全 文 ：硒锌与富啡酸配施对紫花苜蓿产量、
营养成分及氨基酸组成的影响
田春丽１，３，介晓磊１，４，刘騋１，刘芳１，郭孝２，胡华锋２，刘世亮１
（１．河南农业大学资源与环境学院，河南 郑州４５０００２；２．河南牧业经济学院，河南 郑州４５００１１；
３．河南农业职业学院，河南 中牟４５１４５０；４．黄淮学院，河南 驻马店４６３０００）
摘要：采用大田小区试验方法，通过播前基施硒、锌微肥和富啡酸，研究了硒锌和富啡酸配施对紫花苜蓿产量、营养
成分及氨基酸组成的影响。结果表明：在统一施用氮磷钾的基础上，适量硒锌或富啡酸的施用均可提高紫花苜蓿
干草产量，且以两者配施效果最好，产量达１６．２８ｔ／ｈｍ２，显著（犘＜０．０１）高于对照，增幅为４２．４３％；施用硒锌混合
微肥或富啡酸均可显著提高紫花苜蓿硒、锌含量及积累量；硒锌和富啡酸配施极显著提高了紫花苜蓿粗蛋白含量
和粗灰分含量，而对粗脂肪、粗纤维和无氮浸出物含量影响不显著，三者配施显著提高了氨基酸总量及缬氨酸
（Ｖａｌ）、亮氨酸（Ｌｅｕ）以及赖氨酸（Ｌｙｓ）等３种必需氨基酸（ＥＡＡ），同时提高了非必需氨基酸（ＮＥＡＡ）中的天门冬氨
酸（Ａｓｐ）、精氨酸（Ａｒｇ）、组氨酸（Ｈｉｓ）和酪氨酸（Ｔｙｒ），其他氨基酸变化不明显。因此，适量硒锌与富啡酸配施有利
于增加苜蓿干草产量、营养成分、必需氨基酸含量和氨基酸总量，改善紫花苜蓿品质。
关键词：紫花苜蓿；硒；锌；富啡酸；营养成分；氨基酸组成
中图分类号：Ｓ８１６．１１；Ｓ５４１＋．１０６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４５７５９（２０１４）０２００６６１０
犇犗犐：１０．１１６８６／ｃｙｘｂ２０１４０２０８
研究表明硒是人体和动物必需的微量营养元素，兼具营养、疾病治疗和致毒等多种生物学效应［１］。缺硒是人
类克山病和大骨节病产生的主要原因，也与动物白肌病的发生密切相关，但是过量摄入硒也会导致急性或慢性中
毒，致使动物胚胎畸形发育，甚至死亡或发生“碱性病”。研究表明，世界范围内的低硒区域面积远大于高硒的硒
毒区面积，我国２／３的地区属于缺硒地区，２９％的地区严重缺硒［２］，由此导致人、畜缺硒在我国甚至世界都较普
遍。在土壤－植物－动物－人体生态链中，植物是自然界硒循环过程中的关键性环节，植物硒含量决定食物链硒
水平，低硒环境势必造成低硒食物的产生，人类通过动物性食物或植物性食物消费而摄取的硒量是人体由缺硒状
态向适硒状态转变的关键。因此，通过将硒引入食物链可以克服缺硒的问题。
近年来，有关硒对重要的饲料资源———牧草的影响已引起不少关注［３４］。紫花苜蓿（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪）是一
种多年生优质蛋白饲草，被誉为“牧草之王”，其在生长过程中不仅需要氮磷钾等大量营养元素，而且还需要铁、
锰、铜、锌、钼、硼、钴、硒等多种微量元素［５］。在河南省广泛分布的石灰性潮土中，游离的碳酸钙对硒和锌有较强
的吸附和固定作用，导致土壤中硒、锌有效性极低［６］。但是关于河南低硒低锌石灰性潮土区，尤其是地方病严重
地区，如何调节该地区农产品的硒、锌等微量组分营养的研究报道较少。研究表明，富含羟基、酚羟基、甲氧基、羧
基等活性功能团的富啡酸（ｆｕｌｖｉｃａｃｉｄ，ＦＡ）对微量元素离子有较强的络合或螯合能力，从而影响微量营养元素的
储存、传递和吸收。Ｋｕｍａｒ和Ｐｒａｓａｄ［７］研究表明，富啡酸可显著提高锌在石灰性土壤中的扩散系数，促进锌向可
溶性配合物的转化，增加作物的产量和吸收量。而硒是两性元素，具有３ｄ１０４ｓ２４ｐ４ 电子结构，与含氧基团有较强
的成键倾向，易与富啡酸络合产生低分子量的硒－富啡酸螯合物，从而提高动植物对硒的吸收［８］。为此，本试验
通过在低硒低锌的石灰性潮土上基施硒锌混合微肥和富啡酸的田间试验，研究硒、锌和富啡酸对紫花苜蓿产量、
６６－７５
２０１４年４月
草 业 学 报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
第２３卷 第２期
Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．２
收稿日期：２０１３０８２２；改回日期：２０１３１０３０
基金项目：“十二五”农村领域国家科技计划课题“砂质潮土中低产田改良研究与示范”（２０１２ＢＡＤ０５Ｂ０２０７），国家农业科技成果转化资金项目“土
－草－饲－畜系统微量元素增效技术中试与示范”（２０１０ＧＢ２Ｄ０００２８７），河南省科技攻关重点项目（１２２１０２１１０１２３）和国家“十二五”科
技支撑计划项目（２０１１ＢＡＤ１７Ｂ０４）资助。
作者简介：田春丽（１９８２），女，河南驻马店人，讲师，在读博士。Ｅｍａｉｌ：ａｓｈｏｕ０５＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｓｈｌｉｕ７０＠１６３．ｃｏｍ
品质和氨基酸组成的影响，以期为河南紫花苜蓿种植中合理施用硒、锌肥提供科学依据。
１ 材料与方法
１．１ 试验地概况
试验地点为河南省农业高新科技园区。该区属于北暖温带大陆季风性气候区，日平均气温１４．３℃，１月份日
均温１．５℃（最低－２０℃），７月份日均温２７．５℃（最高４０℃），≥１０℃有效积温为４７００～５０００℃，平均年降雨量
６３０ｍｍ，无霜期２２０～２２５ｄ。试验区土壤为潮土，质地为轻壤土，肥力中等。土壤有机质含量为１０．７ｇ／ｋｇ，碱解
氮为５５．２ｍｇ／ｋｇ，速效磷为１１．５ｍｇ／ｋｇ，速效钾为８５．０ｍｇ／ｋｇ，有效锌０．６４ｍｇ／ｋｇ，有效硒０．００８ｍｇ／ｋｇ，ｐＨ
值为７．８８。
１．２ 供试材料
供试紫花苜蓿为二年生第一茬收获样，品种为三得利，秋眠级数４．０。
供试肥料：氮肥为尿素［ＣＯ（ＮＨ２）２，含Ｎ４６％］；钾肥为硫酸钾（Ｋ２ＳＯ４，含Ｋ２Ｏ５０％）；磷肥为过磷酸钙（含
Ｐ２Ｏ５１２％）；锌肥为七水硫酸锌（ＺｎＳＯ４·７Ｈ２Ｏ，ＡＲ），含锌量为２２．６％；硒肥为亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３，ＡＲ），含硒
量为４５．６％。
１．３ 试验设计
试验采用随机区组设计，共设５个不同施肥处理，分别为：（１）仅施氮、磷、钾肥料，施肥量为，Ｎ：９０ｋｇ／ｈｍ２，
Ｐ２Ｏ５：１２０ｋｇ／ｈｍ２，Ｋ２Ｏ：１０５ｋｇ／ｈｍ２（用ＮＰＫ表示）；（２）在施用氮、磷、钾肥料的基础上增施富啡酸，氮、磷、钾
肥料，施肥量同（１），下同；富啡酸（ＦＡ）施用量为９０ｋｇ／ｈｍ２，即氮磷钾＋富啡酸（用ＮＰＫ＋ＦＡ表示）；（３）在施用
氮、磷、钾肥料的基础上增施硒锌混合微肥，硒、锌施用量分别为，ＺｎＳＯ４·７Ｈ２Ｏ：１５ｋｇ／ｈｍ２（纯Ｚｎ量为３．３９
ｋｇ／ｈｍ２）、Ｎａ２ＳｅＯ３：０．６０ｋｇ／ｈｍ２（纯Ｓｅ量为２７４ｇ／ｈｍ２），即氮磷钾＋硒锌混合微肥（用ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ表示）；
（４）在施用氮、磷、钾肥料的基础上增施富啡酸和锌硒混合微肥，即氮磷钾＋富啡酸＋硒锌混合微肥（用ＮＰＫ＋
ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ表示）；（５）以不施任何肥料为对照（ＣＫ）。每个处理重复３次，小区面积为４ｍ×３ｍ，共１５个小区，
随机区组排列。
根据试验设计，将各小区所需氮、磷、钾、微量元素肥料和富啡酸混匀，作基肥一次性撒施于已整好的小区土
壤表面并采用人工翻耕，翻耕深度为２０ｃｍ左右。
本试验于２０１０年９月下旬进行整地施肥，１０月３号播种，播种方式为条播，行距３０ｃｍ左右，播深１．５～２．０
