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Isolation of endophytic fungi from the medicinal plant Tamarix chinensis
and their microbial inhibition activity

药用植物柽柳内生真菌分离及其抑菌活性初步研究



全 文 :书药用植物柽柳内生真菌分离及其抑菌活性初步研究
毕江涛1,马萍2,杨志伟2,关晓庆2
(1.宁夏大学新技术应用研究开发中心,宁夏 银川750021;2.宁夏大学农学院,宁夏 银川750021)
摘要:为探明药用植物柽柳内生真菌资源的多样性及其抑菌活性特征,通过组织块法对内生真菌进行了分离,并选
择小麦全蚀病菌、枸杞黑果病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜立枯病菌5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定其抑菌活性。结
果显示,从柽柳不同组织器官中分离出18株内生真菌,茎部最多,根部次之,叶部最少;经形态学初步分类鉴定归
于2个目,3个科,7个属;有11株菌对2种或多种植物病原真菌有不同程度的抑制作用,占菌株总数的61.1%,有
8株内生真菌只对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,占分离菌株总数的44.4%;活性内生真菌菌株TCEFL001
分别对枸杞黑果病菌、小麦全蚀病菌以及金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,属于组丝核菌属。药用植物柽柳具
有较为丰富的内生真菌资源,其开发和利用值得进一步探究。
关键词:药用植物;柽柳;内生真菌;分离;抑菌活性
中图分类号:Q949.32  文献标识码:A  文章编号:10045759(2013)03013207
犇犗犐:10.11686/cyxb20130317  
  柽柳(犜犪犿犪狉犻狓犮犺犻狀犲狀狊犻狊)为柽柳科柽柳属植物,落叶灌木,是我国西北荒漠、半荒漠地区分布较广的一个树
种,其主要特点是耐干旱、耐盐碱、耐贫瘠、耐风蚀,是优良的防风固沙植物和盐碱地造林的优良树种,同时柽柳的
嫩枝、嫩叶可作为中草药,是我国传统药材,有疏风、解表、透疹、利尿、解毒发汗透气之功效,近代科研工作者已经
从柽柳的枝叶中分离得到柽柳的化学成分黄酮类、三萜类、有机酸类、挥发油等,药理研究证实柽柳具有保肝、抗
炎、解热、镇痛等作用。柽柳不仅自身作为药用植物,还是濒危药材管花肉苁蓉(犆犻狊狋犪狀犮犺犲狋狌犫狌犾狅狊犪)的专性寄主。
柽柳具有多种用途,是西北荒漠、半荒漠地区具有重要经济价值和生态价值的植物资源[13]。以往对柽柳主要开
展了一些生物学特性、组织培养、栽培种植等方面的研究[48],但对其内生菌的研究还鲜见报道。
植物内生菌(endophytes)是指生活在植物组织内或生活史中的某一阶段,对植物组织没有引起明显症状的
菌,包括那些生活史中某一阶段营表面生的腐生菌、对宿主暂时没有伤害的潜伏性病原菌和菌根菌[9]。近年来,
国内外对植物内生真菌的研究报道较多,主要集中于植物内生真菌种群多样性以及植物内生真菌代谢活性产物
的研究[1012],结果表明内生真菌具有丰富的生物多样性,对植物生长发育进行积极调控,具有促生抗逆等重要生
物学功能[1316],并能够产生与宿主相同或相似的生理活性物质[17],有抗菌、抗肿瘤、杀虫、免疫抑制、抗氧化等生
