全 文 ：书海滨雀稗体细胞突变体犛犘２００８３的特异性分析
常盼盼１，２，钟小仙１，刘智微１
（１．江苏省农业科学院畜牧研究所，江苏 南京２１００１４；２．南京农业大学动物科技学院草业科学系，江苏 南京２１００９５）
摘要：以海滨雀稗体细胞突变体ＳＰ２００８３和Ａｄａｌａｙｄ（对照）为材料，对其植物学特征和叶片表皮气孔特性进行了
比较，结合染色体鉴定和ＲＡＰＤ技术，探索了海滨雀稗体细胞突变体ＳＰ２００８３的特异性。结果表明，与对照Ａｄａ
ｌａｙｄ相比，ＳＰ２００８３匍匐茎节间长、茎直径分别显著减小３４．７７％和１１．７６％，叶片长度、宽度分别显著增加
２２．５５％和１１．１１％，而直立茎节间长、茎直径无显著差异；叶片上表皮气孔器密度显著增加２０．５８％，气孔器长度
和宽度分别显著减小９．６４％和６．３１％；叶片下表皮气孔器密度显著增加４０．６２％，气孔器长度和宽度分别显著减
小６．７３％和５．３３％。ＳＰ２００８３体细胞染色体数目为２狀＝２０，与对照Ａｄａｌａｙｄ染色体数目相同。ＲＡＰＤ结果显示，
采用随机引物Ｓ３６９扩增，ＳＰ２００８３缺失１条约１１００ｂｐ的条带，表明其在ＤＮＡ水平上与Ａｄａｌａｙｄ存在差异。
关键词：海滨雀稗；体细胞；突变体；ＲＡＰＤ；气孔特性；植物学特性
中图分类号：Ｑ９４４．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４５７５９（２０１２）０６０２０７０６
海滨雀稗（犘犪狊狆犪犾狌犿狏犪犵犻狀犪狋犻狌犿，Ｓｅａｓｈｏｒｅｐａｓｐａｌｕｍ）为禾本科（Ｇｒａｍｉｎｅａ）雀稗属（犘犪狊狆犪犾狌犿）植物，原产
于美洲，分布于世界热带、亚热带，尤其美洲热带之海岸，为潮间带草滩植被的主要组分，能在复杂的逆境条件下
生长，其抗性主要表现在耐盐、耐涝、抗旱、耐践踏等方面，是目前已知耐盐能力最强的草坪草种。其叶色翠绿，景
观效果优于狗牙根（犆狔狀狅犱狅狀ｓｐｐ．）和假俭草（犈狉犲犿狅犮犺犾狅犪狅狆犺犻狌狉狅犻犱犲狊），已成为２１世纪最具发展潜力的暖季型
草坪草种［１７］。美国较早开展了海滨雀稗品种的选育工作，２０世纪末海滨雀稗品种 Ａｄａｌａｙｄ从美国引进中国，
１９９８年自深圳的观澜湖高尔夫球场引至江苏省，试种结果表明，Ａｄａｌａｙｄ能生长在全盐含量为０．８％～１．０％的
滨海盐土，海水短期淹没、较长期浸泡均能忍受，抗寒性强，综合性状优，在江苏省连云港以南地区可自然越冬。
邹轶等［８］及景艳霞和袁庆华［９］系统研究了海盐胁迫对海滨雀稗Ａｄａｌａｙｄ生长及植株体内阳离子含量的影响，初
步明确了盐胁迫下海滨雀稗不同于紫花苜蓿（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪）的阳离子积累规律。邹轶等［１０］系统研究了海盐
胁迫对海滨雀稗Ａｄａｌａｙｄ植株形态和生长的影响，并进一步明确了 Ａｄａｌａｙｄ对海盐胁迫的生理响应，在此基础
上，在江苏省和浙江省新围垦海涂，初步建立了海滨雀稗Ａｄａｌａｙｄ种茎直播和草块直铺技术体系，因其耐盐性强、
景观效果好，在长江中下游及其以南地区正在备受关注。但由于海滨雀稗Ａｄａｌａｙｄ与其他二倍体海滨雀稗种质
一样，由于自交不亲和［１１，１２］，只能以无性繁殖方式扩繁，明显影响海涂大面积草地建植以及沿海开发区大面积厂
区和边坡地绿化的成本。
截至目前，全世界只有一个商品化种子直播型海滨雀稗杂交品种“ＳｅａＳｐｒａｙ”（Ｑ３６３１３×Ｈｙｂ７），由美国纯
种子测试机构（ＰｕｒｅＳｅｅｄＴｅｓｔｉｎｇ）与乔治亚大学研究基金会（ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＧｅｏｒｇｉａＲｅｓｅａｒｃｈＦｏｕｎｄａｔｉｏｎ）合作
培育而成［１３］。据报道，２００５年海滨雀稗杂交品种“ＳｅａＳｐｒａｙ”已正式引入我国，但尚未见其在江浙海涂推广应
用，推测可能与生态适应性和抗寒性有关。近年来，江苏省农业科学院钟小仙等［１４］一直致力于可自交结实型海