ｃｍ，埂宽３０ｃｍ，各区组间过道宽５０ｃｍ。播种量为１５ｋｇ／ｈｍ２，播后镇压保墒，出苗后注意补苗，生长期间按大
田种植模式管理。本文数据来自紫花苜蓿第二年第一茬收获样品，采样时间为紫花苜蓿的初花期（２０１２年５月２
日）。
１．４ 基础土样的采集与测定
整地后采用“Ｓ”型多点法取０～２０ｃｍ土层样品，风干后过１ｍｍ和０．３ｍｍ尼龙筛，备用。基础土样理化性
状测定参照鲍士旦［９］的方法；有效锌采用ＤＴＰＡ浸提—ＡＡＳ法［９］；有效硒采用ＮａＨＣＯ３（ｐＨ８．５）浸提—ＡＡＳ
法［１０］。
１．５ 植株草产量及营养成分测定
１．５．１ 干草产量的测定 初花期采样时，为便于计算亩产量，按照常规方法，于每试验小区中选取３行长势均匀
的样点，每行１．１ｍ，折合为１ｍ２，刈割时留茬５ｃｍ左右，刈割后立即称重，测定鲜样含水率后，按下面公式换算
出每ｈｍ２ 干草产量。
每ｈｍ２ 干草产量（ｔ）＝
鲜草称重（ｋｇ）×（１－含水量）×１００００
１０００
１．５．２ 植株常规营养成分的测定 植株样品用去离子水清洗、杀青、烘干后粉碎过１ｍｍ筛，备用。粗蛋白质采
用浓硫酸－双氧水消化－半微量凯氏定氮法；粗脂肪采用索氏脂肪提取法；粗纤维采用酸性洗涤剂法（ＡＤＦ）；粗
灰分采用干灰化法；无氮浸出物（％）＝１００－粗蛋白质（％）－粗脂肪（％）－粗纤维（％）－粗灰分（％）［１１］。植株
７６第２３卷第２期 草业学报２０１４年
全硒采用ＧＢ／Ｔ１３８８３２００８法（饲料中全硒的测定），植株全锌采用湿灰化法［９］。硒（锌）积累量按下列公式进行
计算：硒（锌）积累量＝硒（锌）含量×干物质
１．５．３ 紫花苜蓿氨基酸含量和组分的测定 准确称取粉碎过０．３ｍｍ的样品２００～５００ｍｇ于试管中，加入１０
ｍＬ６ｍｏｌ／Ｌ的盐酸溶液（含０．５％巯基乙酸）进行水解，冷冻后抽真空，再充入氮气，封口，将试管放入１１０℃的烘
箱中水解２２～２４ｈ，冷却后过滤到５０ｍＬ容量瓶中，并用无离子水稀释至刻度，过滤。准确取１０μＬ样品液于５
ｍｍ×５０ｍｍ小试管中，真空抽干，加入２０μＬ衍生缓冲液，于混合器上振荡３０ｓ，加入２０μＬ衍生试剂，用封口
膜封口，振荡３０ｓ，放入６０℃烘箱３０ｍｉｎ，冷却后加入１６０ｍＬ平衡缓冲液，振荡混合３０ｓ。然后使用氨基酸自动
分析仪（日立Ｌ８８００，日本）检测牧草中１７种氨基酸含量。
１．６ 数据处理方法
采用Ｅｘｃｅｌ２０１３和ＤＰＳ７．０５版软件进行数据处理和统计分析，并采用Ｄｕｎｃａｎ新复极差法进行多重比较。
２ 结果与分析
图１ 不同施肥处理对紫花苜蓿干草产量的影响
犉犻犵．１ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犛犲－犣狀犪狀犱犳狌犾狏犻犮犪犮犻犱犮狅犿犫犻狀犲犱
犪狆狆犾犻犮犪狋犻狅狀狅狀犺犲狉犫犪犵犲狔犻犲犾犱狅犳犪犾犳犪犾犳犪
不同大写字母表示差异极显著（犘＜０．０１），不同小写字母表示差异显
著（犘＜０．０５）。下同。Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃａｐｉｔａｌｌｅｔｔｅｒｓｓｈｏｗｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒ
ｅｎｃｅａｔ犘＜０．０１，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｍａｌｌｅｔｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｔ
犘＜０．０５ｂｙｔｈｅＤｕｎｃａｎｔｅｓｔ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
２．１ 不同施肥处理对紫花苜蓿草产量的影响
从图１可知，各施肥处理均促进了紫花苜蓿草产
量的增加。与对照 （ＣＫ）相比，干草产量增幅为
３．２５％～４２．４３％，不同处理干草产量大小顺序为：
ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ＞ＮＰＫ＋ＦＡ＞ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ＞
ＮＰＫ＞ＣＫ。
具体而言，以 ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理产量最
高，高达１６．２８ｔ／ｈｍ２，比对照（１１．４３ｔ／ｈｍ２）显著提
高（犘＜０．０１），高出４．８５ｔ／ｈｍ２，增幅为４２．４３％；其
次是ＮＰＫ＋ＦＡ和ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理，产量分别为
１４．０９和１３．３１ｔ／ｈｍ２，分别比对照高２．６６和１．８８
ｔ／ｈｍ２，增幅分别为２３．２４％和１６．３９％；ＮＰＫ处理较
对照增产仅为０．３７ｔ／ｈｍ２，增幅为３．２４％，与对照差
异不显著，说明施肥能不同程度地促进紫花苜蓿干物
质的累积，而仅施氮磷钾对提高紫花苜蓿草产量效果
并不理想。另外，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ、ＮＰＫ＋ＦＡ与
ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ三个处理之间均达到显著差异，表明在
统一施氮磷钾基础上，富啡酸与硒锌混合微肥配施的增产效果最好，且富啡酸的施用比硒锌混合微肥施用的效果
更明显，这可能因为富啡酸作为可溶性腐殖酸能刺激植物根系生长，提高紫花苜蓿根系活力，使紫花苜蓿对水分
和养分的吸收运转加强，促进紫花苜蓿生长［１２］，且富啡酸可与微量元素形成水溶性螯合物，增强微量元素的吸收
和运输，进而提高植物的抗逆性和改善作物品质［１３］。而在石灰性土壤中基施硒和锌的效果不如富啡酸与硒锌混
合微肥配施明显，主要原因可能是大部分硒和锌被固定所致［６］，但ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理仍与ＮＰＫ处理差异显著，
这与Ｓｅ、Ｚｎ的生理功能有关，Ｚｎ能促进紫花苜蓿体内ＩＡＡ含量增加，提高苜蓿株丛数、改善结瘤、促进分枝、增
加株高从而达到增产效果［１４］，而Ｓｅ在一定程度上促进紫花苜蓿产量的增加。因此在紫花苜蓿的生产中，适量施
用锌硒微肥或富啡酸均有利于产草量的提高。
２．２ 对紫花苜蓿硒含量与积累量的影响
由表１可见，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理紫花苜蓿硒含量为２．０１ｍｇ／ｋｇ，比对照（０．３７ｍｇ／ｋｇ）高１．６４
ｍｇ／ｋｇ，增幅为４４８．１８％，这与紫花苜蓿对硒具有较强的吸收和富集能力［１５］有关；其次为ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理，
硒含量为１．８１ｍｇ／ｋｇ，比对照（０．３７ｍｇ／ｋｇ）高１．４４ｍｇ／ｋｇ，增幅为３９３．６４％，然后为ＮＰＫ＋ＦＡ处理，硒含量
为０．５８ｍｇ／ｋｇ，比对照（０．３７ｍｇ／ｋｇ）高０．２１ｍｇ／ｋｇ，增幅为５８．１８％，ＮＰＫ 处理紫花苜蓿硒含量为０．４５
８６ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．２
ｍｇ／ｋｇ，比对照（０．３７ｍｇ／ｋｇ）高０．０８ｍｇ／ｋｇ，增幅为２１．８２％。ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ与ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理间达
极显著差异，表明富啡酸能极显著提高土壤硒的有效性，李永华和王五一［１６］研究表明，土壤中的硒能溶于富啡酸
