全 文 ：书甘肃中部地区禾谷镰孢的变异研究
李金花１，２，纪莉景３，柴兆祥２，ＫｎｉｇｈｔＴＥ４，ＢｕｒｇｅｓｓＬＷ４
（１．甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室，甘肃 兰州７３００７０；２．甘肃农业大学草业学院植物病理学系，
甘肃 兰州７３００７０；３．河北农林科学院植保所，河北 保定０７１００１；４．澳大利亚悉尼大学农业、
食品和自然资源学院镰刀菌研究实验室，悉尼２００６）
摘要：为掌握禾谷镰孢在甘肃中部地区的分布及变异情况，从根部表现有坏死和叶鞘发褐的小麦幼苗的不同部位、
小麦地土壤及玉米籽粒、玉米茎秆上分离禾谷镰孢，并以形态学为基础，参照 Ｎｅｌｓｏｎ分类系统进行鉴定。结果表
明，在分离到的４３个镰刀菌菌株中，有１４个菌株经鉴定为禾谷镰孢，均从玉米茎秆上分离到，小麦根部、小麦叶
鞘、小麦地土壤、玉米籽粒中分离到的镰刀菌中未见禾谷镰孢。将禾谷镰孢在特定条件下培养后，发现１４个禾谷
镰孢菌株产生子囊壳的数量不同，为２～９０个。在以Ｆｇ１６为引物的ＰＣＲ反应中，随机选取的１１个禾谷镰孢菌株
都产生０．４１ｋｂ的ＰＣＲ产物，而６个对照菌株都产生０．５０ｋｂ的片段，证明引物Ｆｇ１６可以区分禾谷镰孢菌株群体
的遗传多态性。以Ｔｒｉ１３为引物的ＰＣＲ反应显示，１１个禾谷镰孢菌株以及３个中国对照菌株都产生脱氧雪腐镰
刀菌烯醇（ＤＯＮ）毒素，而３个澳大利亚对照菌株产生雪腐镰刀菌烯醇（ＮＩＶ）毒素。
关键词：禾谷镰孢；子囊壳；真菌毒素；Ｆｇ１６；Ｔｒｉ１３；ＰＣＲ
中图分类号：Ｓ４３５．１２１．４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４５７５９（２００９）０１０１１８０７
禾谷镰孢（犉狌狊犪狉犻狌犿犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿）能侵染小麦（犜狉犻狋犻犮狌犿犪犲狊狋犻狏狌犿）、大麦（犎狅狉犱犲狌犿狏狌犾犵犪狉犲）、水稻（犗狉狔
狕犪狊犪狋犻狏犪）、燕麦（犃狏犲狀犪狊犪狋犻狏犪）等禾谷类作物的穗、茎、茎基部和根部等部位，引起穗腐、茎腐、茎基腐和根腐病等
病害，也能侵染其他植物。虽然有时罹病植株受害症状不明显［１，２］，但仍能造成作物减产和品质下降［３］。由于少、
免耕技术的大面积推广，禾谷镰孢已经成为世界性的植物病原物，其子囊壳中的子囊孢子能够通过气流传播，是
翌年的初侵染来源。其次，寄居在禾本科作物籽粒中的禾谷镰孢还产生包括脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）、雪腐
镰刀菌烯醇（ＮＩＶ）和玉米赤霉烯酮（ＺＥＡ）等真菌毒素［４］，这些作物产品不适合食用或饲用［５，６］的原因是ＤＯＮ、
ＮＩＶ能抑制植物、动物蛋白质的生物合成［７，８］。禾谷镰孢引起的玉米穗茎腐和小麦赤霉病在中国发生普遍［９～１２］，
但在甘肃少见报道。甘肃大部分地区属于干旱和半干旱地区，但玉米小麦的间作和轮作以及作物的灌溉使得禾
谷镰孢对甘肃省禾谷类作物存在一定的潜在危险。本研究初步调查了禾谷镰孢在甘肃省中部地区玉米、小麦及
土壤中的分布状况，以及不同菌株所产毒素种类和子囊壳数量等特性，旨在为深入研究干旱和半干旱地区的禾谷
镰孢提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 标样的采集
２００５年５月，在定西中部地区随机选择１０块小麦田，随机挖取小麦幼苗，选择根部表现有坏死和叶鞘发褐
的幼苗；土样从相同的小麦田块中用土壤取样器以五点取样法取０～１５ｃｍ的土样，混合均匀。玉米茎秆残体为
２００４年收获、室外贮存带有黑色小颗粒的标样。玉米籽粒为２００４年收获的陈粒。所有标样均分装在保鲜袋中
带回实验室分离。
１．２ 镰刀菌的分离和纯化
小麦幼苗流水冲洗后，将小麦标样的根和叶鞘用７０％ 酒精消毒１ｍｉｎ，切成０．５ｃｍ左右的小段后置于蛋白
胨五氯硝基苯（ＰＰＡ，ｐｅｐｔｏｎｅＰＣＮＢａｇａｒ：琼脂２０ｇ，蛋白胨１５ｇ，ＫＨ２ＰＯ４１ｇ，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．５ｇ，五氯硝基
