全 文 ：林业科学研究摇 圆园员员袁圆源渊圆冤院员愿怨 员怨猿云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员员冤园圆鄄园员愿怨鄄园缘
云南省核桃品种遗传多样性的 云陨杂匀鄄粤云蕴孕分析
宁德鲁员袁 马庆国圆袁 张摇 雨员袁 王摇 滑圆袁 陆摇 斌猿袁 裴摇 东圆鄢
渊员郾 云南省林业科学院经济林研究所袁云南 昆明摇 远缘园圆园源曰 圆郾 中国林业科学研究院林业研究所袁国家林业局林木培育重点实验室袁
北京摇 员园园园怨员曰 猿郾 云南省林业技术推广总站袁云南 昆明摇 远缘园圆圆源冤
摘要院采用 云陨杂匀鄄粤云蕴孕技术袁选取 愿 对 耘 垣 猿 和 酝 垣猿 引物组合袁对云南省林木品种审定委员会审渊认冤定的 员苑 个核
桃品种渊无性系冤进行了基因组 阅晕粤分子水平上的检测袁实验结果共获得 怨愿苑 条可统计的条带袁其中 怨源圆 条呈多态
性袁多态性带百分率达 怨缘郾 源源豫 曰员苑 份供试核桃样品的遗传相似系数范围为 园郾 远园远 怨 园郾 苑怨远 源袁平均为 园郾 苑猿源 怨遥 本
研究分析了云南省审渊认冤定核桃品种渊无性系冤的遗传多样性和亲缘关系袁建立了它们的指纹图谱袁为下一步的核
桃新品种选育尧构建核桃优良种质库提供了理论指导遥
关键词院核桃曰品种曰遗传多样性曰云陨杂匀鄄粤云蕴孕曰聚类分析
中图分类号院杂苑怨圆郾 员猿 文献标识码院粤
收稿日期院 圆园员园鄄园苑鄄园缘
基金项目院 林业公益性行业科研专项经费项目院员郾 核桃优异种质资源保存与开发利用技术研究渊圆园园苑园源园源远冤曰圆郾 核桃集约及可持续生
产关键技术研究渊圆园员园园源园源愿冤
作者简介院 宁德鲁渊员怨苑源要冤袁男袁副研究员袁硕士生导师袁主要从事经济林良种选育及栽培技术等方面的研究袁耘鄄皂葬蚤造院灶蚤灶早凿藻造怎岳
员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者院 裴摇 东渊员怨远源要冤袁女袁博士袁研究员袁中国林业科学研究院博士生导师袁主要从事植物生物技术的研究袁耘鄄皂葬蚤造院 责藻蚤早怎岳 糟葬枣援
葬糟援 糟灶
云陨杂匀鄄粤云蕴孕 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 郧藻灶藻贼蚤糟 阅蚤增藻则泽蚤贼赠 燥灶 宰葬造灶怎贼 悦怎造贼蚤增葬则泽
蚤灶 再怎灶灶葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻
晕陨晕郧 阅藻鄄造怎员袁 酝粤 匝蚤灶早鄄早怎燥圆袁 在匀粤晕郧 再怎员袁 宰粤晕郧 匀怎葬圆袁 蕴哉 月蚤灶猿袁 孕耘陨 阅燥灶早圆
渊员郾 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 耘糟燥灶燥皂蚤糟 云燥则藻泽贼则赠袁 再怎灶灶葬灶 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 运怎灶皂蚤灶早摇 远缘园圆园源袁 再怎灶灶葬灶袁 悦澡蚤灶葬曰
圆郾 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠曰 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 栽则藻藻 月则藻藻凿蚤灶早 葬灶凿 悦怎造贼蚤增葬贼蚤燥灶袁 杂贼葬贼藻 云燥则藻泽贼则赠 粤凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶袁
