全 文 ：林业科学研究摇 圆园员猿袁圆远渊源冤院源缘源 源缘愿云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员猿冤园源鄄园源缘源鄄园缘
华北落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究
韩登媛袁 李摇 旦袁 赵摇 健袁 李摇 慧袁 张金凤鄢
渊林木育种国家工程实验室 辕林木尧花卉遗传育种教育部重点实验室 辕 国家林业局树木花卉育种与
生物工程重点开放实验室 辕北京林业大学生物科学与技术学院袁北京摇 员园园园愿猿冤
收稿日期院 圆园员猿鄄园圆鄄圆愿
基金项目院 国家自然科学基金项目野科研训练及科研能力提高项目冶渊允员员园猿缘员远冤曰国家林业局林业公益性行业专项野重要乡土树种核心
种质评价及高效育种共性技术研究冶 渊圆园员园园源园园怨冤冶曰北京市与中央在京高校共建项目野华北落叶松遗传资源收集评价及新品种选育
渊郧允圆园员员鄄圆冤冶
作者简介院 韩登媛渊员怨愿愿要冤袁女袁陕西人袁在读硕士袁主要从事植物遗传育种方向研究遥 耘鄄皂葬蚤造院澡葬灶凿藻灶早圆园园苑岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
鄢 通讯作者院张金凤渊员怨远源要冤袁女袁内蒙古人袁教授袁博士袁主要研究针叶树良种繁育遥 耘鄄皂葬蚤造院扎躁枣岳 遭躁枣怎援 藻凿怎援 糟灶
摘要院以成熟合子胚为外植体袁用完全随机尧正交设计等试验方法加之组培技术来研究影响华北落叶松渊蕴葬则蚤曾 责则蚤灶糟蚤鄄
责蚤泽鄄则怎责责则藻糟澡贼蚤蚤冤胚性愈伤组织诱导的几种主要因子遥 结果表明院诱导胚性愈伤组织过程中的最佳灭菌方式为 圆豫 晕葬鄄
悦造韵灭菌 猿园 皂蚤灶袁剥皮尧去胚乳处理遥 其中污染率和 晕葬悦造韵的灭菌时间呈负相关院晕葬悦造韵灭菌时间越长袁污染率越低遥
诱导胚性愈伤组织的最佳琼脂浓度为 源 早窑蕴 原员袁且过高和过低的琼脂浓度不仅降低了其诱导率袁提高了愈伤组织的
褐化水平袁也影响了外植体的发育形态遥 外源激素的正交试验结果表明院圆袁源鄄阅 是主要影响因子袁对诱导率的影响
显著袁其次是 运栽袁最后是 远鄄月粤遥 最佳的植物外源激素配比是 圆袁源鄄阅 员郾 愿 皂早窑蕴 原员 垣 远鄄月粤 园郾 猿 皂早窑蕴 原员 垣 运栽 园郾 猿 皂早
窑蕴 原员遥
关键词院华北落叶松曰体细胞胚胎发生曰诱导曰培养基曰胚性愈伤组织
中图分类号院杂苑圆圆援 猿 文献标识码院粤
云葬糟贼燥则泽 粤枣枣藻糟贼蚤灶早 陨灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 耘皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 悦葬造造怎泽 燥枣
蕴葬则蚤曾 责则蚤灶糟蚤责蚤泽鄄则怎责责则藻糟澡贼蚤蚤
匀粤晕 阅藻灶早鄄赠怎葬灶袁 蕴陨 阅葬灶袁 在匀粤韵 允蚤葬灶袁 蕴陨 匀怎蚤袁 在匀粤晕郧 允蚤灶鄄枣藻灶早
渊晕葬贼蚤燥灶葬造 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 枣燥则 栽则藻藻 月则藻藻凿蚤灶早 辕 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 郧藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 月则藻藻凿蚤灶早 蚤灶 云燥则藻泽贼 栽则藻藻泽 葬灶凿 韵则灶葬皂藻灶贼葬造 孕造葬灶贼泽袁
酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 耘凿怎糟葬贼蚤燥灶 辕 栽澡藻 栽则藻藻 葬灶凿 韵则灶葬皂藻灶贼葬造 孕造葬灶贼 月则藻藻凿蚤灶早 葬灶凿 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 杂贼葬贼藻 云燥则藻泽贼则赠 粤凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶 辕 悦燥造造藻早藻 燥枣
月蚤燥造燥早蚤糟葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 月藻蚤躁蚤灶早 云燥则藻泽贼则赠 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园愿猿袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽葬噪蚤灶早 皂葬贼怎则藻 扎赠早燥贼蚤糟 藻皂遭则赠燥泽 燥枣 蕴葬则蚤曾 责则蚤灶糟蚤责蚤泽鄄则怎责责则藻糟澡贼蚤蚤 葬泽 藻曾责造葬灶贼泽 贼燥 蚤灶凿怎糟藻 藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造怎泽援
杂藻增藻则葬造 枣葬糟贼燥则泽 蚤灶枣造怎藻灶糟蚤灶早 贼澡藻 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 憎藻则藻 葬泽泽葬赠藻凿 遭赠 怎泽蚤灶早 糟燥皂责造藻贼藻造赠 则葬灶凿燥皂 凿藻泽蚤早灶袁 燥则贼澡燥早燥灶葬造 凿藻泽蚤早灶 贼燥早藻贼澡藻则
憎蚤贼澡 贼蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻 贼藻糟澡灶燥造燥早赠 蚤灶 燥则凿藻则 贼燥 藻曾责造燥则藻 藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 蚤灶 贼澡藻 藻葬则造赠 泽贼葬早藻 蚤灶 造葬则糟澡 葬灶凿 燥责贼蚤鄄
皂蚤扎藻 蚤贼泽 泽燥皂葬贼蚤糟 藻皂遭则赠燥早藻灶藻泽蚤泽 泽赠泽贼藻皂援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎 贼澡葬贼 贼澡藻 遭藻泽贼 憎葬赠 燥枣 凿蚤泽蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 凿怎则蚤灶早 贼澡藻 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 藻皂鄄
遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造怎泽 蚤泽 责藻藻造蚤灶早袁 则藻皂燥增蚤灶早 藻灶凿燥泽责藻则皂 葬枣贼藻则 凿蚤泽蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 燥枣 猿园 皂蚤灶怎贼藻泽 憎蚤贼澡 圆豫 晕葬悦造韵援 栽澡藻 糟燥灶贼葬皂蚤灶葬鄄
贼蚤燥灶 则葬贼藻 葬灶凿 凿蚤泽蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 贼蚤皂藻 葬则藻 灶藻早葬贼蚤增藻造赠 糟燥则则藻造葬贼藻凿院 贼澡藻 造燥灶早藻则 贼澡藻 泽贼藻则蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 贼蚤皂藻袁 贼澡藻 造燥憎藻则 贼澡藻 糟燥灶贼葬皂蚤灶葬贼蚤燥灶
