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Comparative Analysis of Salt Tolerance of Three Nitraria Species

3种白刺耐盐性的对比分析



全 文 :林业科学研究 2012,25(1):48 53
ForestResearch
  文章编号:10011498(2012)01004806
3种白刺耐盐性的对比分析
倪建伟,武 香,张华新,刘 涛,张 丽
(林木遗传育种国家重点实验室,中国林业科学研究院林业研究所,北京 100091)
收稿日期:20110418
基金项目:林业科技支撑计划专题“滨海盐碱地优良抗逆性植物材料选育技术研究(2009BADB2B0103)”;“渤海湾盐碱地防护林体系
高效配置与土壤生物改良技术研究(2009BADB2B0501)”
作者简介:倪建伟(1986—),男,河北任县人,在读硕士研究生,主要研究方向:林木遗传育种.
通讯作者:张华新,研究员,博士生导师.主要研究方向:林木遗传育种.
摘要:以2年生西伯利亚白刺、齿叶白刺和唐古特白刺苗为材料,设置0、100、200、300、400mmol·L-1NaCl5种盐浓
度开展胁迫试验,测定并对比分析其对盐胁迫的生长及生理生化响应。结果表明:低盐浓度处理促使白刺生长速度
和生物量增加、叶绿素含量增高,高盐浓度处理下这种促进作用降低;在100mmol·L-1的盐处理下,唐古特白刺、西
伯利亚白刺、齿叶白刺叶绿素含量均达最高,分别为072、078、061mg·g-1;在400mmol·L-1的盐处理下,唐古
特白刺、西伯利亚白刺、齿叶白刺生物量为最低,分别为1049、1242、1019g·株 -1,仅为对照的75% 79%;3种
白刺中,唐古特白刺的Na+/K+最高,施盐处理下西伯利亚白刺的Na+/K+均高于对照,而齿叶白刺则低于对照;随
着盐浓度的增加,3种白刺叶片中可溶性蛋白的含量递增,可溶性糖含量则先增后减;低盐浓度处理的唐古特和西
伯利亚白刺叶片中MDA含量比对照低,齿叶白刺却比对照高;3种白刺的 POD和 SOD活性在盐处理下高于对照,
其中唐古特白刺叶片中POD活性最低,齿叶白刺中SOD活性最高;3种白刺在盐胁迫下均能正常生长。
关键词:白刺;盐生植物;盐胁迫;耐盐机理;对比分析
中图分类号:S7223+6 文献标识码:A
ComparativeAnalysisofSaltToleranceofThreeNitrariaSpecies
NIJianwei,WUXiang,ZHANGHuaxin,LIUTao,ZHANGLi
(StateKeyLaboratoryofTreeGeneticsandBreedings,ResearchInstituteofForestry,ChineseAcademyofForestry,Beijing 100091,China)
Abstract:Inthisstudy,twoyearoldNitrariasibiricaPal.,N.tangutorumBobr.andN.roborowskiKom.were
usedasplantmaterial.Treatedbyfivesaltconcentrations(0,100,200,300and400mmol·L-1NaCl),the
physiologicalandbiochemicalresponsesofthesespeciesunderdiferentsaltstresswerecomparedandanalyzed.The
resultsshowedthatlowsaltconcentrationpromotedthegrowthofNitrariaandincreasedthebiomassandchlorophyl
contentwhiledecreasedathighconcentration.ThechlorophylcontentsofN.tangutorum,N.sibiricaandN.
roborowskiwerethehighestat100mmol·L-1saltconcentration,whichwererespectively072,078,and061
mg·g-1;ThebiomassofN.tangutorum,N.sibiricaandN.roborowskiwerethelowestat400mmol·L-1salt
concentration,whichwererespectively1049,1242,and1019g;Undersaltstress,themaximumcontentof
Na+/K+wasfoundinN.tangutorum.TheNa+/K+contentsofN.sibiricawerehigherthantheCKgroup,while
thatofN.roborowskiwaslowerthantheCKgroup.Withthesaltconcentrationincreased,thecontentofsoluble
sugarincreasedatinitialandthendecreased,andthesolubleproteinofalthethreeNitrariaspeciesincreased.In
thelowsaltconcentration,theMDAwashigherthantheCKgroupintheN.tangutorumandN.sibirica,whilethe
N.roborowkiwastheopposite.TheactivityofPODandSODwerehigherundersaltenvironment,theN.tanguto
rumhadlowestPODactivitywhiletheN.roborowskihadthehighestSODactivity.ThreeNitrariaspeciescanma
第1期 倪建伟等:3种白刺耐盐性的对比分析
intannormalgrowthinsalineenvironment.