月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园怨员袁 悦澡蚤灶葬曰 猿郾 再怎灶灶葬灶 郧藻灶藻则葬造 杂贼葬贼蚤燥灶 燥枣 云燥则藻泽贼则赠 栽藻糟澡灶燥造燥早赠 耘曾贼藻灶泽蚤燥灶 杂贼葬贼蚤燥灶袁 运怎灶皂蚤灶早摇 远缘园圆圆源袁 再怎灶灶葬灶袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽澡藻 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼蚤藻泽 燥枣 员苑 憎葬造灶怎贼 糟怎造贼蚤增葬则泽渊允怎早造葬灶泽 泽蚤早蚤造造葬贼葬 阅燥凿藻冤 葬怎贼澡燥则蚤扎藻凿 燥则 葬责责则燥增藻凿 遭赠 再怎灶灶葬灶
孕则燥增蚤灶糟藻 云燥则藻泽贼 栽则藻藻 悦怎造贼蚤增葬则 砸藻早蚤泽贼则葬贼蚤燥灶 悦燥皂皂蚤贼贼藻藻 憎藻则藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻凿 憎蚤贼澡 云陨杂匀鄄粤云蕴孕 贼藻糟澡灶蚤糟葬造 泽赠泽贼藻皂援 耘蚤早澡贼
责葬蚤则泽 燥枣 耘 垣 猿 辕 酝 垣猿 责则蚤皂藻则泽 憎藻则藻 怎泽藻凿 贼燥 葬皂责造蚤枣赠 贼澡藻 早藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 怨愿苑 粤云蕴孕 遭葬灶凿泽 憎藻则藻
燥遭贼葬蚤灶藻凿袁 怨源圆 燥枣 贼澡藻皂 憎藻则藻 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 皂葬则噪藻则泽 葬灶凿 贼澡藻 葬增藻则葬早藻 责藻则糟藻灶贼 燥枣 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 遭葬灶凿泽 憎葬泽 怨缘郾 源源豫 援 栽澡藻
早藻灶藻贼蚤糟 泽蚤皂蚤造葬则蚤贼赠 蚤灶凿藻曾藻泽 葬皂燥灶早 葬造造 贼澡藻 员苑 糟怎造贼蚤增葬则泽 葬则藻 则葬灶早藻凿 枣则燥皂 园援 远园远 怨 贼燥 园郾 苑怨远 源 憎蚤贼澡 葬灶 葬增藻则葬早藻 燥枣
园郾 苑猿源 怨援 栽澡藻泽藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼蚤燥灶泽 憎燥怎造凿 遭藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 蚤灶 怎贼蚤造蚤扎蚤灶早 憎葬造灶怎贼 早藻则皂责造葬泽皂 则藻泽燥怎则糟藻泽 葬灶凿 糟怎造贼蚤增葬贼蚤灶早 灶藻憎 增葬则蚤鄄
藻贼蚤藻泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院 憎葬造灶怎贼渊允怎早造葬灶泽 泽蚤早蚤造造葬贼葬 阅燥凿藻冤曰 糟怎造贼蚤增葬则曰 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠曰 云陨杂匀鄄粤云蕴孕曰 糟造怎泽贼藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽
核桃渊允怎早造葬灶泽 则藻早蚤葬 蕴援 冤为世界四大干果之一袁
云南作为我国核桃主产大省袁截止 圆园园怨 年袁云南省
核桃种植面积达 员远园 万 澡皂圆袁年产量超过 猿 亿 噪早袁产
值超过 远园 亿元袁种植面积和产量约占全国的员 辕 猿咱员暂 遥
云南省在良种选育方面也开展了大量的工作袁选育
出的许多优良品种通过了云南省林木品种审定委员
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆源 卷
会的审渊认冤定袁但总的来看袁云南省的良种使用率
