全 文 ：六倍体杂交狼尾草体细胞突变体特异性分析
钟小仙，刘智微，刘伟国，崔莉莉，吴娟子，张建丽
（江苏省农业科学院畜牧研究所，江苏 南京２１００１４）
摘要：为明确秋水仙素诱导获得的六倍体杂交狼尾草体细胞突变体ＣＨＰ２００９１４的特异性，以ＣＨＰ２００９１４为材
料，杂交狼尾草（Ｔｉｆｔ２３Ａ×苏牧２号象草）为对照，进行了综合农艺性状和饲用价值评价、叶片微形态特性分析和
流式细胞术鉴定，结果表明，与对照相比，ＣＨＰ２００９１４叶色深绿、叶绿素含量提高１０．５１％ （犘＜０．０５），叶片和叶鞘
绒毛明显增多，植株矮化株高降低２６．３４％ （犘＜０．０１）、叶片长度减小了２０．０６％ （犘＜０．０１）、叶片厚度增加了
１６．４１％ （犘＜０．０１）、茎叶比减少了４３．６１％ （犘＜０．０１）和分蘖数提高４４．６２％ （犘＜０．０１），叶片宽度无显著差异；
体外消化率显著提高６．９４％ （犘＜０．０５），粗蛋白含量、灰分含量分别提高６２．３４％ （犘＜０．０１）和１７．３５％ （犘＜
０．０１）；中性洗涤纤维含量显著降低３．３５％ （犘＜０．０５），酸性洗涤纤维含量提高０．５０％ （犘＞０．０５）、鲜草产量提高
０．８７％ （犘＞０．０５）和干物质产量降低３．２７％ （犘＞０．０５）；ＣＨＰ２００９１４植株叶片上表皮的气孔器密度减少６５．２０％
（犘＜０．０１），气孔器的长度和宽度分别增加了４７．７１％ （犘＜０．０１）和３０．５３％ （犘＜０．０１），气孔器面积为对照的
２．０７倍，ＣＨＰ２００９１４植株叶片下表皮的气孔器密度减少了３５．７１％ （犘＜０．０１），气孔器长度和宽度分别增加了
５１．５４％（犘＜０．０１）和３４．１７％（犘＜０．０１），气孔器面积为对照的１．５４倍；流式细胞仪检测结果显示，ＣＨＰ２００９１４
植株叶片细胞核ＤＮＡ含量是对照的两倍。
关键词：杂交狼尾草；六倍体；形态特征；营养品质；流式细胞术；气孔器特性
中图分类号：Ｓ８１６．５＋３；Ｓ５４３＋９０３．５１　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１４）０４０１０７０７
犇犗犐：１０．１１６８６／ｃｙｘｂ２０１４０４１３　　
　　狼尾草属（犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿）隶属于禾本科，全世界约有１３０个种，广泛分布于热带、亚热带和部分温带地区，一年
生二倍体美洲狼尾草（犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿犪犿犲狉犻犮犪狀狌犿；２狀＝２狓＝１４，ＡＡ）和多年生四倍体象草（犘．狆狌狉狆狌狉犲狌犿；２狀＝
４狓＝２８，ＡＡＢＢ）是其中最重要的２个种［１］。美国乔治亚州立大学Ｔｉｆｔｏｎ试验站自２０世纪４０年代开始杂交狼尾
草品种选育［２］，利用美洲狼尾草不育系与象草恢复系远缘杂交获得了三倍体杂交狼尾草，能综合母本美洲狼尾草
品质优和父本象草产草量高、抗逆性强、可多年生的特性［３４］。杂交狼尾草不仅可作为草食畜禽的优质青饲料，优
质纸浆和人造板原料，还是重要的生物质能源作物［５８］。但由于父本象草为光周期敏感型短日照作物，自然开花
期在美国大部分地区因霜冻危害，无法完成大面积杂交制种或种子产量极低，Ｔｉｆｔｏｎ试验站迄今尚未实现商品化
种子生产。通过秋水仙素处理进行染色体加倍、结合集团选择或回交选育能种子繁殖、综合农艺性状优良的六倍
体或四倍体杂交狼尾草，被认为是一种恢复杂交狼尾草育性和进行商品化种子生产的可能途径，美国、巴西、印度
等国已取得了初步的进展［９１２］。江苏农业科学院２０世纪８０年代从美国引进了杂交狼尾草品种及其亲本材料，
经过多年的系统研究，尽管建立了“人工短日照处理诱导象草开花并与美洲狼尾草不育系花期相遇”制种体系，率
先突破了北纬２６°以北地区不能杂交制种的生态禁区，但近年来灾害性天气发生频繁，父母本花期相遇不稳定，
制种产量低、风险大［１３１４］，亟需尝试杂交狼尾草大面积商品化种子生产的其他途径，特别是耐盐“苏牧２号”象草
２０１０通过全国牧草品种审定后［１５］，创造耐盐六倍体杂交狼尾草新种质，并与美洲狼尾草杂交选育四倍体耐盐杂
交狼尾草成为近期育种的又一目标。
本文以六倍体杂交狼尾草体细胞突变体ＣＨＰ２００９１４为材料，耐盐杂交狼尾草（美洲狼尾草Ｔｉｆｔ２３Ａ×苏牧
２号象草）为对照，通过综合农艺性状评价和饲用价值比较、叶片微形态特性分析和流式细胞术鉴定，以期明确六
第２３卷　第４期
Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．４
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ 　　
１０７－１１３
２０１４年８月
收稿日期：２０１３０８１９；改回日期：２０１３１１１５
基金项目：江苏省自主创新项目［ＣＸ（１３）３０５３］和国家牧草产业技术体系盐城综合试验站（ＣＡＲＳ３５３１）资助。
作者简介：钟小仙（１９６８），女，浙江余姚人，研究员，博士。Ｅｍａｉｌ：ｘｉａｏｘｉａｎ＠ｊａａｓ．ａｃ．ｃｎ
倍体耐盐杂交狼尾草新种质的特异性，为四倍体杂交狼尾草新品种选育提供参考，有关研究国内尚未见报道。
１　材料与方法
１．１　试验地概况
大田试验在大丰市金海农场试验基地进行。试验地土壤为轻质沙壤，有机质、碱解氮、速效磷含量分别为
１６．８ｇ／ｋｇ，３１．２ｍｇ／ｋｇ，２２．３５ｍｇ／ｋｇ，ｐＨ８．１，含盐量为３．６ｇ／ｋｇ。
１．２　试验材料
