全 文 ：书山西白羊草种质资源遗传多样性的犐犛犛犚分析
李钰莹，董宽虎
（山西农业大学动物科技学院，山西 太谷０３０８０１）
摘要：利用ＩＳＳＲ分子标记技术对山西３３个白羊草种质资源进行遗传多样性分析。白羊草种质间遗传变异较稳
定，１０条ＩＳＳＲ引物共扩增出９９条带，多态性比率（Ｐ）为５２．２３％；通过ＰｏｐＧｅｎ３２软件计算出：等位基因数（Ｎａ）为
１．５２５３±０．５０１９，有效等位基因数（Ｎｅ）为１．２９４１±０．３６６５，Ｎｅｉ’ｓ基因多样性（Ｈ）为０．１７２３±０．１９８３，Ｓｈａｎｎｏｎ信
息指数（Ｉ）为０．２５９０±０．２８４１；通过 ＮＴＳＹＳｐｃ１．２０ｃ软件计算出３３份材料间的遗传相似系数（ＧＳ）为０．８１８８～
０．９８０１，遗传距离（ＧＤ）为０．０２００～０．１９８８。结果表明，３３份种质材料居群水平的遗传多样性较低，而自然条件下
白羊草进行无融合生殖可能是导致白羊草居群遗传多样性较低的原因之一。
关键词：白羊草；ＩＳＳＲ；遗传多样性；山西；无融合生殖
中图分类号：Ｓ８１６；Ｓ５４３＋．９０３；Ｑ９４３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１４）０１０２１７０６
犇犗犐：１０．１１６８６／ｃｙｘｂ２０１４０１２６　　
　　白羊草（犅狅狋犺狉犻狅犮犺犾狅犪犻狊犮犺犪犲犿狌犿）是禾本科孔颖草属丛生、具匍匐茎的多年生暖季型牧草，属Ｃ４ 植物，具有
高产、抗旱、耐牧等特点，是我国暖性草丛类草地的建群种，主要分布于我国暖温带森林草原区和落叶阔叶林区。
白羊草草地是山西中南部地区低山丘陵区的主要草地类型［１］。国外早在２０世纪５０年代对于白羊草能进行无融
合生殖（ａｐｏｍｉｘｉｓ）已有报道［２３］，即白羊草可以不经过雌雄性细胞的融合而产生有胚的种子；国内肖辅珍和王景
林［４］采用石蜡切片法和苏木精浅染整体透明法观察了北京地区的白羊草生殖过程，观察到不定胚、双胚、多胚囊
以及双苗现象，证实了白羊草的无融合生殖现象。白羊草可以进行有性繁殖和无融合生殖［２３，５６］，而这２种繁殖
存在资源的竞争，两者之间的权衡很大程度上受植物生理生化特性和生境条件的影响［７］，对于山西省境内不同地
域的白羊草自然状态下的生殖特点还罕有报道。约在２０世纪早期白羊草作为牧草引入美国［８］，白羊草现已广泛
分布于美国的中部和南部地区，对于白羊草的研究国内外已做了大量的工作，主要集中在生理生态方面［９１２］，利
用分子手段对白羊草的研究还罕有报道［１３１４］。
简单序列重复区间（ｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ，ＩＳＳＲ）ＤＮＡ分子标记技术是Ｚｉｅｔｋｉｅｗｉｃｚ等［１５］于１９９４年
提出，在ＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）中直接使用微卫星序列进行ＤＮＡ扩增［１６］，具有操作简单、成本低、快
速、灵敏、检测多态性能力强、所需ＤＮＡ模板的量少而倍受青睐。ＩＳＳＲ标记在雀麦（犅狉狅犿狌狊）［１７］、燕麦（犃狏犲狀犪
狊犪狋犻狏犪）［１８］、扁蓿豆（犕犲犾犻狊狊犻狋狌狊）［１９］和苜蓿（犕犲犱犻犮犪犵狅）［２０］等牧草种质资源的遗传多样性研究领域得到广泛应用。
山西省白羊草野生资源丰富，分布广泛，是较为重要的建群种植物之一。本研究利用ＩＳＳＲ分子标记对山西省内
３３个自然居群白羊草进行了遗传多样性研究，以期从遗传上鉴定这些材料，为后期的育种和种质资源的收集、保
存工作奠定基础，同时从分子层面揭示出山西省内不同地域白羊草的繁殖特点。
１　材料与方法
１．１　材料
参试白羊草种质资源于２０１０年１０月采自山西境内，共３３个自然居群，各居群地理信息如表１。２０１１年６
月种植于山西农业大学动物科技学院草业科学实验室，待植株正常生长到５０ｄ后采样。对不同居群，随机收集８
第２３卷　第１期
Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．１
