全 文 ：林业科学研究摇 圆园员源袁圆苑渊员冤院园猿员 园猿苑云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员源冤园员鄄园园猿员鄄园苑
大孔吸附树脂对白蜡虫多糖脱色及
抗氧化活性的影响
何摇 钊袁 李摇 娴袁 陈智勇袁 孙摇 龙袁 冯摇 颖鄢
渊中国林业科学研究院资源昆虫研究所曰国家林业局资源昆虫培育与利用实验室袁云南 昆明摇 远缘园圆圆源冤
收稿日期院 圆园员猿鄄园怨鄄圆园
基金项目院 国家林业局科研项目咱林规批字渊圆园员员冤圆猿远暂曰中央公益性科研院所基本科研业务费渊则蚤则蚤糟葬枣圆园员员园园圆酝冤
作者简介院 何摇 钊渊员怨苑远要冤袁男袁硕士袁助理研究员袁从事资源昆虫利用的研究援
鄢 通讯作者援
摘要院试验研究了大孔吸附树脂对白蜡虫粗多糖脱色效果的影响和脱色前后多糖抗氧化活性的变化遥 通过静态吸
附法确定大孔吸附树脂 晕运粤鄄怨 较适合白蜡虫粗多糖脱色袁动态吸附法确定白蜡虫多糖脱色条件为 猿园 益下 员园 皂早窑
皂蕴 原员多糖溶液渊责匀值 愿援 园冤以 员 月灾窑澡 原员流速上样 员 月灾后袁以 缘 月灾水洗脱袁脱色率为 苑员援 源豫 尧脱蛋白率 缘员郾 怨豫 尧多
糖收率为 远园豫 遥 体外细胞抗氧化结果表明院脱色前多糖溶液仅在 员 园园园 滋早窑皂蕴 原员浓度时能提升过氧化氢损伤人神
经母细胞瘤细胞的存活率袁而脱色后多糖溶液在 员园 员 园园园 滋早窑皂蕴 原员范围内均能提升模型细胞存活率袁其中袁
员 园园园 滋早窑皂蕴 原员的脱色白蜡虫多糖与模型组的差异显著渊孕 约园援 园员冤袁结果表明袁脱色后多糖抗氧化能力增加遥
关键词院白蜡虫曰 多糖曰 脱色曰 大孔吸附树脂曰 抗氧化曰 人神经母细胞瘤细胞
中图分类号院栽匝怨猿远援 员 文献标识码院粤
阅藻糟燥造燥则蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿 粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 粤泽泽葬赠 燥枣 孕燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 枣则燥皂
宰澡蚤贼藻 宰葬曾 杂糟葬造藻 哉泽蚤灶早 酝葬糟则燥责燥则燥怎泽 砸藻泽蚤灶
匀耘 在澡葬燥袁 蕴陨 载蚤葬灶袁 悦匀耘晕 在澡蚤鄄赠燥灶早袁 杂哉晕 蕴燥灶早袁 云耘晕郧 再蚤灶早
渊砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 砸藻泽燥怎则糟藻泽 陨灶泽藻糟贼泽袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠曰 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 悦怎造贼蚤增葬贼蚤燥灶 葬灶凿 哉贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 砸藻泽燥怎则糟藻泽
陨灶泽藻糟贼泽袁 杂贼葬贼藻 云燥则藻泽贼则赠 粤凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶袁 运怎灶皂蚤灶早摇 远缘园圆圆源袁 再怎灶灶葬灶袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽澡藻 凿藻糟燥造燥则蚤灶早 藻枣枣藻糟贼 燥枣 员圆 皂葬糟则燥责燥则燥怎泽 则藻泽蚤灶泽 燥灶 糟则怎凿藻 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 藻曾贼则葬糟贼藻凿 枣则燥皂 憎澡蚤贼藻 憎葬曾 泽糟葬造藻袁
耘则蚤糟藻则怎泽责藻造葬 责藻造葬 渊悦澡葬增葬灶灶藻泽冤袁 憎葬泽 泽贼怎凿蚤藻凿援 栽澡藻 糟藻造造怎造葬则 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 糟则怎凿藻 葬灶凿 凿藻糟燥造燥则葬灶贼 责燥造赠泽葬糟糟澡葬鄄