物活性[1820],筛选具有活性的内生真菌作为药用植物替代资源的研究已经成为微生物学研究领域的一个热
点[2123]。
根据植物-内生菌共生原理和柽柳的生物学特性,本试验开展柽柳内生真菌分离和抑菌活性初步研究,从而
为发掘野生药用植物柽柳内生真菌资源,提高其综合利用途径提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试材料 柽柳于2011年8月采自宁夏银川市兴庆区,地理位置为东经106°15′31″,北纬38°29′21″,海
拔1074m。采样时挑选无病害健康植株,取材部位为植物根、茎、叶,采集后48h内进行预处理和表面消毒。
132-138
2013年6月
   草 业 学 报   
   ACTAPRATACULTURAESINICA   
第22卷 第3期
Vol.22,No.3
收稿日期:20120904;改回日期:20121203
基金项目:宁夏银川市科技攻关项目(银财2010452)资助。
作者简介:毕江涛(1964),男,宁夏中宁人,副研究员,博士。Email:731507283@qq.com
1.1.2 培养基 营养琼脂培养基(nutrientagar,NA):蛋白胨10g/L,牛肉粉3.0g/L,氯化钠5.0g/L,琼脂
15.0g/L;马铃薯葡萄糖培养基(potatodextroseagar,PDA):马铃薯浸粉5.0g/L,葡萄糖20.0g/L,琼脂15.0
g/L,氯霉素0.1g/L。
1.1.3 供试指示菌 供试植物病原真菌指示菌为小麦全蚀病菌(犌犪犲狌犿犪狀狀狅犿狔犮犲狊犵狉犪犿犻狀犻狊var.狋狉犻狋犻犮犻)、枸杞
黑果病菌(犆狅犾犾犲狋狅狋狉犻犮犺狌犿犵犾狅犲狅狊狆狅狉犻狅犻犱犲狊)、番茄灰霉病菌(犅狅狋狉狔狋犻狊犮犻狀犲狉犲犪)、黄瓜枯萎病菌(犉狌狊犪狉犻狌犿狅狓狔狊狆狅
狉犻狌犿f.sp.犮狌犮狌犿犲狉犻狊)、黄瓜立枯病菌(犚犺犻狕狅犮狋狅狀犻犪狊狅犾犪狀犻),由宁夏农林科学院植物保护研究所提供;供试细菌
指示菌为枯草芽孢杆菌(犅犪犮犻犾犾狌狊狊狌犫狋犻犾犻狊),由西北农林科技大学无公害农药研究中心提供,大肠杆菌(犈狊犮犺犲
狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻)、金黄色葡萄球菌(犛狋犪狆犺狔犾狅犮狅犮犮狌狊犪狌狉犲狌狊)、铜绿假单胞菌(犘狊犲狌犱狅犿狅狀狅狊犪犲狉狌犵犻狀狅狊犪),由宁夏医科大
学附属医院检验科提供。
1.2 方法
1.2.1 内生真菌的分离与纯化 内生真菌的分离采用组织块法[24],分离材料用自来水冲洗,进行预处理,然后
依次用75%的酒精漂洗1min,无菌水漂洗3次,0.1%的升汞漂洗3min,无菌水漂洗3次,75%的酒精漂洗30
s,无菌水漂洗5次进行表面消毒。消毒后的材料用无菌手术剪剪成叶(2~5)mm×(2~5)mm,根和茎5~10
mm的片段,置于PDA平板上,用封口膜将培养皿密封,28℃进行避光培养3~5d;同时,将表面消毒的植物组织
片段不经剪切直接在培养基表面轻抹,相同条件下培养作为对照,培养3d后对照培养基中无真菌长出,证明表
面消毒彻底,分离到的真菌是柽柳内生真菌。每皿接4~5个样品,观察材料切口处长出菌丝(菌落),取切口处菌
丝,转接至新的PDA培养基上继续培养,采用尖端菌丝挑取法对所分离的内生真菌进行纯化,纯化后转接到
PDA斜面上编号并保存[2527]。
1.2.2 内生真菌的形态观察与初步分类鉴定 以点植培养法进行菌落观察和常规镜检,从纯化培养3~5d的