杂交狼尾草（ＣＫ）：美洲狼尾草不育系Ｔｉｆｔ２３Ａ×苏牧２号象草，２狀＝３狓＝２１，为三倍体；ＣＨＰ２００９１４：２００７
年，以对照杂交狼尾草幼穗离体培养获得的胚性愈伤组织为材料，经５００ｍｇ／Ｌ秋水仙素诱导７２ｈ获得的体细胞
突变体，２狀＝６狓＝４２，为六倍体耐盐杂交狼尾草体细胞突变体。
１．３　试验方法
１．３．１　体细胞再生植株大田综合农艺性状评价和营养品质分析　２０１１年５月１０日，把冬季塑料大棚保存的
ＣＨＰ２００９１４和对照杂交狼尾草种茎移栽至大田，畦宽４ｍ，行株距为４５ｃｍ×４０ｃｍ，每小区１０行，每行８株，小
区面积为１６ｍ２，随机区组设计，３次重复。移栽前施无机复合肥（Ｎ∶Ｐ∶Ｋ＝１０∶８∶７）７５０ｋｇ／ｈｍ２作基肥，苗
期追施尿素７５ｋｇ／ｈｍ２。
２０１１年８月１日，对植株综合农艺性状进行定性观察后，每个小区随机选取５株测量株高（从地面至植株的
最高部位的绝对高度），计算其平均值；每个小区各随机选取１０株，测量主茎倒数第３张完全展开叶的长度和宽
度，计算平均值；选取叶片中间区域、主脉左右厚度均匀的部位，打孔器取叶片小样，用游标卡尺测量２０片小样的
中心处厚度，计算其平均值，并测定叶片叶绿素含量［１６］；选取中间８行进行刈割测产，刈割留茬高度为１５ｃｍ，取
约１ｋｇ样品茎叶分离后，７５℃烘干测定含水量，计算干物质产量，并进行营养品质分析，粗蛋白、酸性洗涤纤维、
中性洗涤纤维、粗灰分的测定参照 ＶａｎＳｏｅｓｔ纤维测定法［１７］，体外干物质消化率（ＩＶＤＭＤ）采用 Ｇｏｔｏ胃蛋白
酶－纤维素酶两步消化法测定［１８］，刈割后田间统计中间６行植株的平均分蘖数。
１．３．２　叶片表皮微形态结构分析　２０１１年７月２８日，每个小区分别选取２个供试材料各１株，切取其倒数第３
张完整叶片的中间区域（长１ｃｍ、宽为叶片自然宽度），浸泡在３０％过氧化氢∶醋酸（ｖ∶ｖ＝１∶１）溶液中，在
６０℃烘箱内放置２～４ｈ，待叶肉组织和表皮细胞分离后取出，放入装有适量蒸馏水的培养皿中，用镊子分离叶片
上、下表皮，１％番红染色３～６ｍｉｎ，制成临时装片，在ＯＬＹＭＰＵＳＣＸ３１光学显微镜下观察并拍照。采用形态学
（荧光）图像分析系统１．０软件（ＪＤ８０１，江苏捷达软件工程有限公司，南京）测量如下各项指标。
气孔器密度：在１０×１０倍的物镜下，每份材料选择３０个清晰视野拍照，计数气孔器数目，测量视野中表皮面
积，计算密度。
气孔器长度、宽度及面积：在１０×４０倍物镜下，每份供试材料选取１５个视野，每个视野随机测量２个气孔器
的长度、宽度和面积。由于取样后气孔处于关闭的状态，试验测得的气孔器长度和宽度是指气孔关闭状态下哑铃
型气孔器的长度、宽度以及面积［１９］。
１．３．３　流式细胞术分析　２０１１年８月５日，各小区选取供试材料各１株刈割后再生的幼嫩叶片２０～３０ｍｇ，用
刀片迅速切碎，放入加有１ｍＬＬＢ０１缓冲液（１５ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓＨＣｌ，２ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＥＤＴＡ，８０ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ，２０
ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ，０．５ｍｍｏｌ／Ｌｓｐｅｒｍｉｎｅ，１５ｍｍｏｌ／Ｌｍｅｒｃａｐｔｏｅｔｈａｎｏｌ，０．１％ ＴｒｉｔｏｎＸ１００，ｐＨ９．０）的培养皿（培
养皿置于冰袋上）中，用移液枪将混合液吸打２～３次，经二层４００目（３８μｍ）尼龙网过滤，滤液收集至１．５ｍＬ的
离心管中，４℃、２０００ｒ／ｍｉｎ离心３ｍｉｎ，弃上清液，加入２００μＬＬＢ０１缓冲液，轻轻振荡细胞重新悬浮，加入２５μＬ
的碘化丙啶（１ｍｇ／ｍＬ）进行染色，并加入５μＬＲＮａｓｅ（１ｍｇ／ｍＬ），４℃、避光染色约１ｈ后，转入标准上样管中，
采用美国ＢＤ公司的ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ流式细胞仪进行测定，使用随机软件ＣｅｌｑｕｅｓｔＰｒｏ获取数据，采用Ｆｌｏｗｊｏ
７．５软件做细胞周期分析。
１．４　数据分析
利用Ｅｘｃｅｌ２００３软件进行数据统计，ＳＰＳＳ１６．０软件进行方差分析。
８０１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．４
２　结果与分析
２．１　综合农艺性状评价和品质分析
与对照三倍体杂交狼尾草相比，六倍体新种质ＣＨＰ２００９１４株型紧凑，叶色深绿，叶绿素含量比对照提高
１０．５１％（犘＜０．０５），叶片变短变厚，茎节缩短，叶片和叶鞘上绒毛增多，花药无花粉散出，联苯胺－过氧化氢反应
液能将ＣＨＰ２００９１４的白色柱头染成深蓝色并伴有大量气泡出现，表明柱头具有可授性。六倍体杂交狼尾草新
种质ＣＨＰ２００９１４的株高与对照三倍体杂交狼尾草相比降低了２６．３４％ （犘＜０．０１），叶片长度减少了２０．０６％
（犘＜０．０１），叶片厚度增加了１６．４１％ （犘＜０．０１），茎叶比减少了４３．６１％ （犘＜０．０１），分蘖数提高４４．６２％ （犘＜
０．０１），叶片宽度ＣＨＰ２００９１４与对照差异不显著（表１）。
与对照三倍体杂交狼尾草相比，六倍体杂交狼尾草新种质ＣＨＰ２００９１４体外消化率显著提高６．９４％ （犘＜
０．０５），粗蛋白含量和灰分含量分别极显著提高６２．３４％ （犘＜０．０１）和１７．３５％ （犘＜０．０１），中性洗涤纤维含量和