则蚤凿藻 燥灶 责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶 藻枣枣藻糟贼 燥枣 杂匀鄄杂再缘再 糟藻造造泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 澡赠凿则燥早藻灶 责藻则燥曾蚤凿藻 憎藻则藻 藻增葬造怎葬贼藻凿援 栽澡藻 则藻泽蚤灶 晕运粤鄄怨 憎葬泽
泽藻造藻糟贼藻凿 枣燥则 噪蚤灶藻贼蚤糟 泽贼怎凿赠 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 葬凿泽燥则责贼蚤燥灶 责则燥责藻则贼蚤藻泽 糟燥皂责葬则蚤灶早 燥枣 皂葬糟则燥责燥则燥怎泽 葬凿泽燥则责贼蚤燥灶 则藻泽蚤灶泽
葬灶凿 贼澡藻 泽贼葬贼蚤糟 葬凿泽燥则责贼蚤燥灶 贼藻泽贼援 栽澡藻 凿赠灶葬皂蚤糟 葬凿泽燥则责贼蚤燥灶 葬灶凿 凿藻泽燥则责贼蚤燥灶 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼泽 憎藻则藻 糟燥灶凿怎糟贼藻凿 贼燥 藻泽贼葬遭造蚤泽澡 贼澡藻
燥责贼蚤皂怎皂 责葬则葬皂藻贼藻则泽 燥枣 晕运粤鄄怨 葬泽院 燥灶藻 增燥造怎皂藻 泽燥造怎贼蚤燥灶 燥枣 糟则怎凿藻 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 憎葬泽 造燥葬凿藻凿 蚤灶 糟燥造怎皂灶 葬贼 贼澡藻 枣造燥憎 则葬贼藻
员 遭藻凿 增燥造怎皂藻 责藻则 澡燥怎则 怎灶凿藻则 贼澡藻 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶 燥枣 猿园 益 葬灶凿 责匀 愿援 园援 栽澡藻 凿藻糟燥造燥则葬灶贼 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 憎葬泽 糟燥造造藻糟贼藻凿 遭赠
憎葬泽澡蚤灶早 葬凿泽燥则遭葬贼藻鄄造葬凿藻灶 糟燥造怎皂灶 怎泽蚤灶早 枣蚤增藻 遭藻凿 增燥造怎皂藻 燥枣 凿藻蚤燥灶蚤扎藻凿 憎葬贼藻则援 栽澡藻 凿藻糟燥造燥则葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 憎葬泽 苑员援 源豫 袁 贼澡藻
赠蚤藻造凿 燥枣 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 憎葬泽 远园豫 袁 贼澡藻 凿藻责则燥贼藻蚤灶蚤扎葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 憎葬泽 缘员援 怨豫 援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 糟藻造造怎造葬则 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠
葬泽泽葬赠 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 糟藻造造 造蚤增葬遭蚤造蚤贼赠 糟燥怎造凿 遭藻 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 燥灶造赠 葬贼 贼澡藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 员 园园园 滋早窑皂蕴 原员 糟则怎凿藻 责燥造赠泽葬糟鄄
糟澡葬则蚤凿藻援 月怎贼 贼澡藻 凿藻糟燥造燥则葬灶贼 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 葬贼 贼澡藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 员园 员 园园园 滋早窑皂蕴 原员 糟燥怎造凿 则藻凿怎糟藻 贼澡藻 糟藻造造
凿藻葬贼澡 则葬贼藻 燥枣 杂匀鄄杂再缘再援 粤皂燥灶早 贼澡藻皂袁 贼澡藻 凿藻糟燥造燥则葬灶贼 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 葬贼 贼澡藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 员 园园园滋早窑皂蕴 原员 糟燥怎造凿