菌落上挑取菌丝,连同分生孢子用乳酸石炭酸棉蓝染色液染色制成玻片,置于光学显微镜下观察菌丝形态、孢子
梗形态、孢子形态以及孢子与营养体着生关系,对照有关资料初步确定真菌的分类学地位至属[28,29]。
1.2.3 拮抗真菌的初步筛选 对供试植物病原真菌的拮抗作用初筛采用对峙培养法[3033],将5种植物病原真菌
分别接种于PDA平板中央,内生真菌接种于平板边缘,相距25mm,同时以只接病原真菌的平板作对照,处理和
对照均设4次重复,置于28℃下恒温避光培养4d后,观察病原真菌菌落周围的变化,以拮抗带宽度平均值作为
抑菌活性强弱的指标,初步筛选出对病原真菌生长具有抑制作用的内生真菌。对供试细菌的拮抗作用初步筛选
采用改进的菌块法[34,35],取融化并保温在45℃左右的营养琼脂培养基倒入90mm无菌培养皿中制成平板,按无
菌操作法分别接入2~3环供试细菌于培养皿中,轻轻以手搓法摇动使其混匀,待培养基凝固后迅速用灭菌接种
环取内生真菌菌块3~4块(直径约5mm),分3~4点等距离均匀放置,距皿边缘距离不得小于10mm,小心放
入培养基中,使菌块带菌丝的一面贴在培养基表面,用封口膜密封后将培养皿置低温10℃以下保持12~14h,使
菌块中的抗菌素扩散,将皿置于28℃下恒温培养3~5d,观察内生真菌对供试细菌的拮抗作用,并测定抑菌圈的
直径。
2 结果与分析
2.1 柽柳内生真菌分离菌株数量和种群组成
从药用植物柽柳中分离到内生真菌18株,其中根部8株,占分离菌株数的44.4%,茎部9株,占分离菌株数
的50.0%,叶部1株,占分离菌株数的5.6%(表1),从分离部位可以看出,分离的菌株数量茎部最多,其次为根
部,叶部最少。
通过菌落和显微形态特征观察,将分离的内生真菌初步鉴定为2个目,3个科,7个属(表2);在丝孢目丛梗
孢科中有11株菌,分属于简梗孢霉属、峡串孢霉属、梭孢霉属、卵形孢霉属,其中简梗孢霉属菌株占分离菌株总数
的38.9%,为优势菌属;丝孢目暗梗孢科中有2株菌,分属于匐柄霉属;无孢目无孢科中有5株菌,分属于组丝核
菌属和丝核菌属,其中组丝核菌属有4株菌,占分离菌株总数的22.2%。因此,柽柳内生真菌在种类组成上具有
一定的多样性。
331第22卷第3期 草业学报2013年
表1 柽柳内生真菌分离部位及其菌株数量
犜犪犫犾犲1 犜犺犲犻狊狅犾犪狋犻狅狀狊犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狀狋犻狋狔狅犳犳狌狀犵犪犾犲狀犱狅狆犺狔狋犻犮犻狊狅犾犪狋犲狊犳狉狅犿犜.犮犺犻狀犲狀狊犻狊
菌株编号
StrainNo.

Root
菌株编号
StrainNo.

Stem
菌株编号
StrainNo.

Leaf
TCEFR002 简梗孢霉属犆犺狉狅犿狅狊狆狅狉犻狌犿sp. TCEFS001 卵形孢霉属犗狅狊狆狅狉犪sp. TCEFL001 组丝核菌属犘犺犪犮狅犱犻狌犿sp.
TCEFR003 匐柄霉属犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿sp. TCEFS002 丝核菌属犚犺犻狕狅犮狋狅狀犻犪sp.
TCEFR004 简梗孢霉属犆犺狉狅犿狅狊狆狅狉犻狌犿sp. TCEFS004 峡串孢霉属犘犪犲狆犪犾狅狆狊犻狊sp.
TCEFR005 简梗孢霉属犆犺狉狅犿狅狊狆狅狉犻狌犿sp. TCEFS006 组丝核菌属犘犺犪犮狅犱犻狌犿sp.
TCEFR006 简梗孢霉属犆犺狉狅犿狅狊狆狅狉犻狌犿sp. TCEFS009 组丝核菌属犘犺犪犮狅犱犻狌犿sp.