酸性洗涤纤维含量分别降低３．３５％ （犘＞０．０５）和提高０．５０％ （犘＞０．０５），差异不显著。六倍体杂交狼尾草新种
质ＣＨＰ２００９１４的鲜草产量比对照提高０．８７％ （犘＞０．０５），但由于六倍体杂交狼尾草新种质植株的含水量低于
对照，干物质产量比对照低３．２７％ （犘＞０．０５），差异均未达到显著水平（表２）。
表１　六倍体犆犎犘２００９１４与三倍体杂交狼尾草（犆犓）生物学特性比较
犜犪犫犾犲１　犆狅犿狆犪狉犻狊狅狀狅犳犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊犻狀犺犲狓犪狆犾狅犻犱犆犎犘２００９１４犪狀犱狋狉犻狆犾狅犻犱犺狔犫狉犻犱犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿
性状Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ＣＨＰ２００９１４ ＣＫ
株高Ｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔ（ｃｍ） １４１．１７±３．１３ｂＢ １９１．６７±８．２１ａＡ
叶长Ｌｅａｆｌｅｎｇｔｈ（ｃｍ） ５６．２０±６．４２ｂＢ ７０．３０±３．７５ａＡ
叶宽Ｌｅａｆｗｉｄｔｈ（ｃｍ） ２．０４±０．１５ａＡ ２．０４±０．１８ａＡ
叶厚Ｌｅａｆｔｈｉｃｋｎｅｓｓ（ｍｍ） ０．２４１２±０．００４８ａＡ ０．２０７２±０．００７６ｂＢ
分蘖数 Ｎｏ．ｏｆｔｉｌｅｒ ２３．５０±７．１４ａＡ １６．２５±５．７４ｂＢ
叶绿素含量Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｃｏｎｔｅｎｔ（％） ２．４２ａＡ ２．１９ｂＡ
茎叶比Ｓｔｅｍ∶ｌｅａｆ ０．３２±０．１５ｂＢ ０．８７±０．１２ａＡ
　注：不同小写字母表示差异显著（犘＜０．０５）；不同大写字母表示差异极显著（犘＜０．０１）。下同。
　Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｍａｌｌｅｔｔｅｒｓａｎｄｃａｐｉｔａｌｌｅｔｔｅｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｔ犘＜０．０５ａｎｄ犘＜０．０１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
表２　六倍体新种质犆犎犘２００９１４与三倍体对照杂交狼尾草生物产量和品质比较
犜犪犫犾犲２　犆狅犿狆犪狉犻狊狅狀狅犳犫犻狅犿犪狊狊犪狀犱犪狀犻犿犪犾狀狌狋狉犻狋犻狅狀犻狀犺犲狓犪狆犾狅犻犱犆犎犘２００９１４犪狀犱狋狉犻狆犾狅犻犱犺狔犫狉犻犱犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿
性状Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ＣＨＰ２００９１４ ＣＫ
鲜草产量Ｆｒｅｓｈｙｉｅｌｄ（ｋｇ／６６６．７ｍ２） ５４２９．３８±２０９．５０ａＡ ５３８２．６９±３７２．８５ａＡ
干物质产量 Ｄｒｙｍａｔｔｅｒｙｉｅｌｄ（ｋｇ／６６６．７ｍ２） ５８３．１２±１９．０７ａＡ ６０２．８６±４４．４２ａＡ
体外消化率犐狀狏犻狋狉狅ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ（％） ５９．７６±０．７４ａＡ ５５．８８±３．６３ｂＡ
中性洗涤纤维Ｎｅｕｔｒａｌｄｅｔｅｒｇｅｎｔｆｉｂｅｒ（％） ５９．４０±１．４１ａＡ ６１．４６±０．９２ａＡ
酸性洗涤纤维 Ａｃｉｄｄｅｔｅｒｇｅｎｔｆｉｂｅｒ（％） ３９．９３±１．０１ａＡ ３９．７３±１．７３ａＡ
粗蛋白Ｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎ（％） １１．３８±０．２６ａＡ ７．０１±０．５６ｂＢ
灰分 Ａｓｈ（％） １４．０７±１．８６ａＡ １１．９９±１．４２ｂＢ
２．２　叶片表皮微形态特异性分析
杂交狼尾草新种质ＣＨＰ２００９１４与对照叶片上、下表皮均由气孔器、长细胞（Ｌ）、短细胞（Ｓ）、叶脉和刺毛（Ｔ）
等组成，脉间长细胞多为长形，细胞壁多具齿纹，短细胞及气孔器分布于长细胞间，气孔器成行分布于叶脉间隙
（图１）。
９０１第２３卷第４期 草业学报２０１４年
与对照三倍体杂交狼尾草相比，六倍体杂交狼尾草新种质ＣＨＰ２００９１４上表皮气孔器密度减小了６５．２０％
（犘＜０．０１），气孔器长度和宽度分别增加了４７．７１％（犘＜０．０１）和５１．５４％（犘＜０．０１）；下表皮气孔器密度减小了
３５．７１％（犘＜０．０１），其气孔器长度和宽度分别增加了３０．５３％（犘＜０．０１）和３４．１７％（犘＜０．０１）；杂交狼尾草新
种质ＣＨＰ２００９１４叶片上、下表皮气孔器面积均较对照杂交狼尾草有所增加，分别达到对照杂交狼尾草气孔器面
积的２．０７倍和１．５４倍（表３）。
图１　犆犎犘２００９１４与三倍体杂交狼尾草叶片上下表皮气孔特性比较
犉犻犵．１　犆狅犿狆犪狉犻狊狅狀狅犳狊狋狅犿犪犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊犻狀狌狆狆犲狉犪狀犱犾狅狑犲狉犾犲犪犳犲狆犻犱犲狉犿犻狊狅犳犆犎犘２００９１４犪狀犱狋狉犻狆犾狅犻犱犺狔犫狉犻犱犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿
　Ａ：ＣＨＰ２００９１４上表皮ＴｈｅｕｐｐｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓｏｆＣＨＰ２００９１４；Ｂ：ＣＨＰ２００９１４下表皮ＬｏｗｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓｏｆＣＨＰ２００９１４；Ｃ：ＣＫ上表皮Ｔｈｅｕｐｐｅｒｅｐ
ｉｄｅｒｍｉｓｏｆＣＫ；Ｄ：ＣＫ下表皮ＬｏｗｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓｏｆＣＫ；箭头表示气孔器Ａｒｒｏｗｈｅａｄｐｏｉｎｔｓｔｏｔｈｅｓｔｏｍａ；Ｔ表示刺毛Ｔｉｎｄｉｃａｔｅｓｓｅｔａ；Ｌ表示长细胞Ｌ
ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｌｏｎｇｃｅｌ；Ｓ表示短细胞Ｓｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓｈｏｒｔｃｅｌ；比例尺Ｂａｒ＝１００μｍ．
表３　六倍体犆犎犘２００９１４与三倍体杂交狼尾草叶片表皮气孔器特征
犜犪犫犾犲３　犛狋狅犿犪犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊犻狀狌狆狆犲狉犪狀犱犾狅狑犲狉犾犲犪犳犲狆犻犱犲狉犿犻狊狅犳犆犎犘２００９１４犪狀犱犺狔犫狉犻犱犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿
部位Ｌｏｃａｔｉｏｎ 供试材料 Ｍａｔｅｒｉａｌ 密度 Ｄｅｎｓｉｔｙ（Ｎｏ．／ｍｍ２） 面积 Ａｒｅａ（μｍ２） 长度Ｌｅｎｇｔｈ（μｍ） 宽度 Ｗｉｄｔｈ（μｍ）
上表皮 Ｕｐｐｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ＣＨＰ２００９１４ ３１．４８±３．２３ｂＢ １２５２．７６±１３１．１５ａＡ ４８．５１±２．８６ａＡ ３５．８７±５．１５ａＡ
ＣＫ ９０．４７±８．７０ａＡ ５７９．２６±７２．２１ｂＢ ３２．８４±２．３４ｂＢ ２３．６７±１．９９ｂＢ
下表皮Ｌｏｗｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ＣＨＰ２００９１４ ７０．２９±５．９７ｂＢ ９９９．１６±１２０．８３ａＡ ４２．５４±３．７９ａＡ ３３．２２±２．８０ａＡ
ＣＫ １０９．３４±４．４９ａＡ ６３３．４８±８５．４４ｂＢ ３２．５９±１．６９ｂＢ ２４．７６±１．７８ｂＢ
２．３　流式细胞术分析
以三倍体杂交狼尾草为对照，调整仪器阈值使对照三倍体杂交狼尾草Ｇ１期峰值所在的荧光道数为２００道，
检测三倍体杂交狼尾草和六倍体杂交狼尾草新种质ＣＨＰ２００９１４植株细胞核的ＤＮＡ相对含量。结果显示（图
２），三倍体杂交狼尾草Ｇ１期峰值位于２００道附近，Ｇ２期峰值位于４００道附近；新种质ＣＨＰ２００９１４植株的Ｇ１、
Ｇ２期峰值分别位于４００道和８００道附近，表示其细胞核ＤＮＡ含量为对照三倍体杂交狼尾草的两倍，杂交狼尾
草新种质ＣＨＰ２００９１４的染色体与对照相比发生了加倍。
０１１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．４
图２　杂交狼尾草体细胞突变体对照 （犃）和犆犎犘２００９１４（犅）叶片相对犇犖犃含量分布曲线
犉犻犵．２　犇犻狊狋狉犻犫狌狋犻狅狀犮狌狉狏犲狅犳狉犲犾犪狋犻狏犲犇犖犃犮狅狀狋犲狀狋狅犳狊狅犿犪狋犻犮犿狌狋犪狀狋犆犓（犃）犪狀犱犆犎犘２００９１４（犅）犻狀犾犲犪犳
　
３　讨论与结论
３．１　六倍体杂交狼尾草种质创新及评价
多年来，人工诱导多倍体的研究一直吸引着广大的植物育种工作者［２０］。但大量的研究发现，多倍化的种质
在形态、细胞学特性和分子特性方面发生的变异是多样而复杂的［２１２２］，人工诱导六倍体杂交狼尾草的研究国外有
少量报道。Ｒａｊａｓｅｋａｒａｎ等［２３］以不育系Ｔｉｆｔ２３ＤＡ（２狀＝２狓＝１４）×矮生象草品种‘Ｎ７５’（２狀＝４狓＝２８）杂交种幼
穗为外植体，离体培养获得的胚性愈伤为材料，在适宜激素组合的培养基中继代和分化培养后的再生植株中，获
得了２株可自交结实的突变体植株，经根尖染色体计数分析，染色体数２狀＝６狓＝４２，为六倍体杂交狼尾草突变体
植株，但对突变体产生机理尚不清楚，推测可能原始外植体为嵌合体，也可能与组织培养过程有关，对２个可自交
结实的六倍体杂交狼尾草突变体的植物学特征评价表明，２个六倍体杂交狼尾草株高均极显著低于对照三倍体
杂交狼尾草，叶片宽度大于等于对照，而叶片长度表现不一，１个比对照长，１个比对照短。Ｈａｎｎａ［１０］利用秋水仙
素处理三倍体杂交狼尾草幼苗根获得了可自交结实的六倍体杂交狼尾草，Ｈａｎｎａ等［２４］对狼尾草属次级基因库中
向初级基因库中遗传物质转移的研究表明，以雌雄蕊均可育的六倍体杂交狼尾草为母本或父本与美洲狼尾草杂
交均可产生种子，实现次级基因库中的象草遗传物质向美洲狼尾草转移。本研究中的六倍体杂交狼尾草新种质
ＣＨＰ２００９１４，是以三倍体杂交狼尾草（Ｔｉｆｔ２３Ａ×苏牧２号象草）的幼穗为材料，离体培养获得的胚性愈伤为外
植体，在继代培养基中经５００ｍｇ／Ｌ秋水仙素诱导处理７２ｈ，分化培养后获得的染色体加倍植株。与对照三倍体
杂交狼尾草相比，株高极显著降低、叶片长度极显著减小、分蘖数和叶片厚度极显著增加，叶片宽度与对照无显著
差异，茎叶比极显著减小；六倍体杂交狼尾草新种质ＣＨＰ２００９１４具有多年生习性，尽管花药败育，不能自交结