１１８－１２４
２００９年２月
草 业 学 报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
第１８卷 第１期
Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．１
收稿日期：２００７１２０６；改回日期：２００８０９１０
基金项目：澳大利亚ＡＴＳＥ／Ｃｒａｗｆｏｒｄ基金，甘肃省科技厅（甘科计［２００１］２１号）和甘肃省教育厅项目（０３２２０８）资助。
作者简介：李金花（１９７２），女，甘肃秦安人，副教授。Ｅｍａｉｌ：ｌｊｈ＠ｇｓａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｊｉａｎｇｚｅ＠ｐｕｂｌｉｃ．ｌｚ．ｇｓ．ｃｎ
苯１ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ，灭菌后当培养基温度降到５５℃左右时加入适量硫酸链霉素和新霉素）［１３］培养基上。土
样用０．２％的水琼脂稀释成１／２００的浓度，吸取１ｍＬ后均匀涂在ＰＰＡ上。玉米茎秆直接用７０％的酒精擦拭表
面，用解剖刀切取上面的黑色小颗粒，置于ＰＰＡ平板上。玉米籽粒于分离前用７０％酒精消毒、灭菌水冲洗３次
后，在灭菌水中浸泡过夜，次日将籽粒纵切后置于ＰＰＡ上。
ＰＰＡ平板培养７ｄ左右，将镰刀菌纯化至康乃馨叶琼脂（ＣＬＡ：琼脂２０ｇ，水１０００ｍＬ，康乃馨叶片若干）［１３］
培养基上，１０ｄ左右后将ＣＬＡ上的镰刀菌菌落单孢分离至ＣＬＡ和马铃薯葡萄糖琼脂（ＰＤＡ：马铃薯２５０ｇ，葡萄
糖１５ｇ，琼脂２０ｇ，水１０００ｍＬ）［１３，１４］培养基上用于鉴定和保存（－７０℃冰箱）。以上３种平板均在特定条件下的
镰刀菌培养室中培养［１５］。
１．３ 镰刀菌的鉴定
参照Ｎｅｌｓｏｎ分类系统［１３］，以ＣＬＡ上小孢子和厚壁孢子的有无及产生方式、大孢子的形态及产生方式、ＰＤＡ
上的菌落形态及颜色、单孢子在２５℃、３０℃全黑暗７２ｈ的菌落直径进行鉴定。
１．４ 禾谷镰孢子囊壳的产生
将４片经辐射消毒的康乃馨圆片（直径４ｍｍ）置于水琼脂（ＷＡ：琼脂２０ｇ，蒸馏水１０００ｍＬ）［１６］平板（培养
皿直径为９０ｍｍ，内有３０ｍＬ的 ＷＡ培养基）周围，ＷＡ平板中央接种一片ＰＤＡ上培养的直径为５ｍｍ的菌饼，
置于白天２２℃有光照／晚上２０℃全黑暗各１２ｈ的光照培养室中培养２１ｄ后，在体视显微镜下镜检每平板产生子
囊壳的数量。每个菌株重复４个平板。
１．５ ＤＮＡ的提取、检测和ＰＣＲ扩增
从分离到的禾谷镰孢中，随机选取１１株在ＤＮＡ水平进行分析。菌株在ＰＤＡ上生长５ｄ后，分别刮取菌丝
于１．５ｍＬ离心管中，按照ＤＮＡ提取试剂盒（购自ＱｂｉｏｇｅｎｅＩｎｃ．Ｉｒｖｉｎｅ，加拿大）上的操作步骤提取ＤＮＡ，以２．５
μＬ的 ＨｙｐｅｒｌａｄｄｅｒＩ（购自Ｅ＆ＫＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＳａｎｔａＣｌａｒａ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，美国）确定ＤＮＡ的浓度
［１７］。
以２５μＬ体系进行ＰＣＲ扩增
［１７］，使用引物［１８～２０］
见表１，以不加ＤＮＡ为阴性对照。ＰＣＲ反应包括１０
×Ｔａｑｂｕｆｆｅｒ２．５μＬ，２．５ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ２μＬ，１０
μｍｏｌ／Ｌ的引物１μＬ，模板ＤＮＡ１μＬ，５Ｕ／μＬＴａｑ酶
０．２５μＬ，超纯水将反应体系补至２５μＬ。ＰＣＲ反应热
循环参数设置为：预变性９４℃４ｍｉｎ；９４℃变性３０ｓ，
５５℃退火３０ｓ，７２℃延伸２ｍｉｎ，进行３５个循环；７２℃
延伸１０ｍｉｎ［１７］。
１．６ ＰＣＲ产物的纯化和检测
ＰＣＲ产物采用北京天为时代科技有限公司的离
表１ 本试验中使用的引物及其序列
犜犪犫犾犲１ 犘狉犻犿犲狉狊犲狇狌犲狀犮犲狊狌狊犲犱犻狀犿狅犾犲犮狌犾犪狉
犱犻犳犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀狊狋狌犱犻犲狊
引物名称Ｐｒｉｍｅｒ 序列Ｓｅｑｕｅｎｃｅ（５′ｔｏ３′）