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ 　　
２１７－２２２
２０１４年２月
收稿日期：２０１３０４０３；改回日期：２０１３０５２７
基金项目：教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目（２０１０１４０３１１０００２），山西省科技攻关项目（２０１２０３１１０１１１）和山西省科技基础条件平
台建设项目（２０１２０９１００４０１０１）资助。
作者简介：李钰莹（１９８８），女，陕西宝鸡人，在读硕士。Ｅｍａｉｌ：ｌｉｙｕｙ＿ｉｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｄｏｎｇｋｕａｎｈｕ＠１２６．ｃｏｍ
株以上［２１］的白羊草无污染叶片均匀混合后存于－８０℃冰箱备用。
１．２　方法
１．２．１　总ＤＮＡ的提取与检测　采用改良的ＣＴＡＢ法提取基因组ＤＮＡ［１６］，紫外分光光度计检测纯度，核酸分
析仪测定ＤＮＡ浓度。稀释至１０ｎｇ／μＬ，母液于－２０℃冰箱中备用
［１３］。
１．２．２　引物筛选　引物从哥伦比亚大学（ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＢｒｉｔｉｓｈＣｏｌｕｍｂｉａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＵＢＣ）提供的９６条引
物序列中选出２５条在禾本科牧草中多态性较高的引物进行筛选，引物由生工生物工程（上海）公司合成，其中２３
条引物都能扩增出清晰的条带。经过综合考虑其多态性、重复性和稳定性，最终选出１０条用于本次试验，引物序
列如表２所示。ＴａｑＤＮＡ酶、ｄＮＴＰｓ、Ｍｇ２＋和１０×ＰＣＲＢｕｆｆｅｒ购自宝生物工程（大连）公司。
表１　山西白羊草３３个种质资源的地理位置
犜犪犫犾犲１　犌犲狅犵狉犪狆犺犻犮犾狅犮犪狋犻狅狀狅犳３３犅．犻狊犮犺犪犲犿狌犿犵犲狉犿狆犾犪狊犿狉犲狊狅狌狉犮犲狊犻狀犛犺犪狀狓犻
编号Ｃｏｄｅ 采样位置Ｌｏｃａｔｉｏｎ 经度Ｌｏｎｇｉｔｕｄｅ（Ｎ） 纬度Ｌａｔｉｔｕｄｅ（Ｅ） 海拔 Ａｌｔｉｔｕｄｅ（ｍ）
１ 阳高县 ＹａｎｇｇａｏＣｏｕｎｔｙ １１３°４８′３２．１″ ４０°２５′４３．９″ １１６９
２ 岚县ＬａｎＣｏｕｎｔｙ １１１°４４′２１．３″ ３８°１５′４８．１″ １３４７
３ 芮城县 ＲｕｉｃｈｅｎｇＣｏｕｎｔｙ １１０°２４′３１．８″ ３４°３８′４４．８″ ４２８
４ 阳泉县 ＹａｎｇｑｕａｎＣｏｕｎｔｙ １１３°２６′２９．９″ ３７°５１′１７．６″ ７９５
５ 隰县 ＸｉＣｏｕｎｔｙ １１０°５９′３９．４″ ３６°４７′１７．２″ １１２５
６ 昔阳县 ＸｉｙａｎｇＣｏｕｎｔｙ １１３°３８′４１．４″ ３７°３０′０３．６″ １０２１
７ 襄汾县 ＸｉａｎｇｆｅｎＣｏｕｎｔｙ １１１°１６′０９．７″ ３５°５５′５８．０″ ５８５
８ 原平市 ＹｕａｎｐｉｎｇＣｉｔｙ １１２°４６′０３．８″ ３８°５７′２６．４″ ８４２
９ 忻府区ＸｉｎｆｕＤｉｓｔｒｉｃｔ １１２°２６′３３．３″ ３９°３８′０２．３″ １４９８
１０ 运城市 ＹｕｎｃｈｅｎｇＣｉｔｙ １１０°５４′２４．０″ ３４°５４′２９．１″ ３６３
１１ 偏关县ＰｉａｎｇｕａｎＣｏｕｎｔｙ １１１°２９′１４．７″ ３９°３３′２１．０″ １４７７
１２ 古交市 ＧｕｊｉａｏＣｉｔｙ １１２°１３′３０．６″ ３７°５４′５６．４″ １００７
１３ 芮城县 ＲｕｉｃｈｅｎｇＣｏｕｎｔｙ １１０°３６′３７．７″ ３４°４１′２８．５″ ５１８
１４ 浑源县 ＨｕｎｙｕａｎＣｏｕｎｔｙ １１３°５１′１８．８″ ３９°２９′３０．４″ １２８２
１５ 阳高县 ＹａｎｇｇａｏＣｏｕｎｔｙ １１３°３８′４３．５″ ４０°１４′４６．８″ １１２５
