全 文 ：第 ww卷 第 |期
u s s {年 | 月
林 业 科 学
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人心果品种资源亲缘关系的 „ƒ°分析
文亚峰t 谢碧霞t 何 钢t 潘晓芳u
kt q中南林业科技大学资源与环境学院 长沙 wtsssw ~u q广西大学林学院 南宁 xvssswl
摘 要 } 利用荧光 „ƒ°分子标记技术对 uz个人心果品种k类型l及 w个蔓妹人心果品种资源的亲缘关系进行研
究 ∀|对引物k°¶·´ p ¶¨ ´l共扩增得到 t tvt条带kzx ∗ xss ¥³l o其中多态性带 t s|y条k|y1|s h l ∀u{个品种k类
型l具特征性条带 o特征带大小为 vxs ∗ xss ¥³∀品种间多态性比例在 uu1t| h ∗ wx1{| h之间 o遗传相似性系数为
s1ws ∗ s1{z ∀ ˜°Š„聚类结果将 vt个品种聚为蔓妹人心果类群k „l和 u个人心果类群k≥„°t和 ≥„°ul ∀在遗传
相似性系数 s1xu处 ow个蔓妹人心果品种首先被区分开 o单独聚为一类k „l ∀人心果类群中 ott个美国品种和
ts个国内地方类型在相似性系数 s1yy处聚为一大组k≤ !⁄组l o相互之间表现出较近的亲缘关系 ∀大部分栽培品
种聚于 ⁄2u亚组 o与地方类型有一定的遗传距离 o说明栽培种的亲缘关系较为相近 ∀人心果表型标记与分子标记
结果间存在一定差异 o二者的相关性不高 ∀
关键词 } 人心果 ~品种资源 ~亲缘关系 ~遗传多样性 ~ „ƒ°
中图分类号 }≥zt{1wy ~≥zt{1w| 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kuss{ls| p ssx| p sy
收稿日期 }ussz p tt p us ∀
基金项目 }国家林业局/ |w{0国际引进项目kussu p u|l ∀
ΑΦΛΠ Αναλψσισ οφ Γενετιχ Ρελατιονσηιπ οφ Σαποδιλλα Γερµ πλασµ Ρεσουρχεσ
• ±¨ ≠¤©¨ ±ªt ÷¬¨ …¬¬¬¤t ‹¨Š¤±ªt °¤± ÷¬¤²©¤±ªu
kt qΧολλεγε οφ Ρεσουρχεσ ανδ Ενϖιρονµεντo ΧεντραλΣουτη Υνιϖερσιτψοφ Φορεστρψ ανδ Τεχηνολογψ Χηανγσηα wtsssw ~
u qΧολλεγε οφ Φορεστρψo Γυανγξι Υνιϖερσιτψ Ναννινγ xvssswl
Αβστραχτ} ׫¨ ª¨ ±¨ ·¬¦µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³ ²©uz ¶¤³²§¬¯¯¤ k Μανιλκαρα ζαποταl ¦∏¯·¬√¤µ¶¤±§w °¤°¨ ¼ ¶¤³²¤¨ k Πουτερια σαποταl
¦∏¯·¬√¤µ¶º¨ µ¨ ¤±¤¯¼½¨ §¥¼ ∏¶¬±ª©¯∏²µ¨¶¦¨±·2¯ ¤¥¨¯¨ §„ƒ° °¤µ®¨µ¶q„·²·¤¯ ²©t tvt „ƒ° °¤µ®¨µ¶¥¨·º¨ ±¨ zx·²xss ¥¤¶¨ ³¤¬µ¶
k¥³¶l º¨ µ¨ ª¨ ±¨ µ¤·¨§º¬·«| ³µ¬°¨ µ¦²°¥¬±¤·¬²±¶o²© º«¬¦«t s|y k|y1| h l º¨ µ¨ ³²¯¼°²µ³«¬¦q„°²±ªvt ¦∏¯·¬√¤µ¶ou{ ²±¨ ¶
«¤§∏±¬´∏¨ ¥¤±§¶µ¤±ª¬±ª©µ²°vxs·²xss ¥¤¶¨ ³¤¬µ¶k¥³¶l q׫¨ ³¨µ¦¨±·¤ª¨ ²©³²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶º¤¶©µ²°uu1t| h ·²wx1{| h
¬± ¦∏¯·¬√¤µ¯ √¨¨ ¯q׫¨ ª¨ ±¨ ·¬¦¶¬°¬¯¤µ¬·¼¦²¨©©¬¦¬¨±·¶k‘¨¬¤±§¬. ¶lµ¤±ª¨§©µ²° s1ws·²s1{z1 •¬·«˜°Š„ ¦¯∏¶·¨µ¬±ª °¨ ·«²§o
vt ¦∏¯·¬√¤µ¶º¨ µ¨ ¶¨³¤µ¤·¨§¬±·²·«µ¨¨¦¯∏¶·¨µ¶q׫¨ w °¤°¨ ¼¶¤³²¤¨ ¦∏¯·¬√¤µ¶º¨ µ¨ ªµ²∏³¨§¬± „ qŒ±¶¤³²§¬¯¯¤¦¯∏¶·¨µk≥„°t