形成碱性溶液，减少施入硒的固定。ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ与ＮＰＫ＋ＦＡ处理之间也达到极显著差异，表明在严重缺硒
地区通过土壤基施硒肥能有效提高紫花苜蓿硒含量；单施氮磷钾处理也提高了紫花苜蓿硒含量。
２．３ 对紫花苜蓿锌含量与积累量的影响
紫花苜蓿锌含量与硒含量的规律类似（表１），也表现出ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ＞ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ＞ＮＰＫ＋ＦＡ＞
ＮＰＫ＞ＣＫ的趋势，虽然ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ与ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理与其他３个处理之间达到了显著差异，但两
者之间差异却不显著，同时ＮＰＫ＋ＦＡ与ＮＰＫ之间、ＮＰＫ与ＣＫ之间也未达到显著差异，表明基施锌硒肥极显
著提高紫花苜蓿锌含量，而氮磷钾的施用并不能提高紫花苜蓿锌含量。从表１还可得知，配施硒锌混合微肥极显
著提高了硒含量，也极显著提高了锌含量，表现为硒锌间的协同作用。胡华锋等［１５］通过苜蓿叶面喷施硒肥研究
表明，适量施硒显著促进紫花苜蓿对锌的吸收，本研究结果也与韦东普等［１７］在黑麦草（犔狅犾犻狌犿犿狌犾狋犻犳犾狅狉狌犿）上
施硒试验的结论一致。
硒、锌积累量与其含量和紫花苜蓿产量相关（表１），且有相似的规律性，仍以ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理最高，
其次为ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理和ＮＰＫ＋ＦＡ处理，而且三者之间差异极显著，即紫花苜蓿Ｓｅ、Ｚｎ含量增加和产量增
加共同促进了紫花苜蓿Ｓｅ和Ｚｎ的积累量。
表１ 不同处理对紫花苜蓿硒、锌含量与积累量的影响
犜犪犫犾犲１ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犛犲－犣狀犪狀犱犳狌犾狏犻犮犪犮犻犱（犉犃）犮狅犿犫犻狀犲犱犪狆狆犾犻犮犪狋犻狅狀狅狀犛犲，犣狀犮狅狀狋犲狀狋犪狀犱犪犮犮狌犿狌犾犪狋犻狅狀狊狅犳犪犾犳犪犾犳犪
处理Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
硒Ｓｅ
含量
Ｃｏｎｔｅｎｔｓ（ｍｇ／ｋｇ）
积累量
Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｓ（ｇ／ｈｍ２）
锌Ｚｎ
含量
Ｃｏｎｔｅｎｔｓ（ｍｇ／ｋｇ）
积累量
Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｓ（ｇ／ｈｍ２）
ＣＫ ０．３７ｅＤ ４．１９ｄＤ ２５．０１ｃＢ ２８６．２１ｄＤ
ＮＰＫ ０．４５ｄＤ ５．２７ｄＤ ２７．２５ｂｃＢ ３２１．５６ｄＤ
ＮＰＫ＋ＦＡ ０．５８ｃＣ ８．１７ｃＣ ２９．６８ｂＢ ４１８．５３ｃＣ
ＮＰＫ＋Ｚｎ＋Ｓｅ １．８１ｂＢ ２４．１０ｂＢ ３８．８１ａＡ ５１５．８９ｂＢ
ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｚｎ＋Ｓｅ ２．０１ａＡ ３２．７３ａＡ ４０．７５ａＡ ６６３．４９ａＡ
同列不同大写字母表示差异极显著（犘＜０．０１），不同小写字母表示差异显著（犘＜０．０５）。下同。
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃａｐｉｔａｌｌｅｔｔｅｒｓｓｈｏｗｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ犘＜０．０１，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｍａｌｌｅｔｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｔ犘＜０．０５ｂｙｔｈｅＤｕｎｃａｎ
ｔｅｓｔ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
２．４ 不同施肥处理对紫花苜蓿营养成分含量的影响
粗蛋白含量是反映饲草营养价值的重要指标之一。苜蓿蛋白中含有２０多种氨基酸，包括人和动物所需的必
需氨基酸和一些稀有氨基酸，如瓜氨酸、刀豆氨酸等，是家畜合成蛋白质的原料。一般粗蛋白含量越高，饲草料品
质越好。由表２可知，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理可显著提高粗蛋白含量，并显著高于其他处理，但 ＮＰＫ＋ＦＡ、
ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ与ＮＰＫ处理和ＣＫ之间差异均不显著，说明单施富啡酸或硒锌可提高苜蓿的产量，但并不能提高
苜蓿的粗蛋白，而富啡酸和硒锌配施可以显著提高紫花苜蓿粗蛋白含量，从而提高紫花苜蓿品质。翁伯琦等［４］的
研究也表明施硒能提高黑麦草、紫花苜蓿和圆叶决明（犆犺犪犿犪犲犮狉犻狊狋犪狉狅狋狌狀犱犻犳狅犾犻犪）等牧草粗蛋白含量。
粗脂肪是植物维持生命活动必需的储藏物质，饲草中粗脂肪含量愈高，其营养价值也愈高。从表２可见，不
同施肥处理对紫花苜蓿粗脂肪含量无明显影响，这与田应兵等［３］研究结果不一致，他们的研究表明土壤施硒量低
于２０ｍｇ／ｋｇ时，提高了黑麦草粗脂肪含量，但当施硒量高于２０ｍｇ／ｋｇ时，黑麦草粗脂肪含量反而降低，具体原
因有待进一步研究。
粗灰分是植物体内无机营养的总和，其含量可表征矿质营养含量情况。由表２可见，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ与
９６第２３卷第２期 草业学报２０１４年
ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理均能极显著提高紫花苜蓿粗灰分含量，且两者之间也存在明显差异，但ＮＰＫ＋ＦＡ和 ＮＰＫ
处理与ＣＫ间差异不显著。
牧草中粗纤维是草食家畜日粮的主要成分，且是家畜最主要的能量来源之一，但含量过高会影响动物的适口
性，降低动物的采食率。由表２可见，各施肥处理可降低紫花苜蓿粗纤维含量，但仅有ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理
与对照差异显著（犘＜０．０１）。对于无氮浸出物，各施肥处理与对照相比差异均不明显。
总之，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理能极显著提高紫花苜蓿粗蛋白含量和粗灰分含量，而对粗脂肪、粗灰分和无
氮浸出物含量则影响不显著。
表２ 不同施肥处理对紫花苜蓿营养成分含量的影响
犜犪犫犾犲２ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犛犲－犣狀犪狀犱犳狌犾狏犻犮犪犮犻犱犮狅犿犫犻狀犲犱犪狆狆犾犻犮犪狋犻狅狀狅狀狀狌狋狉犻犲狀狋犮狅犿狆狅狀犲狀狋狅犳犪犾犳犪犾犳犪 ％
处理Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ 粗蛋白Ｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎ 粗脂肪Ｃｒｕｄｅｆａｔ 粗灰分Ｃｒｕｄｅａｓｈ 粗纤维Ｃｒｕｄｅｆｉｂｅｒ 无氮浸出物Ｎｉｔｒｏｇｅｎｆｒｅｅｅｘｔｒａｃｔ