TCEFR007 简梗孢霉属犆犺狉狅犿狅狊狆狅狉犻狌犿sp. TCEFS010 组丝核菌属犘犺犪犮狅犱犻狌犿sp.
TCEFR008 卵形孢霉属犗狅狊狆狅狉犪sp. TCEFS012 梭孢霉属犉狌狊犻犱犻狌犿sp.
TCEFR012 简梗孢霉属犆犺狉狅犿狅狊狆狅狉犻狌犿sp. TCEFS014 简梗孢霉属犆犺狉狅犿狅狊狆狅狉犻狌犿sp.
TCEFS015 匐柄霉属犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿sp.
合计Total(株Strains) 8 9 1
所占比例Proportion(%) 44.4 50.0 5.6
 TC:柽柳犜.犮犺犻狀犲狀狊犻狊;EF:内生真菌Endophyticfungus;R:根 Root;S:茎Stem;L:叶Leaf.
表2 柽柳内生真菌种群组成
犜犪犫犾犲2 犜犺犲犮狅犿狆狅狊犻狋犻狅狀狅犳犲狀犱狅狆犺狔狋犻犮犳狌狀犵犻犻狊狅犾犪狋犲犱犳狉狅犿犜.犮犺犻狀犲狀狊犻狊
目Order 科Family 属Genus 合计Total(株Strains)
无孢目Agonomycetales 无孢科Agonomycetaceae 组丝核菌属犘犺犪犮狅犱犻狌犿sp. 4
丝核菌属犚犺犻狕狅犮狋狅狀犻犪sp. 1
丝孢目 Hyphomycetales
丛梗孢科 Moniliaceae 简梗孢霉属犆犺狉狅犿狅狊狆狅狉犻狌犿sp. 7
峡串孢霉属犘犪犲狆犪犾狅狆狊犻狊sp. 1
梭孢霉属犉狌狊犻犱犻狌犿sp. 1
卵形孢霉属犗狅狊狆狅狉犪sp. 2
暗梗孢科Dematiaceae 匐柄霉属犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿sp. 2
2.2 柽柳内生真菌抑菌活性
通过对供试植物病原真菌抑菌试验(表3),有11株菌对2种或多种植物病原真菌有不同程度的抑制作用,
占菌株总数的61.1%,其中菌株TCEFS015、TCEFSL001对枸杞黑果病菌有明显抑制作用,菌株 TCEFS014、
TCEFL001对小麦全蚀病菌有明显的抑制作用,菌株TCEFL001既对枸杞黑果病菌,又对小麦全蚀病菌抑菌活
性明显。柽柳多数内生真菌菌株对供试植物病原真菌具有不同程度抑制作用,菌株TCEFL001对2种病原真菌
抑菌活性明显。
通过对供试细菌抑菌试验(表4),8株内生真菌只对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,占分离菌株总数的
44.4%,同时,所分离的内生真菌菌株对其他3种供试细菌没有抑制作用,具有明显的选择性抑菌特征。
另外,菌株TCEFL001不仅对供试细菌金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,而且对供试植物病原真菌枸杞
黑果病菌、小麦全蚀病菌有明显抑制作用,抑菌谱较宽(表4)。
2.3 柽柳内生真菌活性菌株菌属分布
柽柳内生真菌抑菌活性试验结果显示,菌株TCEFL001既对植物病原真菌枸杞黑果病菌和小麦全蚀病菌抑
制作用明显,又对供试细菌金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,为高活性菌株,其分布于无孢目无孢科中的组丝
核菌属,来源于柽柳叶部。
431 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.3
表3 柽柳内生真菌抑制植物病原真菌活性
犜犪犫犾犲3 犜犺犲犪狀狋犻犳狌狀犵犪犾犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳犻狊狅犾犪狋犲犱犲狀犱狅狆犺狔狋犻犮犳狌狀犵犻犳狉狅犿犜.犮犺犻狀犲狀狊犻狊