很低袁不到 猿园豫 遥 随着核桃种植面积的不断扩展和
不同用途品质的要求袁必然要在充分分析云南核桃
品质特征及开发利用方向的大基础上袁开展果用尧仁
用尧油用核桃的定向培育袁对核桃的选育和栽培提出
了新的更高的要求袁对现有核桃品种遗传背景尧亲缘
关系深入系统的了解袁将有助于进一步育种工作的
开展遥 收集保护云南核桃的种质资源袁进行遗传多
样性分析评价袁构建核心种质资源库袁是培育核桃新
品种的前提基础遥
国内外目前关于核桃遗传多样性的研究有少
量报道袁研究方法主要采用同工酶尧砸粤孕阅尧杂杂砸尧陨杂鄄
杂砸咱圆 原 远暂等技术袁由于材料选择尧研究手段的局限性
及分析方法的不同袁获得的结果也不一致咱苑 原 怨暂 遥 核
桃 粤云蕴孕试验体系的研究较多咱员园 原 员猿暂 袁 粤云蕴孕技术应
用于核桃遗传多样性研究的报道很少咱员源 原 员缘暂 遥 扩增
片段长度多态性渊粤皂责造蚤枣蚤藻凿 枣则葬早皂藻灶贼 造藻灶早贼澡 责燥造赠皂燥则鄄
责澡蚤泽皂袁粤云蕴孕冤是目前综合效应最高的分子标记方
法袁已被广泛用于遗传资源研究咱员远暂 遥 云陨杂匀鄄粤云蕴孕
方法是在 粤云蕴孕技术中引入荧光引物袁通过测序仪
直接获得图像并进行数据读取和分析袁同时具有
高灵敏尧高通量的优点 咱员圆暂 遥 本研究采用 云陨杂匀鄄
粤云蕴孕 技术袁对云南省通过审渊认冤定的 员苑 个核桃
品种渊无性系冤进行遗传多样性分析袁为利用该项
分子标记技术开展核桃的种质鉴定提供理论依
据曰同时为种质资源的遗传学研究及生产应用提
供参考遥
员摇 材料与方法
员援 员摇 试验材料
供试材料为 员苑 个云南省林木品种审定委员会
审渊认冤定的核桃品种渊无性系冤遥 圆园园怨 年 员圆 月至
圆园员园 年 员 月采其生长健壮尧无病虫害的 员 年生枝条袁
置于冰盒带回实验室袁 原 圆园 益保存备用遥 供试材料
的基本情况见表 员袁于 圆园员园 年 猿要缘 月进行遗传多样
性实验遥
表 员摇 核桃供试材料及其来源
品种号 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 供试样品 摇 摇 摇 摇 摇 亲本来源 采集地点
员 云新高原渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 伊 允援 则藻早蚤 耶再怎灶曾蚤灶早葬燥赠怎葬灶爷冤 漾濞泡核桃 伊新疆早实核桃云林 粤苑 号 嵩明云新高原尧云新云林核桃采穗圃
圆 云新云林渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 伊 允援 则藻早蚤 耶再怎灶曾蚤灶赠怎灶造蚤灶爷冤 漾濞泡核桃 伊新疆早实核桃云林 粤苑 号 嵩明云新高原尧云新云林核桃采穗圃
猿 云新 猿园员渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 伊 允援 则藻早蚤 耶再怎灶曾蚤灶 猿园员爷冤 三台核桃 伊新疆早实核桃新早 员猿 号 昆明树木园
源 云新 猿园猿渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 伊 允援 则藻早蚤 耶再怎灶曾蚤灶 猿园猿爷冤 三台核桃 伊新疆早实核桃新早 员猿 号 昆明树木园
缘 云新 猿园远渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 伊 允援 则藻早蚤 耶再怎灶曾蚤灶 猿园远爷冤 三台核桃 伊新疆早实核桃新早 员猿 号 昆明树木园
远 漾杂 员 号渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶再葬灶早扎葬 员爷冤 漾濞泡核桃 伊娘青核桃 云南省漾濞县