ＣＫ １７．８０ｂＡＢ ３．２２ａＡ ８．９８ｃＣ ３７．６２ａＡ ３２．１０ａＡ
ＮＰＫ １７．４２ｂＡＢ ３．２４ａＡ ８．９４ｃＣ ３５．７８ａｂＡ ３４．６２ａＡ
ＮＰＫ＋ＦＡ １８．０３ｂＡＢ ３．３８ａＡ ８．８７ｃＣ ３４．７５ａｂＡ ３５．０８ａＡ
ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ １８．０７ｂＡＢ ３．２６ａＡ ９．５９ｂＢ ３５．０４ａｂＡ ３４．０８ａＡ
ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ ２０．１０ａＡ ３．５８ａＡ １０．４６ａＡ ３３．３１ｂＡ ３２．７５ａＡ
２．５ 不同施肥处理对紫花苜蓿氨基酸组成的影响
营养学理论认为蛋白质的营养价值与其氨基酸组成密切相关，特别是必需氨基酸的含量和比例，食物蛋白质
的氨基酸组成越接近人体蛋白质的组成，其营养价值越高。紫花苜蓿氨基酸的组成比例与联合国粮农组织推荐
的成人氨基酸模式基本符合［１８］，所以氨基酸含量和组成是评定牧草营养价值的重要指标之一。
由表３可知，与ＣＫ相比，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ和 ＮＰＫ＋ＦＡ处理显著提高了紫花苜蓿总氨基酸含量，但
ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理的总氨基酸含量却明显降低。在测定的１７种氨基酸中，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理显著提高
了其中的７种氨基酸含量，其中必需氨基酸（ＥＡＡ）为缬氨酸、亮氨酸以及赖氨酸，非必需氨基酸（ＮＥＡＡ）为天门
冬氨酸、精氨酸、组氨酸和酪氨酸，其他氨基酸含量变化不明显。
在必需氨基酸中，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理的缬氨酸含量为１．２９％，比ＣＫ提高了１３．１６％，ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ
处理的缬氨酸含量为０．９８％，比ＣＫ（１．１４％）降低了１４．０４％，ＮＰＫ＋ＦＡ和 ＮＰＫ处理的缬氨酸含量也明显降
低，且两者之间差异不显著；对亮氨酸而言，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理的含量仍为最高，达到１．５７％，较对照
（１．４８％）提高６．０８％，而ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理的含量最低，仅为１．３５％，比对照降低了８．７８％；对赖氨酸而言，
ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｚｎ＋Ｓｅ处理的含量为０．９９％，显著高出对照０．２１％，增幅为２６．９２％，ＮＰＫ＋ＦＡ处理比ＣＫ增加
８．９７％，其余两处理与对照无明显差异。
在非必需氨基酸中，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理的天门冬氨酸含量为２．１９％，比对照提高了６．８３％，其余处理
间差异不显著；ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理也提高了精氨酸的含量，达到０．９６％，比对照提高了３．２３％，而ＮＰＫ＋
Ｓｅ＋Ｚｎ处理精氨酸的含量却显著降低，比对照降低６．４６％，ＮＰＫ＋ＦＡ和ＮＰＫ处理与对照之间差异不显著。
ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理与ＮＰＫ＋ＦＡ处理显著提高了组氨酸含量，含量分别为０．５８％和０．５４％，比对照ＣＫ
（０．４９％）提高了１８．３７％和１０．２０％，ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理组氨酸含量显著低至０．４４％，比对照降低了１０．２０％，
ＮＰＫ处理与对照无显著差异；对酪氨酸而言，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理与ＮＰＫ处理显著提高了其含量，增加幅
度分别为１７．０２％和８．５％。在其余的非必需氨基酸中，与对照相比，ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理显著降低了谷氨酸、脯
氨酸、丙氨酸及胱氨酸的含量，降幅分别为５．６５％、６．６０％、８．４６％与２８．５７％，同时ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理显著提
高了丝氨酸的含量，比对照（０．８３％）提高了１０．８４％。ＮＰＫ＋ＦＡ与ＮＰＫ处理显著提高了苏氨酸的含量，提高
幅度分别为１１．６３％和９．３０％。而甘氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸在各处理之间差异不明显。
０７ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．２
表３ 不同施肥处理对紫花苜蓿氨基酸含量的影响
犜犪犫犾犲３ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犛犲－犣狀犪狀犱犳狌犾狏犻犮犪犮犻犱犮狅犿犫犻狀犲犱犪狆狆犾犻犮犪狋犻狅狀狅狀犪犾犳犪犾犳犪犪犿犻狀狅犪犮犻犱狊犳狅狉犿犪狋犻狅狀犮狅狀狋犲狀狋狊 ％
项目Ｉｔｅｍｓ ＣＫ ＮＰＫ ＮＰＫ＋ＦＡ ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ
天门冬氨酸 Ａｓｐ ２．０５±０．０２ｂ ２．００±０．０２ｂ ２．０２±０．０５ｂ ２．０５±０．０５ｂ ２．１９±０．０２ａ
谷氨酸 Ｇｌｕ ２．３０±０．０２ｂ ２．５２±０．０５ａ ２．５３±０．０５ａ ２．１７±０．０２ｃ ２．５４±０．０２ａ
丝氨酸Ｓｅｒ ０．８３±０．０１ｃ ０．８９±０．０２ａｂ ０．８５±０．０１ｃ ０．９２±０．０２ａ ０．８９±０．０１ｂ
精氨酸 Ａｒｇ ０．９３±０．０４ｂ ０．９１±０．０４ｂ ０．９４±０．０１ｂ ０．８７±０．０２ｃ ０．９６±０．０３ａ
甘氨酸 Ｇｌｙ １．１１±０．０１ａｂ １．０９±０．０３ｂ １．１６±０．０６ａ １．０６±０．０３ｂ １．１６±０．０５ａ
苏氨酸 Ｔｈｒ ０．８６±０．０２ｃ ０．９４±０．０８ａｂ ０．９６±０．０１ａ ０．８７±０．０１ｂｃ ０．８２±０．０３ｃ
脯氨酸Ｐｒｏ １．０６±０．０３ａ １．０８±０．０３ａ １．０４±０．０１ｂ ０．９９±０．０１ｃ １．０３±０．０１ｂ
丙氨酸 Ａｌａ １．３０±０．０１ａ １．３０±０．０２ａ １．２８±０．０４ａ １．１９±０．０３ｂ １．３１±０．０７ａ
缬氨酸 Ｖａｌ １．１４±０．０２ｂ １．０４±０．０２ｃ １．０７±０．０４ｃ ０．９８±０．０３ｄ １．２９±０．０１ａ
蛋氨酸 Ｍｅｔ ０．０８±０．０１ａｂ ０．０８±０．００ａｂ ０．０８±０．０１ａｂ ０．０７±０．０１ｂ ０．１０±０．０２ａ
胱氨酸Ｃｙｓ ０．０７±０．０１ａ ０．０７±０．０２ａ ０．０６±０．００ａ ０．０５±０．０１ｂ ０．０７±０．０１ａ
异亮氨酸Ｉｌｅ ０．７４±０．０１ａ ０．６８±０．０２ｂ ０．７６±０．０３ａ ０．６３±０．０３ｂ ０．７５±０．０１ａ
亮氨酸Ｌｅｕ １．４８±０．０３ｂ １．４２±０．０４ｃ １．４８±０．０３ｂ １．３５±０．０３ｄ １．５７±０．０２ａ