实，但柱头具有可授性，正在筛选合适的二倍体美洲狼尾草恢复系与之杂交选育四倍体杂交狼尾草新品系，有关
研究结果将进一步报道。
Ｈａｎｎａ等［２５］研究了倍性对杂交狼尾草产量和品质的影响，认为多倍体对产量和品质没有影响或有负面影
响，三倍体杂交狼尾草比六倍体杂交狼尾草具有更高的产量和品质。本研究结果表明，在海涂地种植的新种质
ＣＨＰ２００９１４鲜草产量略高于三倍体杂交狼尾草，干物质产量略低于对照，差异不显著，体外消化率显著增加，粗
蛋白含量极显著提高。本试验结果与 Ｈａｎｎａ等［２５］的研究结果不一致，分析原因可能与种植的土地类型有关，
ＣＨＰ２００９１４在盐碱地种植表现优于三倍体杂交狼尾草，有关机理正在进一步研究。
３．２　六倍体杂交狼尾草新种质的鉴定方法
Ｈｏｄｇｓｏｎ等［２６］提出在被子植物相当大范围的分类单元里气孔的大小与基因组大小呈正相关关系。Ｃａｍｐｏｓ
等［１２］对获得的１７株六倍体植株、１１５株嵌合体植株的气孔器特性分析表明，六倍体杂交狼尾草上下表皮气孔器
密度比三倍体杂交狼尾草减小了大约４８．８３％和４４．８３％，气孔器面积约是三倍体杂交狼尾草的１．５２倍，混倍体
植株气孔器密度和大小介于三倍体和六倍体之间。本研究结果表明，上下表皮气孔器密度六倍体杂交狼尾草新
１１１第２３卷第４期 草业学报２０１４年
种质ＣＨＰ２００９１４比三倍体杂交狼尾草减小６５．２％和３５．７１％，ＣＨＰ２００９１４叶片上、下表皮气孔器面积分别为
对照三倍体杂交狼尾草气孔器面积的２．０７倍和１．５４倍，与Ｃａｍｐｏｓ等［１２］的研究结果呈现相似的规律。尽管多
倍体育种中根尖染色体计数是最直接的倍性鉴定证据，但由于染色体精确计数对操作技术要求极高［２７］，对染色
体数多的嵌合体不易识别，而流式细胞术可灵敏地检测出嵌合体并计算不同倍性细胞所占比例［２８］。本研究中流
式细胞术的分析结果表明，对照三倍体杂交狼尾草有丝分裂 Ｇ１期和 Ｇ２期的峰值在２００和４００附近，而
ＣＨＰ２００９１４有丝分裂Ｇ１期和Ｇ２期的峰值在４００和８００附近，表明ＣＨＰ２００９１４细胞核ＤＮＡ含量约是对照
三倍体杂交狼尾草的２倍，与ＣＨＰ２００９１４的染色体计数结果２狀＝４２相吻合。因此，在秋水仙素诱导处理三倍
体杂交狼尾草胚性愈伤再生植株后，可以先进行叶片气孔器特性分析初步筛选，然后进行流式细胞术分析，最后
进行染色体计数确定，可提高六倍体杂交狼尾草新种质筛选的效率。
参考文献：
［１］　ＷａｌｔｅｒＲＦ，ＨｅｎｒｙＨＨ．ＨｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎｏｆＣｒｏｐＰｌａｎｔｓ［Ｍ］．Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ：ＡｍｅｒｉｃａｎＳｏｃｉｅｔｙｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙａｎｄＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅＳｏ
ｃｉｅｔｙｏｆＡｍｅｒｉｃａ，１９８０．
［２］　ＢｕｒｔｏｎＧＷ．Ｈｙｂｒｉｄｂｅｔｗｅｅｎｎａｐｉｅｒｇｒａｓｓａｎｄｃａｔｔａｉｌｍｉｌｅｔ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｒｅｄｉｔｙ，１９４４，３５（５）：７２６７３２．
［３］　ＰｏｗｅｌＪＢ，ＢｕｒｔｏｎＧＷ．Ａｓｕｇｇｅｓｔｅｄｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｍｅｔｈｏｄｏｆｐｒｏｄｕｃｉｎｇａｎｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃｈｙｂｒｉｄｆｏｒａｇｅｉｎ犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿［Ｊ］．Ｃｒｏｐ
Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９６６，６：３７８３７９．
［４］　ＲａｉＫＮ，ＣｈａｎｄｒａＳ，ＲａｏＡＳ．ＰｏｔｅｎｔｉａｌａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｍａｌｅｓｔｅｒｉｌｅＦ１ｈｙｂｒｉｄｓｆｏｒｕｓｅａｓｓｅｅｄｐａｒｅｎｔｓｏｆｔｈｒｅｅｗａｙｈｙｂｒｉｄｓｉｎ
ｐｅａｒｌｍｉｌｅｔ［Ｊ］．ＦｉｅｌｄＣｒｏｐｓＲｅｓｅａｒｃｈ，２０００，（６８）：１７３１８１．
［５］　ＥｋｅｍｉｎｉＥＯ，ＭｉｃｈｅａｌＥＡ，ＧｏｄｆｒｅｙＡＩ．Ｆｏｒａｇｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｓｏｆｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃｈｙｂｒｉｄｓｂｅｔｗｅｅｎｅｌｅｐｈａｎｔｇｒａｓｓｓｅｌｅｃｔｉｏｎｓａｎｄｃｕｌ
ｔｉｖａｔｅｄｐｅａｒｌｍｉｌｅｔｇｅｎｏｔｙｐｅｓｏｆＮｉｇｅｒｉａｎｏｒｉｇｉｎ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＢｒｅｅｄｉｎｇａｎｄＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，２０１２，４（９）：１３６１４３．