苑 漾杂 圆 号渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶再葬灶早扎葬 圆爷冤 漾濞泡核桃 伊娘青核桃 云南省漾濞县
愿 漾杂 猿 号渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶再葬灶早扎葬 猿爷冤 漾濞泡核桃 伊娘青核桃 云南省漾濞县
怨 漾濞泡核桃渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶再葬灶早遭蚤责葬燥澡藻贼葬燥爷冤 铁核桃实生选育 云南省林业科学院漾濞研究站
员园 细香核桃渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶载蚤曾蚤葬灶早澡藻贼葬燥爷冤 铁核桃实生选育 云南保山市昌宁县
员员 华宁大白壳渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶匀怎葬灶蚤灶早凿葬遭葬蚤噪藻爷冤 铁核桃实生选育 云南玉溪市华宁县
员圆 华宁大砂壳渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶匀怎葬灶蚤灶早凿葬泽澡葬噪藻爷冤 铁核桃实生选育 云南玉溪市华宁县
员猿 丽 缘猿渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶蕴蚤 缘猿爷冤 铁核桃实生选育 云南省林业科学院漾濞研究站
员源 永 员员渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶再燥灶早 员员爷冤 铁核桃实生选育 云南省林业科学院漾濞研究站
员缘 维 圆 号渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶宰藻蚤 圆爷冤 铁核桃实生选育 云南省林业科学院漾濞研究站
员远 漾江 员 号渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶再葬灶早躁蚤葬灶早 员爷冤 铁核桃实生选育 云南省漾濞县
员苑 泸 员 号渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶蕴怎 员爷冤 铁核桃实生选育 云南省怒江州泸水县
摇 摇 注院新疆早实核桃渊允援 则藻早蚤葬 蕴援 冤袁三台核桃渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶杂葬灶贼葬蚤澡藻贼葬燥爷冤袁娘青核桃渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 耶晕蚤葬灶早择蚤灶早澡藻贼葬燥爷冤袁铁核桃渊允援 泽蚤早蚤造造葬贼葬 阅燥凿藻冤袁
新疆早实核桃云林 粤苑 号渊允援 则藻早蚤葬 耶再怎灶造蚤灶 粤苑爷冤袁新疆早实核桃新早 员猿 号渊允援 则藻早蚤葬 耶载蚤灶扎葬燥 员猿爷冤遥
员援 圆摇 试验方法
员援 圆援 员摇 总 阅晕粤 制备 摇 采用改良 悦栽粤月 法袁从准备
好的核桃枝条韧皮部中提取总 阅晕粤咱员园暂 遥 称取 缘园
皂早 材料袁在液氮中研磨成细粉状袁立即装入预先加
入 员 皂蕴含有 孕灾孕源园尧茁鄄巯基乙醇和偏重亚硫酸钠的
悦栽粤月提取缓冲液的 员郾 缘 皂蕴离心管中袁混匀袁源 益下
猿 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 源 皂蚤灶遥 弃上清液袁加入 苑园园 滋蕴
经过 远缘 益预热的 悦栽粤月袁混匀袁远缘 益水浴 猿园 皂蚤灶袁期