１６ 沁水县 ＱｉｎｓｈｕｉＣｏｕｎｔｙ １１２°３７′０２．０″ ３５°４２′１４．５″ ８１９
１７ 武乡县 ＷｕｘｉａｎｇＣｏｕｎｔｙ １１２°４９′５７．２″ ３６°４７′５３．４″ １０４４
１８ 太谷县 ＴａｉｇｕＣｏｕｎｔｙ １１２°４５′２７．４″ ３７°２２′３４．５″ ９４５
１９ 娄烦县ＬｏｕｆａｎＣｏｕｎｔｙ １１１°５０′００．６″ ３８°０８′１３．８″ １１９２
２０ 芮城县 ＲｕｉｃｈｅｎｇＣｏｕｎｔｙ １１０°５３′２２．２″ ３４°４９′５０．１″ １１５１
２１ 交城县ＪｉａｏｃｈｅｎｇＣｏｕｎｔｙ １１１°４３′１８．９″ ３７°３９′２０．３″ １１９５
２２ 和顺县 ＨｅｓｈｕｎＣｏｕｎｔｙ １１３°３６′３２．６″ ３７°２５′１０．６″ １２８５
２３ 中阳县ＺｈｏｎｇｙａｎｇＣｏｕｎｔｙ １１１°１２′５１．６″ ３７°０９′１８．３″ １４４４
２４ 交口县ＪｉａｏｋｏｕＣｏｕｎｔｙ １１１°２２′４８．６″ ３７°０２′３７．６″ １１６１
２５ 阳城县 ＹａｎｇｃｈｅｎｇＣｏｕｎｔｙ １１２°３２′２５．９″ ３５°３６′１４．５″ ５７５
２６ 平定县ＰｉｎｇｄｉｎｇＣｏｕｎｔｙ １１３°４０′３５．３″ ３７°４３′０７．３″ ８６３
２７ 沁县 ＱｉｎＣｏｕｎｔｙ １１２°４０′３５．０″ ３６°４４′４７．５″ １００３
２８ 太谷县 ＴａｉｇｕＣｏｕｎｔｙ １１２°３４′４１．２″ ３７°２１′４３．９″ ９７８
２９ 代县 ＤａｉＣｏｕｎｔｙ １１２°５６′５０．７″ ３９°０５′１０．６″ ８８９
３０ 临汾市ＬｉｎｆｅｎＣｉｔｙ １１１°３８′１２．３″ ３５°５９′３１．２″ １００７
３１ 高平市 ＧａｏｐｉｎｇＣｉｔｙ １１２°５０′５５．３″ ３５°４５′３３．４″ ８９１
３２ 盐湖区 ＹａｎｈｕＤｉｓｔｒｉｃｔ １１０°５２′２４．６″ ３４°５６′１２．７″ ３４９
３３ 方山县ＦａｎｇｓｈａｎＣｏｕｎｔｙ １１１°２０′４４．８″ ３８°００′１４．２″ １３２１
８１２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．１
表２　犐犛犛犚分析的引物序列及其扩增结果
犜犪犫犾犲２　犘狉犻犿犲狉狊犲狇狌犲狀犮犲狌狊犲犱犻狀犐犛犛犚犪狀犪犾狔狊犲狊犪狀犱犪犿狆犾犻犳犻犲犱狉犲狊狌犾狋狊
引物编号
Ｐｒｉｍｅｒｎａｍｅ
引物序列（５′－３′）
Ｓｅｑｕｅｎｃｅ
退火温度
Ｔｍ（℃）
扩增条带数
Ｔｏｔａｌｂａｎｄｓ
多态性条带
Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｂａｎｄｓ
多态性比率Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｂａｎｄｓ（％）
片段大小
Ｆｒａｇｍｅｎｔｓｉｚｅ（ｂｐ）
ＵＢＣ８０７ （ＡＧ）８Ｔ ５２．１８ １２ ６ ５０．００ ３００～１６００
ＵＢＣ８０８ （ＡＧ）８Ｃ ５４．５９ ７ ３ ４２．８６ ２５０～１０００
ＵＢＣ８１１ （ＧＡ）８Ｇ ５４．５９ ９ ４ ４４．４４ ４００～１２００
ＵＢＣ８２２ （ＴＧ）８Ａ ５２．１８ １２ ９ ７５．００ ３００～２０００
ＵＢＣ８２３ （ＴＣ）８Ｃ ５４．５９ ９ ５ ５５．５６ ４００～２０００
ＵＢＣ８２６ （ＧＣ）８Ｃ ５４．５９ １２ ４ ３３．３３ ３００～１６００
ＵＢＣ８４５ （ＧＡ）８ＲＧ ５６．１６ ９ ５ ５５．５６ ３５０～２５００
ＵＢＣ８５５ （ＡＣ）８ＹＴ ５３．８８ ７ ３ ４２．８６ ５００～１５００
ＵＢＣ８５７ （ＡＣ）８ＹＧ ５６．１６ １１ ６ ５４．５５ ２００～１６００
ＵＢＣ８８１ （ＧＧＧＧＴ）３ ６１．７７ １１ ７ ６３．６４ ５００～２０００
总计 Ｔｏｔａｌ － － ９９ ５２ － －
平均 Ａｖｅｒａｇｅ － － ９．９０ ５．２０ ５２．５３ －