苯丙氨酸Ｐｈｅ １．０８±０．０１ａ ０．９９±０．０４ｂｃ １．０３±０．０２ａｂ ０．９４±０．０１ｃ １．０５±０．０５ａ
组氨酸 Ｈｉｓ ０．４９±０．０３ｃ ０．５２±０．０３ｂｃ ０．５４±０．０３ａｂ ０．４４±０．０２ｄ ０．５８±０．０２ａ
赖氨酸Ｌｙｓ ０．７８±０．０１ｃ ０．７７±０．０３ｃ ０．８５±０．０５ｂ ０．７７±０．０２ｃ ０．９９±０．０２ａ
酪氨酸 Ｔｙｒ ０．４７±０．００ｃ ０．５１±０．０１ａｂ ０．５０±０．０５ｂｃ ０．４７±０．０１ｂｃ ０．５５±０．０２ａ
总氨基酸 ＴＡＡ １６．７４±０．０１ｃ １６．７９±０．２５ｃ １７．１０±０．２３ｂ １５．７９±０．０８ｄ １７．８３±０．３２ａ
ＥＡＡ ６．１６±０．０３ｂ ５．９１±０．０９ｃ ６．２１±０．０８ｂ ５．６０±０．１０ｄ ６．５５±０．１０ａ
ＥＡＡ／ＴＡＡ（％） ３６．７８±０．０６ａ ３５．１８±０．０１ｃ ３６．２９±０．０５ｂ ３５．４７±０．４６ｃ ３６．７１±０．１３ａ
ＮＥＡＡ／ＴＡＡ（％） ６３．３１±０．１５ｃ ６４．８２±０．０１ａ ６３．７１±０．０５ｂ ６４．５３±０．４６ａ ６３．２９±０．１３ｃ
ＥＡＡ／ＮＥＡＡ（％） ５８．１０±０．２３ａ ５４．２７±０．０２ｃ ５６．９５±０．１３ｂ ５４．９６±１．０９ｃ ５８．００±０．３２ａ
注：表示必需氨基酸，ＥＡＡ为必需氨基酸总量，ＴＡＡ为总氨基酸，ＮＥＡＡ为非必需氨基酸总量。
Ｎｏｔｅ：ｄｅｎｏｔｅｓｅｓｓｅｎｔｉａｌａｍｉｎｏａｃｉｄ，ＥＡＡ：Ｔｏｔａｌｅｓｓｅｎｔｉａｌａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，ＴＡＡ：Ｔｏｔａｌａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，ＮＥＡＡ：Ｔｏｔａｌｎｏｎｅｓｓｅｎｔｉａｌａｍｉｎｏａｃｉｄｓ．
由表３还可看出，各处理紫花苜蓿总氨基酸含量在１５．７９％～１７．８３％之间，与对照相比，除ＮＰＫ处理外，其
余处理之间均差异显著，表现为ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ＞ＮＰＫ＋ＦＡ＞ＣＫ和ＮＰＫ＞ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理，ＮＰＫ＋
ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理 （１７．８３％）和ＮＰＫ＋ＦＡ处理（１７．１％）分别比对照ＣＫ（１６．７４％）提高６．５１％和２．１５％（犘＜
０．０５），但ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理总氨基酸含量（１５．７９％）却有所降低，降幅为５．６８％。不同处理的必需氨基酸含量
在５．６０％～６．５５％之间，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理最大，ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理最小，且ＮＰＫ＋ＦＡ＞ＣＫ＞ＮＰＫ。
另外，ＥＡＡ／ＴＡＡ和 ＥＡＡ／ＮＥＡＡ 这两个指标规律相似，表现为 ＣＫ＞ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ＞ＮＰＫ＋ＦＡ＞
ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ＞ＮＰＫ，且ＣＫ与ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ之间差异不显著，但与其他处理达到显著差异，ＮＰＫ＋Ｓｅ＋
Ｚｎ与ＮＰＫ之间差异也不显著，但与 ＮＰＫ＋ＦＡ 差异显著。对于 ＮＥＡＡ／ＴＡＡ 而言，ＮＰＫ 处理达最大值
６４．８２％，其次为ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理 （６４．５３％），且两者之间无明显差异，但与ＮＰＫ＋ＦＡ处理（６３．７１％）差异显
著，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理 （６３．２９％）虽略低于对照（６３．３１％），但两者之间差异不显著。
总之，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ和ＮＰＫ＋ＦＡ处理能显著提高总氨基酸的含量，ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理显著提
高了缬氨酸、亮氨酸以及赖氨酸这３种必需氨基酸含量，同时提高了天门冬氨酸、精氨酸、组氨酸和酪氨酸这４种
非必需氨基酸含量，而ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理显著降低了谷氨酸、精氨酸、脯氨酸、丙氨酸、胱氨酸及总氨基酸含量
和必需氨基酸含量，却显著提高了丝氨酸的含量。
另外，不同处理中含量较高的６种氨基酸的含量由高到低的排列次序基本相同，都是谷氨酸＞天门冬氨酸＞
１７第２３卷第２期 草业学报２０１４年
亮氨酸＞丙氨酸＞甘氨酸＞脯氨酸；而含量最低的４种氨基酸基本上都是胱氨酸＜蛋氨酸＜酪氨酸＜组氨酸，此
结果与王照兰等［１９］的研究结论基本一致。
３ 讨论
３．１ 硒锌与富啡酸配施对紫花苜蓿草产量及营养成分含量的影响
近年来，随着我国畜牧业的快速发展及人们膳食结构的调整，粮食消耗量逐步下滑，而饲料为主的间接消费
则急剧上升，意味着饲料的需要量急剧增加，专家预测在未来的１５年及相当长的时期饲料危机将严重威胁我国
食物安全［２０］，优质饲料紫花苜蓿将成为不可替代的战略性保障饲草。微量元素在紫花苜蓿体内含量虽然很少，
但在新陈代谢过程中起着转运物质和交换能量的作用，当牧草缺乏某种微量元素时，生长发育都会受到抑制，导
致产量和品质下降，严重时甚至死亡。单独施硒或锌对作物生理特性及品质的研究较多［３４］，有关锌、硒相互作用
虽有一些报道，但由于试验条件差异，其作用的机制尚不明确。施用硒肥不仅影响作物对硒的吸收，还不同程度
地影响作物对其他矿质元素的吸收，进而影响作物的产量和品质。如Ｓｉｎｇｈ和Ｓｉｎｇｈ［２１］研究发现施硒降低了小
麦（犜狉犻狋犻犮狌犿犪犲狊狋犻狏狌犿）和向日葵（犎犲犾犻犪狀狋犺狌狊犪狀狀狌狌狊）体内铁、锰、铜、锌的含量，尤其是硒对于锌的拮抗作用明
显；并且还发现硒对微量元素的拮抗作用因施用磷肥而改变：不施磷或磷水平较低时，硒水平的提高可降低植株
锌和铜含量；而施磷量提高时，施硒肥明显增加了植株锌、铜和锰含量。据报道硒对植物生长发育的影响呈现出
Ｂｅｒｔｒａｎｄ生物剂量规律，即低浓度硒促进植物生长，过量则对植物生长产生毒害［７］，因此，硒只有在适度的情况下
才促进作物对其他元素的吸收。本研究认为，硒锌混合微肥与富啡酸配施显著提高紫花苜蓿草产量及其锌、硒含
量和积累量，富啡酸的施用显著提高硒、锌的吸收量，并通过促进根系发育、增强根系活力及提高多种合成酶活性
和叶绿素含量使光合作用加强，从而显著提高紫花苜蓿的产草量及品质［２２］，硒与锌表现为协同作用，这与胡华锋
等［１５］研究结果一致：施硒可显著促进紫花苜蓿对锌的吸收，且紫花苜蓿对锌的吸收能力与施硒量有关，当硒肥用
量超过１００ｍｇ／ｋｇ时，紫花苜蓿对锌的吸收能力显著下降，表现为硒对锌的协同作用减弱，但喷施锌肥显著降低
了紫花苜蓿硒的含量和吸收量［２３］。韦东普等［１７］研究也证实硒、锌的交互作用与硒锌肥用量有关。值得注意的
是，对豆科作物紫花苜蓿是否施氮肥和施多少的问题，一直以来存在着争论。紫花苜蓿根瘤菌对空气游离Ｎ２ 的