则葬贼藻援 栽澡藻 燥责贼蚤皂葬造 葬早葬则 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 蚤泽 源 早窑蕴 原员袁 葬灶凿 贼澡藻 澡蚤早澡藻则 燥则 造燥憎藻则 燥枣 贼澡藻
葬早葬则 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 憎蚤造造 灶燥贼 燥灶造赠 则藻凿怎糟藻 贼澡藻 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 则葬贼藻袁 蚤灶糟则藻葬泽藻 贼澡藻 造藻增藻造 燥枣 糟葬造造怎泽 遭则燥憎灶蚤灶早袁 遭怎贼 葬造泽燥 葬枣枣藻糟贼 贼澡藻
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 藻曾责造葬灶贼泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 燥则贼澡燥早燥灶葬造 凿藻泽蚤早灶 枣燥则 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 藻曾燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻 泽澡燥憎 贼澡葬贼 贼澡藻 圆袁源鄄阅 蚤泽
贼澡藻 噪藻赠 枣葬糟贼燥则 葬灶凿 澡葬泽 葬 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 蚤灶枣造怎藻灶糟藻袁 枣燥造造燥憎藻凿 蚤泽 运栽 葬灶凿 远鄄月粤援 栽澡藻 遭藻泽贼 糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶 燥枣 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 藻曾燥早鄄
藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻 蚤泽 圆袁源鄄阅 员郾 愿 皂早窑蕴 原员 垣 远鄄月粤 园郾 猿 皂早窑蕴 原员 垣 运栽 园郾 猿 皂早窑蕴 原员 援
运藻赠 憎燥则凿泽院 蕴葬则蚤曾 责则蚤灶糟蚤责蚤泽鄄则怎责责则藻糟澡贼蚤蚤曰 泽燥皂葬贼蚤糟 藻皂遭则赠燥早藻灶藻泽蚤泽曰 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶曰 糟怎造贼怎则藻 皂藻凿蚤怎皂曰 藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造怎泽
第 源 期 韩登媛等院华北落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究
华北落叶松渊蕴葬则蚤曾 责则蚤灶糟蚤责蚤泽鄄则怎责责则藻糟澡贼蚤蚤 酝葬赠则援 冤为
松科落叶松属植物袁是我国主要的速生用材树种和
绿化树种咱员暂 遥 近年来华北落叶松的人工造林面积日
益扩大袁对其优良种质资源的需求也越来越多遥
目前虽然已建立了一些种子园和母树林袁但华
北落叶松人工林仍需 源园 远园 葬才到结实龄袁球果出
种率低渊仅为 圆豫 源豫 冤袁大小年现象严重袁种子产
量不稳定袁并且种子具中等休眠特性袁给良种应用和
实生繁殖带来一定的困难咱圆 原 远暂 遥 依托体胚培养的无
性快繁技术袁可以克服传统育种的缺点袁最大程度地
保持优树的遗传增益遥 对于华北落叶松体胚发生的
研究袁国外尚未见报道遥 国内有齐力旺等咱苑 原 愿暂对华
北落叶松未成熟胚做过体胚发生的一些研究袁但是
以成熟胚作为外植体的研究迄今尚未查找到相关报