Keywords:Nitraria;saltstress;halophytes;salttolerancemechanisms;comparison;analysis
我国土壤盐渍化面积较大,约占总耕地面积的
10%[1]。盐碱化的土壤不适合绝大多数植物生长,
通过工程措施直接对土壤进行改良不仅投入成本
高,效果难以长久保持,而通过选育适合当地生长
的、具有经济开发价值的耐盐植物对盐碱化土地进
行改良,可以持久有效地改善土壤,提高土地利
用率[2]。
白刺是具有多分枝、耐盐碱、耐干旱等特性的低
矮灌木。在我国沙漠及沿海地区广为存在[3],自然
生长于盐渍化坡梗高地、荒漠地区及泥质海滩丘垄
型裸地上,耐盐能力极强,能够有效改善土壤肥力,
为其他植物群落创造良好生存条件,是荒漠、半荒漠
和盐碱地的重要建群种[4-5]。白刺资源的开发利用
逐渐受到重视,如高航等[6]、王洪伦等[7]、白明生
等[8]研究了白刺果实和枝叶中含有的氨基酸、黄酮
类物质和生物碱等活性成分,鲁长征等[9]、刘松
涛[10]利用白刺果实研制出了白刺酒和白刺饮料。
在以往的研究中,一些学者研究了白刺的耐盐性,如
王秀娟等[11]、张胜景等[12]对西伯利亚白刺在盐胁
迫下的各种生理反应和耐盐性进行了初步研究;吴
春荣等[13]比较了不同白刺种在盐胁迫下的生长量;
闫永庆等[14]研究了白刺对不同浓度混合盐碱胁迫
的不同生理响应;然而有关不同白刺种在盐胁迫下
生长以及生理生化反应的综合对比分析尚未见报
道。本研究综合利用前人所常用的耐盐性指
标[15-17],测定、对比分析了唐古特白刺、西伯利亚白
刺和齿叶白刺在5种不同盐胁迫程度下的生长和生
理生化指标,以期探明这3种白刺各自的耐盐特性,
为今后筛选和培育耐盐性优良的白刺品种提供依
据,对开发白刺资源和利用植物改良盐碱地打下
基础[18-19]。
1 试验材料与方法
1.1 材料培养及盐胁迫处理
供试白刺为唐古特白刺(Nitrariatangutorum
Bobr.)、西伯利亚白刺(N.sibiricaPal.)和齿叶白
刺(N.roborowskiKom.),均为产自吉林白城的2年
生苗。
将3种白刺种植在30cm×30cm的塑料盆中
(底带托盘),按照1∶3∶1的体积比例混合腐殖质土、
草炭、珍珠岩做基质,并用多菌灵进行消毒处理,每
盆装(5000±50)g混合基质。定期定量浇水、施肥
培养,2个月后选择长势一致的白刺(实测高度为
(40±5)cm)做试验样本。
试验采用完全随机区组设计,设置 0(对照)、
100、200、300、400mmol·L-1的 5个 NaCl浓度梯
度[20],对3种白刺分别进行盐胁迫处理,每个处理3
次重复,每个重复6株白刺,采取分次浇灌的方法施
盐,除对照外,分别浇灌相应浓度的盐溶液,对照浇
灌相同体积的清水,每3天浇灌1次,每次浇500mL
盐溶液,共浇 4次,土壤最终含盐量分别为:0,
234‰,468‰,702‰,936‰。之后保持土壤湿
度并定期定量浇水,如果水漏入托盘则把水倒回并
冲洗托盘,洗液一并倒入塑料盆以防止盐分的淋融
流失,培养45d后待测。
1.2 测定方法
每个小区随机选取长势良好的3株植株,测定
胁迫处理前和处理45d,后的植株高度,于处理45d
后收获植株,分单株根、茎、叶放入105℃的烘箱中
杀青1h,然后70℃烘至恒质量,测定植株生物量;
采集每株上的完全展开的功能叶片,每个小区取1
个混合样,放置 -70℃以下的超低温冰箱保存
待用。
1.2.1 形态生长类指标的测定
(1)生长速度的计算:生长速度 =(处理后植株
株高-处理前植株株高)/生长天数;
(2)生物量的测定,即盐处理和对照组中各植
株的干质量;
(3)根冠比的计算:根冠比 =植物地下部分干
质量/植株地上部分干质量;
1.2.2 叶绿素含量的测定 取新鲜叶片剪碎,加入
丙酮,放置黑暗处浸提 24h,利用分光光度计法
测定[21]。