间颠倒混匀若干次遥 水浴完成后袁加入等体积氯仿
颐异戊醇渊圆源颐 员袁灾 辕 灾冤袁颠倒混匀遥 员圆 园园园 则窑皂蚤灶 原员
离心 员缘 皂蚤灶袁取上清液袁加入等体积的氯仿 颐 异戊
醇袁颠倒混匀袁动作要轻遥 源 益下 员圆 园园园 则窑皂蚤灶 原员离
园怨员
第 圆 期 宁德鲁等院云南省核桃品种遗传多样性的 云陨杂匀鄄粤云蕴孕分析
心 员缘 皂蚤灶袁转上清液于新的 员郾 缘 皂蕴 离心管中袁加入
圆 辕 猿 体积预冷的异丙醇袁混匀袁静置 猿园 皂蚤灶袁源 益下 员圆
园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员缘 皂蚤灶袁弃上清袁用 苑园豫乙醇漂洗
圆 次袁室温风干袁加入 源园园 滋蕴 栽耘渊员园 皂皂燥造窑蕴 原员 栽则蚤泽鄄
匀悦造袁责匀 值 愿郾 园曰员 皂皂燥造窑蕴 原员 耘阅栽粤冤遥 加入 砸晕葬泽藻
液渊员园 皂早窑皂蕴 原员冤员缘 滋蕴袁猿苑 益水浴 猿园 皂蚤灶遥 加入等
体积的苯酚 颐 氯仿渊员 颐 员袁灾 辕 灾冤袁源 益下 员圆 园园园 则窑
皂蚤灶 原员离心 员缘 皂蚤灶袁取上清液袁再加入等体积的氯仿
颐异戊醇袁源 益下 员圆 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园 皂蚤灶袁取上
清液遥 加入 员 辕 员园 体积 猿 皂燥造窑 蕴 原员 晕葬粤糟 渊 责匀 值
缘郾 圆冤袁圆 倍体积预冷的无水乙醇轻轻混匀袁静置 圆园
皂蚤灶袁源 益下 员圆 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员缘 皂蚤灶袁弃上清袁
苑园豫乙醇漂洗 圆 次袁室温风干后加 缘园 滋蕴 栽耘渊责匀 值
愿郾 园冤溶解袁 原 圆园 益冰箱保存备用遥
员援 圆援 圆摇 云陨杂匀鄄粤云蕴孕 分析摇 参照北京鼎国生物技术
公司的 云陨杂匀 原 粤云蕴孕试剂盒及其操作指南进行遥
员援 圆援 猿摇 电泳与数据分析 摇 选择扩增后的样品在
粤月陨 猿苑苑 自动测序仪上电泳分离检测袁得到 云陨杂匀鄄
粤云蕴孕的 阅晕粤指纹图谱遥 利用 郧藻灶藻杂糟葬灶 猿郾 员 软件将
员苑 个材料 愿 对荧光引物产生的电泳胶图转换为野园 辕
员冶矩阵渊即按照凝胶上不同材料同一位置带的有无
进行统计袁有带记为野员冶袁无带记为野园冶冤遥 用 晕栽鄄
杂再杂责糟鄄圆郾 员员云 软件进行数据分析遥 对原始矩阵用
杂蚤皂匝怎葬造程序求 阅陨悦耘相似系数袁并获得相似系数矩
阵遥 用 杂匀粤晕 程序中的非加权算术平均法渊哉孕郧鄄
酝粤冤进行聚类分析袁并通过 栽则藻藻 责造燥贼 模块生成聚类
图遥 使用 孕韵孕郧耘晕耘猿圆 增藻则泽蚤燥灶 员郾 猿圆 软件计算多态性
比例 孕孕月渊责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 遭葬灶凿泽冤遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 多态性分析
本研究选用六碱基内切酶 耘糟燥砸 陨 和四碱基内
切酶 酝泽藻 陨对基因组 阅晕粤 进行双酶切袁然后与接头
连接曰用 愿 对 耘 垣 猿 辕 酝 垣 猿 引物组合进行选择性扩
增袁获得了较好的扩增结果渊表 圆袁图 员冤遥 由表 圆 可
见院愿 对引物组合共扩增出 怨愿苑 条带袁其中 怨源圆 条带
是多态性条带袁平均多态性比例为 怨缘郾 源源豫 袁这表明
员苑 份核桃品种渊无性系冤具有较高比例的多态性条
带遥 其中袁引物组合 耘鄄粤粤悦 辕 酝鄄悦栽悦 所检测的 员员苑
条带均为多态性条带袁多态性比例为 员园园豫 曰引物组