固定能力很强，据估算，当年生紫花苜蓿固定到土壤中的Ｎ约３５～３０５ｋｇ／ｈｍ２，通过生物固氮作用一般能满足
自身氮的需求，因此不少学者认为紫花苜蓿无需施用氮肥，或在苗期根瘤形成前施少量氮肥即可［２４］。本研究结
果表明，ＮＰＫ处理的紫花苜蓿干草产量虽较对照有所增加，但二者差异并不显著，表明对二年生苜蓿而言，播种
时随底肥施入的氮肥对紫花苜蓿产量没有显著影响。
硒、锌不仅影响紫花苜蓿矿质营养元素的含量和吸收量，也影响常规营养成分。郭孝等［２５］研究表明随着硒
肥基施量的增加，裸燕麦（犃狏犲狀犪）秸秆中粗蛋白和无氮浸出物的含量呈下降趋势，而粗灰分、粗脂肪以及粗纤维
的含量呈上升的趋势；硒肥对裸燕麦果实在基施量小的情况下（５７０～７６５ｇ／ｈｍ２）能显著提高果实中的粗蛋白质
含量，降低粗纤维的含量，当超过这个范围则可显著提高粗脂肪和粗纤维的含量，但对粗蛋白质含量无显著影响。
本研究表明，富啡酸与硒、锌配施处理能极显著提高紫花苜蓿粗蛋白含量和粗灰分含量，而对粗脂肪、粗灰分和无
氮浸出物含量影响不显著。这与胡华锋等［１５］的研究结果有一定差异，他的研究表明适量施用硒能显著提高紫花
苜蓿粗蛋白、粗灰分、粗脂肪的含量，降低粗纤维含量。这可能与硒、锌等施用方式不同有关，他们采用的是叶面
喷施方式，而本试验采用的是土壤基施的方式，硒、锌的固定相对比较严重。但总体可以看出，硒对不同作物的品
质指标影响不尽一致，其内部作用机理还需进一步研究和探讨。
３．２ 硒锌与富啡酸配施对紫花苜蓿氨基酸组成的影响
牧草中氨基酸含量的高低、组成种类以及比例直接影响牧草最终品质以及对家畜的生长。必需氨基酸是指
动物机体需要但本身不能合成，必须从饲草料中摄取的氨基酸；不同动物机体需要的必需氨基酸种类存在差异。
当必需氨基酸以动物所需的比例吸收时，动物对总氨基酸的需要量将降低，蛋白质的合成率将最大。本试验条件
下，硒、锌与富啡酸配施显著提高了缬氨酸、亮氨酸以及赖氨酸等３种必需氨基酸（ＥＡＡ）的含量，同时提高了非
必需氨基酸（ＮＥＡＡ）中的天门冬氨酸、精氨酸、组氨酸和酪氨酸的含量，其他氨基酸变化不明显。目前认为，硒至
２７ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．２
少以两种方式参与蛋白质的代谢，一是以无机硒的形态进入植物体后很快转化为ＳｅＣｙｓ（硒代半胱氨酸）、Ｓｅ
Ｍｅｔ（硒代蛋氨酸）、ＣｙＳｅ（硒代胱氨酸）等多种氨基酸，以原料形式直接参与蛋白质的合成，从而减少了游离氨基
酸中半胱氨酸、蛋氨酸的含量；二是硒可能是植物体内一种ｔＲＮＡ核糖核酸链的必要组分，现已证实植物体内确
实存在具有硒代半胱氨酸残基的ｔＲＮＡ，其主要的生理功能是转运氨基酸用于蛋白质的合成。因硒元素与硫元
素的化学性质相似，在黑麦草和紫花苜蓿中也都观察到了硒对含硫氨基酸中硫的广泛取代，尽管对其体内其他形
态的硒尚欠了解，但可以认为黑麦草体内的硒大都以氨基酸的形式被结合于植物蛋白质［３］。周遗品［２６］研究表
明，适量施用硒肥，促进了水稻（犗狉狔狕犪狊犪狋犻狏犪）籽粒中蛋白质和大多数氨基酸含量增加，其中以土壤基施硒量为２
ｍｇ／ｋｇ时效果最为显著，蛋白质含量和氨基酸总量分别比对照增加１５．０％和１８．１％；１７种氨基酸除含硫氨基酸
（胱氨酸和蛋氨酸）含量受硒的影响减少外，其余１５种氨基酸含量均明显增加，最高增长率为３２％。但本试验
中，施硒处理紫花苜蓿的含硫氨基酸蛋氨酸及半胱氨酸的含量与不施硒处理间差异不显著，可能由于本试验中
硒、锌的用量较低，加上土壤对之大量固定和吸附，使得在苜蓿体内硒与硫表现出拮抗作用［２７］，具体原因有待进
一步研究。
硒能提高牧草和籽粒中氨基酸的总含量，可能与氨基酸的密切结合有关，植物吸收的硒能以化合物（包括游
离Ｓｅ）的形式存在于生物体内，并以硒代氨基酸形式结合于蛋白质中。李明等［２８］研究表明，基施硒肥可以提高莜
麦（犃狏犲狀犪狀狌犱犪）籽粒中蛋氨酸、亮氨酸以及赖氨酸等３种必需氨基酸的含量，并显著提高天门冬氨基酸、谷氨
酸、丝氨酸和甘氨酸等非必需氨基酸的含量，同时，提高了氨基酸的总含量，但对氨基酸中必需氨基酸／总氨基酸
（ＥＡＡ／ＴＡＡ）、非必需氨基酸／总氨基酸（ＮＥＡＡ／ＴＡＡ）和必需氨基酸／非必需氨基酸（ＥＡＡ／ＮＥＡＡ）等指标影响
不大，这与本试验的结论一致。值得注意的是，本研究中ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理与其他处理截然不同，该处理显著
降低了谷氨酸、精氨酸、脯氨酸、丙氨酸、胱氨酸及总氨基酸含量和必需氨基酸含量，但显著提高了丝氨酸的含量，
这可能与苜蓿品种、施肥方式、土壤环境条件等有关，具体原因有待深入研究。由于植物体内不同形态的硒化合
物对人和动物的作用差异较大，因此，比较苜蓿对不同形态硒的吸收利用以及其在体内的转化和存在形态值得进
一步研究和探讨。近年来，随着对含硒生物大分子研究的不断深入，更清楚地了解植物中含硒化合物的分子形
态、作用机理和功能，并从分子水平阐明硒同人类健康与疾病的密切关系具有重要意义，而硒在作物体内的功能
和表达机理尚不十分清楚。研究者认为硒元素以ＳｅＯ４２－或者ＳｅＯ３２－的形式被植物吸收后，主要转运到叶绿体
中［２９］。但是硒被转运到叶绿体之后，作用于什么位点，发挥什么功能，通过怎样的方式影响植物的光合作用和其
他生理功能，值得进一步探索，而质谱鉴定等蛋白质组学研究手段为揭示外源硒影响植物光合作用和生理功能的
本质规律和机制提供了可能。目前，国内外从蛋白组学水平分析紫花苜蓿响应重金属胁迫途径中的差异研究尚
不多见，而深入阐明植物解毒及积累重金属的机制并揭示其对植物生命活动规律及重要生理、病理现象将成为今
后一阶段的研究重点。另外，虽然现在研究了不少参与重金属的吸收、转运和调控过程的基因，但是这些基因是
怎样协同工作，又是通过哪些机制来调控，还知之甚少，这将是重金属在植物体内转运机理研究的一大发展趋
势［３０］。相信随着大量新技术的开发应用，蛋白质组学研究将会在植物生长、发育、进化及代谢调控等生命活动的
规律等方面取得重大突破。
４ 结论
在统一施用氮磷钾基础上，适量硒锌或富啡酸均可提高紫花苜蓿干草产量，且以两者配施（ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋
Ｚｎ）效果最好，产量达１６．２８ｔ／ｈｍ２，比对照（１１．４３ｔ／ｈｍ２）显著（犘＜０．０１）高４．８５ｔ／ｈｍ２，增幅为４２．４３％，
ＮＰＫ＋ＦＡ和ＮＰＫ＋Ｓｅ＋Ｚｎ处理较对照增幅分别为２３．２４％和１６．３９％，即施用富啡酸比硒锌混合微肥效果更
显著。硒锌混合微肥或富啡酸均可显著提高紫花苜蓿硒、锌含量及积累量；其中以两者配施（ＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｓｅ＋
Ｚｎ）紫花苜蓿硒、锌的含量和积累量达到最高值，表明通过适量施用硒锌混合微肥可明显提高紫花苜蓿对锌硒的
吸收，而富啡酸的配施促进了紫花苜蓿对硒锌的吸收。硒锌和富啡酸配施极显著提高了紫花苜蓿粗蛋白含量和
粗灰分含量，而对粗脂肪、粗纤维和无氮浸出物含量影响不显著，也为提高紫花苜蓿品质打下基础。硒锌和富啡
酸配施处理显著提高了氨基酸总量及缬氨酸（Ｖａｌ）、亮氨酸（Ｌｅｕ）以及赖氨酸（Ｌｙｓ）等３种必需氨基酸（ＥＡＡ），同
３７第２３卷第２期 草业学报２０１４年
时提高了非必需氨基酸（ＮＥＡＡ）中的天门冬氨酸（Ａｓｐ）、精氨酸（Ａｒｇ）、组氨酸（Ｈｉｓ）和酪氨酸（Ｔｙｒ），其他氨基
酸变化不明显。因此，适量硒锌与富啡酸配施有利于增加苜蓿干草产量、营养成分和必需氨基酸含量和氨基酸总
量，进而改善紫花苜蓿品质。
参考文献：