１．２．３　ＰＣＲ扩增及产物的检测［１３］　采用Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ梯度ＰＣＲ仪对白羊草进行ＩＳＳＲ－ＰＣＲ扩增。扩增程序：
９４℃预变性５ｍｉｎ，９４℃变性４５ｓ，５０～６０℃（温度随引物不同而定）退火６０ｓ，７２℃延伸９０ｓ，共３５个循环，７２℃
后延伸５ｍｉｎ，４℃冰箱保存；反应体系：２５μＬ体系中ｄＮＴＰ０．２ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｔａｑ酶１．０Ｕ、引物０．６μｍｏｌ／Ｌ、Ｍｇ
２＋
２．５ｍｍｏｌ／Ｌ、ＤＮＡ模板３０ｎｇ、１０×ＰＣＲＢｕｆｆｅｒ２．５μＬ。
扩增产物用含有ＥＢ的１．５％琼脂糖凝胶电泳分离，９０Ｖ电泳１ｈ左右，用Ｂｉｏ－ＲａｄＧｅｌＤｏｃＸＲ凝胶成像
系统观察、拍照保存。
１．３　数据统计与分析
用ＱｕａｎｔｉｔｙＯｎｅ软件选取清晰可辨的扩增条带进行统计分析，对于同一引物的扩增产物，迁移率相同的条
带记为１个位点，有条带的记为“１”，无带的记为“０”，依次构建原始数据矩阵。采用ＰｏｐＧｅｎｅ３２软件计算居群间
等位变异数（Ｎａ：Ｏｂｓｅｒｖｅｄｎｕｍｂｅｒｏｆａｌｅｌｅｓ）、有效等位基因数（Ｎｅ：Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｕｍｂｅｒｏｆａｌｅｌｅｓ）、Ｎｅｉ’ｓ基因多
样性（Ｈ：Ｎｅｉ’ｓｇｅｎｅｄｉｖｅｒｓｉｔｙ）、Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数（Ｉ：Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ）、多态位点比率（Ｐ：Ｔｈｅ
ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｌｏｃｉ）；利用ＮＴＳＹＳｐｃ２．１０ｃ软件计算３３个白羊草自然居群间遗传距离（ＧＤ）和遗传
相似系数（ＧＳ），然后用非加权配对算术平均法（ＵＰＧＭＡ）构建亲缘关系聚类树状图。
２　结果与分析
２．１　多态性分析
本研究按最适反应体系及程序最终筛选出１０条稳定性和重复性好、多态性较高且条带清晰的引物，用于３３
份白羊草样品的扩增。由表２可知，１０条引物中（ＡＣ）ｎ、（ＡＧ）ｎ、（ＧＡ）ｎ 各２条，说明白羊草基因中可能存在大
量的（ＡＧ）二核苷酸重复序列。１０条引物共扩增出９９条带，大小在２００～２５００ｂｐ之间（引物ＵＢＣ８２３扩增结果
见图１），平均每个引物扩增出９．９０条带，平均多态性比率（Ｐ）为５２．５３％。其中引物ＵＢＣ８２２的扩增条带为１２
条，多态性比率最高为７５．００％；引物ＵＢＣ８２６的扩增条带为１２条，多态性比率最低为３３．３３％。３３份白羊草材
料的遗传变异较稳定，有一定的多态性，ＩＳＳＲ标记能够解释白羊草基因组部分的信息量。
２．２　遗传变异分析
试验利用ＰｏｐＧｅｎ３２软件对１０条引物分别扩增３３份白羊草的９９条扩增条带进行了分析，结果表明，等位
基因数（Ｎａ）为１．５２５３±０．５０１９，有效等位基因数（Ｎｅ）为１．２９４１±０．３６６５，Ｎｅｉ’ｓ基因多样性（Ｈ）为０．１７２３±
０．１９８３，Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数（Ｉ）为０．２５９０±０．２８４１，多态性条带比率（Ｐ）为５２．５３％。结果表明，山西境内不同居
９１２第２３卷第１期 草业学报２０１４年
群的白羊草遗传变异较稳定。用 ＮＴＳＹＳｐｃ１．２０ｃ软件计算白羊草自然居群间的遗传距离（ＧＤ），其变异为
０．０２００～０．１９８８，其中阳高县孤山（１）和忻府区奇村镇（９）之间的遗传距离最小，为０．０２００，说明２个居群的白羊
草亲缘关系最近；芮城县中条山（２０）和运城市盐湖区（３２）之间的遗传距离最大，为０．１９８８，表明２个居群的白羊
草之间亲缘关系最远。
２．３　ＩＳＳＲ聚类分析