菌株编号
Strains
番茄灰霉病菌
犅.犮犻狀犲狉犲犪
黄瓜枯萎病菌
犉.狅狓狔狊狆狅狉犻狌犿f.sp.犮狌犮狌犿犲狉犻狊
枸杞黑果病菌
犆.犵犾狅犲狅狊狆狅狉犻狅犻犱犲狊
黄瓜立枯病菌
犚.狊狅犾犪狀犻
小麦全蚀病菌
犌.犵狉犪犿犻狀犻狊var.狋狉犻狋犻犮犻
TCEFR002 - - - - -
TCEFR003 - + - - -
TCEFR004 - - + - +
TCEFR005 - - + - +
TCEFR006 - - + - -
TCEFR007 - - ++ - +
TCEFR008 - - - - -
TCEFS001 ++ - + - -
TCEFS002 ++ - ++ - -
TCEFS004 - - + - +
TCEFS006 ++ - + - -
TCEFS009 ++ ++ ++ - ++
TCEFS010 + - + - +
TCEFS012 + - - - -
TCEFS014 - - - - +++
TCEFS015 + + +++ + ++
TCEFL001 - - +++ - +++
 注:拮抗带宽度为3次重复试验的平均值;“+”拮抗带宽度小于2mm;“++”拮抗带宽度介于2~5mm;“+++”拮抗带宽度大于5mm;“-”无
拮抗活性。
 Note:Antagonisticzonebreadthistheaveragebasedonthreereplicates;“+”meansantagonisticzonebreadthlessthan2mm;“++”meansantag
onisticzonebreadthinbetween2and5mm;“+++”meansantagonisticzonebreadthmorethan5mm;“-”meansantagonisticzonebreadthisnil.
3 讨论
植物内生真菌具有明显的普遍性和丰富的生物多样性。目前,在所有研究过内生真菌的植物中都发现内生
真菌。内生真菌的数量、种类与植物的生长环境、气候条件、取样时间、取样部位以及分离方法等因素有关。每种
植物及其不同组织部位都有分离几率较高的内生真菌种类,被称之为优势种群,其中一些可能是该植物或该组织
的专性内生真菌。韩艳洁等[36]从5个地区的旱柳(犛犪犾犻狓犿犪狋狊狌犱犪狀犪)植物各部位、不同发育阶段共分离到1409
株内生真菌,其中1027株经鉴定分属于3亚门4纲5目6科27属,从分离的结果可以看出旱柳各个部位普遍存
在种群和数量不一的内生真菌,不同部位有其特有属,随着宿主生长发育阶段的变化,内生真菌的种群和数量呈
动态变化的过程,并且在相同气候条件下,不同的群落组成及郁闭度也会影响内生真菌的种群分布。钮旭光
等[37]对盐生植物翅碱蓬(犛狌犪犲犱犪犺犲狋犲狉狅狆狋犲狉犪)的内生真菌多样性进行了分析,共分离得到内生真菌49株,分属
于13个属,其中小丛壳菌属(犌犾狅犿犲狉犲犾犾犪)、链格孢属(犃犾狋犲狉狀犪狉犻犪)、毛盘孢属(犆狅犾犾犲狋狅狋狉犻犮犺狌犿)和枝孢属(犆犾犪犱狅狊
狆狅狉犻狌犿)为优势菌属,研究发现翅碱蓬体内含有丰富的内生真菌资源,其内生真菌具有很高的宿主特异性,而且
其分布受生境的影响。孙剑秋等[38]对4科6种药用植物的1144个组织块中分离到内生真菌973株,根据形态
特征将778株产孢菌株鉴定为21个分类单元,其中腔胞菌11种、子囊菌6种、丝孢菌4种,从每种植物中分离出
的内生真菌种数为5~8种,互隔交链孢属(犃犾狋犲狉狀犪狉犻犪犪犾狋犲狉狀犪狋犪)是这6种植物内生真菌的优势种,内生真菌群
落组成的相似性和聚类分析结果表明,部分内生真菌具有一定的宿主和组织偏好性。本试验从柽柳健康植物中
分离出内生真菌18株,在根、茎、叶组织中分布数量不同,分属于7个属,显示出较为丰富的多样性。