导遥 采用成熟胚袁具有取材方便容易袁不受时间地点
限制等优点袁具有大规模产业化的潜力遥 本研究以
低价袁环境污染小的 晕葬悦造韵代替以往的 匀早悦造圆 灭菌袁
通过诱导成熟合子胚体细胞胚性愈伤组织的研究袁
为华北落叶松的体胚研究提供初步的试验支撑遥 本
研究的结果将有助于华北落叶松体胚研究的进一步
深入袁具有很好的实用价值遥
员摇 材料和方法
员援 员摇 试验材料
成熟种子购于河北承德落叶松基地渊千粒质量
猿郾 愿 源郾 圆 早冤室温放置备用遥 琼脂购于北京宏宝达
生物科技有限公司袁产地 杂蚤早皂葬袁凝胶强度大于 怨园园 早
窑糟皂 原圆遥
员援 圆摇 试验方法
员援 圆援 员摇 外植体处理摇 将种子先用洗涤液清洗后用
水冲洗干净并浸泡至充分吸胀渊源 远 澡冤袁后在超净
工作台上用 苑园豫的酒精处理 员 皂蚤灶 后做如下处理院
员尧分别用 圆豫 晕葬悦造韵 溶液灭菌处理 员园尧圆园尧猿园尧源园
皂蚤灶曰圆尧将上述处理种子用无菌水冲洗 猿 次后分别按
照以下设置处理渊员冤不剥种皮只划伤到胚渊 孕粤冤袁
渊圆冤剥去种皮袁留下胚和胚乳并划伤到胚渊孕月冤袁渊猿冤
剥去种皮并去掉胚乳袁留下胚渊孕悦冤遥 把处理后的种
子接种到添加 员郾 愿 皂早窑蕴 原员的 圆袁 源鄄阅尧园郾 远 皂早窑蕴 原员
的 月粤和 园郾 远 皂早窑蕴 原员的 运栽 的 杂 培养基咱远 原 苑暂中培
养遥 重复 猿 次袁每次 圆园 个外植体遥 苑 凿 后统计污染
率袁圆员 凿时统计胚的存活率遥
员援 圆援 圆摇 琼脂浓度试验摇 将成熟种子的外植体袁接种
于添加 员郾 愿 皂早窑蕴 原员的 圆袁 源鄄阅尧园郾 远 皂早窑蕴 原员的 月粤
和 园郾 远 皂早窑蕴 原员的 运栽的 杂培养基中袁 琼脂浓度分别
为 猿尧源尧缘尧远尧苑 早窑蕴 原员袁重复 猿 次袁每次 圆园 个外植体遥
其中琼脂产于 杂蚤早皂葬袁凝胶强度大于 怨园园 早窑糟皂 原圆遥
员援 圆援 猿 摇 外源激素浓度试验 摇 以 杂 为基本培养基袁
外源激素种类和浓度组合采用正交设计 蕴员远 渊源缘 冤渊表 员冤袁共 员远 个处理袁另外设置 员 个空白对照遥 圆园 凿
后统计胚性愈伤组织诱导率并进行分析遥 重复 猿
次袁每次 员缘 个外植体遥
表 员摇 正交试验因素及水平 蕴员远渊源缘冤
水平渊外源激素浓度冤 辕
渊皂早窑蕴 原员 冤
因素渊外源激素种类冤
圆袁 源鄄阅 远鄄月粤 运栽
员 园援 远 园摇 园摇
圆 员援 圆 园援 猿 园援 猿
猿 员援 愿 园援 远 园援 远
源 圆援 源 园援 怨 园援 怨
摇 摇 以上培养基均添加 员 园园园 皂早窑蕴 原员肌醇袁源缘园 皂早
窑蕴 原员的 蕴圆 谷氨酰胺袁缘园园 皂早窑蕴 原员水解酪蛋白袁猿园
早窑蕴 原员蔗糖袁琼脂浓度为 源 早窑蕴 原员袁培养在渊圆猿 依
圆冤益袁责匀值 缘援 苑 缘援 愿袁相对湿度 源园豫 苑园豫 袁用遮
光布遮住进行暗培养遥 圆员 凿 左右继代 员 次袁继代增
殖培养基分别以原培养基外源激素浓度的 员 辕 圆尧员 辕
缘尧员 辕 员园 的顺序递减遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 形态学和细胞学观察
初取出的胚体积比较小袁在培养基中培养 员 凿
后袁胚吸收水分和营养物质袁体积明显变大袁表面仍
保持光滑渊图 员葬冤曰培养 猿 凿 后袁外植体明显膨大袁表
面开始变得不如之前光滑渊图 员遭冤曰培养 缘 员园 凿
后袁先后从胚根尧胚轴尧子叶基部袁产生乳白色透明尧
半透明粘状组织渊图 员糟冤曰 员缘 凿 后部分愈伤组织表
面产生白色袁透明丝状组织渊图 员凿冤曰培养 圆员 凿袁根据
愈伤组织的形态可区分出非胚性愈伤组织和胚性愈