则藻凿怎糟藻 贼澡藻 糟藻造造 凿藻葬贼澡 则葬贼藻 灶燥贼葬遭造赠援 栽澡藻 糟藻造造怎造葬则 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 凿藻糟燥造燥则葬灶贼 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 憎葬泽 藻灶澡葬灶糟藻凿 葬枣贼藻则
凿藻糟燥造燥则蚤灶早 遭赠 晕运粤鄄怨援
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
运藻赠 憎燥则凿泽院 憎澡蚤贼藻 憎葬曾 泽糟葬造藻曰 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻曰 凿藻糟燥造燥则蚤灶早曰 皂葬糟则燥责燥则燥怎泽 则藻泽蚤灶曰 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼曰 澡怎皂葬灶 灶藻怎则燥遭造葬泽贼燥皂葬
糟藻造造 造蚤灶藻 渊杂匀鄄杂再缘再冤
白蜡虫 渊 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬 悦澡葬增葬灶灶藻泽泽冤 属同翅目
渊匀燥皂燥责贼藻则葬冤蜡蚧科渊悦燥糟糟蚤凿葬造藻冤袁是中国重要的资源
昆虫袁其 圆 龄雄虫分泌的白蜡是由长链脂肪酸尧醇构
成的酯类化合物袁广泛应用于机械尧化工尧医药尧食
品尧农业等行业袁雌成虫主要作为种虫利用咱员暂 遥 研究
发现袁怀卵的白蜡虫雌成虫具有一定的抗突变尧免疫
调节功能袁可作为保健食品开发利用袁其中袁多糖类
物质可能是其功效成分之一咱圆 原 猿暂 遥 对黄粉虫多
糖咱源暂 尧蟑螂多糖咱缘暂 尧蚕蛹多糖咱远暂等的研究表明袁昆虫
多糖同植物多糖尧微生物多糖等其他生物多糖一样
具有提高免疫尧抗氧化等功能遥 采用水提醇沉法获
得的白蜡虫雌成虫粗多糖易溶于水袁含有较多蛋白袁
为葡萄糖尧甘露糖和半乳糖组成的杂多糖袁色泽较
深袁色素较多咱苑暂 袁色素等杂质的存在影响其进一步分
离纯化和结构鉴定袁从而不利于对多糖组成尧结构与
生物活性间关系的判断遥 因此有必要对其脱色和脱
色对其生物活性的影响进行研究袁以便为白蜡虫多
糖进一步研究和开发利用提供基础遥
目前袁生物多糖脱色的方法主要有活性炭吸附
法咱愿暂 尧过氧化氢渊匀圆韵圆 冤氧化法咱怨 原 员员暂及大孔树脂法
等咱员圆 原 员缘暂 袁这些方法各有其优缺点遥 活性炭吸附法是
利用范德华力将色素吸附到表面袁从而达到脱色效
果袁该方法对多糖脱色效果较不明显咱员圆袁 员远暂 曰匀圆韵圆 氧
化脱色法是利用 匀圆韵圆 在水溶液中产生过氧氢根离
子渊匀韵圆 原 冤氧化色素达到脱色效果袁但由于多糖分子
中含有羟基尧醛基等基团袁易与 匀圆韵圆 发生氧化反应袁
破坏多糖的长链袁导致多糖降解咱员圆袁 员苑暂 曰大孔树脂法
通过离子交换或物理吸附作用结合色素达到脱色目
的袁不影响多糖结构咱员愿 原 员怨暂 遥 本文采用大孔吸附树脂
对白蜡虫多糖进行脱色研究袁通过静态吸附结合动
态吸附试验选择合适的树脂种类尧优化脱色条件袁并
以人神经母细胞瘤细胞为试验对象袁采用过氧化氢
造成细胞氧化损伤模型袁观察脱色前后不同浓度的
白蜡虫多糖对模型细胞存活率的影响袁评价其抗氧
化效果遥
员摇 材料与方法
员援 员摇 材料
白蜡虫多糖由水提醇沉法制备咱苑暂 袁人神经母细
胞瘤细胞株渊杂匀鄄杂再缘再冤购于中国科学院昆明动物研
究所细胞库袁大孔吸附树脂 阅员园员尧阅粤圆园员尧阅酝猿园员尧
粤月鄄愿尧 晕运粤鄄陨陨尧 晕运粤鄄怨尧 杂鄄愿尧 载鄄缘尧 阅源园圆园尧 阅猿缘圆园尧
阅源园园远尧匀员园猿渊天津海光化工有限公司冤各项指标见
表 员曰主要试剂 阅怎造遭藻糟糟燥鸳泽 皂燥凿蚤枣蚤藻凿 耘葬早造藻爷 泽 皂藻凿蚤怎皂
渊阅酝耘酝冤高糖培养基渊美国 郧蚤遭糟燥冤袁胎牛血清渊美国
匀赠糟造燥灶冤袁胰蛋白酶渊美国 粤皂则藻泽糟燥冤袁磷酸盐缓冲液
渊孕月杂冤渊美国 匀赠糟造燥灶冤袁甲基噻唑基四唑溴盐渊酝栽栽冤
渊美国 粤皂则藻泽糟燥冤袁二甲基亚砜渊阅酝杂韵冤渊美国 粤皂则藻泽鄄
糟燥冤袁其余试剂均为国产分析纯遥
表 员摇 大孔吸附树脂的物理结构参数
树脂型号 极性 比表面积 辕 渊皂圆窑早 原员 冤 平均孔径 辕 灶皂 外观
阅员园员 非极性 逸源园园 怨 员员援 园 乳白色
阅猿缘圆园 非极性 源愿园 缘圆园 愿援 缘 怨援 园 乳白色