滨雀稗新品种选育，以幼穗离体培养获得的胚性愈伤组织为材料，从经一定浓度和时间的秋水仙素诱导处理获得
的再生植株上，收获到了体细胞突变体 Ｍ１种子，Ｍ１种子均能正常发芽成苗。本研究通过比较能自交结实的海
滨雀稗突变体ＳＰ２００８３和对照品种Ａｄａｌａｙｄ的植物学特征和叶片气孔特性，结合细胞遗传学鉴定和ＤＮＡ分子
检测，探索海滨雀稗突变体ＳＰ２００８３的特异性，为育成具有完全自主知识产权、可种子繁殖的海滨雀稗新品种提
第２１卷 第６期
Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．６
草 业 学 报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
２０７－２１２
２０１２年１２月
收稿日期：２０１１１２０５；改回日期：２０１２０３１２
基金项目：宁波市科技计划项目 （２００８Ｃ１００３３）和慈溪市农业社会发展科技计划（ＣＲ２００７２３）资助。
作者简介：常盼盼（１９８７），女，黑龙江密山人，在读硕士。Ｅｍａｉｌ：ｃｐｐ２０１１２３６＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｚｈｐａｎｓｙ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
供基础保证［１５］，为大面积盐渍土利用提供技术支撑。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
海滨雀稗品种Ａｄａｌａｙｄ，２狀＝２０，为自交不亲和二倍体，２０世纪末从美国夏威夷引进我国，２００６年江苏省农
业科学院从杭州白云草业研究所有限公司引进；海滨雀稗突变体ＳＰ２００８３，以Ａｄａｌａｙｄ幼穗诱导产生的颗粒状
愈伤组织为材料［１６］，经秋水仙素诱导获得了再生植株，２００９年，经田间结实性鉴定，获得了可自交结实的再生植
株并收获到种子，２０１０年４月播种出苗后植株成坪。
１．２ 试验方法
１．２．１ 植物学特征的观测 每种材料分别选取２０个匍匐茎，测量从顶端向后第４个节的节间长度及直径；选取
２０个直立茎，测量中间１个节的节间长度及直径；选取３０片新出的第３片完全展开叶，测量叶片长度和宽度。
１．２．２ 叶片气孔特性的观测 分别选取２种供试材料新出的第３片完全展开叶中间部位长１ｃｍ、宽为叶片自
然宽度的部分叶片，采用离析法［１７］，浸泡在等量的３０％过氧化氢醋酸溶液中，在６０℃烘箱内放置２４ｈ，待叶肉
组织和表皮细胞分离后，把离析材料取出，放入装有适量蒸馏水的培养皿中，用镊子分离叶片上、下表皮，１％番红
染色１～２ｍｉｎ，制成临时装片，在ＯＬＹＭＰＵＳＣＸ３１光学显微镜下观察和拍照。
采用形态学图像分析系统（ＪＤ８０１，江苏捷达软件工程有限公司，南京）测定气孔的密度、宽度和长度。每种
供试材料选择３０个视野拍照，统计气孔器数目，计算其密度。每种供试材料拍摄１５个视野，统计气孔器长度和
宽度。气孔器长度是指气孔关闭状态下哑铃形气孔器的长度；气孔器宽度是气孔关闭状态下垂直于哑铃形气孔
器的最宽值［１８］。
１．２．３ 细胞学鉴定 分别取海滨雀稗ＳＰ２００８３和Ａｄａｌａｙｄ茎节，将其放入１／２Ｈｏａｇｌａｎｄ营养液中培养生根，待
根长至１～２ｃｍ时，于上午９：００前后取出切下根尖，经自来水冲洗后加入到装有预处理液８羟基喹啉的离心管
中，置于４℃冰箱中处理２～４ｈ。材料预处理后用自来水冲洗３０ｍｉｎ后用卡诺氏固定液于冰箱中固定２４ｈ，固
定后的材料用蒸馏水冲洗后放入装有预热的１ｍｏｌ／Ｌ盐酸的离心管中于６０℃恒温水浴中解离４～６ｍｉｎ，解离后
的材料用蒸馏水冲洗３０ｍｉｎ后，置于卡宝品红中染色３０ｍｉｎ。染色后滴１滴４５％冰醋酸于载玻片压片观察，在
显微镜下镜检。在实际操作中，不同学者所统计细胞的数目有很大差别，一般认为８５％以上的细胞具有相同染