合 耘鄄粤悦郧 辕 酝鄄悦栽粤 所获得的总条带数最多渊图 员冤袁
为 员缘愿 条带袁但多态性比例在选用的 愿 对引物中最
低袁为 怨猿郾 远苑豫 遥 可见袁云陨杂匀鄄粤云蕴孕 检测核桃品种遗
传多样性的效率很高袁也充分体现了分析材料具有
较高的遗传多样性遥
表 圆摇 愿 对引物的扩增结果及条带多态性
序号 引物对 总条带数 辕条 共有带 辕条 多态性带 辕条 多态性比例 辕 豫
猿鄄缘 耘鄄粤粤悦 辕 酝鄄悦栽粤 员圆愿 员员 员员苑 怨员援 源员
猿鄄远 耘鄄粤粤悦 辕 酝鄄悦栽悦 员员苑 园 员员苑 员园园援 园园
远鄄员 耘鄄粤悦栽 辕 酝鄄悦粤粤 员员愿 苑 员员员 怨源援 园苑
远鄄苑 耘鄄粤悦栽 辕 酝鄄悦栽郧 员猿员 愿 员圆猿 怨猿援 愿怨
远鄄愿 耘鄄粤悦栽 辕 酝鄄悦栽栽 员园远 员 员园缘 怨怨援 园远
愿鄄圆 耘鄄粤悦郧 辕 酝鄄悦粤悦 员员远 缘 员员员 怨缘援 远怨
愿鄄缘 耘鄄粤悦郧 辕 酝鄄悦栽粤 员缘愿 员园 员源愿 怨猿援 远苑
愿鄄远 耘鄄粤悦郧 辕 酝鄄悦栽悦 员员猿 猿 员员园 怨苑援 猿缘
合计 怨愿苑 源缘 怨源圆
平均 员圆猿援 猿愿 缘援 远猿 员员苑援 苑缘 怨缘援 源源
圆援 圆摇 供试核桃品种的遗传关系
圆援 圆援 员摇 遗传关系分析摇 员苑 份供试核桃样品的遗传
相似系数范围为 园郾 远园远 怨 园郾 苑怨远 源袁 平均为
园郾 苑猿源 怨袁其中袁云新云林和云新 猿园员 之间的遗传相
似系数最大袁为 园郾 苑怨远 源袁表明 圆 个品种之间的亲缘
关系较近曰而云新 猿园远 和丽 缘猿 之间的遗传相似系数
最小袁为 园郾 远园远 怨袁表明这 圆 个品种之间的亲缘关系
较远遥
圆援 圆援 圆摇 聚类分析摇 用 晕栽杂再杂责糟鄄圆援 员员云 软件进行数
据分析获得相似系数矩阵后袁用 杂匀粤晕 程序中的
哉孕郧酝粤方法进行聚类分析袁并通过 栽则藻藻 责造燥贼模块生
成聚类图渊图 圆冤遥
从图 圆 中可以看出院供试样品的相似系数为
园郾 远源 园郾 愿园遥 当阈值为 园郾 远源 时袁可将 员苑 个供试样
品分成 圆 个 粤云蕴孕群渊简称 粤郧冤曰粤郧员 仅含有一个核
桃品种要要要丽 缘猿袁为云南省林业科学院经济林研究
所通过实生选育出的优良无性系袁树势较强袁抗逆性
强袁树冠圆头形袁分枝力强袁坚果近圆球形袁种壳刻纹
浅较光滑袁缝合线微隆起袁紧密遥 另一个 粤云蕴孕 群
粤郧圆 则囊括了其他 员远 个核桃品种遥 当阈值为 园郾 苑猿
员怨员
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆源 卷
时袁可将 粤郧圆 分为 远 个组渊分别标记为玉 遇冤袁其
中袁域尧芋尧吁尧遇组各包含 员 个品种袁分别为云新高
原尧细香核桃尧云新 猿园猿 和漾杂 圆 号遥 员苑 个研究材料
中袁由铁核桃实生选育的品种共有 怨 个袁除丽 缘猿 归
入 粤郧员 外袁其余 愿 个品种中漾濞泡核桃尧永 员员尧漾江
员 号尧泸 员 号尧华宁大白壳尧华宁大砂壳 远 个品种聚在
玉组袁品种细香核桃单独分为芋组袁维 圆 号与杂交品
种云新 猿园远渊三台核桃 伊新疆早实核桃冤聚在郁组遥
相同父母本的杂交品种漾杂 员 猿 号渊漾濞泡核桃
伊娘青核桃冤袁除漾杂 员 号和漾杂 猿 号归入玉组外袁
漾杂 圆 号单独分为遇组遥 由此可见袁即使同为实生
选育的铁核桃品种或相同父母本的杂交品种袁可能
由于云南核桃品种遗传基础较为丰富袁具有比较丰
富的遗传变异袁故而在基因组水平上仍表现出可检
测到的较大差异遥
猿摇 结论与讨论
本次实验采用 云陨杂匀鄄粤云蕴孕技术袁选用 愿 对 耘 垣 猿
和 酝 垣猿 引物组合首次对云南省 员苑 个审渊认冤定核
桃品种渊无性系冤进行了总基因组 阅晕粤 水平上的检