531第22卷第3期 草业学报2013年
  植物内生真菌是植物微生态系统中的重要组成部
分,其次级代谢中产生的生物活性物质具有很好的开
发利用价值,而且某些药用植物内生真菌具备合成宿
主某些代谢产物的能力,利用药用植物内生真菌开发
新药源具有极大的可能性[3941]。黄东益等[42]在旗草
(犅狉犪犮犺犻犪狉犻犪犫狉犻狕犪狀狋犺犪)内生真菌与旗草抗病性研究
中,利用旗草内生真菌交织顶孢霉的7个不同分离物
对旗草主要病原真菌德氏霉和立枯丝核菌在PDA培
养基上进行体外对峙试验,结果显示大多数内生真菌
分离物对这2种病原菌都具有不同程度的抑制作用,
不同分离物对同一病原菌的抑制作用不同,同一分离
物对不同病原菌的抑制作用也不同,同时试验表明对
病原菌生长抑制能力强的内生真菌分离物,在旗草体
内也表现出较强的抗病性,说明抗病内生真菌的体外
抑菌活性是有效的。江曙等[43]对353株药用植物内
生真菌进行了抗菌活性研究,结果表明,内生真菌对植
物病原真菌的抑菌现象较为普遍,且抑菌效果明显,其
中对番茄早疫病和番茄灰霉产生抑制作用的内生真菌
比例分别达15.9%和11.3%,对细菌的抑菌效果较
差,从药用植物内生真菌中寻找新的抑菌活性物质是
可行的。陆晓东和王琦[44]以金黄色葡萄球菌、大肠杆
菌、鼠伤沙门氏及大肠杆菌F为供试菌,对从耐旱药
用植物骆驼蓬(犘犲犵犪狀狌犿犺犪狉犿犪犾犪)叶中分离出的14
株内生真菌进行抗菌活性筛选,结果表明,8个菌株及
10个菌株的代谢产物均至少对1种细菌具有抑菌活
性。本试验从柽柳分离出的内生真菌抑菌活性试验可
以看出,多数内生真菌对2种或多种病原真菌具有不
同程度的抑菌活性,近多数内生真菌对金黄色葡萄球
菌具有明显的抑菌活性,这可能与柽柳抑菌、抗炎等药
表4 柽柳内生真菌抑制细菌活性
犜犪犫犾犲4 犜犺犲犪狀狋犻犫犪犮狋犲狉犻犪犾犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳犻狊狅犾犪狋犲犱
犲狀犱狅狆犺狔狋犻犮犳狌狀犵犻犳狉狅犿犜.犮犺犻狀犲狀狊犻狊
菌株编号
Strains
枯草芽孢杆菌
犅.狊狌犫狋犻犾犻狊
大肠杆菌
犈.犮狅犾犻
金黄色葡萄球菌
犛.犪狌狉犲狌狊
铜绿假单胞菌
犘.犪犲狉狌犵犻狀狅狊犪
TCEFR002 - - - -
TCEFR003 - - +++ -
TCEFR004 - - - -
TCEFR005 - - +++ -
TCEFR006 - - +++ -
TCEFR007 - - - -
TCEFR008 - - +++ -
TCEFS001 - - +++ -
TCEFS002 - - - -
TCEFS004 - - - -
TCEFS006 - - - -
TCEFS009 - - - -
TCEFS010 - - +++ -
TCEFS012 - - +++ -
TCEFS014 - - - -
TCEFS015 - - - -
TCEFL001 - - +++ -
 注:抑菌圈直径大小为3次重复试验的平均值;“+”抑菌圈直径小于
10mm;“++”抑菌圈直径10~15mm;“+++”抑菌圈直径大于15
mm;“-”无拮抗作用。
 Note:Diameterofinhibitionzoneistheaverageofthreereplicates;
“+”meansdiameterofinhibitionzonelessthan10mm;“++”means
diameterofinhibitionzoneinbetween10and15mm;“+++”means
diameterofinhibitionzonemorethan15mm;“-”meansdiameterof
inhibitionzoneisnil.