色体数时，方能确定该植物染色体数［１９，２０］。本试验选择２５个染色体分散良好、形态清晰的中期分裂相细胞进行
观察、拍照和统计染色体数目。
１．２．４ ＲＡＰＤ分子鉴定 取海滨雀稗体细胞突变体ＳＰ２００８３、原始对照Ａｄａｌａｙｄ（ＣＫ１）及其幼穗离体培养再
生植株（ＣＫ２）的幼嫩叶片，采用Ｋａｒｒｏｔｅｎ公司生产的植物ＤＮＡ提取试剂盒（ＫａｒｒｏｔｅｎＴＭＰｌａｎｔＧｅｎｏｍｉｃＤＮＡ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｋｉｔ）提取ＤＮＡ。选取 ＲＡＰＤ随机引物３４条委托上海生工生物工程有限公司合成。扩增反应在
ＴａＫａＲａ公司ＰＣＲＴｈｅｒｍａｌＣｙｃｌｅｒＤ上进行，反应体积２５μＬ，内含１０×Ｂｕｆｆｅｒ（含 Ｍｇ
２＋），１０μｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ，
ＴａｑＤＮＡ聚合酶０．３μＬ，引物０．５μｍｏｌ／Ｌ，总ＤＮＡ模板１μＬ。ＰＣＲ反应程序为：９４℃预变性４ｍｉｎ；９４℃变性
１ｍｉｎ，３６℃退火１ｍｉｎ，７２℃延伸１．５ｍｉｎ，共４５个循环，最后再７２℃ 延伸７ｍｉｎ，４℃ 保存。扩增产物用１．４％
的琼脂糖凝胶电泳分离，ｔａｌｏｎ全自动凝胶成像分析系统观察并记录结果。对表现多态性的引物，重复３次，选择
重复性好的引物进行分析。
随机选用３４个合成引物对海滨雀稗突变体ＳＰ２００８３、对照Ａｄａｌａｙｄ（ＣＫ１）和Ａｄａｌａｙｄ幼穗离体培养再生植
株（ＣＫ２）进行了ＲＡＰＤＰＣＲ反应体系扩增，筛选出２个多态性和重复性好的引物Ｓ３６９和Ｓ１３１。Ｓ３６９序列为５′
ＣＣＣＴＡＣＣＧＡＣ３′；Ｓ１３１序列为５′ＴＴＧＧＴＡＣＣＣＣ３′。
１．３ 统计分析
采用ＳＰＳＳ１３．０软件进行差异显著性分析。
２ 结果与分析
２．１ 植物学特征的比较
与Ａｄａｌａｙｄ相比，ＳＰ２００８３匍匐茎节间长度及匍匐茎直径分别减小３４．７７％和１１．７６％，差异显著（犘＜
８０２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．６
０．０５）；叶片长度及宽度分别显著增加２２．５５％和１１．１１％；直立茎缩短变粗，但与 Ａｄａｌａｙｄ无显著差异（犘＞
０．０５）（表１）。
２．２ 细胞学鉴定
在统计的２５个染色体分散良好、形态清晰的中期分裂相细胞中，ＳＰ２００８３中有２２个细胞的染色体数目为
２０条，占所统计细胞总数的８８％，比例超过了８５％，据此确定海滨雀稗ＳＰ２００８３的体细胞染色体数目为２狀＝２０
（图１）。
表１ 犛犘２００８３与 犃犱犪犾犪狔犱植物学特征比较
犜犪犫犾犲１ 犆狅犿狆犪狉犻狊狅狀狅狀狆犺狔狋狅犾狅犵犻犮犪犾犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊犫犲狋狑犲犲狀犛犘２００８３犪狀犱犃犱犪犾犪狔犱
品种
Ｖａｒｉｅｔｉｅｓ
匍匐茎节间长度
Ｓｔｏｌｏｎｓｉｎｔｅｒｎｏｄｅｓ
ｌｅｎｇｔｈ（ｃｍ）
匍匐茎直径
Ｓｔｏｌｏｎｓｄｉａｍｅｔｅｒ
（ｃｍ）
直立茎节间长度
Ｅｒｅｃｔｓｔｅｍｉｎｔｅｒｎｏｄｅｓ
ｌｅｎｇｔｈ（ｃｍ）
直立茎直径
Ｅｒｅｃｔｓｔｅｍｉｎｔｅｒｎｏｄｅｓ
ｄｉａｍｅｔｅｒ（ｃｍ）
叶片长度
Ｌｅａｆｌｅｎｇｔｈ
（ｃｍ）
叶片宽度
Ｌｅａｆｗｉｄｔｈ
（ｃｍ）
ＳＰ２００８３ １．６７±０．２９ｂ ０．１５±０．０１ｂ ３．２５±０．４９ａ ０．１２±０．０２ａ １０．４９±１．４７ａ ０．３０±０．０４ａ
Ａｄａｌａｙｄ ２．５６±０．２６ａ ０．１７±０．０１ａ ３．１３±０．６６ａ ０．１１±０．０１ａ ８．５６±１．４３ｂ ０．２７±０．０４ｂ
注：同列不同字母表示差异显著（犘＜０．０５），下同。