1.2.3 渗透调节类指标的测定
(1)叶片中 Na+/K+采用原子吸收分光光度计
法测定[22];
(2)可溶性蛋白含量用考马斯亮蓝染色法
测定[23];
(3)可溶性糖含量用蒽酮比色法测定[23];
(4)脯氨酸含量用茚三酮比色法测定[23]。
1.2.4 膜酶系统类指标的测定
(1)丙二醛(MDA)含量用硫代巴比妥酸比色法
94
林 业 科 学 研 究 第25卷
测定[24];
(2)过氧化物酶(POD)含量用磷酸愈创木酚法
测定[24];
(3)超氧化物歧化酶(SOD)含量用氮蓝四唑法
测定[24]。
2 结果与分析
2.1 形态生长指标的对比分析
由表1可知:3种白刺的生长速度和生物量在
盐浓度为100mmol·L-1的处理最高,明显高于对
照,但之后随着盐浓度的增加而降低,且2项指标均
低于对照。齿叶白刺的生长速度变化幅度比其他2
种白刺大,在100mmol·L-1盐浓度处理下生长速度
为027cm·d-1,而400mmol·L-1处理的生长速
度仅为013cm·d-1。3种白刺的生物量总体呈下
降趋势,在盐浓度为100mmol·L-1时略有增高,而
盐浓度达到300mmol·L-1之后生物量显著低于对
照,盐浓度为400mmol·L-1时最低,唐古特白刺、西
伯利亚白刺、齿叶白刺的生物量分别为 1049、
1242、1019g·株 -1,仅为对照的75% 79%。
表1 不同盐浓度处理下3种白刺的生长对比
植物
盐浓度/
(mmol·L-1)
生长速度/
(cm·d-1)
生物量/(g·株-1) 根冠比
唐古特白刺 0 0.22±0.026b 13.70±1.28a0.37±0.016a
100 0.26±0.023a 14.33±1.13a0.37±0.028a
200 0.21±0.022b 12.68±0.14ab0.32±0.033ab
300 0.18±0.021c 11.80±0.48b0.33±0.027ab
400 0.14±0.025d 10.49±1.11b0.31±0.031b
西伯利亚白刺 0 0.21±0.020b 16.04±1.01a0.34±0.054a
100 0.27±0.044a 16.93±1.97a0.34±0.043a
200 0.21±0.021b 16.09±1.67a0.32±0.026a
300 0.16±0.022c 13.65±0.17b0.30±0.101a
400 0.15±0.022c 12.42±0.64b0.30±0.018a
齿叶白刺 0 0.20±0.031b 13.50±0.44a0.39±0.020a
100 0.27±0.032a 14.25±0.47a0.38±0.046a
200 0.19±0.022a 11.59±0.70b0.39±0.034a
300 0.15±0.022c 11.09±0.57b0.42±0.015a
400 0.13±0.055c 10.19±0.31c0.44±0.084a
  注:同列数据后字母相同表示差异不显著,不同则表示差异显
著,下同。
  对照的唐古特白刺和西伯利亚白刺根冠比高于
施盐组,且盐浓度越高,比值越低;而齿叶白刺在盐
浓度超过200mmol·L-1时,根冠比高于对照组,且
盐浓度越高,比值越高。盐浓度为400mmol·L-1时
唐古特白刺的根冠比为0.31,显著低于无盐对照和
低盐胁迫处理。
2.2 叶绿素指标的对比分析
由图1可知:盐处理的3种白刺的叶绿素含量
均显著高于对照(P<005),盐浓度为100mmol·
L-1时含量最高,唐古特白刺、西伯利亚白刺、齿叶
白刺叶绿素含量为 072、078、061mg·g-1,较
对照分别增加了44%、24%和22%;随着盐浓度的
进一步增加,叶绿素含量呈下降趋势。盐浓度为
100、400mmol·L-1时,唐古特白刺、齿叶白刺和西
伯利亚白刺的叶绿素含量分别降低了 263%、