利用ＮＴＳＹＳｐｃ１．２０ｃ软件中的ＳＡＨＮ程序和ＵＰＧＭＡ算法，根据遗传相似系数（ＧＳ）构建３３个白羊草种
质资源遗传关系聚类图（图２），从图２可以看出，来自不同地域条件下的３３份种质资源居群水平的遗传多样性
较低，这也与３３份材料具有较高的表观相似性一致。如果以０．８８作为相似系数分界点，３３份材料能分成２类，
１６和３２号分为一类，其余３１份材料为一类。沁水县胡底村（１６），运城盐湖区（３２）为同一类，均来自晋南地区；
阳高县孤山（１）、忻府区奇村镇（９）、阳高县重兴镇（１５）和娄烦县（１９），材料遗传相似度最高，在地理位置上也距离
较近都属于晋北地区。
图１　引物犝犅犆８２３对３３份材料犇犖犃的犐犛犛犚扩增图
犉犻犵．１　犜犺犲犐犛犛犚－犘犆犚犪犿狆犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犲犾犲犮狋狉狅狆犺狅狉犲狊犻狊狅犳３３犇犖犃狊犪犿狆犾犲犫狔狆狉犻犿犲狉犝犅犆８２２
　
图２　３３份白羊草基于犐犛犛犚的遗传相似性犝犘犌犕犃的聚类图
犉犻犵．２　犝犘犌犕犃犮犾狌狊狋犲狉犪狀犪犾狔狊犻狊犫犪狊犲犱狅狀犐犛犛犚犵犲狀犲狋犻犮狊犻犿犻犾犪狉犻狋狔犮狅犲犳犳犻犮犻犲狀狋犪犿狅狀犵３３犅．犻狊犮犺犪犲犿狌犿犿犪狋犲狉犻犪犾狊
０２２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．１
３　讨论与结论
种质资源遗传变异与地理生态环境之间的关系一直是植物遗传研究中关注的热点。本研究结果显示山西省
内白羊草居群间有一定的地域关系，但是遗传距离和地理距离没有显著的相关性。这一方面符合郭敏等［２２］、曾
亮等［２３］的聚类分析呈现一定地域性分布的规律；另一方面也符合孙群等［２４］、俞靓等［２５］得出的遗传多样性与地域
性没有明显关系的规律。
Ｈａｍｒｉｃｋ和Ｌｏｖｅｌｅｓｓ［２６］的研究表明，植物的繁育系统、基因流和种子扩散机制、繁殖方式及自然选择等因素
对植物的遗传结构有明显的影响。白羊草既可进行种子繁殖（有性繁殖以及无融合生殖）［２３，５６］，又可进行营养繁
殖［９，２７］，在天然草地上主要依靠营养繁殖的形式实现种群的补充更新，使其成为群落中的优势种［９，２８］。当白羊草
进行兼性无融合生殖时，既存在基因的分离和重组，提供了可供自然选择的遗传变异，产生的新的有益基因又可
经过无融合生殖迅速占领某个地区，从而补充了因无融合生殖而降低的遗传多样性，提高了种群间的遗传变异水
平并降低了种群内的遗传差异。杨艳娟等［２９］研究表明高的无融合生殖率可能是造成其种群内遗传多样性较低
的原因之一；姚家玲等［３０］研究表明专性或高度无融合生殖个体之间，因缺乏有性生殖，没有基因交流。虽然山西
省地形较为复杂，境内有山地、丘陵、高原、盆地、台地等多种地貌类型，但是其总面积为１５．６７ｋｍ２，仅占全国总
面积的１．６％。风的驱动和人为因素都促进了种子的远距离传播，增大了采样地自然居群间的交配机会，使得山
西省内白羊草自然居群间遗传分化较小。
ＩＳＳＲ分子标记是一种基于微卫星序列发展起来的分子标记，具有简便迅速、稳定高效、ＤＮＡ多态性高，该方
法克服了ＲＦＬＰ技术的局限性以及ＲＡＰＤ的假阳性等优点。本研究利用１０条ＩＳＳＲ引物对山西省白羊草进行
遗传多样性研究，得到５２条多态性条带，平均多态性比率（Ｐ）５２．５３％。说明ＩＳＳＲ分子标记法可以区分３３个不
同居群的白羊草，对其遗传多样性的研究具有一定的意义。本研究利用ＩＳＳＲ分子标记法研究了山西地区３３个
自然居群的白羊草的遗传多样性，为扩展白羊草的遗传资源，研究、利用白羊草种质资源，发掘新种质，培育白羊
草新品种提供了丰富的物质基础。
参考文献：
［１］　董宽虎．山西白羊草草地生产性能、种群生态位及草地培育的研究［Ｄ］．北京：中国农业大学，２００４．
［２］　ＣｅｌａｒｉｅｒＲＰ．ＴｈｅＣｙｔｏｇｅｏｇｒａｐｈｙｏｆｔｈｅ犅狅狋犺狉犻狅犮犺犾狅犪犻狊犮犺犪犲犿狌犿ｃｏｍｐｌｅｘ．ＩＩ．ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｂｅｈａｖｉｏｒ［Ｊ］．ＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌ
ｏｆＢｏｔａｎｙ，１９５７，４４（９）：７２９７３８．
［３］　ＢｒｏｗｎＷＶ，ＥｍｅｒｙＷＨＰ．ＡｐｏｍｉｘｉｓｉｎｔｈｅＧｒａｍｉｎｅａｅ，ＴｒｉｂｅＡｎｄｒｏｐｏｇｏｎｅａｅ：犜犺犲犿犲犱犪狋狉犻犪狀犱狉犪ａｎｄ犅狅狋犺狉犻狅犮犺犾狅犪犻狊犮犺犪犲
犿狌犿［Ｊ］．ＢｏｔａｎｉｃａｌＧａｚｅｔｔｅ，１９５７，１１８（４）：２４６２５３．
［４］　肖辅珍，王景林．白羊草无融合生殖现象的研究初报［Ｊ］．植物学通报，１９９４，（Ｓ１）：７３．
［５］　ＭａＧＨ，ＨｕａｎｇＸＬ．Ｃｙｔｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｅｍｂｒｙｏｌｏｇｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓｏｎａｐｏｓｐｏｒｙｉｎ犅狅狋犺狉犻狅犮犺犾狅犪犻狊犮犺犪犲犿狌犿 Ｌ．［Ｊ］．ＡｃｔａＢｉｏｌｏｇｉｃａ
Ｈｕｎｇａｒｉｃａ，２００７，５８（４）：４２１４２９．
［６］　ＷｅｔＪＭＪＤ，ＢｏｒｇａｏｎｋａｒＤＳ．Ａｎｅｕｐｌｏｉｄｙａｎｄａｐｏｍｉｘｉｓｉｎ犅狅狋犺狉犻狅犮犺犾狅犪ａｎｄ犇犻犮犺犪狀狋犺犻狌犿［Ｊ］．ＢｏｔａｎｉｃａｌＧａｚｅｔｔｅ，１９６３，
１２４（６）：４３７４４０．
［７］　王洪义，王正文，李凌浩，等．不同生境中克隆植物的繁殖倾向［Ｊ］．生态学杂志，２００５，２４（６）：６７０６７６．
［８］　ＧａｂｂａｒｄＢＬ，ＦｏｗｌｅｒＮＬ．Ｗｉｄｅｅｃｏｌｏｇｉｃａｌａｍｐｌｉｔｕｄｅｏｆａｄｉｖｅｒｓｉｔｙｒｅｄｕｃｉｎｇｉｎｖａｓｉｖｅｇｒａｓｓ［Ｊ］．ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｖａｓｉｏｎｓ，２００７，
９（２）：１４９１６０．
［９］　董宽虎，米佳．白羊草种群繁殖的数量特征［Ｊ］．草地学报，２００６，１４（３）：２１０２１３．
［１０］　张昌胜，刘国彬，薛?，等．干旱胁迫和ＣＯ２ 浓度升高条件下白羊草的光合特征［Ｊ］．应用生态学报，２０１２，２１（１１）：３００９
３０１５．
［１１］　袁子成．黄土丘陵沟壑区白羊草群落种多度格局及优势种空间点格局分析［Ｄ］．杨凌：西北农林科技大学，２０１２．
［１２］　徐伟洲，徐炳成，段东平，等．不同水肥条件下白羊草光合生理生态特征研究Ⅲ．叶绿素荧光参数［Ｊ］．草地学报，２０１１，
１９（１）：３１３７．
［１３］　李钰莹，董宽虎，王若梦，等．白羊草ＩＳＳＲ－ＰＣＲ反应体系的建立与优化［Ｊ］．中国草地学报，２０１２，３４（４）：１５２０．
１２２第２３卷第１期 草业学报２０１４年
［１４］　ＭａｔａｋｉｓＳ，ＯｖｅｒａｔｈＲＤ，ＫｕｔｉｌＢ，犲狋犪犾．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅｍａｒｋｅｒｓｆｏｒ犅狅狋犺狉犻狅犮犺犾狅犪犻狊犮犺犪犲犿狌犿
（Ｐｏａｃｅａｅ）［Ｊ］．ＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｏｔａｎｙ，２０１１，９８（７）：１９２１９４．
［１５］　ＺｉｅｔｋｉｅｗｉｃｚＥ，ＲａｆａｌｓｋｉＡ，ＬａｂｕｄａＤ．Ｇｅｎｏｍｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇｂｙｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ（ＳＳＲ）ａｎｃｈｏｒｅｄｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅ
ａｃｔｉｏｎａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，１９９４，２０（２）：１７６１８３．