阅源园园远 非极性 源园园 源源园 远援 源 苑援 缘 乳白色
阅源园圆园 非极性 缘源园 缘愿园 员园 员园援 缘 乳白色
载鄄缘 非极性 缘园园 远园园 圆怨 猿园援 园 乳白色
匀员园猿 非极性 员 园园园 员 员园园 愿援 缘 怨援 缘 深棕色
粤月鄄愿 弱极性 源愿园 缘圆园 员猿 员源援 园 乳白色
阅酝猿园员 极性 逸猿猿园 员源 员苑援 园 浅黄色
阅粤圆园员 极性 逸圆园园 员园 员猿援 园 浅黄色
杂鄄愿 极性 员园园 员圆园 圆愿 猿园援 园 浅黄色
晕运粤鄄陨陨 极性 员远园 圆园园 员源援 缘 员缘援 缘 红棕色
晕运粤鄄怨 极性 圆缘园 圆怨园 员缘援 缘 员远援 缘 微黄色
员援 圆摇 白蜡虫多糖性质分析
糖含量分析采用苯酚 原硫酸法咱远暂 袁以葡萄糖为
标样曰蛋白含量分析采用福林 原酚法咱缘暂 袁以牛血清白
蛋白为标样遥
员援 猿摇 大孔树脂对白蜡虫多糖脱色作用
预试验对白蜡虫多糖粗提液在 圆园园 愿园园 灶皂
波长范围内全波长扫描渊灾葬则蚤燥泽噪葬灶 云造葬泽澡 美国 栽澡藻则鄄
皂燥 泽糟蚤藻灶贼蚤枣蚤糟冤袁未发现有最大吸收波长袁本文选择
源圆园 灶皂 波长为检测波长袁测定溶液的吸光值袁按照
以下公式计算脱色率咱圆园暂 院
脱色率 越 渊韵阅园 原 韵阅员冤 辕 韵阅园 伊 员园园豫
式中院韵阅园 为溶液脱色前吸光值曰韵阅员 为脱色后
吸光值遥
按以下公式计算蛋白脱除率院
蛋白脱除率 越 渊悦园 原 悦员冤 辕 悦园 伊 员园园豫
式中院悦园 为溶液脱色前蛋白浓度曰悦员 为脱色后
蛋白浓度遥
圆猿
第 员 期 何摇 钊等院大孔吸附树脂对白蜡虫多糖脱色及抗氧化活性的影响
按以下公式计算多糖保留率院
多糖保留率 越 悦员 辕 悦园 伊 员园园豫
式中院悦园 为溶液脱色前多糖浓度曰悦员 为脱色后
多糖浓度遥
员援 猿援 员摇 大孔吸附树脂筛选摇 圆缘园 皂蕴 三角烧瓶加入
圆园 早经乙醇尧缘豫 匀悦造 及 缘豫 晕葬韵匀 预处理的供试树
脂和 员园园 皂蕴 员豫 渊憎 辕 憎冤多糖溶液袁圆缘 益下摇床恒温
震荡渊圆园园 则窑皂蚤灶 原员 冤员圆 澡袁过滤袁收集滤液遥 测定滤
液 源圆园 灶皂的吸光值尧多糖含量及蛋白含量袁比较不
同树脂的脱色率尧脱蛋白率及多糖保留率袁选择合适
的树脂进行下一步研究遥
员援 猿援 圆摇 静态吸附实验摇 缘园园 皂蕴 具塞锥形瓶中加入
员园 早树脂和 责匀值 缘尧远尧苑尧愿尧怨尧员园 等 远 种不同 责匀 值
的 员园园 皂蕴多糖溶液袁置于恒温摇床中震荡吸附渊圆园园
则窑皂蚤灶 原员冤袁一段时间后取样分析袁测定吸光值尧多糖
及蛋白含量袁计算脱色率尧脱蛋白率及多糖保留率袁
评价 责匀值对脱色的影响曰同法将 缘尧员园尧员缘尧圆园尧圆缘尧
猿园 皂早窑皂蕴 原员等 远 个不同浓度的白蜡虫多糖溶液分
别在 猿园尧源园尧缘园 益的摇床中震荡吸附脱色袁评价温度
及白蜡虫多糖浓度对脱色的影响遥
员援 猿援 猿摇 动态吸附实验摇 将大孔吸附树脂装入 缘园 糟皂
伊圆援 缘 糟皂层析柱中袁猿园 益下 员园 皂早窑皂蕴 原员白蜡虫多
糖以 员 月灾窑澡 原员流速通过层析柱袁定量收集遥 测定
收集液的吸光值尧多糖及蛋白含量袁考察色素尧蛋白
及多糖吸附情况曰再用一定量的去离子水及乙醇梯
度洗脱袁定量收集洗脱液袁考察色素尧蛋白及多糖解
吸状况遥
员援 源摇 白蜡虫多糖的细胞抗氧化活性
员援 源援 员摇 人神经母细胞瘤细胞培养摇 杂匀鄄杂再缘再 细胞
采用含 员园豫胎牛血清的 阅酝耘酝 培养液袁于 猿苑 益尧
缘豫悦韵圆尧怨缘豫空气尧饱和湿度的 悦韵圆 培养箱渊猿员员员 美
国 栽澡藻则皂燥 泽糟蚤藻灶贼蚤枣蚤糟冤中培养袁园援 圆缘豫胰酶消化传代袁
选取对数生长期细胞进行实验遥
员援 源援 圆摇 白蜡虫多糖对 匀圆韵圆 氧化损伤细胞模型的保
护作用摇 采用 悦澡燥 等咱圆员暂的方法进行袁略有改动遥 怨远
孔培养板中加入 远 伊员园缘 糟藻造造泽窑皂蕴 原员浓度的对数生长
期 杂匀鄄杂再缘再细胞渊圆园园 滋蕴窑孔 原 员 冤袁培养 圆源 澡 后吸弃
上清液袁加入 圆园园 滋蕴 含 园援 员尧员尧员园尧员园园 及员 园园园 滋早窑
皂蕴 原员的不同浓度白蜡虫多糖样品培养基渊圆园园 滋蕴窑
孔 原 员冤袁每个浓度设 源 个平行孔袁同时设正常对照组
渊未损伤细胞冤尧模型组渊细胞损伤尧未给药加入等量培