［６］　ＭａｄａｋａｄｚｅＩＣ，ＭａｓａｍｖｕＴ Ｍ，ＲａｄｉｏｔｉｓＴ，犲狋犪犾．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｐｕｌｐａｎｄｐａｐｅｒｍａｋｉｎｇｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｅｌｅｐｈａｎｔｇｒａｓｓ
（犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿狆狌狉狆狌狉犲狌犿Ｓｃｈｕｍ．）ａｎｄｓｗｉｔｃｈｇｒａｓｓ（犘犪狀犻犮狌犿狏犻狉犵犪狋狌犿Ｌ．）［Ｊ］．ＡｆｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，４（７）：４６５４７０．
［７］　张德荣，母军，王洪滨，等．杂交狼尾草制造刨花板工艺研究［Ｊ］．北京林业大学学报，２００８，３０（３）：１３６１３９．
［８］　ＳｃｈａｎｋＳＣ，ＤｉｚＤＡ，ＢａｔｅｓＤＢ，犲狋犪犾．Ｇｅｎｅｔｉｃｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｎａｐｉｅｒｇｒａｓｓａｎｄｈｙｂｒｉｄｓｗｉｔｈｐｅａｒｌｍｉｌｅｔ［Ｊ］．Ｂｉｏｍａｓｓａｎｄ
Ｂｉｏｅｎｅｒｇｙ，１９９３，５（１）：３５４０．
［９］　Ａｋｅｎ’ｏｖａＭＥ，ＣｈｈｅｄａＨＲ．Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｃｙｔｏｌｏｇｙａｎｄｆｏｒａｇｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆ犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿犃犿犲狉犻犮犪狀狌犿 （Ｌ．）Ｋ．Ｓｃｈｕｍ．×犘．
狆狌狉狆狌狉犲狌犿Ｓｃｈｕｍ．Ａｍｐｈｉｄｉｐｌｏｉｄｓ［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，１９８１，（３０）：３９７４０４．
［１０］　ＨａｎｎａＷ Ｗ．Ｍｅｔｈｏｄｏｆｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｎａｐｉｅｒｇｒａｓｓａｎｄｉｎｔｈｅ３Ｘａｎｄ６Ｘａｌｏｐｌｏｉｄｈｙｂｒｉｄｓｗｉｔｈｐｅａｒｌｍｉｌｅｔ［Ｊ］．ＣｒｏｐＳｃｉ
ｅｎｃｅ，１９８１，２１：１２３１２６．
［１１］　ＤｉｚＤＡ，ＳｃｈａｎｋＳＣ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｅｅｄｐｒｏｄｕｃｉｎｇｐｅａｒｌｍｉｌｅｔ×ｅｌｅｐｈａｎｔｇｒａｓｓｈｅｘａｐｌｏｉｄｈｙｂｒｉｄｓ［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，１９９３，
６７：１４３１４９．
［１２］　ＣａｍｐｏｓＪＭＳ，ＤａｖｉｄｅＬＣ，ＳａｌｇａｄｏＣＣ．犐狀狏犻狋狉狅ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｅｘａｐｌｏｉｄｐｌａｎｔｓｆｒｏｍｔｒｉｐｌｏｉｄｈｙｂｒｉｄｓｏｆ犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿狆狌狉狆狌
狉犲狌犿ａｎｄ犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿犵犾犪狌犮狌犿［Ｊ］．ＰｌａｎｔＢｒｅｅｄｉｎｇ，２００９，１２８：１０１１０４．
［１３］　白淑娟，顾洪如，周卫星，等．杂交狼尾草制种技术［Ｊ］．江苏农业科学，１９９７，５：５８６０．
［１４］　白淑娟，张运昌，陈德新．杂交狼尾草亲本花期及主要植物学性状［Ｊ］．中国草地学报，１９９６，３：４９５２．
［１５］　马金星，张吉宇，单丽燕，等．中国草品种审定登记工作进展［Ｊ］．草业学报，２０１１，２０（１）：２０６２１３．
［１６］　魏海姗．植物生理学实验［Ｍ］．北京：科学出版社，１９７４．
［１７］　杨胜．饲料分析及饲料检测技术［Ｍ］．北京：北京农业大学出版社，１９９１．
［１８］　ＧｏｔｏＩ，ＭｉｎｓｏｎＤ．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｄｒｙｍａｔｔｅｒｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆｔｒｏｐｉｃａｌｇｒａｓｓｅｓｕｓｉｎｇａｐｅｐｓｉｎｃｅｌｕｌａｓｅｅｓｓａｙ［Ｊ］．ＡｎｉｍａｌＦｅｅｄ
ｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９７，（２）：２４７２５３．
［１９］　云岚，云锦凤，李俊琴，等．新麦草愈伤组织多倍体诱导与倍性鉴定［Ｊ］．草业学报，２０１０，１９（６）：１２６１３１．
［２０］　刘曙娜，于林清，周延林，等．利用ＲＡＰＤ技术构建四倍体苜蓿遗传连锁图谱［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（１）：１７０１７５．
［２１］　聂利红，王延召，房卫平，等．多倍体植物基因组结构和基因表达的变化研究进展［Ｊ］．河南农业科学，２０１２，４１（２）：１４．
２１１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１４） Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．４