Ｔｒｉ１３前引物 Ｔｒｉ１３ｆｏｒｗａｒｄ ｔａｃｇｔｇａａａｃａｔｔｇｔｔｇｇｃ
Ｔｒｉ１３后引物 Ｔｒｉ１３ｒｅｖｅｒｓｅ ｇｇｔｇｔｃｃｃａｇｇａｔｃｔｇｃｇ
Ｆｇ１６前引物Ｆｇ１６ｆｏｒｗａｒｄ ｃｔｃｃｇｇａｔａｔｇｔｔｇｃｇｔｃａａ
Ｆｇ１６后引物Ｆｇ１６ｒｅｖｅｒｓｅ ｇｇｔａｇｇｔａｔｃｃｇａｃａｔｇｇｃａａ
心柱型ＰＣＲ产物纯化试剂盒（普通型）进行纯化，纯化后的ＰＣＲ产物于４℃短期保存［１７］。取６～８μＬ扩增产物
于１％的琼脂糖凝胶上电泳，利用成像系统成像。
２ 结果与分析
２．１ 镰刀菌的种群分布
共分离到４３个镰刀菌菌株，其中从小麦根部分离到６个镰刀菌菌株，小麦叶鞘上分离到３个，小麦地土壤共
分离到１１个，玉米籽粒上分离到３个，玉米茎秆上分离到２０个。禾谷镰孢１４个，占３２．６％，均从玉米茎秆上分
离到，变褐的小麦根以及小麦叶鞘上未分离到禾谷镰孢（表２）。
２．２ 禾谷镰孢的鉴定特征
ＰＤＡ上的菌丝呈羊毛状，淡黄色至淡玫瑰红。菌落在ＰＤＡ中产生玫瑰红色素。ＣＬＡ上产生玫瑰红色素，
形成大量的淡橘红色分生孢子座。不产生小型分生孢子。有的菌株产生厚垣孢子，有的菌株不产生。生长在
ＣＬＡ上的子囊壳呈黑色小点（图１）。大型分生孢子产生于子座中分枝的分生孢子梗上，镰刀状或较直，通常５或
６个隔膜，顶胞渐尖，足胞脚后跟状（图２）。
９１１第１８卷第１期 草业学报２００９年
表２ 甘肃中部地区禾谷镰孢的分离来源和数量
犜犪犫犾犲２ 犛狅狌狉犮犲狊犪狀犱狇狌犪狀狋犻狋狔狅犳犉．犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿犻狊狅犾犪狋犲犱犳狉狅犿狋犺犲犿犻犱犱犾犲狅犳犌犪狀狊狌
菌株编号Ｉｓｏｌａｔｅｓｃｏｄｅ 菌株分离来源Ｓｏｕｒｃｅｓｏｆｉｓｏｌａｔｅｓ 菌株数Ｑｕａｎｔｉｔｙｏｆｉｓｏｌａｔｅｓ 菌株分类地位Ｔａｘｏｎｏｍｉｃａｌｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｉｓｏｌａｔｅｓ
Ｃ１～Ｃ６ 小麦根Ｒｏｏｔｏｆ犜．犪犲狊狋犻狏狌犿 ６ 镰刀菌犉狌狊犪狉犻狌犿ｓｐｐ．
Ｃ７～Ｃ９ 小麦叶鞘Ｓｈｅａｔｈｏｆ犜．犪犲狊狋犻狏狌犿 ３ 镰刀菌犉狌狊犪狉犻狌犿ｓｐｐ．
Ｃ１１～Ｃ１３ 玉米籽粒 Ｋｅｒｎａｌｏｆ犣．犿犪狔狊 ３ 镰刀菌犉狌狊犪狉犻狌犿ｓｐｐ．
Ｃ１４～Ｃ２７ 玉米茎秆Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊 １４ 禾谷镰孢犉．犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿
Ｃ２８～Ｃ３８ 小麦地土壤Ｓｏｉｌｉｎ犜．犪犲狊狋犻狏狌犿ｆｅｉｌｄ １１ 镰刀菌犉狌狊犪狉犻狌犿ｓｐｐ．
Ｃ３９～Ｃ４３ 玉米茎秆Ｓｔｅｍｏｆ犣．犿犪狔狊 ６ 镰刀菌犉狌狊犪狉犻狌犿ｓｐｐ．
２．３ 禾谷镰孢不同菌株产生子囊壳的情况
图１ 犆犔犃上禾谷镰孢的培养性状和康乃馨叶片上的子囊壳
犉犻犵．１ 犆狌犾狋狌狉犪犾犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊狅犳犉．犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿狅狀犆犔犃
犪狀犱犻狋狊狆犲狉犻狋犺犲犮犻犪狅狀犮犪狉狀犪狋犻狅狀犾犲犪犳狆犻犲犮犲狊
图２ 禾谷镰孢大型分生孢子
犉犻犵．２ 犕犪犮狉狅犮狅狀犻犱犻犪狅犳犉．犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿
不同来源的禾谷镰孢菌株产生子囊壳的数量不
同。产生数量最大的为Ｃ２０菌株，每平板产生９０
个子囊壳；产生数量最少的为Ｃ１８和Ｃ２２菌株，每
平板仅产生２个子囊壳。从甘肃武威辣椒（犆犪狆狊犻
犮狌犿犳狉狌狋犲狊犮犲狀狊）根部和湖北小麦麦穗上分离到的对
照菌株Ｃ４６、Ｃ４７和Ｃ４８每平板产生子囊壳的数量
分别为１，１和２个（表３）。
２．４ 引物Ｆｇ１６对不同来源的禾谷镰孢的多样性
分析
对不同菌株的ＤＮＡ以引物Ｆｇ１６进行扩增后，
ＰＣＲ产物的片段大小也有差异。从甘肃中部分离