养基冤袁圆园园 滋早窑皂蕴 原员维生素 悦为阳性组遥 各组细胞
培养 圆源 澡后取出袁吸弃上清液后用磷酸盐缓冲液清洗
员 遍细胞袁每孔加入 圆园园 滋蕴阅酝耘酝 培养液渊含 愿园园
滋皂燥造窑蕴 原员 匀圆韵圆 冤袁员 澡 后加入 圆园 滋蕴 酝栽栽 溶液渊缘
皂早窑皂蕴 原员冤再培养 源 澡袁吸弃上清液袁加入 员缘园 滋蕴窑
孔 原 员 阅酝杂韵袁振荡 员缘 皂蚤灶 后于 缘苑园 灶皂 波长测定各孔
吸光度袁按照以下公式计算细胞相对存活率院
细胞相对存活率 越 渊样品孔吸光度 辕未损伤对照
孔吸光度冤 伊员园园豫
根据细胞相对存活率的高低确定抗氧化能力的
强弱袁细胞存活率高袁即多糖抗氧化能力较强遥
员援 缘摇 数据处理
体外细胞抗氧化试验重复 源 次袁其余试验重复 猿
次袁由 藻曾糟藻造 圆园园猿 软件处理数据曰其中袁体外细胞抗
氧化试验结果以 軃曾 依 泽 表示袁组间差异进行方差分
析袁其余数据以均值表示遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 大孔树脂对白蜡虫多糖脱色作用
圆援 员援 员摇 大孔吸附树脂筛选摇 员圆 种树脂对白蜡虫多
糖脱色效果见表 圆袁由表 圆 结果可见院员圆 种树脂对白
蜡虫多糖均有不同程度的脱色及脱蛋白作用袁在本
实验条件下袁其中 愿 种树脂的脱色率都达到了 缘园豫
以上袁脱色率最高的为 阅员园员 树脂袁最低的为 匀员园猿
树脂遥
表 圆摇 大孔吸附树脂对白蜡虫多糖的影响
树脂型号 脱色率 辕 豫 脱蛋白率 辕 豫 多糖保留率 辕 豫
阅员园员 远远援 愿 怨员援 愿 源远援 员
阅猿缘圆园 远园援 远 怨苑援 愿 猿远援 圆
阅源园园远 缘愿援 苑 远愿援 缘 远猿援 愿
阅源园圆园 缘源援 猿 怨怨援 苑 猿远援 园
载鄄缘 缘园援 园 愿愿援 员 源源援 怨
匀员园猿 员猿援 缘 缘源援 远 怨猿援 怨
粤月鄄愿 缘猿援 源 怨圆援 员 缘缘援 员
阅酝猿园员 猿员援 圆 愿缘援 苑 愿远援 愿
阅粤 圆园员 缘愿援 圆 怨源援 员 远源援 愿
杂鄄愿 源猿援 苑 愿怨援 员 缘苑援 苑
晕运粤鄄陨陨 缘远援 苑 远愿援 源 缘园援 缘
晕运粤鄄怨 远猿援 园 怨远援 远 苑源援 圆
选择脱色率较高的 阅员园员尧 阅猿缘圆园尧 晕运粤鄄怨 及
阅源园园远 等 源 种树脂进行进一步实验袁以选择较合适
的树脂遥 源 种树脂在多糖溶液中进行充分吸附袁每
隔一段时间取样分析直至吸附饱和袁达到吸附平衡袁
测定吸附动力学袁比较各树脂对色素等吸附速率的
差异遥 结果渊图 员冤表明院随着时间的增加袁树脂对色
猿猿
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
素渊图 员葬冤尧蛋白渊图 员遭冤及多糖渊图 员糟冤的吸附效果
均增加遥 源 种树脂中 阅猿缘圆园 对色素尧多糖吸附速率
最快袁远园 皂蚤灶 后达到吸附平衡曰其次为 晕运粤鄄怨袁而
阅员园员 和 阅源园园远 达到吸附平衡的时间相对较长遥 比
较 源 种树脂对多糖的吸附动力学曲线渊图 员糟冤袁达到
吸附平衡时多糖在 晕运粤鄄怨 树脂上的吸附较少袁多糖
保留率高袁损失较少袁故选择 晕运粤鄄怨 树脂进行白蜡
虫多糖脱色的进一步实验遥
图 员摇 源 种树脂对色素尧蛋白和多糖的静态吸附动力学曲线
圆援 员援 圆 摇 静态吸附动力学摇 不同 责匀 值多糖溶液在
晕运粤鄄怨 树脂上的吸附行为结果见图 圆袁在实验 责匀 值
范围内袁树脂对色素和蛋白质的吸附效果差异不明
显袁即实验范围内溶液 责匀 值对脱色率和脱蛋白率
的影响较少曰但溶液 责匀 值对多糖在树脂上的吸附
有一定影响袁在 责匀值 愿援 园 左右时袁多糖在树脂上的
吸附最弱袁即多糖保留率最高袁随着 责匀 值升高或降
低袁多糖保留率均相应下降袁故选择将白蜡虫粗多糖
溶液 责匀值调至 愿援 园 以减低树脂脱色时多糖的损失遥
温度及多糖浓度对树脂吸附的影响结果见图
猿袁由图 猿 可知院相同温度下袁随着多糖溶液浓度的升
高色素脱除率渊图 猿葬冤和脱蛋白率渊图 猿遭冤均有所下
降袁而多糖保留率渊图 猿糟冤上升袁尤其在多糖浓度大
于 员园 皂早窑皂蕴 原员时脱色率和脱蛋白率下降更明显袁
这主要是由于树脂的表面积有限袁溶液达到一定
浓度后袁树脂吸附饱和尧形成吸附和解吸的动态平
衡袁溶液浓度的增加已不能增加树脂吸附量袁表观上