［２２］　徐远东，范彦，何玮．多倍体育种在牧草和草坪草中的应用［Ｊ］．牧草科学，２０１２，（９）：１２１５．
［２３］　ＲａｊａｓｅｋａｒａｎＫ，ＳｃｈａｎｋＳＣ，ＶａｓｉｌＩＫ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｂｉｏｍａｓｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｃｙｔｏｌｏｇｙ，ａｎｄｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓｏｆｐｌａｎｔｓｒｅｇｅｎｅｒａ
ｔｅｄｆｒｏｍｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃｃａｌｕｓｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆ犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿犪犿犲狉犻犮犪狀狌犿×犘．狆狌狉狆狌狉犲狌犿（ｈｙｂｒｉｄｔｒｉｐｌｏｉｄｎａｐｉｅｒｇｒａｓｓ）［Ｊ］．Ｔｈｅｏｒｅｔｉ
ｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９８６，７３：４１０．
［２４］　ＨａｎｎａＷ Ｗ．Ｔｒａｎｓｆｅｒｏｆｇｅｒｍｐｌａｓｍｆｒｏｍｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙｔｏｔｈｅｐｒｉｍａｒｙｇｅｎｅｐｏｏｌｉｎ犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿［Ｊ］．ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐ
ｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９０，８０：２００２０４．
［２５］　ＨａｎｎａＷ Ｗ，ＧａｉｎｅｓＴＰ，ＧｏｎｚａｌｅｚＢ，犲狋犪犾．ＥｆｆｅｃｔｏｆｐｌｏｉｄｙｏｎｙｉｅｌｄａｎｄｑｕａｌｉｔｙｏｆＰｅａｒｌｍｉｌｅｔ×Ｎａｐｉｅｒｇｒａｓｓｈｙｂｒｉｄｓ［Ｊ］．
ＡｇｒｏｎｏｍｙＪｏｕｒｎａｌ，１９８４，７６：９６９９７１．
［２６］　ＨｏｄｇｓｏｎＪＧ，ＳｈａｒａｆｉＭ，ＪａｌｉｌｉＡ，犲狋犪犾．Ｓｔｏｍａｔａｌｖｓｇｅｎｏｍｅｓｉｚｅｉｎａｎｇｉｏｓｐｅｒｍｓ：ｔｈｅｓｏｍａｔｉｃｔａｉｌｗａｇｇｉｎｇｔｈｅｇｅｎｏｍｉｃ
ｄｏｇ［Ｊ］．ＡｎｎａｌｓｏｆＢｏｔａｎｙ，２０１０，１０５：５７３５８４．
［２７］　常盼盼，钟小仙，刘智微．海滨雀稗体细胞突变体ＳＰ２００８３的特异性分析［Ｊ］．草业学报，２０１２，２１（６）：２０７２１２．
［２８］　ＧａｌｂｒａｉｔｈＤＷ，ＨａｒｋｉｎｓＫＲ，ＭａｄｄｏｘＪＭ，犲狋犪犾．Ｒａｐｉｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｃｅｌｃｙｃｌｅｉｎｉｎｔａｃｔｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｓ［Ｊ］．
Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８３，２２０：１０４９１０５１．
犃狀犪犾狔狊犻狊狅犳犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊狅犳犪犺犲狓犪狆犾狅犻犱狊狅犿犪狋犻犮犿狌狋犪狀狋狅犳犺狔犫狉犻犱犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿
ＺＨＯＮＧＸｉａｏｘｉａｎ，ＬＩＵＺｈｉｗｅｉ，ＬＩＵ Ｗｅｉｇｕｏ，ＣＵＩＬｉｌｉ，ＷＵＪｕａｎｚｉ，ＺＨＡＮＧＪｉａｎｌｉ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＪｉａｎｇｓｕＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００１４，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：ＴｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｈｅｘａｐｌｏｉｄｓｏｍａｔｉｃｍｕｔａｎｔＣＨＰ２００９１４ｗｈｉｃｈｗａｓｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｆｒｏｍｅｍｂｒｙｏｎｉｃ
ｃａｌｕｓｔｒｅａｔｅｄｂｙｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，ＣＨＰ２００９１４ａｎｄａｔｒｉｐｌｏｉｄｈｙｂｒｉｄｏｆＴｉｆｔ２３Ａａｎｄ犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿狆狌狉狆狌狉犲狌犿 ｃｖ．
ＳｕｍｕＮｏ．２（ＣＫ）ｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．Ｓｐｅｃｉｆｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎａｌｙｓｅｄｗｅｒｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｔｒａｉｔｓ，ｐｌａｎｔｎｕｔｒｉｔｉｏｎｖａｌ