［１６］　周延清，杨清香，张改娜．生物遗传标记与应用［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００８：３１２．
［１７］　田青松，韩冰，杨稢，等．９６份雀麦属材料遗传多样性的ＩＳＳＲ分析［Ｊ］．中国草地学报，２０１０，３２（１）：１８２５．
［１８］　刘欢，慕平，赵桂琴．燕麦种质资源遗传多样性ＩＳＳＲ研究［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（４）：１１６１２４．
［１９］　李鸿雁，李志勇，师文贵，等．３种生态型野生扁蓿豆种质资源ＩＳＳＲ与ＳＳＲ遗传多样性分析［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（５）：
１０７１１３．
［２０］　魏臻武．苜蓿遗传多样性分子标记及其种质资源评价［Ｄ］．兰州：甘肃农业大学，２００３．
［２１］　刘传虎，周兆喜，周云，等．不同居群龙须草ＲＡＰＤ分析及其分类研究［Ｊ］．西北植物学报，２００６，２６（５）：９１５９２０．
［２２］　郭敏，马彦军，李毅．祁连山不同海拔梯度山生柳遗传多样性的ＳＳＲ分析［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（５）：１１４１２１．
［２３］　曾亮，袁庆华，王方，等．冰草属植物种质资源遗传多样性的ＩＳＳＲ分析［Ｊ］．草业学报，２０１３，２２（１）：２６０２６７．
［２４］　孙群，佟汉文，吴波，等．不同种源乌拉尔甘草形态和ＩＳＳＲ遗传多样性研究［Ｊ］．植物遗传资源学报，２００７，８（１）：５６６３．
［２５］　俞靓，井赵斌，程积民．陕西省本氏针茅自然种群遗传多样性的ＩＳＳＲ分析［Ｊ］．草地学报，２０１２，２０（３）：５１２５１７．
［２６］　ＨａｍｒｉｃｋＪＬ，ＬｏｖｅｌｅｓｓＭＤ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｂｒｅｅｄｉｎｇｓｙｓｔｅｍａｎｄｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｔｒｏｐｉｃａｌｔｒｅｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ａ
ｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｏｔａｎｙ，１９８７，７４（５）：６４２．
［２７］　国振杰．蒙古高原草原区主要根茎禾草发育及繁殖特性的研究［Ｄ］．呼和浩特：内蒙古农业大学，２００７．
［２８］　许庆方，董宽虎，史书瑞，等．放牧利用白羊草灌丛草地的植被特征［Ｊ］．草地学报，２００４，１２（２）：１３６１３９．
［２９］　杨艳娟，谢世清，孟珍贵，等．濒危药用植物云南黄连传粉生态学研究［Ｊ］．西北植物学报，２０１２，３２（７）：１３７２１３７６．
［３０］　姚家玲，洪柳，张友德，等．龙须草生态型的划分及其遗传差异的 ＡＦＬＰ分析［Ｊ］．中国农业科学，２００４，３７（１１）：１６９９
１７０４．
犐犛犛犚犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳犵犲狀犲狋犻犮犱犻狏犲狉狊犻狋狔狅犳犵犲狉犿狆犾犪狊犿狉犲狊狅狌狉犮犲狊
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ＬＩＹｕｙｉｎｇ，ＤＯＮＧＫｕａｎｈｕ
（ＣｏｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＳｈａｎｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｇｕ０３０８０１，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓｏｆ３３ｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆ犅狅狋犺狉犻狅犮犺犾狅犪犻狊犮犺犪犲犿狌犿ｉｎＳｈａｎｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅ
ｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｕｓｉｎｇｉｎｔｅｒｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ（ＩＳＳＲ）ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｍｏｎｇｇｅｒｍｐｌａｓｍ
ｒｅｓｏｕｒｃｅｓｗａｓｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｓｔａｂｌｅ．Ｎｉｎｅｔｙｎｉｎｅｂａｎｄｓ，ｏｆｗｈｉｃｈ５２（５２．２３％）ｗｅｒｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ，ｗｅｒｅａｍｐｌｉｆｉｅｄ
ｕｓｉｎｇ１０ｐａｉｒｓｏｆＩＳＳＲｐｒｉｍｅｒｓ．ＡｎａｌｙｚｅｓｂｙＰｏｐＧｅｎ３２ｓｏｆｔｗａｒｅｓｈｏｗｅｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆａｌｅｌｅｓ（Ｎａ）ｗａｓ１．５２５３
±０．５０１９，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｕｍｂｅｒｏｆａｌｅｌｅｓ（Ｎｅ）ｗａｓ１．２９４１±０．３６６５，Ｎｅｉ’ｓｇｅｎｅｄｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｈ）ｗａｓ０．１７２３±
０．１９８３，ａｎｄＳｈａｎｎｏｎ’ｓｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ（Ｉ）ｗａｓ０．２５９０±０．２８４１；ＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＮＴＳＹＳｐｃ
１．２０ｃ，ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ（ＧＳ）ａｍｏｎｇ３３ｇｅｒｍｐｌａｓｍ ｍａｔｅｒｉａｌｓｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ０．８１８８ｔｏ０．９８０１，
ｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅ（ＧＤ）ｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ０．０２００ｔｏ０．１９８８．Ｔｈｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ３３ｇｅｒｍｐｌａｓｍ
ｍａｔｅｒｉａｌｓｗａｓｌｏｗ：ｔｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅｒｅａｓｏｎｃｏｕｌｄｂｅｔｈａｔｔｈｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｓｔｒａｔｅｇｙｏｆ犅．犻狊犮犺犪犲犿狌犿ｉｓａｐｏｍｉｘｉｃｕｎ
ｄｅｒｎａｔｕｒａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：犅狅狋犺狉犻狅犮犺犾狅犪犻狊犮犺犪犲犿狌犿；ＩＳＳＲ；ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；Ｓｈａｎｘｉ；ａｐｏｍｉｘｅｓ
２２２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．１