理作用有密切的关系,并且与柽柳黄酮类成分柽柳酮、柽柳醇对耐药金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用的结果相
吻合[3,45],表明药用植物柽柳内生真菌具有重要的资源价值。
试验中所用的常规培养方法不能保证所有生活在植物组织内的内生真菌能够全被分离出来,有些内生真菌
不能在人工培养基上生长,有研究者利用非培养方法对内生真菌多样性进行研究,结果可能更科学[46,47];同时,
试验研究中对内生真菌的鉴定只是依据菌株形态学特征初步鉴定到属,同一属内有多株重复,究竟是同属同种,
还是同属不同种的菌株,仍有待进一步研究。
4 结论
从本试验分离出的内生真菌抑菌活性试验可以看出,多数内生真菌具有不同程度的抑菌活性,显示出药用植
物柽柳具有较为丰富的内生真菌资源,其开发和利用值得进一步探究。
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犐狊狅犾犪狋犻狅狀狅犳犲狀犱狅狆犺狔狋犻犮犳狌狀犵犻犳狉狅犿狋犺犲犿犲犱犻犮犻狀犪犾狆犾犪狀狋犜犪犿犪狉犻狓犮犺犻狀犲狀狊犻狊
犪狀犱狋犺犲犻狉犿犻犮狉狅犫犻犪犾犻狀犺犻犫犻狋犻狅狀犪犮狋犻狏犻狋狔
BIJiangtao1,MAPing2,YANGZhiwei2,GUANXiaoqing2
(1.ResearchandDevelopmentCenterforNewTechniques,NingxiaUniversity,Yinchuan750021,
China;2.SchoolofAgriculture,NingxiaUniversity,Yinchuan750021,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Toexploretheresourcediversityandmicrobialinhibitionactivityofendophyticfungifromthemedic
inalplant犜犪犿犪狉犻狓犮犺犻狀犲狀狊犻狊,endophyticfungiwereisolatedfromroot,stem,andleafofthehostbytissuein
oculationculture.Fivepathogenicfungiandfourbacterialstrainswereusedasindicatorstotestmicrobialinhi
bitionactivitybyagarplateantagonisticactionandmodifiedagargeldiffusion.Eighteenendophyticfungal
strainswereisolated:mostfromthestemsandleastfromtheleaves.Theisolatedstrainsweredividedinto
sevengenera,threefamilies,andtwoordersbasedonmorphologicalcharacteristics.Amongtheisolates,elev
enstrains(61.1%ofthetotalisolated)werefoundtohavesomemicrobialinhibitionactivitiesagainsttwoor
morepathogenicfungi,eightstrains(44.4%)hadevidentinhibitionactivityagainst犛狋犪狆犺狔犾狅犮狅犮犮狌狊犪狌狉犲狌狊
withstrainTCEFL001showingevidentantifungalandantibacterialactivitiesagainst犆狅犾犾犲狋狅狋狉犻犮犺狌犿犵犾狅犲狅狊狆狅狉犻
狅犻犱犲狊,犌犪犲狌犿犪狀狀狅犿狔犮犲狊犵狉犪犿犻狀犻狊var.狋狉犻狋犻犮犻and犛.犪狌狉犲狌狊,belongingto犘犺犪犮狅犱犻狌犿sp.Themedicinalplant
犜犪犿犪狉犻狓犮犺犻狀犲狀狊犻狊isagoodendophyticfungalresource,whichisworthfurtherstudyforitsdevelopmentand
application.
犓犲狔狑狅狉犱狊:medicinalplant;犜犪犿犪狉犻狓犮犺犻狀犲狀狊犻狊;endophyticfungus;isolation;microbialinhibitionactivity
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