伤组织遥 非胚性愈伤组织院表面光滑袁颗粒状袁黄褐
色或棕褐色袁表面没有丝状组织产生渊图 员凿冤曰 胚性
愈伤组织院胚轴和子叶基部产生白色略黄袁透明尧半
透明丝状愈伤组织袁结构松软袁继代培养增殖较快
渊图 员藻冤袁在解剖镜下可观察丝状突起渊图 员枣冤曰在显
微镜下袁可见细胞核大袁细胞质浓厚渊图 员早冤遥 这就
是在松柏类植物组织培养中常提到的胚性胚柄团
渊耘皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 杂怎泽责藻灶泽燥则 酝葬泽泽袁 耘杂酝冤袁即胚性愈伤
组织遥
缘缘源
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
葬院 培养 员 凿的成熟合子胚曰遭院 培养 猿 凿的成熟合子胚曰糟院 培养 员缘 凿的成熟合子胚曰凿院 非胚性愈伤组织曰
藻院 胚性愈伤组织曰枣院 丝状突起曰 早院胚性细胞渊员园园 伊 冤曰澡尧蚤院 远尧苑 早窑蕴 原员琼脂上的种子褐化严重
图 员摇 合子胚发育观察图
圆援 圆摇 数据统计分析
圆援 圆援 员摇 外植体处理摇 通过对 猿 缘 凿外植体污染情
况的观察袁和 圆员 凿后胚成活的观察袁制作成表格渊表
圆冤遥 可以看出采取 孕粤 处理的不论 圆豫 晕葬悦造韵 灭菌
多长时间污染率都为 员园园豫 袁而 孕月 处理的污染率也
都在 远园豫以上袁只有 孕悦 处理的外植体随灭菌时间
的增长污染率在逐渐降低袁最终达到 缘豫 遥 而且由
此可见在种皮和胚乳之间的空隙有很多内生菌遥 值
得注意的是灭菌时间在 员园 皂蚤灶 和 圆园 皂蚤灶 时袁孕月 处
理的部分外植体出现在 猿 缘 凿 观察没有长菌袁在
员园 凿左右时没有长愈伤组织袁而从外植体周围开始
长菌的现象遥 移出同瓶中没有长菌而长愈伤的外植
体到新的培养瓶中袁可以继续生长袁而 孕悦 处理的没
有这一现象遥 说明胚乳层也有内生菌袁而胚和愈伤
组织有一定的抑菌效果遥 从不同处理方法下的胚成
活率和胚成活活性可以看出种子的活性相对比而言
还是比较高的袁可以达到 愿缘郾 苑员豫 遥
表 圆摇 灭菌试验结果
种子处理时间 辕 皂蚤灶 外植体数 辕个 污染数 辕个 胚成活数 辕个 污染率 辕 豫 胚成活率 辕 豫 胚成活活性 辕 豫
栽员 员园渊孕粤冤 远园 远园 园 员园园 园 要
栽圆 员园渊孕月冤 远园 缘猿 源 愿愿援 猿猿 远援 远苑 缘苑援 员源
栽猿 员园渊孕悦冤 远园 员远 圆怨 圆远援 远苑 源愿援 猿猿 缘缘援 愿愿
栽源 圆园渊孕粤冤 远园 远园 园 员园园 园 要
栽缘 圆园渊孕月冤 远园 源缘 员园 苑缘 员远援 远苑 远远援 远苑
栽远 圆园渊孕悦冤 远园 怨 源猿 员缘 苑员援 远苑 愿源援 猿员
栽苑 猿园渊孕粤冤 远园 远园 园 员园园 园 要
栽愿 猿园渊孕月冤 远园 源远 员园 苑远援 远苑 员远援 远苑 苑员援 源猿
栽怨 猿园渊孕悦冤 远园 源 源愿 远援 苑 愿园 愿缘援 苑员
栽员园 源园渊孕粤冤 远园 远园 园 员园园 园 要
栽员员 源园渊孕月冤 远园 猿愿 员猿 远猿援 猿猿 圆员援 远苑 缘怨援 员
栽员圆 源园渊孕悦冤 远园 猿 源远 缘 苑远援 远苑 愿园援 苑
进一步通过方差分析可以判断灭菌处理方法间
差异极显著遥 而 阅怎灶糟葬灶 多重比较则表明 栽员圆 跃 栽怨
跃 栽远遥 所以袁就降低污染率而言袁栽员圆 处理最好遥 在
以上的处理中虽然 栽员圆 的污染率比 栽怨 低袁但是 栽怨
远缘源
第 源 期 韩登媛等院华北落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究