ｕｅ，ｌｅａｆｓｔｏｍａｔａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ａｎｄｐｌｏｉｄｙｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．ＣｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｏｓｅｏｆｔｈｅＣＫａｆ
ｔｅｒ９２ｄａｙｓｇｒｏｗｔｈｉｎｓａｌｉｎｅｓｏｉｌ，ｔｈｅｌｅａｆｃｏｌｏｒｏｆＣＨＰ２００９１４ｗａｓｄａｒｋｇｒｅｅｎ，ｔｈｅｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｃｏｎｔｅｎｔｉｎ
ｃｒｅａｓｅｄ１０．５１％ （犘＜０．０５），ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｍａｎｙｍｏｒｅｈａｉｒｓｉｎｔｈｅｌｅａｖｅｓａｎｄｓｈｅａｔｈｓ；ｔｈｅｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔｗａｓｒｅ
ｄｕｃｅｄ２６．３４％ （犘＜０．０１）；ｔｈｅｌｅａｆｌｅｎｇｔｈｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙ２０．０６％ （犘＜０．０１）ａｎｄｔｈｅｌｅａｆｔｈｉｃｋｎｅｓｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ
１６．４１％ （犘＜０．０１）．Ｔｈｅｓｔｅｍ／ｌｅａｆｒａｔｉｏｗａｓｒｅｄｕｃｅｄ４３．６１％ （犘＜０．０１）ａｎｄｎｕｍｂｅｒｏｆｔｉｌｅｒｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ
４４．６２％ （犘＜０．０１）．Ｔｈｅｌｅａｆｗｉｄｔｈｗａｓｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．Ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙｉｎｖｉｔｒｏ，ｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎ，ａｓｈ
ａｎｄａｃｉｄｄｅｔｅｒｇｅｎｔｆｉｂｅｒｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ６．９４％ （犘＜０．０５），６２．３４％ （犘＜０．０１），１７．３５％ （犘＜
０．０１）ａｎｄ１０．２４％ （犘＜０．０１），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｎｅｕｔｒａｌｄｅｔｅｒｇｅｎｔｆｉｂｅｒｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙ３．３５％ａｎｄａｃｉｄｄｅｔｅｒｇｅｎｔｆｉ
ｂｅｒｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ０．５０％ （犘＞０．０５）．Ｆｒｅｓｈｇｒａｓｓｙｉｅｌｄｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ０．８７％ （犘＞０．０５）ａｎｄｄｒｙｍａｔｔｅｒｙｉｅｌｄｄｅ
ｃｒｅａｓｅｄｂｙ３．２７％（犘＞０．０５）．ＣｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｏｓｅｏｆｔｈｅＣＫ，ｔｈｅｓｔｏｍａｔａｌｄｅｎｓｉｔｙｏｆＣＨＰ２００９１４ｉｎｔｈｅｕｐｐｅｒ
ａｎｄｌｏｗｅｒｅｐｉｄｅｒｍｉｓｗａｓｌｏｗｅｒｂｙ６５．２０％ （犘＜０．０１）ａｎｄ３５．７１％ （犘＜０．０１），ｔｈｅｓｔｏｍａｔａｌｌｅｎｇｔｈａｎｄｗｉｄｔｈ
ｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ４７．７１％ （犘＜０．０１）ａｎｄ３０．５３％ （犘＜０．０１），５１．５４％ （犘＜０．０１）ａｎｄ３４．１７％ （犘＜０．０１），ｒｅ
ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅｓｔｏｍａｔａｌａｒｅａｗａｓ２．０７ａｎｄ１．５４ｔｉｍｅｓｔｈａｔｏｆｔｈｅＣＫ．Ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔｔｈｅｎｕｃｌｅａｒＤＮＡｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆＣＨＰ２００９１４ｗａｓｔｗｉｃｅｔｈａｔｏｆｔｈｅＣＫ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ｈｙｂｒｉｄ犘犲狀狀犻狊犲狋狌犿；ｈｅｘａｐｌｏｉｄ；ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｔｒａｉｔｓ；ｎｕｔｒｉｔｉｏｎｖａｌｕｅ；ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ；ｓｔｏｍａｔａｌａｐ
ｐａｒａｔｕｓｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ
３１１第２３卷第４期 草业学报２０１４年