形成脱色率尧脱蛋白率下降遥
图 圆摇 责匀值对 晕运粤鄄怨 树脂脱色效果的影响
图 猿摇 色素尧蛋白及多糖在 晕运粤鄄怨 树脂上的吸附等温线
源猿
第 员 期 何摇 钊等院大孔吸附树脂对白蜡虫多糖脱色及抗氧化活性的影响
多糖浓度小于 员园 皂早窑皂蕴 原员时袁温度对脱色率
和脱蛋白率影响不明显袁但在多糖溶液浓度高于 员园
皂早窑皂蕴 原员后袁同浓度下多糖的脱蛋白率和脱色率 缘园
益时最好袁其余依次为 猿园尧源园 益袁多糖的吸附行为也
与此类似遥 其可能原因是在一定的吸附体系下袁吸
附是放热过程袁温度升高不利于吸附行为袁但另一方
面袁当温度升高时袁分子扩散速度增加袁多糖溶液粘
度下降袁有利于色素尧蛋白的吸附袁两种因素的相互
作用形成以上结果咱员怨暂 遥 综合以上结果袁确定采用
晕运粤鄄怨 树脂脱色时袁白蜡虫多糖浓度为 员园 皂早窑
皂蕴 原员袁责匀值 愿援 园袁吸附温度 猿园 益遥
圆援 员援 猿摇 动态吸附与解吸摇 白蜡虫多糖溶液在 晕运粤
原怨 树脂上的动态吸附和解吸行为实验结果见图 源尧
缘遥 由图 源 可知院随着上样液体积的增加袁流出液中
蛋白和色素浓度逐渐上升袁树脂吸附逐渐达到动态
吸附平衡袁当上样体积为床层体积 员 倍时袁流出液色
素及蛋白含量分别约为上样液的 员园豫和 圆园豫袁故实
验条件下上样液体积为 员 月灾即可遥 用水和不同浓度
乙醇洗脱吸附多糖溶液的树脂层析柱时袁大部分的
多糖组分及部分蛋白和色素组分在水洗脱时就解吸
出来进入洗脱液中渊图 缘冤袁只有较少部分的多糖及
一部分色素和蛋白在 圆园豫 愿园豫乙醇溶液的解吸
液中流出遥
图 源摇 白蜡虫多糖在 晕运粤鄄怨 树脂上的动态吸附曲线
图 缘摇 白蜡虫多糖在 晕运粤鄄怨 树脂上的动态解吸曲线
综上所述袁白蜡虫多糖在 晕运粤鄄怨 树脂上吸附及
解吸条件为院猿园 益下将 员 月灾 员园 皂早窑皂蕴 原员责匀值 愿援 园
的白蜡虫多糖溶液以 员 月灾窑澡 原员流速上样袁然后以 缘
月灾体积的去离子洗脱袁收集洗脱液浓缩干燥得到脱
色后的白蜡虫粗多糖遥 采用上述条件脱色后的白蜡
虫粗多糖脱色率为 苑员援 源豫 袁脱蛋白率为 缘员援 怨豫 袁多
糖收率为 远园豫 遥
圆援 圆摇 脱色前后白蜡虫多糖性质
对脱色前后的白蜡虫多糖进行多糖尧蛋白含量
的测定袁结果渊表 猿冤表明院脱色后的白蜡虫多糖颜色
变浅袁蛋白含量显著降低袁多糖含量有所增加遥
表 猿摇 白蜡虫多糖性质
项目 性状 蛋白含量 辕 豫 多糖含量 辕 豫
未脱色白蜡虫多糖 深灰色粉末尧员豫水溶液为深褐色 员远援 源 源援 源
脱色后白蜡虫多糖 浅灰色粉末尧员豫水溶液为黄褐色 猿援 园 缘援 源
缘猿
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
圆援 猿摇 白蜡虫多糖体外细胞抗氧化活性
由表 源 可见院匀圆韵圆 损伤后的 杂匀鄄杂再缘再 细胞存
活率均明显低于正常对照组渊孕 约 园援 园员冤袁而阳性对
照 圆园园 滋早窑皂蕴 原员 灾糟 能显著增加 匀圆韵圆 氧化损伤的
细胞相对存活率袁对模型细胞显示出较好的抗氧化
活性袁表明本评价体系可信遥 未脱色白蜡虫多糖在
浓度低于 员园园 滋早窑皂蕴 原员时对细胞存活率无影响袁对
氧化损伤细胞无保护作用袁但在浓度 员 园园园 滋早窑
皂蕴 原员时细胞存活率高于未添加多糖的空白对照组袁
表明高浓度的粗多糖对氧化损伤细胞具有一定的保
护作用袁但效果不显著遥 脱色后的白蜡虫多糖在浓
度为 员园 滋早窑皂蕴 原员即开始对提高细胞存活率产生影
响袁随着浓度的增加细胞存活率随之增加袁在浓度为
员 园园园 滋早窑皂蕴 原员时能显著增加细胞存活率 渊 孕 约
园援 园员冤袁与未脱色白蜡虫多糖相比袁脱色后的白蜡虫
多糖抗氧化能力增强遥 这可能是由于部分抗氧化活
性较低的杂质被吸附袁使得具有抗氧化活性成分浓
度增加袁细胞存活率相应增加遥
表 源摇 灾糟尧脱色前后白蜡虫多糖对 匀圆韵圆 损伤的
杂匀鄄杂再缘再细胞相对存活率的影响渊軃曾 依 泽曰灶 越源冤鄢
项目 浓度 辕 渊滋早窑皂蕴 原员 冤 细胞相对存活率 辕 豫
灾糟 园渊对照冤 远员援 愿 依 愿援 愿
圆园园 愿源援 园 依 源援 源鄢鄢
未脱色白蜡虫多糖 园渊对照冤 远缘援 园 依 员员援 怨
园援 员 缘远援 员 依 源援 苑
员援 园 缘源援 愿 依 愿援 猿