Ｎｏｔｅ：Ｄａｔａ（ｍｅａｎ±ＳＤ）ｉｎｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｆｏｌｏｗｅｄｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔ（犘＜０．０５），ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
图１ 海滨雀稗突变体２００８３（犃）与犃犱犪犾犪狔犱（犅）有丝分裂中期染色体
犉犻犵．１ 犆犺狉狅犿狅狊狅犿犲狅犳犿狌狋犪狀狋犛犘２００８３（犃）犪狀犱犃犱犪犾犪狔犱（犅）犪狋犿犻狋狅狋犻犮犿犲狋犪狆犺犪狊犲
２．３ ＲＡＰＤ分子鉴定
引物Ｓ３６９序列为５′ＣＣＣＴＡＣＣＧＡＣ３′，与Ａｄａｌａｙｄ（ＣＫ１、ＣＫ２）相比，ＳＰ２００８３缺少１条约３０００ｂｐ的条带
和１条约８００ｂｐ的条带；引物Ｓ１３１序列为５′ＴＴＧＧＴＡＣＣＣＣ３′，与Ａｄａｌａｙｄ（ＣＫ１、ＣＫ２）相比，ＳＰ２００８３植株缺
少１条约２００ｂｐ的条带（ＤＮＡＭａｒｋｅｒ５０００ｂｐ）。再用重复性较好的引物Ｓ３６９对所有３个材料进行ＰＣＲ扩
增，不仅条带清晰，而且经３次重复表现稳定。ＲＡＰＤ分析结果显示，对照材料海滨雀稗Ａｄａｌａｙｄ（ＣＫ１、ＣＫ２）均
含有约１１００ｂｐ的条带，而ＳＰ２００８３则缺失（图２）。
２．４ 叶片表皮气孔特性的比较
与Ａｄａｌａｙｄ相比，海滨雀稗体细胞突变体ＳＰ２００８３叶片上表皮气孔密度增加２０．５８％，气孔器长度减小
９．６４％，气孔器宽度减小６．３１％，差异均达显著水平。海滨雀稗体细胞突变体ＳＰ２００８３叶片下表皮气孔器密度
比Ａｄａｌａｙｄ增加４０．６２％，气孔器长度和气孔器宽度分别比Ａｄａｌａｙｄ减小６．７３％和５．３３％，且均呈显著性差异
（表２）。
３ 讨论
形态学鉴定是比较传统、常规的品种鉴定技术［２１］。刘建秀等［２２］根据狗牙根匍匐茎节间长和节间直径、叶长
９０２第２１卷第６期 草业学报２０１２年
和叶宽等１９个外部性状对华东地区３４个点上的８８份
图２ 突变体犛犘２００８３犚犃犘犇多态性分析
犉犻犵．２ 犚犃犘犇犪狀犪犾狔狊犲狊狅犳犿狌狋犪狀狋犛犘２００８３
Ｍ：ＤＮＡ标记 ＤＮＡＭａｒｋｅｒ；１：ＳＰ２００８３；２：ＣＫ１；３：ＣＫ２．
狗牙根材料进行了遗传多样性的研究，结果表明，华东
地区狗牙根可分为５个类型，即矮细型、矮粗型、斜细
型、斜粗型和直立型。金洪等［２３］通过对结缕草（犣狅狔
狊犻犪犼犪狆狅狀犻犮犪）叶宽、匍匐茎中部节间长、匍匐茎的直
径、穗长等表型性状研究了结缕草居群内部的变异类
型，将２０个居群分为８类。本研究通过对海滨雀稗体
细胞突变体ＳＰ２００８３和Ａｄａｌａｙｄ植物学特性比较发
现，ＳＰ２００８３除了可自交结实的显著特性外，匍匐茎
节间长度、匍匐茎茎粗均较 Ａｄａｌａｙｄ显著减小；叶片
长度和宽度均显著增加。这表明，经秋水仙素诱导后
的ＳＰ２００８３在表型性状上与对照材料 Ａｄａｌａｙｄ存在
显著差异。
叶片是进行光合作用、呼吸作用、蒸腾作用等生
理代谢的主要器官，叶解剖结构与植物生长相关性密
切，因此，叶解剖结构可作为良种筛选的又一辅助指
标［２４，２５］。气孔在调控水分丢失和光合作用之间总是
处于一种折中状态［２６］，气孔器密度的增加有利于提高
净光合速率和品种耐湿能力，气孔器减小则有利于减小叶片蒸腾速率［２５，２７，２８］。与对照品种Ａｄａｌａｙｄ相比，海滨雀
稗突变体ＳＰ２００８３叶片上、下表皮气孔器密度显著增加，气孔器长度，气孔器宽度均显著减小。气孔器特性改变
与生理代谢的相关性正在进一步研究。
表２ 犛犘２００８３与 犃犱犪犾犪狔犱气孔器特性的比较
犜犪犫犾犲２ 犆狅犿狆犪狉犻狊狅狀狅犳狊狋狅犿犪狋犪犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮犫犲狋狑犲犲狀犛犘２００８３犪狀犱犃犱犪犾犪狔犱
品种
Ｖａｒｉｅｔｉｅｓ
气孔器密度Ｓｔｏｍａｔａｄｅｎｓｉｔｙ（Ｎｏ．／ｍｍ２）
上表皮
Ｕｐｐｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓ
下表皮
Ｌｏｗｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓ
气孔器长度Ｓｔｏｍａｔａｌｅｎｇｔｈ（μｍ）
上表皮
Ｕｐｐｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓ
下表皮
Ｌｏｗｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓ
气孔器宽度Ｓｔｏｍａｔａｗｉｄｔｈ（μｍ）
上表皮
Ｕｐｐｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓ
下表皮
Ｌｏｗｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓ
ＳＰ２００８３ １８７．３９±２４．５８ａ １１８．６７±２３．６３ａ ２２．５０±１．９３ｂ ２７．１８±２．０８ｂ １９．１６±１．６０ｂ ２１．３２±１．４５ｂ
Ａｄａｌａｙｄ １５５．４０±２１．１０ｂ ８４．３９±１２．５４ｂ ２４．９０±１．６５ａ ２９．１４±１．６１ａ ２０．４５±１．５８ａ ２２．５２±１．６５ａ
在植物诱变育种过程中，秋水仙素作为一种常用的药剂，因作用时期不同，诱变机理和结果不同，适宜浓度的
秋水仙素能破坏纺锤丝的形成，使分生细胞复制的染色体在细胞分裂时不能分向两极，从而导致新生细胞的染色
体加倍［２９］；而秋水仙素的作用时期为ＤＮＡ复制期，其通过植物细胞在复制转录过程中渗入细胞内，发生碱基的
替代或嵌入碱基之间，造成染色体变异，进而发生复制或转录错误，从而导致基因突变［３０］。对海滨雀稗ＳＰ２００８３
体细胞染色体初步计数结果表明，海滨雀稗突变体ＳＰ２００８３的体细胞染色体数目与对照品种Ａｄａｌａｙｄ相同，为
２狀＝２０，但是其染色体大小、随体着丝点位置等是否不同于Ａｄａｌａｙｄ，又或者其在细胞水平上未发生改变［３１，３２］，尚
有待于进一步研究。
随着生物实验技术的迅速发展，植物品种鉴定的方法已从简单、粗放的形态学鉴定进入到了分子生物学鉴定
水平。常见的分子标记技术主要有ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ、ＡＦＬＰ、ＳＳＲ、ＩＳＳＲ等［３３］。其中ＲＡＰＤ具有操作简便快速，对
ＤＮＡ的纯度要求不高，ＤＮＡ用量少，检测位点多，灵敏度高等优点［３１，３３］。解新明等［３４］利用ＲＡＰＤ技术将来自
广东省海滨雀稗的３个野生居群和１个草坪型栽培品种分为两类。本研究中海滨雀稗ＳＰ２００８３与对照Ａｄａ
ｌａｙｄ相比，缺失了１条约１１００ｂｐ的条带，进一步表明在ＤＮＡ水平上海滨雀稗ＳＰ２００８３发生了变异。这一结
０１２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．６
果与Ｍａｒｔｅｌｏｔｔｏ等［３５］对２个海滨雀稗种的同源多倍体ＲＡＰＤ检测结果相似，基因重组造成条带缺失的频率显著
高于获得新条带的概率。
参考文献：
［１］ 解新明，卢小良．海雀稗种质资源的优良特性及其利用价值［Ｊ］．华南农业大学学报，２００４，２５：６４６７．
［２］ ＤｕｎｃａｎＲＲ，ＣａｒｒｏｗＲＮ．Ｓｅａｓｈｏｒｅ犘犪狊狆犪犾狌犿ｔｈｅＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＴｕｒｆｇｒａｓｓ［Ｍ］．Ｈｏｂｏｋｅｎ：ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９．
［３］ ＰｅａｃｏｃｋＣＨ，ＤｕｄｅｃｋＡＥ．Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｇｒｏｗｔｈｒｅｓｐｏｎｓｅｓｏｆｓｅａｓｈｏｒｅｐａｓｐａｌｕｍｔｏｓａｌｉｎｉｔｙ［Ｊ］．ＨｏｒｔＳｃｉｅｎｃｅ，１９８５，