66%和64%;说明唐古特白刺的叶绿素对盐胁
迫更敏感。
图1 不同盐浓度处理下3种白刺叶绿素含量的比较
2.3 渗透调节类指标对比分析
由表2可知:唐古特白刺和西伯利亚白刺随盐
胁迫浓度的增加 Na+/K+呈先增加后减少的趋势,
在盐浓度为300、200mmol·L-1时达最大值,分别为
356和316,而齿叶白刺 Na+/K+则整体上呈下降
趋势,在盐浓度为100、400mmol·L-1时最低,均为
211。西伯利亚白刺的 Na+/K+含量在各盐浓度处
理下均显著高于对照;唐古特白刺 Na+/K+随盐浓
度的增加而增加,但在盐浓度为400mmol·L-1时却
明显下降,低于对照;齿叶白刺对照的 Na+/K+最
高。说明不同种的白刺对Na+的吸收随着环境中的
Na+浓度的增加而相应增加;而在较高盐浓度时则
会促进对 K+的吸收,从而降低 Na+/K+值,西伯利
亚白刺对这种现象表现得最为明显。
05
第1期 倪建伟等:3种白刺耐盐性的对比分析
表2 不同盐浓度处理下3种白刺渗透调节指标的比较
植物 盐浓度/(mmol·L-1) Na+/K+ 可溶性蛋白/(mg·g-1) 可溶性糖/(mg·g-1) 脯氨酸/(μg·g-1)
唐古特白刺   0 3.01±0.18bc 4.24±0.55c 28.57±0.65b 119.36±48.96b
100 3.33±0.23ab 5.46±0.37b 34.59±1.65a 154.40±15.58ab
200 3.39±0.20a 7.65±0.15a 27.65±3.29b 188.81±23.34a
300 3.56±0.21a 8.00±0.62a 29.90±2.62b 212.13±30.80a
400 2.71±0.04c 8.27±0.24a 28.57±0.33b 217.82±22.24a
西伯利亚白刺 0 1.95±0.86c 6.22±0.69b 19.31±0.67b 154.49±13.24b
100 2.50±0.15b 6.66±0.37b 25.75±3.32a 190.90±14.99a
200 3.16±0.38a 7.77±0.31a 28.17±1.27a 213.84±19.89a
300 2.59±0.02b 8.34±0.39a 21.21±1.03b 207.62±20.55a
400 2.61±0.09b 8.39±0.16a 21.58±2.49b 224.72±23.70a
齿叶白刺   0 2.94±0.23a 4.97±1.77a 22.22±0.88c 208.95±29.12a
100 2.11±0.12c 6.27±1.87a 24.61±0.68c 217.06±17.16a
200 2.77±0.12a 8.31±1.46a 35.84±3.13a 218.69±35.20a
300 2.47±0.02b 6.55±1.15a 29.56±2.40b 200.00±17.96a
400 2.11±0.09c 6.57±0.75a 29.19±2.49b 216.85±25.81a
唐古特白刺和西伯利亚白刺叶片中的可溶性蛋
白含量,随着盐浓度的增加而增加,400mmol·L-1
处理的最高,分别为827、839mg·g-1,分别比对
照高953%和348%;齿叶白刺在各处理间差异不
显著(P>005)。3种白刺叶片的可溶性糖含量差
异显著,且西伯利亚白刺和齿叶白刺在盐浓度200
mmol·L-1的处理最大,为2817、3584mg·g-1,分
别比对照增长了459%和613%,而唐古特白刺在
100mmol·L-1的盐浓度处理下可溶性糖含量最高,
比对照高出211%。在低浓度盐处理下,可溶性糖
含量较高的为唐古特白刺,高盐浓度处理下西伯利
亚白刺叶片中可溶性糖含量明显低于唐古特白刺和
齿叶白刺。
唐古特白刺和西伯处亚白刺中脯氨酸的含量在
施盐处理下均高于对照组,西伯利亚白刺叶片中的