员园援 园 缘园援 圆 依 愿援 猿
员园园援 园 远缘援 员 依 怨援 缘
员 园园园援 园 苑远援 愿 依 愿援 猿
脱色后白蜡虫多糖 园渊对照冤 苑源援 园 依 员员援 员
园援 员 源猿援 源 依 怨援 园
员援 园 远圆援 远 依 源援 园
员园援 园 苑远援 圆 依 员园援 员
员园园援 园 愿怨援 源 依 苑援 园
员 园园园援 园 员园怨援 圆 依 苑援 园鄢鄢
摇 摇 注院鄢正常组的细胞相对存活率为 员园园豫计曰与模型对照组比
较袁鄢孕 约 园援 园缘袁鄢鄢孕 约 园援 园员
猿摇 结论与讨论
通过树脂筛选尧吸附条件选择试验确定了 晕运粤鄄
怨 树脂为白蜡虫水溶性多糖合适的脱色树脂袁猿园 益
下将 员 月灾 员园 皂早窑皂蕴 原员责匀 值 愿援 园 的白蜡虫多糖溶
液以 员 月灾窑澡 原员流速上样袁然后以 缘 月灾 体积的去离
子水洗脱袁收集洗脱液浓缩干燥后得到脱色白蜡虫
多糖袁在此条件下其脱色率为 苑员援 源豫 尧多糖收率
远园郾 园豫 袁脱蛋白率 缘员援 怨豫 遥 脱色后多糖溶液在 员园
员 园园园 滋早窑皂蕴 原员范围内均能提高氧化损伤 杂匀鄄杂再缘再
细胞的存活率袁其中袁浓度为 员 园园园 滋早窑皂蕴 原员的脱色
白蜡虫多糖能显著增加渊孕 约 园援 园缘冤细胞存活率袁表
明经过 晕运粤鄄怨 树脂脱色除杂后袁白蜡虫多糖的抗氧
化能力得到提高遥
大孔树脂是一类具有大孔网状结构团的高分子
材料袁按作用机理分为离子交换树脂和大孔吸附树
脂袁其中袁大孔吸附树脂不含功能基团袁通过范德华
力和氢键作用进行物理吸附作用咱圆圆暂 袁根据材料不同
分为极性尧弱极性和非极性 猿 种类型袁不同树脂的表
面吸附基团尧比表面积及孔径有差异袁而吸附树脂的
吸附能力与这些参数密切相关袁比表面积大吸附能
力强袁还需要合适的孔径以便吸附物能进入树脂内
部遥 此外袁如果树脂表面基团及吸附物作用较弱则
吸附较低袁故需要从各种型号的树脂中进行筛选得
到合适吸附树脂遥 白蜡虫多糖色素在极性和非极性
树脂上均能吸附袁表明色素含有极性及非极性基团袁
匀员园猿 在几种树脂中比表面积最大尧孔径适中袁但对
树脂吸附最弱袁有可能是树脂表面基团对色素作用
力较小袁吸附能力较低曰杂鄄愿 树脂孔径较大袁但比表面
积较小袁可能是其脱色率较低的原因遥 蛋白质是两
性物质袁具有多种基团袁在极性和非极性树脂上均能
吸附袁因此袁树脂在脱色素的同时还具有脱除蛋白作
用遥 白蜡虫多糖在树脂上的吸附表明袁多糖可能含
有硫酸基等极性基团袁也有可能与蛋白尧色素结合袁
使得在脱色过程中多糖有一定损失遥
目前袁抗氧化活性的测定方法主要有化学方法
和动物体内测定 圆 类遥 化学方法较为快捷尧重复性
较好尧易于标准化袁但由于体内抗氧化是多种途径协
同作用袁体外研究结果不能代表体内具有相同作用曰
体内抗氧化评价需要借助动物模型进行袁评价结果
较为可靠尧真实袁但费用较高袁耗时较长遥 细胞抗氧
化分析是测定尧筛选各物质抗氧化活性一种新的可
供选择方法袁该方法利用离体培养细胞对抗氧化物
质进行抗氧化能力测定袁涉及细胞吞吐尧新陈代谢等
生物行为袁能模拟体内细胞的一些生物行为袁因此袁
比传统体外化学抗氧化测定更具生物代表性袁同时
与动物体内抗氧化测定相比有相对简便快捷袁是一
种接近生物体抗氧化行为的方法遥 过氧化氢损伤细
胞引起线粒体膜损伤尧抑制细胞凋亡抑制蛋白 月糟造鄄圆
的表达及促进半胱氨酸蛋白酶 悦葬泽责葬泽藻鄄猿 的表达袁从
而引起细胞凋亡曰而白蜡虫多糖能使过氧化氢损伤
后的细胞存活率增加袁可能在这些途径中参与作用袁
远猿
第 员 期 何摇 钊等院大孔吸附树脂对白蜡虫多糖脱色及抗氧化活性的影响
但具体抗氧化机理需要进一步研究遥
参考文献院
咱员暂 陈晓鸣袁冯 摇 颖援 资源昆虫学概论咱酝暂援 北京院科学出版社袁
圆园园怨院圆怨 原 猿园
咱圆暂 冯摇 颖袁陈晓鸣袁马 摇 艳袁等援 白蜡虫免疫调节作用试验研究
咱允暂 援 林业科学研究袁圆园园远袁员怨渊圆冤院圆圆员 原 圆圆源
咱猿暂 冯摇 颖袁陈晓鸣袁何摇 钊袁等援 白蜡虫抗突变实验与主要功效成
分分析咱允暂 援 林业科学研究袁圆园园远袁员怨渊猿冤院圆愿源 原 圆愿愿
咱源暂 何摇 钊袁冯摇 颖袁孙摇 龙袁等援 黄粉虫多糖响应面法提取及抗氧
化活性咱允暂 援 食品与生物技术学报袁圆园员员袁猿园渊缘冤院远源员 原 远源苑