２０（１）：１１１１１２．
［４］ ＤｕｎｃａｎＲＲ．Ｓｅａｓｈｏｒｅｐａｓｐａｌｕｍｍａｙｂｅｇｒａｓｓｆｏｒｔｈｅｙｅａｒ２０００［Ｊ］．ＳｏｕｔｈｅｒｎＴｕｒｆＭａｎａｇｅｍｅｎｔ，１９９４，５：３１３２．
［５］ ＨｕａｎｇＢ，ＤｕｎｃａｎＲＲ，ＣａｒｒｏｗＲＮ．Ｄｒｏｕｇｈｔｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｓｅｖｅｎｗａｒｎｓｅａｓｏｎｔｕｒｆｇｒａｓｓｕｎｄｅｒｓｕｒｆａｃｅｓｏｉｌｄｒ
ｙｉｎｇ：Ｉ．Ｓｈｏｏｔｒｅｓｐｏｎｓｅ［Ｊ］．ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，１９９７，３７（６）：１８５８１８６３．
［６］ 贺小霞，刘一明，王兆龙．海滨雀稗栽培品种的形态特征与ＡＦＬＰ分子标记分析［Ｊ］．草地学报，２０１１，１９（１）：１６４１７０．
［７］ 郑轶琦，臧国长，郭海林，等．假俭草杂交后代生殖性状遗传及相关性分析［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（２）：２８３２８９．
［８］ 邹轶，顾洪如，钟小仙，等．海盐胁迫对海滨雀稗生长及植株体内阳离子含量的影响［Ｊ］．草业科学，２００９，２６（４）：１１７１２０．
［９］ 景艳霞，袁庆华．ＮａＣｌ胁迫对苜蓿幼苗生长及不同器官中盐离子分布的影响［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（２）：１３４１３９．
［１０］ 邹轶，顾洪如，钟小仙，等．海盐胁迫对海滨雀稗生长及植株体内阳离子含量的影响［Ｊ］．草业科学，２００９，２４（６）：１１７
１２０．
［１１］ ＥｓｐｉｎｏｚａＦ，ＱｕａｒｉｎＣＬ．Ｃｙｔｏｅｍｂｒｙｏｌｏｇｙｏｆ犘犪狊狆犪犾狌犿犮犺犪狊犲犪狀狌犿ａｎｄｓｅｘｕａｌｄｉｐｌｏｉｄｂｉｏｔｙｐｅｓｏｆｔｗｏａｐｏｍｉｃｔｉｃ犘犪狊狆犪犾狌犿
ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．ＡｕｓｔｒａｌｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｏｔａｎｙ，１９９７，４５：８７１８７７．
［１２］ ＣａｒｐｅｎｔｅｒＪＡ．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｕｓｅｏｆｓｅｅｄｉｎｓｅａｓｈｏｒｅｐａｓｐａｌｕｍ［Ｊ］．ＡｕｓｔｒａｌｉａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌ
ｏｇｙ，１９５８，２４：２５２２５６．
［１３］ ＦｒｉｃｋｅｒＣ，ＷｉｐｆｆＪＫ，ＤｕｎｃａｎＲＲ．Ｈｙｂｒｉｄｓｅａｓｈｏｒｅｐａｓｐａｌｕｍａｖａｉｌａｂｌｅｆｒｏｍｓｅｅｄｃａｌｅｄ“ＳｅａＳｐｒａｙ”［Ｐ］．ＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓＰａ
ｔｅｎｔ：７２６２３４１Ｂ１，２００７０８２８．
［１４］ 钟小仙，吴娟子，刘智微，等．自交不结实海雀稗秋水仙素诱导体细胞突变体的筛选方法［Ｐ］．中国专利：２０１１１００７４１４７．１，
２０１１０３２８．
［１５］ 马金星，张吉宇，单丽燕，等．中国草品种审定登记工作进展［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（１）：２０６２１３．
［１６］ 梁流芳，佘建明，吴瑛瑛，等．海雀稗幼穗离体培养植株再生［Ｊ］．草地学报，２００８，１６（６）：５９０５９３．
［１７］ 孙同兴，江幸山．简便有效的叶表皮离析方法———过氧化氢醋酸法［Ｊ］．广西植物，２００９，２９（１）：４４４７．