脯氨酸含量均随盐浓度的增加而增加;当盐浓度达
400mmol·L-1时,唐古特白刺和西伯利亚白刺叶片
脯氨酸含量显著高于对照,分别为21782和22472
μg·g-1,分别较对照高825%和455%;而齿叶白
刺则差异不显著。
2.4 膜酶系统类指标对比分析
由表3可知:在盐浓度为100mmol·L-1的处理
下,唐古特白刺和西伯利亚白刺叶片中的MDA含量
均显著低于对照,分别为对照的66%和80%,此后
随着盐浓度的增加呈递增趋势;齿叶白刺叶片中的
MDA含量在盐胁迫下均显著高于对照,在盐浓度
300mmol·L-1的处理下达到最高(11.68nmol·
g-1),比对照高108%。
表3 不同盐浓度处理下3种白刺膜酶系统指标的比较
植物 
盐浓度/
(mmol·L-1)
丙二醛(MDA)/
(nmol·g-1)
过氧化物酶POD/
(U·g-1·min-1)
超氧化物岐化酶
SOD/(U·g-1)
唐古特 0 8.88±0.11a 13.20±1.59c 61.85±3.26c
白刺 100 5.86±0.38c 23.27±2.44b 77.31±7.57a
200 7.53±0.68b 26.60±6.59b 80.32±5.67a
300 9.51±0.26a 44.00±2.40a 70.08±5.05ab
400 9.36±0.44a 27.07±4.32b 72.49±7.71ab
西伯利 0 7.87±0.18a 68.93±2.99b 28.30±4.41c
亚白刺 100 6.33±1.07b 120.47±9.23a 48.73±2.54b
200 8.79±0.87a 149.80±9.30a 54.09±2.18b
300 8.53±0.56a 152.40±4.39a 79.42±6.36a
400 9.18±0.59a 127.80±5.44a 84.46±3.35a
齿叶 0 5.63±0.39c 96.87±9.15d 84.58±3.81d
白刺 100 9.33±0.07b 191.87±7.17a 102.64±3.34a
200 9.49±1.01b 170.53±4.00b 92.72±6.40bc
300 11.68±0.51a 113.67±7.40c 85.83±2.76cd
400 8.38±2.00b 121.80±5.80c 96.23±1.37ab
不同盐浓度处理的3种白刺叶片的 POD含量
均与对照差异显著。唐古特白刺叶片中的 POD明
显低于其它2种白刺。3种白刺叶片的POD随盐浓
度的增加均呈先升高后下降的趋势。唐古特白刺和
西伯利亚白刺在300mmol·L-1时达到最大,分别为
4400、15240U·g-1·min-1,分别是对照的333%
和221%;齿叶白刺在盐浓度为100mmol·L-1时活
性达最大值(191.87U·g-1·min-1),是对照
的1981%。
不同盐浓度处理的3种白刺的 SOD活性均与
对照的差异显著。对照叶片中 SOD的活性最小,盐
胁迫促进了 SOD活性的增加,唐古特白刺、西伯利
15
林 业 科 学 研 究 第25卷
亚白刺和齿叶白刺分别在盐浓度为 200、400、100
mmol· L-1时 达 最 大,分 别 为 8032、8446、
10264U·g-1。
3 结论与讨论
植株的生长速度和生物量的大小能直观地反映
其生长状态,体现植株的耐盐能力。本研究中,在盐
浓度为100mmol·L-1时,3种白刺的生长速度和生
物量均达最大值,高浓度盐处理反而抑制其生长。
叶绿素含量的变化规律与植株生长一致,亦在100
mmol·L-1盐浓度时达最高。叶绿体是盐胁迫下最
敏感的细胞器之一[25],叶绿素含量可以表示在盐胁
迫下光合作用的强弱,从而可以作为耐盐指标反映
对盐胁迫的抗性大小。3种白刺在低浓度盐胁迫下
的叶绿素含量均增加,盐浓度为100mmol·L-1时含