［１］ ＰａｔｒｉｃｋＬ．Ｓｅｌｅｎｉｕｍｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄｃａｎｃｅｒ：ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ［Ｊ］．ＡｌｔｅｒｎａｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅＲｅｖｉｅｗ，２００４，９（３）：２３９
２５８．
［２］ 唐新欣．硒摄入不足—中国人健康的“软肋”［Ｊ］．医药世界，２００４，１０：２２２４．
［３］ 田应兵，陈芬，熊明标，等．黑麦草对硒的吸收、分配与累积［Ｊ］．植物营养与肥料学报，２００５，１１（１）：１２２１２７．
［４］ 翁伯琦，黄东风，熊德中，等．硒肥对豆科牧草圆叶决明生长和植株养分含量及其固氮能力的影响［Ｊ］．应用生态学报，
２００５，１６（６）：１０５６１０６０．
［５］ 胡华锋，介晓磊，郭孝，等．氮磷钾及微量元素与有机肥配施对紫花苜蓿饲草产量及品质的影响［Ｊ］．沈阳农业大学学报，
２０１０，４１（１）：９８１０１．
［６］ 刘铮．微量元素的农业化学［Ｍ］．北京：农业出版社，１９９１：２０２３１２．
［７］ ＫｕｍａｒＭ，ＰｒａｓａｄＢ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｎａｔｕｒａｌｚｉｎｃｃｏｍｐｌｅｘｅｓｏｎｄｉｆｆｕｓｉｏｎｏｆｓｅｗａｇｅｓｌｕｄｇｅｄｉｓｐｏｓａｌ［Ｊ］．ＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＢｉｏｌｏ
ｇｙ，１９８８，１７：１４４１５０．
［８］ 杨忠才，陈亮．富里酸硒的合成及应用［Ｊ］．微量元素与健康研究，２００４，２１（１）：３２３３．
［９］ 鲍士旦．土壤农化分析［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２００７．
［１０］ 吴雄平．石灰性土壤有效硒浸提剂和浸提条件研究［Ｊ］．农业环境科学学报，２００９，２８（５）：９３１９３６．
［１１］ 杨胜．饲料分析及饲料质量检测技术［Ｍ］．北京：北京农业大学出版社，１９９６：１２０１２５．
［１２］ 张冬梅．紫花苜蓿施用腐殖酸肥效应的研究［Ｊ］．内蒙古民族大学学报（自然科学版），２０１０，２５（４）：３９０３９３．
［１３］ 谷秋荣，腐殖酸类肥料在农业生产上的应用［Ｊ］．河南农业，２００９，１２：３８．
［１４］ 马孝慧，阿不来提，赵清，等．微肥、稀土对苜蓿产量和品质的影响［Ｊ］．草业科学，２００６，２３（２）：４７４９．
［１５］ 胡华锋，介晓磊，刘芳，等．硒对紫花苜蓿产草量和品质的影响［Ｊ］．草地学报，２００８，１６（５）：５０１５０５．
［１６］ 李永华，王五一．硒的土壤环境化学研究进展［Ｊ］．土壤通报，２００２，３３（３）：２３０２３４．
［１７］ 韦东普，华珞，白玲玉，等．氮锌硒肥配合施用对黑麦草锌营养的影响［Ｊ］．核农学报，２００１，１５（３）：１７４１７９．
［１８］ 李季蓉，毕玉芬，龙瑞军．苜蓿蛋白质及其利用技术［Ｊ］．当代畜牧，２００２，１２：３０３２．
［１９］ 王照兰，杜建材，李青丰．１２份苜蓿种质材料的氨基酸分析［Ｊ］．中国草地，２００４，２６（１）：２８３３．
［２０］ 任继周．我国传统农业结构不改变不行了—粮食九连增后的隐忧［Ｊ］．草业学报，２０１３，２２（３）：１５．
［２１］ ＳｉｎｇｈＭ，ＳｉｎｇｈＮ．ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｆｏｒｍｓｏｆｓｅｌｅｎｉｕｍｏｎｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆＳｅ，ＳａｎｄｆｏｒｍｓｏｆＮａｎｄＰｉｎｆｏｒａｇｅｃｏｗｐｅａ［Ｊ］．
ＳｏｉｌＳｃｉｅｎｃｅ，１９７９，１２７（５）：２６４２６９．
［２２］ 回振龙，李朝周，史文煊．黄腐酸改善连作马铃薯生长发育及抗性生理的研究［Ｊ］．草业学报，２０１３，２２（４）：１３０１３６．
［２３］ 胡华锋，李明，介晓磊，等．锌对紫花苜蓿草产量和矿质营养的影响［Ｊ］．土壤通报，２００９，４０（４）：８８４８８７．
［２４］ 李荣霞．不同施肥水平对紫花苜蓿产量、营养吸收及土壤肥力的影响［Ｄ］．乌鲁木齐：新疆农业大学，２００７：５６．
［２５］ 郭孝，介晓磊，胡华锋．基施硒肥对裸燕麦营养水平的影响［Ｊ］．草业学报，２０１３，２２（１）：５３５９．
［２６］ 周遗品．硒对水稻蛋白质和氨基酸含量影响的初步研究［Ｊ］．石河子农学院学报，１９９５，３１（３）：１９２２．
［２７］ 马友华，丁瑞兴，张继榛，等．硒和硫相互作用对烟草氮吸收和积累的影响［Ｊ］．安徽农业大学学报，１９９９，２６（１）：９５１００．
［２８］ 李明，介晓磊，李建平，等．硒肥对莜麦常规养分和氨基酸变化规律的影响［Ｊ］．草地学报，２０１２，２０（６）：１０８６１０９２．
［２９］ ＬｅｕｓｔｅｋＴ，ＭａｒｔｉｎＭＮ，ＢｉｃｋＪＡ，犲狋犪犾．Ｐａｔｈｗａｙｓａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｕｌｆｕｒｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｒｅｖｅａｌｅｄｔｈｒｏｕｇｈｍｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄｇｅ
ｎｅｔｉｃｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．ＡｎｎｕａｌＲｅｖｉｅｗｏｆＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＰｌａｎｔＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２０００，５１：１４１１６５．
［３０］ 黄白飞，辛俊亮．植物积累重金属的机理研究进展［Ｊ］．草业学报，２０１３，２２（１）：３００３０７．
４７ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．２
犈犳犳犲犮狋狊狅犳犛犲－犣狀犪狀犱犳狌犾狏犻犮犪犮犻犱犮狅犿犫犻狀犲犱犪狆狆犾犻犮犪狋犻狅狀狅狀狀狌狋狉犻犲狀狋犮狅犿狆狅狀犲狀狋
犪狀犱犪犿犻狀狅犪犮犻犱狊犳狅狉犿犪狋犻狅狀狅犳犪犾犳犪犾犳犪
ＴＩＡＮＣｈｕｎｌｉ１，３，ＪＩＥＸｉａｏｌｅｉ１，４，ＬＩＵＹａｎ１，ＬＩＵＦａｎｇ１，ＧＵＯＸｉａｏ２，ＨＵＨｕａｆｅｎｇ２，ＬＩＵＳｈｉｌｉａｎｇ１
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＲｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＨｅｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ
４５０００２，Ｃｈｉｎａ；２．ＨｅｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙａｎｄＥｃｏｎｏｍｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００１１，
Ｃｈｉｎａ；３．ＨｅｎａｎＶｏｃａｔｉｏｎａｌＣｏｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｚｈｏｎｇｍｕ４５１４５０，Ｃｈｉｎａ；
４．ＨｕａｎｇｈｕａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｕｍａｄｉａｎ４６３０００，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ａｆｉｅｌｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｎｕｔｒｉｅｎｔｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｎｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ
ｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｌｆａｌｆａ（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪）ｂｙｓｅｌｅｎｉｕｍ（Ｓｅ）ａｎｄｚｉｎｃ（Ｚｎ）ａｎｄｆｕｌｖｉｃａｃｉｄ（ＦＡ）ｃｏｍｂｉｎｅｄｂａｓａｌａｐ
ｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎａｌｆａｌｆａｇｒａｓｓｌａｎｄａｔＺｈｏｎｇｍｕＴｏｗｎｉｎＺｈｅｎｇｚｈｏｕＣｉｔｙ．Ｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｈａｖｅｆｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ：
（１）ｏｎｌｙａｐｐｌｉｅｄＮ，ＰａｎｄＫｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ，ａｎｄｔｈｅｆｅｒｔｉｌｉｚｅｄａｍｏｕｎｔｗａｓＮ９０ｋｇ／ｈｍ２，Ｐ２Ｏ５１２０ｋｇ／ｈｍ２，Ｋ２Ｏ
１０５ｋｇ／ｈｍ２；（２）ｃｏｍｂｉｎｅｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＮ，Ｐ，ＫｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｎｄＦＡ（ＦＡａｐｐｌｉｅｄａｍｏｕｎｔｗａｓ９０ｋｇ／ｈｍ２）；（３）
ｃｏｍｂｉｎｅｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＮ，Ｐ，ＫｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｎｄｍｉｃｒｏｅｌｅｍｅｎｔｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒＳｅ，Ｚｎ（ＺｎＳＯ４·７Ｈ２Ｏａｐｐｌｉｅｄａｍｏｕｎｔ
ｗａｓ１５ｋｇ／ｈｍ２，Ｎａ２ＳｅＯ３ａｐｐｌｉｅｄａｍｏｕｎｔｗａｓ０．６０ｋｇ／ｈｍ２）；（４）ｃｏｍｂｉｎｅｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＮ，Ｐ，Ｋｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ，ｍｉ
ｃｒｏｅｌｅｍｅｎｔｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒＳｅ，ＺｎａｎｄＦＡ；（５）ＣＫ（ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｐｐｌｉｅｄ）．Ａｌｔｈｅｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒｗａｓａｐｐｌｉｅｄａｓ
ｂａｓａｌｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ．Ａｎｄｃｏｌｅｃｔｅｄｔｈｅｆｉｒｓｔｃｕｔｏｆｓｅｃｏｎｄｙｅａｒａｌｆａｌｆａｗａｓｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓａｍｐｌｅｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａ
ｔｅｄｔｈａｔａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅＳｅ－ＺｎａｎｄＦＡａｐｐｌｉｅｄａｍｏｕｎｔｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｈｅｒｂａｇｅｙｉｅｌｄｏｆａｌｆａｌｆａ，ａｎｄｔｈｅ
ｈｉｇｈｅｓｔｈｅｒｂａｇｅｙｉｅｌｄｗａｓｒａｉｓｅｄｔｏ１６．２８ｔ／ｈｍ２ｏｃｃｕｒｒｅｄｉｎｔｈｅＮＰＫ＋ＦＡ＋Ｚｎ＋Ｓｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｈｉｇｈｅｒｂｙ
４２．４３％ｔｈａｎｔｈａｔｏｆＣＫ．ＡｐｐｌｙｉｎｇＳｅ－ＺｎｏｒＦＡａｌｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅａｌｆａｌｆａＳｅａｎｄＺｎｃｏｎｔｅｎｔ
ａｎｄａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ．Ｓｅ－ＺｎａｎｄＦＡｃｏｍｂｉｎｅｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆａｌｆａｌｆａｃｒｕｄｅ
ｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｃｒｕｄｅａｓｈ，ｂｕｔｉｔｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｅｆｆｅｃｔｏｎｃｒｕｄｅｆａｔ，ｃｒｕｄｅｆｉｂｅｒａｎｄｎｏｎｎｉｔｒｏｇｅｎｅｘｔｒａｃｔ
ｃｏｎｔｅｎｔ．Ｓｅ－ＺｎａｎｄＦＡｃｏｍｂｉｎｅｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｃｏｕｌｄａｌｓｏｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｏｔａｌａｍｉｎｏａｃｉｄｓ（ＴＡＡ）ｃｏｎ
ｔｅｎｔａｎｄＶａｌ，Ｌｅｕ，ＬｙｓｃｏｎｔｅｎｔａｎｄＡｓｐ，Ａｒｇ，Ｈｉｓ，Ｔｙｒｃｏｎｔｅｎｔ，ｂｕｔｈａｄｌｅｓｓａｐｐａｒｅｎｔｅｆｆｅｃｔｓｏｎｏｔｈｅｒａｍｉｎｏ
ａｃｉｄｕｎｄｅｒａｎｙｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｂｔａｉｎｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙｓｕｇｇｅｓｔｔｈａｔａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅＳｅ－ＺｎａｎｄＦＡｃｏｍｂｉｎｅｄ
ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｃｏｕｌｄｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｈｅｒｂａｇｅｙｉｅｌｄａｎｄｎｕｔｒｉｅｎｔａｎｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｌｆａｌｆａａｎｄｉｔａｌｓｏ
ｆａｖｏｒｈｉｇｈｑｕａｌｉｔｙｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ａｌｆａｌｆａ；ｓｅｌｅｎｉｕｍ（Ｓｅ）；ｚｉｎｃ（Ｚｎ）；ｆｕｌｖｉｃａｃｉｄ（ＦＡ）；ｎｕｔｒｉｅｎｔｃｏｍｐｏｎｅｎｔ；ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ
５７第２３卷第２期 草业学报２０１４年