［１８］ 傅志强，黄璜，何保良，等．水稻叶片气孔特性及其相关性［Ｊ］．湖南农业大学学报：自然科学版，２００７，３３（６）：６４６６５０．
［１９］ 虞道耿，刘国道，白昌军，等．热研１１号黑籽雀稗染色体核型分析［Ｊ］．草业科学，２０１０，２７（１）：１０９１１３．
［２０］ 李懋学，张赞平．作物染色体及其研究技术［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９９６：１６０．
［２１］ 张建成，江玉萍，王传堂，等．花生品种鉴定技术研究进展［Ｊ］．花生学报，２００６，３５（２）：２４２８．
［２２］ 刘建秀，贺善安，刘永东，等．华东地区狗牙根形态分类及其坪用价值［Ｊ］．植物资源与环境，１９９６，５（３）：１８２２．
［２３］ 金洪，韩烈保，张永明．中国结缕草居群形态变异分析［Ｊ］．中国草地，２００４，２６（２）：５０５６．
［２４］ 覃秀菊，李凤英，何建栋，等．广西茶树新品种品系叶片解剖结构特征与特性关系的研究［Ｊ］．中国农学通报，２００９，
２５（１０）：３６３９．
［２５］ 李宗艳，肖娟，蒙进芳，等．丽江牡丹和中原牡丹叶片结构微形态比较［Ｊ］．浙江农林大学学报，２０１１，２８（１）：１１５１２０．
［２６］ ＣａｓｓｏｎＳＡ，ＨｅｔｈｅｒｉｎｇｔｏｎＡ Ｍ．Ｅｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｔｏｍａｔａｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＰｌａｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，
２０１０，１３（１）：９０９５．
［２７］ ＡｓｃｈａｎＧ，ＰｆａｎｚＨ，ＶｏｄｎｉｋＤ，犲狋犪犾．Ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｖｅｇｅｔａｔｉｖｅａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｇｒｅｅｎｈｅｌｅ
ｂｏｒｅ（犎犲犾犾犲犫狅狉狌狊狏犻狉犻犱犻狊Ｌ．ａｇｇ．）［Ｊ］．Ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃａ，２００５，４３（１）：５５６４．
［２８］ 游明安，盖钧镒，马育华．田间条件下大豆气孔特性的初步研究［Ｊ］．大豆科学，１９９２，１１（２）：１５２１５８．
［２９］ 郑永强，徐坤．秋水仙素在植物体细胞染色体加倍中的应用研究进展［Ｊ］．中国农学通报，２００３，１９（５）：８９９１．
［３０］ 徐明，路铁刚．植物诱变技术的研究进展［Ｊ］．生物技术进展，２０１１，１（２）：９０９７．
［３１］ 甘玲，汤浩茹，董晓莉．梨种类和品种鉴定研究进展［Ｊ］．中国农学通报，２００６，２２（５）：３０２３０７．
１１２第２１卷第６期 草业学报２０１２年
［３２］ 陈智勇，胡忠红，蒋建雄，等．早熟禾族３种基因型草坪草的染色体核型分析［Ｊ］．草业学报，２０１０，１９（６）：２８１２８５．
［３３］ 李志勇，孙启忠，李鸿雁，等．分子标记技术在牧草种质资源研究中的应用［Ｊ］．草原与草坪，２０１０，３０（５）：９１９６．
［３４］ 解新明，卢小良，孙雄松，等．海雀稗种质资源分子标记的遗传多样性研究［Ｊ］．华南农业大学学报，２００４，２５：１０１５．
［３５］ ＭａｒｔｅｌｏｔｔｏＬＧ，ＯｒｔｉｚＪＰＡ，ＳｔｅｉｎＪ，犲狋犪犾．Ｇｅｎｏｍｅｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｓｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍａｕｔｏｐｏｌｙｐｌｏｉｄｉｚａｔｉｏｎｉｎ犘犪狊狆犪犾狌犿ｓｐ．［Ｊ］．
ＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，２００７，１７２：９７０９７７．
犆狅犿狆犪狉犻狊狅狀犪狀犱犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳狋犺犲犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊狅犳犿狌狋犪狀狋犛犘２００８３犪狀犱犪犱犪犾犪狔犱犻狀狊犲犪狊犺狅狉犲犘犪狊狆犪犾狌犿
ＣＨＡＮＧＰａｎｐａｎ１，２，ＺＨＯＮＧＸｉａｏｘｉａｎ１，ＬＩＵＺｈｉｗｅｉ１
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＪｉａｎｇｓｕＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００１４，Ｃｈｉｎａ；
２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｒａｓｓＳｃｉｅｎｃｅ，ＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏｌｅｇｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ
ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，Ｃｈｉｎａ）
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ｌｙ．ＴｈｅｒｅｗｅｒｅｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｅｒｅｃｔｓｔｅｍｉｎｔｅｒｎｏｄｅｌｅｎｇｔｈａｎｄｄｉａｍｅｔｅｒｂｅｔｗｅｅｎＳＰ２００８３ａｎｄ
Ａｄａｌａｙｄ．ＩｎｔｈｅｕｐｐｅｒｌｅａｆｅｐｉｄｅｒｍｉｓｏｆＳＰ２００８３，ｓｔｏｍａｔａｌｄｅｎｓｉｔｙｗａｓ２０．５８％ｇｒｅａｔｅｒ，ａｎｄｓｔｏｍａｔａｌｌｅｎｇｔｈ
ａｎｄｗｉｄｔｈｗｅｒｅ９．６４％ａｎｄ６．３１％ｌｅｓｓｒｅｓｐｅｃｔｉｖｌｅｙｔｈａｎｉｎＡｄａｌａｙｄ．Ｓｔｏｍａｔａｌｄｅｎｓｉｔｙｉｎｔｈｅｌｏｗｅｒｌｅａｆｅｐｉｄｅｒ
ｍｉｓｏｆＳＰ２００８３，ｗａｓ４０．６２％ｇｒｅａｔｅｒ，ａｎｄｓｔｏｍａｔａｌｌｅｎｇｔｈａｎｄｗｉｄｔｈｗｅｒｅ６．７３％ａｎｄ５．３３％ｌｅｓｓｔｈａｎｉｎ
Ａｄａｌａｙｄ．Ｔｈｅｓｏｍａｔｉｃｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｎｕｍｂｅｒｗａｓ２狀＝２０ｉｎｂｏｔｈＳＰ２００８３ａｎｄＡｄａｌａｙｄ．ＲＡＰＤａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄ
ａｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅＤＮＡ：ａ１１００ｂｐｂａｎｄｗａｓｍｉｓｓｉｎｇｉｎＳＰ２００８３ｗｈｅｎｔｈｅＤＮＡｗａｓａｍｐｌｉｆｉｅｄｂｙｐｒｉｍｅｒ
Ｓ３６９．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ｓｅａｓｈｏｒｅ犘犪狊狆犪犾狌犿；ｓｏｍａｔｉｃｃｅｌ；ｍｕｔａｎｔＳＰ２００８３；ＲＡＰＤ；ｓｔｏｍａｔａｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；ｐｈｙｔｏｌｏｇｙ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ
２１２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１２） Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．６