到的菌株中，除了 Ｃ１８没有出现任何大小的片段
外，其余均产生大小为０．４１ｋｂ的片段，而对照菌株
Ａ１和Ｃ４７都产生０．５０ｋｂ的片段（图３）。证明引物
Ｆｇ１６能分析不同来源菌株的多样性。
２．５ 禾谷镰孢不同菌株的产毒情况
以特一性毒素产生引物 Ｔｒｉ１３对不同菌株
ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增后，随机选取的１１个甘肃菌株
和中国的另外３个对照菌株Ｃ４６、Ｃ４７和Ｃ４８都产
生大小为２３４ｂｐ的片段，３个分离自澳大利亚玉米
籽粒上的对照菌株Ａ１、Ａ２和Ａ３都产生大小为４１５
ｂｐ的片段。从ＰＣＲ产物片段大小来看，中国的这
些菌株都产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）毒素，而
３个澳大利亚菌株都产生雪腐镰刀菌烯醇（ＮＩＶ）毒
素。部分菌株Ｔｒｉ１３的ＰＣＲ电泳结果见图４。
３ 结论与讨论
本试验从甘肃中部地区共分离到１４个禾谷镰
孢菌株，占所分离镰刀菌的３２．６％。随机选取的１１个菌株与３个不同来源的其他中国菌株在子囊壳的产生数
量上有差异；并且引物Ｆｇ１６能分析不同来源禾谷镰孢的多样性；这１１个菌株都产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇
（ＤＯＮ）毒素。
０２１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２００９） Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．１
表３ 禾谷镰孢子囊壳的产生数量和毒素类型
犜犪犫犾犲３ 犞犪狉犻犪狋犻狅狀犻狀狆犲狉犻狋犺犲犮犻犪狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀犪狀犱狋狔狆犲狅犳犿狔犮狅狋狅狓犻狀犫狔犉．犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿
菌株编号
Ｉｓｏｌａｔｅｓ
ｃｏｄｅ
分离来源
Ｓｏｕｒｃｅｓｏｆｉｓｏｌａｔｅｓ
每平板平均子囊
壳个数 Ｍｅａｎｐｅｒ
ｉｔｈｅｃｉａｑｕａｎｔｉｔｙ
ｐｅｒｐｅｔｒｉｄｉｓｈ
引物Ｆｇ１６ＰＣＲ
产物片段大小
ＢａｎｄａｔＦｇ１６
ｐｒｉｍｅｒ（ｋｂ）
引物Ｔｒｉ１３ＰＣＲ
产物片段大小
ＢａｎｄａｔＴｒｉ１３
ｐｒｉｍｅｒ（ｂｐ）
毒素类型
Ｔｙｐｅｏｆｍｙｃｏｔｏｘｉｎ
Ｃ２０ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ９０ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ１９ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ７２ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ２１ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ６３ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ１５ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ５７ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ１６ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ４４ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ１４ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ３８ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ１７ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ２３ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ２４ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ １１ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ２３ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ４ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ１８ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ２ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ２２ 玉米秆，甘肃Ｓｔａｌｋｏｆ犣．犿犪狔狊，Ｇａｎｓｕ ２ ０．４１ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ａ１ 玉米籽粒，澳大利亚Ｋｅｒｎｅｌｏｆ犣．犿犪狔狊，Ａｕｓｔｒａｌｉａ ８ ０．５０ ４１５ 雪腐镰刀菌烯醇ＮＩＶ
Ａ２ 玉米籽粒，澳大利亚Ｋｅｒｎｅｌｏｆ犣．犿犪狔狊，Ａｕｓｔｒａｌｉａ ３１ ０．５０ ４１５ 雪腐镰刀菌烯醇ＮＩＶ
Ａ３ 玉米籽粒，澳大利亚Ｋｅｒｎｅｌｏｆ犣．犿犪狔狊，Ａｕｓｔｒａｌｉａ １０ ０．５０ ４１５ 雪腐镰刀菌烯醇ＮＩＶ
Ｃ４６ 辣椒，武威，甘肃犆．犳狉狌狋犲狊犮犲狀狊，Ｗｕｗｅｉ，Ｇａｎｓｕ １ ０．５０ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ４７ 小麦赤霉病病穗，湖北 ＷｈｅａｔＦＨＢ，Ｈｕｂｅｉ １ ０．５０ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
Ｃ４８ 小麦赤霉病病穗，湖北 ＷｈｅａｔＦＨＢ，Ｈｕｂｅｉ ２ ０．５０ ２３４ 脱氧雪腐镰刀菌烯醇ＤＯＮ
图３ 引物犉犵１６扩增禾谷镰孢菌株犇犖犃后的犘犆犚产物片段大小
犉犻犵．３ 犅犪狀犱狊狆狉狅犱狌犮犲犱犫狔犻狊狅犾犪狋犲狊犳狉狅犿犿犻犱犱犾犲犌犪狀狊狌犪狀犱狉犲犳犲狉犲狀犮犲犻狊狅犾犪狋犲狊犪狋狋犺犲犉犵１６狊犲犾犲犮狋犻狏犲犘犆犚
泳道１：１１００ｂｐｌａｄｄｅｒ；泳道２～４，６，８～１４：甘肃菌株Ｃ１４～Ｃ２４；泳道５：Ａ１；泳道７：Ｃ４７；泳道１５：空白对照
Ｌａｎｅ１：１１００ｂｐｌａｄｄｅｒ；Ｌａｎｅ２－４，６，８－１４：ＧａｎｓｕｉｓｏｌａｔｅｓＣ１４－Ｃ２４；Ｌａｎｅ５：Ａ１；
Ｌａｎｅ７：Ｃ４７；Ｌａｎｅ１５：Ｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ
禾谷镰孢能侵染小麦、大麦、水稻、燕麦等禾谷类作物的穗、茎、茎基部和根部等部位，引起穗腐、茎腐、茎基腐
和根腐病等病害，但是受环境因素特别是湿度的影响较大，温暖、湿润的长江流域分布普遍，干旱的年份和地区发
１２１第１８卷第１期 草业学报２００９年
图４ 引物犜狉犻１３扩增禾谷镰孢菌株犇犖犃后的犘犆犚产物片段大小
犉犻犵．４ 犈犾犲犮狋狉狅狆犺狅狉犲狊犻狊狅犳犜狉犻１３犘犆犚狆狉狅犱狌犮狋犳狉犪犵犿犲狀狋犪狋４１５犫狆犻狀犱犻犮犪狋犲狊犖犐犞犮犺犲犿狅狋狔狆犲，
２３４犫狆犳狉犪犵犿犲狀狋犻狀犱犻犮犪狋犲狊犇犗犖犮犺犲犿狅狋狔狆犲
泳道１～３：对照菌株Ａ１～Ａ３；泳道４～１１：试验菌株Ｃ１７～２４；泳道１２：空白对照；泳道１３：Ｈｙｐｅｒｌａｄｄｅｒ
Ｌａｎｅ１－３：ＣｏｎｔｒｌＡ１－Ａ３；Ｌａｎｅ４－１１：ＩｓｏｌａｔｅｓＣ１７－Ｃ２４；Ｌａｎｅ１２：Ｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ；
Ｌａｎｅ１３：Ｈｙｐｅｒｌａｄｄｅｒ
生轻［１８～２４］。甘肃中部为半干旱地区［２５～２７］，在小麦的生长季（３－６月）通常较为干旱，所以从小麦叶鞘和小麦地
土壤中未能分离到禾谷镰孢菌株，而恰恰相反，从玉米茎秆上分离到了大量的禾谷镰孢菌株。因为玉米收获后，
种植者将玉米秸秆存放于田间地头，暴露于秋季雨水中［２７］，使得玉米秸秆成为禾谷镰孢产生子囊壳的温床，这可