量最高,唐古特白刺、西伯利亚白刺、齿叶白刺叶绿
素含量分别为072、078、061mg·g-1,高含量的
叶绿素能够促进光合作用,对植物生长有利,是对盐
胁迫的一种积极响应;在高盐浓度胁迫下叶绿素含
量减少,影响光合性能,影响植物的生长速度和生物
量的增加,这与陈贵林[26]等对西伯利亚白刺试管苗
的研究以及张华新等[27]对11种树种的研究结果一
致。唐古特白刺和西伯利亚白刺根冠比随盐浓度增
加而降低,齿叶白刺却随盐浓度增加而增加,说明齿
叶白刺在根的生长方面更具耐盐能力。
在盐胁迫条件下,植物都会受到不同程度的渗
透胁迫伤害,植物通过调节细胞内无机离子、可溶性
蛋白、可溶性糖、脯氨酸等调节类物质可缓解其受害
程度。本研究中,随着盐浓度的增加,齿叶白刺叶片
中的Na+/K+呈略微下降趋势,唐古特白刺和西伯
利亚白刺呈先上升后降低的趋势,这和不同种白刺
在盐胁迫下对各离子选择吸收有关,通过对 Na+和
K+的选择吸收,可适度改变在不同盐浓度环境下细
胞质中Na+/K+平衡,减少盐胁迫的损伤程度;而白
刺也正是吸收了环境中的Na+、K+从而改良了盐碱
地,同时也适应了在高盐浓度环境下生长。3种白
刺叶片中可溶性蛋白、可溶性糖含量在盐胁迫下均
较对照组高,唐古特白刺和西伯利亚白刺叶片中的
可溶性蛋白含量在400mmol·L-1的处理下达到最
高,为827、839mg·g-1,西伯利亚白刺和齿叶白
刺可溶性糖含量在盐浓度为200mmol·L-1的处理
下达到最大值,为2817、3584mg·g-1,通过渗透
调节可适应盐胁迫环境,同时可溶性糖除做为碳架
和能源外,对细胞膜和酶类起稳定和保持作
用[28-29],但盐浓度高时相对低盐浓度可溶性糖的增
加量减小。脯氨酸亲水性较强,能够保护细胞膜系
统,维持细胞内酶结构,降低细胞内蛋白的降解。随
盐浓度的增加,唐古特白刺和西伯利亚白刺叶片中
脯氨酸含量明显增加,这与刘占彬等[30]对高羊茅
(FestucaarundinaceaSchreb.)耐盐性的研究结论一
致。盐胁迫促使了渗透调节物质的积累,维持了细
胞正常吸水,从而适应盐胁迫。
在盐胁迫下,细胞膜透性增加会破坏膜系统,脂
质过氧化作用的产物 MDA能反应膜受损的情
况[31]。在盐胁迫下,3种白刺MDA的含量均发生变
化,表明膜系统的完整性受到不同程度的破坏,唐古
特白刺和西伯利亚白刺叶片中 MDA含量是先下降
后上升,齿叶白刺叶片中MDA含量呈上升趋势。在
盐处理下,3种白刺叶片中POD、SOD活性均高于对
照,西伯利亚白刺和齿叶白刺叶片中 POD活性明显
高于唐古特白刺,唐古特白刺和西伯利亚白刺在
300mmol·L-1处理下最高,为 4400、15240U·
g-1·min-1,齿叶白刺在100mmol·L-1盐处理下最
高,为19187U·g-1·min-1。在低盐浓度处理下,
唐古特白刺和齿叶白刺 SOD活性明显高于西伯利
亚白刺,且齿叶白刺的 SOD活性最高,表现稳定。
膜系统的修复与SOD和POD的活性是分不开的,其
活性越高,清除 MDA的能力越强,从而起到保护膜
结构的作用[32]。白刺细胞在盐胁迫下产生更多的
氧自由基,而利用 SOD和 POD可清除氧自由基,阻
止氧化损伤,这与张恩平等[33]在黄瓜(Cucumissati
vusLinn.)的研究中得到的结论相似。因此可知,3
种白刺受到盐胁迫时细胞内脂质过氧化增强,MDA
的含量上升,同时细胞内POD、SOD的活性也增加以
修复盐胁迫带来的膜损伤,从而能够维持膜系统的
稳定,抵御盐害。
在盐胁迫下,植物的响应是一个复杂的生理过
程,不同种类的白刺耐盐方式和机理有所不同,细胞
或组织内的生理代谢和生化反应会有所差异,导致
在不同盐浓度胁迫下各种耐盐指标不完全一致性,
因此宜采用多种指标综合对植物耐盐性进行研究。
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