测袁共获得 怨源圆 条多态性条带袁多态性带百分率达
怨缘援 源源豫 遥
陈少瑜等咱苑暂用 砸粤孕阅 和 陨杂杂砸 标记对云南省 造员
个核桃品种进行的研究中袁圆 种标记方法检测出的
总条带数尧多态条带数分别为 愿远尧缘猿 条和 员园圆尧远圆
条袁多态条带百分率分别为 远员郾 远猿豫和 远园郾 苑愿豫 袁二
者相近袁但 陨杂杂砸标记检测出的总条带数和多态性带 图 员摇 引物组合为 耘鄄粤悦郧 辕 酝鄄悦栽粤扩增出的部分核桃品种的云陨杂匀鄄粤蕴云孕电泳图谱
图 圆摇 云南省 员苑 个审渊认冤定核桃品种 云陨杂匀鄄粤云蕴孕分析聚类树状图
圆怨员
第 圆 期 宁德鲁等院云南省核桃品种遗传多样性的 云陨杂匀鄄粤云蕴孕分析
数更多些袁即 陨杂杂砸标记可以揭示更为丰富的遗传信
息遥 本研究每对引物平均获得的总条带数尧多态性
带数分别为 员圆猿 和 员员愿 条袁表现出更高的检测效率袁
说明 云陨杂匀鄄粤云蕴孕方法得到的信息量较大袁是一种较
好的用于分析遗传多态性和指纹图谱分析的标记方
法遥 金强等咱员源暂用筛选出的 苑 对 粤云蕴孕多态性引物对
取自新疆温宿尧巩留尧和田尧若羌尧叶城尧库车尧阿拉尔
的 员圆圆 份核桃种质材料进行扩增袁共获得 圆员 怨愿怨 条
谱带袁其中 愿 愿员园 条具有多态性袁平均多态性检出率
为 源园援 员豫 袁遗传相似系数范围为 园郾 员圆园 园 园郾 怨猿员 园遥
本研究遗传相似系数为 园郾 远园远 怨 园郾 苑怨远 源袁平均为
园郾 苑猿源 怨袁遗传相似系数相对较高袁可能是因为供试
材料中的品种是由铁核桃类群实生选育或以铁核桃
类群的品种为母本进行杂交选育而成袁相互之间的
亲缘关系相对较近的缘故遥 本研究中使用的引物
耘鄄粤粤悦 辕 酝鄄悦栽悦尧耘鄄粤悦栽 辕 酝鄄悦栽郧 在王林咱员圆暂对核桃的
研究中也得到了很好的扩增效果袁同时郭金剑等咱员猿暂
对山核桃渊悦葬则赠葬 糟葬贼澡葬赠藻灶泽蚤泽 杂葬则早援 冤的研究中用 耘鄄
粤悦栽 辕 酝鄄悦栽郧也得到了很好的扩增效果遥 这说明某
些引物在核桃的相关 粤云蕴孕 研究中具有一定通
用性遥
核桃在云南省自然分布极为广泛袁云南省 员圆源
个县市都有核桃的分布和种植袁且核桃属植物的花
是风媒花袁虽然雌雄花同株袁但雌雄异熟袁多异交袁而
云南省地形复杂尧气候条件多样袁在生态环境多样性
条件下袁核桃经长期的异花授粉和自然选择袁其遗传
背景比较复杂咱员苑暂 遥 本研究中也发现同为实生选育
的铁核桃品种或相同父母本的杂交品种却聚在不同
的组中遥 核桃遗传多样性研究是核桃种质资源保护
及开发利用的基础袁对当前核桃种质资源的遗传多
样性进行准确的评价可以为亲本选配尧后代遗传变
异程度及杂种优势水平的预测提供预见性的指导袁
这是关系到育种目标能否成功实现的关键遥 系统地
对核桃品种资源进行调查收集尧保存和分类袁并且对
其主要经济性状深入考察研究袁对云南省乃至中国
地区核桃种质资源的分类尧人工选育优良品种及杂
交育种袁改造核桃低产区具有重要的实际意义遥
参考文献院
咱员暂 陆摇 斌援 云南核桃的特性与品质咱 允暂 援 经济林研究袁圆园园怨袁 圆苑
渊圆冤院 员猿苑 原 员源园
咱圆暂 杨自湘袁奚声珂援 胡桃属十种植物的过氧化物同功酶分析咱 允暂 援
植物分类学报袁员怨愿怨袁 圆苑渊员冤院 缘猿 原 缘苑
咱猿暂 吴燕民袁裴摇 东袁奚声柯援 运用 砸粤孕阅对核桃属种间亲缘关系的
研究咱允暂 援 园艺学报袁圆园园园袁 圆苑渊员冤院 造苑 原 圆圆
咱源暂 张日清袁吕芳德袁谭晓风袁等援 美国山核桃主要栽培品种的 砸粤孕阅
鉴定咱允暂 援经济林研究袁圆园园源袁 圆圆渊源冤院 员 原 缘
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