从玉米秸秆上带有大量的黑色小颗粒和本试验的鉴定结果得以证明。同时，从采集的玉米秸秆标样上观察到大
量的子囊壳，并且通过子囊壳获得禾谷镰孢，说明禾谷镰孢可以在甘肃中部地区越冬。再者，由于甘肃气候的多
样性［２８，２９］，越冬的子囊壳对种植在甘肃的禾谷类作物来说是一个潜在威胁。鉴于此，对禾谷镰孢在甘肃的分布
监测、毒性变异等问题有待深入研究。
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３２１第１８卷第１期 草业学报２００９年
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（１．ＧａｎｓｕＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｒｏｐＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔａｎｄＧｅｒｍｐｌａｓｍＥｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ；
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Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ；３．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，ＨｅｂｅｉＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄ
ＦｏｒｅｓｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００１，Ｃｈｉｎａ；４．ＦｕｓａｒｉｕｍＲｅｓｅａｒｃｈＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｆａｃｕｌｔｙｏｆ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＦｏｏｄａｎｄＮａｔｕｒａｌＲｅｓｏｕｒｃｅｓ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｙｄｎｅｙ，
ＮＳＷ，Ｓｙｄｎｅｙ２００６，Ａｕｓｔｒａｌｉａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆ犉狌狊犪狉犻狌犿犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿ｏｎ犜狉犻狋犻犮狌犿犪犲狊狋犻狏狌犿ａｎｄ犣犲犪犿犪狔狊，ｉｎｔｈｅｍｉｄｄｌｅａｒｅａｓ
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ｓｙｍｐｔｏｍｓ，ｆｒｏｍ犜．犪犲狊狋犻狏狌犿ｓｈｅａｔｈｓ，犜．犪犲狊狋犻狏狌犿ｓｏｉｌ，犣．犿犪狔狊ｋｅｒｎｅｌｓ，ａｎｄ犣．犿犪狔狊ｓｔａｌｋｓ．犉狌狊犪狉犻狌犿ｉｓｏ
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犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿．Ｉｔｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｏｎｌｙｆｒｏｍｃｏｒｎｓｔａｌｋｓ．Ｔｈｅｓｅ１４ｉｓｏｌａｔｅｓｐｒｏｄｕｃｅｄｂｅｔｗｅｅｎ２ａｎｄ９０ｐｅｒｉｔｈｅｃｉａ
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犓犲狔狑狅狉犱狊：犉狌狊犪狉犻狌犿犵狉犪犿犻狀犲犪狉狌犿；ｐｅｒｉｔｈｅｃｉｕｍ；ｍｙｃｏｔｏｘｉｎ；Ｆｇ１６；Ｔｒｉ１３；ＰＣＲ
４２１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２００９） Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．１