渊圆豫晕葬悦造韵灭菌 猿园 皂蚤灶 后剥去种皮袁去掉胚乳冤胚
的成活率和种子的成活活性都是最高的袁就诱导愈
伤组织而言这种处理方法最好遥 以后的试验均是在
栽怨 处理下完成的遥
圆援 圆援 圆摇 琼脂浓度试验摇 培养 苑 凿时观察袁猿尧源尧缘 早窑
蕴 原员明显产生乳白色透明尧半透明粘状组织袁且 源尧缘 早
窑蕴 原员较 猿 早窑蕴 原员多袁而 远尧苑 早窑蕴 原员则表现为子叶张
开袁胚轴比原来稍长遥 当 圆员 凿 时袁前 猿 种比较正常
产生愈伤组织袁而琼脂浓度为 远尧苑 早窑蕴 原员的培养基
中袁多数胚轴伸长尧子叶张开袁只有一小部分从子
叶基部及胚根处长出晶状透明愈伤组织袁质感较硬
且随继代培养时间的延长褐化严重直至死亡渊图
员澡尧蚤冤遥 由图 圆 可以看出袁胚性愈伤组织诱导率最
高时袁琼脂的浓度为 源 早窑蕴 原员遥
进一步对其进行方差分析 孕 越 园郾 园远圆 猿 跃 园郾 园缘袁
显示不同处理间的差异不显著袁所以琼脂的浓度为
源 早窑蕴 原员结果最好遥
图 圆摇 琼脂浓度试验结果
圆援 圆援 猿摇 外源激素浓度试验摇 培养基所含的外源激
素的不同组合对华北落叶松合子胚胚性愈伤组织的
诱导有着明显的影响袁在不加任何外源激素的培养
基渊空白试验 园冤上培养时袁成熟胚胚轴伸长袁子叶伸
展袁并不进一步产生愈伤组织遥 而在添加外源激素
的培养基中培养的外植体变化明显袁且 圆袁 源鄄阅尧月粤尧
运栽的共同使用可显著提高诱导率袁如表 猿 所示遥
表 猿摇 外源激素试验结果
处理 外源激素组合 辕 渊皂早窑蕴 原员 冤圆袁源鄄阅 远鄄月粤 运栽 外植体总数 胚性愈伤组织个数 胚性愈伤组织得率 辕 豫
员 园援 远 园 园 源缘 苑 园援 员远
圆 园援 远 园援 猿 园援 猿 源缘 员猿 园援 源猿
猿 园援 远 园援 远 园援 远 源缘 缘 园援 员苑
源 园援 远 园援 怨 园援 怨 源缘 源 园援 园怨
缘 员援 圆 园 园援 远 源缘 员远 园援 猿远
远 员援 圆 园援 猿 园援 怨 源缘 员苑 园援 猿愿
苑 员援 圆 园援 远 园 源缘 圆源 园援 缘猿
愿 员援 圆 园援 怨 园援 猿 源缘 圆圆 园援 源怨
怨 员援 愿 园 园援 怨 源缘 圆员 园援 源苑
员园 员援 愿 园援 猿 园援 远 源缘 圆猿 园援 缘员
员员 员援 愿 园援 远 园援 猿 源缘 圆园 园援 源源
员圆 员援 愿 园援 怨 园 源缘 员愿 园援 源园
员猿 圆援 源 园 园援 猿 源缘 员远 园援 猿远
员源 圆援 源 园援 猿 园 源缘 员愿 园援 源园
员缘 圆援 源 园援 远 园援 怨 源缘 员源 园援 猿员
员远 圆援 源 园援 怨 园援 远 源缘 员员 园援 圆源
对试验结果进行极差分析袁圆袁源鄄阅袁远鄄月粤袁运栽
的极差分别是 源郾 源圆园袁员郾 猿园愿袁员郾 猿猿园袁说明 圆袁源鄄阅 是
主要影响因子袁其次是 运栽袁最后是 远鄄月粤遥 从效应
曲线可以看出最好的处理是 圆袁源鄄阅 第三个水平尧远鄄
月粤第二个水平和 运栽 第二个水平组合袁也就是外
源激素浓度为 圆袁 源鄄阅 员郾 愿 皂早窑蕴 原员 垣 远鄄月粤 园郾 猿 皂早
窑蕴 原员 垣 运栽 园郾 猿 皂早窑蕴 原员处理诱导效果最好遥 为
此袁进行处理 员苑袁外植体接种于添加 圆袁 源鄄阅浓度为
员郾 愿 皂早窑蕴 原员尧远鄄月粤 浓度为 园郾 猿 皂早窑蕴 原员和 运栽 浓
度为 园郾 猿 皂早窑蕴 原员的 杂 培养基上袁重复 猿 次袁每次
员缘 个外植体袁结果显示其诱导率 缘缘郾 缘远豫 袁略大于
处理 苑袁证实了其为最佳处理遥 对试验进行方差分
析表明袁圆袁源鄄阅 对诱导率的影响显著袁其他因子不