咱缘暂 孙摇 龙袁冯摇 颖袁何摇 钊袁等援 蟑螂水溶性多糖提取尧分析及免疫
活性研究咱允暂援 林业科学研究袁圆园园怨袁圆圆渊圆冤院圆缘远 原 圆远员
咱远暂 孙摇 龙袁冯摇 颖袁何摇 钊袁等援 蚕蛹多糖的碱液提取及免疫活性
初步研究咱允暂援 林业科学研究袁圆园园苑袁圆园渊远冤院苑愿圆 原 苑愿远
咱苑暂 何摇 钊袁孙摇 龙袁冯摇 颖袁等援 白蜡虫多糖的提取及单糖组分分
析咱允暂援 林业科学研究袁圆园园愿袁圆员渊远冤院苑怨圆 原 苑怨远
咱愿暂 杨摇 云袁田润涛袁苗明三袁等援 大枣渣多糖活性炭脱色工艺研究
咱允暂 援 河南中医学院学报袁圆园园源袁员怨渊员冤院猿缘 原 猿远
咱怨暂 允蚤葬灶鄄匀怎葬 载蚤藻袁 酝蚤灶早鄄再怎藻 杂澡藻灶袁 杂澡葬燥鄄孕蚤灶早 晕蚤藻袁 藻贼 葬造援 阅藻糟燥造燥则蚤扎葬贼蚤燥灶
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泽噪葬躁葬 怎泽蚤灶早 怎造贼则葬泽燥怎灶凿 辕 澡圆燥圆 责则燥糟藻泽泽 咱 允暂 援 悦葬则遭燥澡赠凿则葬贼藻 孕燥造赠皂藻则泽袁
圆园员员袁愿源渊员冤院圆缘缘 原 圆远员
咱员园暂 卢国勇袁孟 摇 江袁廖华卫援 鱼腥草多糖双氧水脱色工艺研究
咱允暂援 时珍国医国药袁圆园员员袁圆圆渊猿冤院远苑员 原 远苑猿
咱员员暂 李文芳袁向昌国袁罗庆华袁等援 南瓜藤蔓中多糖脱色工艺的研究
及其含量变化咱允暂 援 食品科学袁圆园园远袁圆苑渊员圆冤院源源圆 原 源源缘
咱员圆暂 宿摇 玮袁王彦超袁张翠玉袁等援 海地瓜多糖脱色工艺研究咱允暂 援 离
子交换与吸附袁圆园员员袁圆苑渊远冤院缘圆员 原 缘圆怨
咱员猿暂 王丽波袁赵 摇 玉袁徐雅琴援 南瓜多糖大孔吸附树脂纯化工艺
咱允暂援 农业机械学报袁圆园员园渊怨冤院员猿愿 原 员源圆
咱员源暂 蕴蚤怎 允袁 蕴怎燥 允袁 杂怎灶 再袁 藻贼 葬造援 粤 泽蚤皂责造藻 皂藻贼澡燥凿 枣燥则 贼澡藻 泽蚤皂怎造贼葬灶藻燥怎泽
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燥造袁圆园员园袁员园员渊员缘冤院远园苑苑 原 远园愿猿
咱员缘暂 王松柏袁秦雪梅袁郭小青袁等援 树脂对防风粗多糖脱色效果咱 允暂 援
应用化学袁圆园园缘袁圆圆渊员圆冤院员猿园愿 原 员猿员员
咱员远暂 杨摇 云袁冯卫生袁雷高明援 大枣渣多糖精制纯化工艺的研究
咱允暂援 中药材袁圆园园远袁圆怨渊员冤院苑愿 原 愿园
咱员苑暂 付学鹏袁杨晓杰援 植物多糖脱色技术的研究咱允暂 援 食品研究与开
发袁圆园园苑袁圆愿渊员员冤院员远远 原 员远怨
咱员愿暂 肖丽霞袁于洪涛袁胡晓松援 香菇多糖的树脂脱色工艺研究咱 允暂 援
食品与机械袁圆园员员袁圆苑渊远冤院圆源员 原 圆源源
咱员怨暂 谢红旗袁周春山援 香菇多糖脱色工艺研究咱 允暂 援 离子交换与吸
附袁圆园园苑袁圆猿渊圆冤院员缘愿 原 员远缘
咱圆园暂 王元凤袁金征宇援 茶多糖脱色的研究咱 允暂 援 食品与发酵工业袁
圆园园源袁猿园渊员圆冤院远园 原 远缘
咱圆员暂 悦澡燥 耘 杂袁 蕴藻藻 运 宰袁 蕴藻藻 匀 允援 悦燥糟燥葬 责则燥糟赠葬灶蚤凿蚤灶泽 责则燥贼藻糟贼 责糟员圆
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咱圆圆暂 载蚤怎鄄蕴蚤葬灶 悦澡葬灶早袁 阅燥灶早 宰葬灶早袁 月蚤鄄再怎灶 悦澡藻灶袁 藻贼 葬造援 粤凿泽燥则责贼蚤燥灶 葬灶凿
凿藻泽燥则责贼蚤燥灶 责则燥责藻则贼蚤藻泽 燥枣 皂葬糟则燥责燥则燥怎泽 则藻泽蚤灶泽 枣燥则 葬灶贼澡燥糟赠葬灶蚤灶泽 枣则燥皂
贼澡藻 糟葬造赠曾 藻曾贼则葬糟贼 燥枣 则燥泽藻造造藻 渊匀蚤遭蚤泽糟怎泽 泽葬遭凿葬则蚤枣枣葬 蕴援 冤咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣
粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 葬灶凿 云燥燥凿 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁圆园员圆袁远园渊怨冤院圆猿远愿 原 圆猿苑远
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