显著遥 对 圆袁源鄄阅 进行多重比较袁显示水平三最佳袁
符合试验结果遥
苑缘源
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
猿摇 结论与讨论
猿郾 员摇 灭菌处理的影响
前人的研究表明袁不同的外植体灭菌处理方法
对其污染率和愈伤组织诱导有显著影响咱苑 原 怨暂 遥 大量
文献指出 匀早悦造圆 对外植体的灭菌效果好袁但因其有
剧毒作用袁灭菌后难除残毒遥 本试验选择 晕葬悦造韵 为
处理落叶松的灭菌剂袁其污染率可以降低到 缘豫 袁完
全可以达到试验要求遥 晕葬悦造韵能分解产生具有杀菌
能力的氯气袁易除去袁对环境的影响也较小袁又易购
买袁故选择 晕葬悦造韵为处理华北落叶松的灭菌剂遥
猿援 圆摇 琼脂浓度与胚性愈伤组织的诱导的关系
琼脂在诱导培养基中常用作凝胶剂袁前人的研
究中表明较高浓度的琼脂可降低试管苗玻璃化袁提
高水稻胚性愈伤组织分化率袁并改善胚性愈伤组织
块的质量袁而过高或过低的琼脂浓度则容易使继代
培养物褐化咱员园 原 员员 暂 遥 虽然方差分析表明琼脂的不同
浓度对胚性愈伤组织诱导的影响不显著袁但是在本
试验中发现琼脂浓度不同对胚性愈伤组织的产生有
很大的影响袁尤其是浓度过高明显使继代培养物褐
化严重遥 试验中还发现袁随着琼脂浓度的不同袁愈伤
组织产生的形态袁大小袁胚性愈伤组织的诱导率都有
很大的不同袁且其胚性愈伤组织的诱导率呈现一定
的分布趋势袁本试验以 源 早窑蕴 原员为最佳袁达到极限遥
猿援 猿摇 外源激素组合及浓度与胚性愈伤组织诱导的
关系
植物组织在离体培养条件下袁自生缺乏合成生
长素和细胞分裂素的能力袁因此袁在配制培养基中通
常要加入一定的植物外源激素调控植物组织脱分
化尧再分化形成再生植株遥 亦不例外袁在细胞的胚性
化过程中袁在培养基中适当的应用植物外源激素不
仅是成功诱导胚性愈伤组织的决定因素袁也是影响
体细胞胚诱导率的主要因子遥 据报道袁影响松树未
成熟胚胚性愈伤组织发生的主要外源激素有 圆袁 源鄄
阅尧月粤 和 运栽咱员圆 原 员源暂 遥 而本试验经方差分析只得出 圆袁
源鄄阅对华北落叶松成熟体细胞胚胚性愈伤组织诱导
具有显著作用袁而 月粤尧运栽 的作用并未达到显著水
平遥 这表明 圆袁源鄄阅是促进外植体细胞脱分化形成胚
性愈伤组织起主导作用的植物外源激素袁但是本研
究发现不可单独使用 圆袁源鄄阅袁只有三者的合理配合尧
相互作用才能使胚性愈伤组织的诱导率显著提高遥
最后经过极差分析袁得出试验所获得的最好结果应
为 圆袁 源鄄阅 员郾 愿 皂早窑蕴 原员 垣 远鄄月粤 园郾 猿 皂早窑蕴 原员 垣 运栽
园郾 猿 皂早窑蕴 原员的组合为最佳遥
参考文献院
咱员暂 李进军袁马存世援 华北落叶松生长分析咱 允暂 援 林业实用技术袁
圆园园愿渊员园冤院员园 原 员圆
咱圆暂 李建华袁田摇 军援 华北落叶松植苗造林关键技术探讨咱 允暂 援 林业
科技开发袁 圆园园苑袁圆员渊缘冤院怨缘 原 怨远
咱猿暂 杨秀云袁韩有志援 关帝山华北落叶松人工林细根生物量空间分
布及季节变化咱允暂 援 植物资源与环境学报袁 圆园园愿袁员苑渊源冤院猿苑 原 源园
咱源暂 王宏星袁孙晓梅袁陈东升袁等援甘肃小陇山日本落叶松人工林不同
发育阶段土壤理化性质的变化 咱 允暂 援 林业科学研究袁圆园员圆袁圆缘
渊猿冤院圆怨源 原 猿园员
咱缘暂 粤贼贼则藻藻 杂 酝袁阅怎灶泽贼葬灶 阅 陨袁云燥憎噪藻 蕴 悦援 孕造葬灶贼造藻贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 藻皂鄄
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