¤±§≥„°ul ott „°¨ µ¬¦¤±¦∏¯·¬√¤µ¶¤±§ts ≤«¬±¨ ¶¨ ·¼³¨¶¶«²º¨ §¦¯²¶¨ ª¨ ±¨ ·¬¦µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³¤±§º¨ µ¨ ªµ²∏³¨§¬± s1yy ¶¬°¬¯¤µ¬·¼
¦²¨©©¬¦¬¨±·¶k≤ ¤±§⁄ ¦¯∏¶·¨µ¶l q ²¶·¦∏¯·∏µ¬±ª¦∏¯·¬√¤µ¶º¨ µ¨ ªµ²∏³¨§¬± ⁄2u ¦¯∏¶·¨µ¤±§«¤§¤©¤µ·«¨µª¨ ±¨ ·¬¦§¬¶·¤±¦¨ ©µ²°
≤«¬±¨ ¶¨ ·¼³¨¶²µº¬¯§¶³¨¦¬¨¶oº«¬¦«¬±§¬¦¤·¨§·«¤·¦∏¯·∏µ¬±ª¦∏¯·¬√¤µ¶«¤§¦¯²¶¨ µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³q׫¨µ¨ º¤¶±²¶¬ª±¬©¬¦¤±·¦²µµ¨ ¤¯·¬²±
¥¨·º¨ ±¨ ˜°Š„ §¨±§µ²ªµ¤°¶²© °²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ ¤±§„ƒ° °¤µ®¨µ¶∏¶¬±ª·«¨ ¤±·¨¯ ·¨¶·q
Κεψ ωορδσ} ≥¤³²§¬¯¯¤k Μανιλκαρα ζαποταl ~¦∏¯·¬√¤µµ¨¶²∏µ¦¨¶~ª¨ ±¨·¬¦µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³~ª¨ ±¨·¬¦§¬√¨ µ¶¬·¼~„ƒ°
人心果k Μανιλκαρα ζαποταl为山榄科k≥¤³²·¤¦¨¤¨ l铁线子属常绿果树 o原产墨西哥南部与中美洲地区
k²µ·²±ousssl o现在大部分热带 !亚热带国家都有种植 ∀人心果是一种果胶两用树种 o其果实主要供鲜食 o味
道甜美 o芳香爽口 o营养丰富 ∀树体所分泌的胶液 o称为/奇可胶0k¦«¬¦®l o是制造生态口香糖的胶基原料 o有
很好的开发利用价值 ∀我国人心果最早于 us世纪初从东南亚国家引种 o主要分布于云南 !广东 !广西 !福建 !
海南和台湾等省k区l的中南部 ∀人心果在我国虽然已有上百年的引种历史 o但仍属珍稀果树 o资源稀少 o良
种缺乏 o没有形成一定的生产规模k谢碧霞等 oussxl ∀目前 o除海南 !广东有少量栽培外 o人心果在其他地区
零星分布 o呈散生状态 ∀就品种而言 o我国目前尚无具体的品种名称 o且各地对人心果的称呼也存在很大差
异 o同物异名 !同名异物现象普遍存在 o这给人心果的资源收集 !种质鉴定 !分类和引种带来了很大困难 ∀
„ƒ°分子标记技术由荷兰科学家 ¤¥¨¤∏等kt||xl创立 ∀该方法结合了 • ƒ°和 • „°⁄技术的特点 o既
具有 °≤• 的高效性 !安全性和方便性的特点 o又具有 • ƒ°可靠性好 !重复性高的优点 o已被广泛应用于植物
亲缘关系 !种质鉴别及遗传多样性研究k王利等 ouss{ ~王献等 oussx ~«¤±ª ετ αλqousss ~宋红竹等 ousszl ∀
本文在人心果品种资源表型性状研究的基础上k文亚峰等 oussyl o利用 „ƒ°分子标记技术分析人心果品种
资源的 ⁄‘„指纹图谱 o研究品种间的亲缘关系及其遗传多样性 o为人心果品种资源收集 !引进 !分类和遗传
改良提供科学依据 ∀
t 材料和方法
1 .1 试验材料
vt个样品采自广西人心果种质资源圃 !云南西双版纳热带植物园及广东湛江等地 o其中包括 w个蔓妹
人心果k Πουτερια σαποταl品种k≤tw !≤tx !≤ty !≤tzl ∀蔓妹人心果与人心果同属山榄科 oussw年首次从美国佛
罗里达州引种到我国 o本试验中用作对照样本 ∀所有样品均选取新鲜嫩叶 x ∗ ts枚用冰盒带回实验室 o置于
p {s ε 低温冰箱保存备用 ∀材料编号 !品种k类型l名称及来源见表 t ∀
表 1 试验材料及来源
Ταβ .1 Εξπεριµεντ µατεριαλσ ανδ τηειρ οριγιν
编号
‘²q
品种名称
≤∏¯·¬√¤µ¶
种名
≥³¨¦¬¨¶
来源地
յ»±
编号
‘²q
品种名称
≤∏¯·¬√¤µ¶
种名
≥³¨¦¬¨¶
来源地
յ»±
≤t ’÷ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤tz ∂¬¨­² Πουτερια σαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤
≤u ²¯¬¬ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤t{ 广西 t Š∏¤±ª¬¬t Μανιλκαρα ζαποτα 广西南宁 ‘¤±±¬±ªoŠ∏¤±ª¬¬
≤v  ¤¨§ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤t| 广西 u Š∏¤±ª¬¬u Μανιλκαρα ζαποτα 广西南宁 ‘¤±±¬±ªoŠ∏¤±ª¬¬
≤w ’2v Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤us 海南 t ‹¤¬±¤± t Μανιλκαρα ζαποτα 海南 ‹¤¬±¤±
≤x ƒµ∏¬·¶³¬¦¨ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤ut 海南 v ‹¤¬±¤± v Μανιλκαρα ζαποτα 海南 ‹¤¬±¤±
≤y ײ°·«¨µ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤uu 海南 u ‹¤¬±¤± u Μανιλκαρα ζαποτα 海南 ‹¤¬±¤±
≤z °¬±¤ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤uv 海南 w ‹¤¬±¤± w Μανιλκαρα ζαποτα 海南 ‹¤¬±¤±
≤{ ²µ¨±¤ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤uw 广西 v Š∏¤±ª¬¬v Μανιλκαρα ζαποτα 广西南宁 ‘¤±±¬±ªoŠ∏¤±ª¬¬
≤| ‹¤¶¼¤ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤ux 广西 w Š∏¤±ª¬¬w Μανιλκαρα ζαποτα 广西南宁 ‘¤±±¬±ªoŠ∏¤±ª¬¬
≤ts °µ²©¬¦ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤uy 云南 t ≠∏±±¤± t Μανιλκαρα ζαποτα 云南西双版纳 ÷¬¶«∏¤±ª¥¤±±¤o≠∏±±¤±
≤tt ²§¨¯¯¤ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤uz 云南 u ≠∏±±¤± u Μανιλκαρα ζαποτα 云南西双版纳 ÷¬¶«∏¤±ª¥¤±±¤o≠∏±±¤±
≤tu „¯ ¤±¤ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤u{ 广东 t Š∏¤±ª§²±ªt Μανιλκαρα ζαποτα 广东湛江 «¤±­¬¤±ªoŠ²±ª§²±ª
≤tv ׬®¤¯ Μανιλκαρα ζαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤u| 越南 ∂¬¨·±¤° Μανιλκαρα ζαποτα 越南 ∂¬¨·±¤°
≤tw ¤ª¤±¤ Πουτερια σαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤vs 广东 u Š∏¤±ª§²±ªu Μανιλκαρα ζαποτα 广东广州 Š∏¤±ª½«²∏oŠ∏¤±ª§²±ª
≤tx ƒ¯ ²µ¬§¤ Πουτερια σαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤ ≤vt 广西 x Š∏¤±ª¬¬x Μανιλκαρα ζαποτα 广西南宁 ‘¤±±¬±ªoŠ∏¤±ª¬¬
≤ty פ½∏°¤¯ Πουτερια σαποτα 美国 „°¨ µ¬¦¤
1 .2 试验方法
采用荧光 „ƒ°k©¯∏²µ¨¶¦¨±·2¯ ¤¥¨¯¨ § „ƒ°l技术开展试验研究 ∀该技术利用荧光染料标记引物进行选择性
扩增 o扩增产物在自动测序仪k„…Œvzzl上扫描鉴定 ∀所显示的 „ƒ°带的式样为不同分子质量 !不同荧光强
度扩增片段的 ⁄‘„指纹图谱 o利用 Š¨ ±¨ ≥¦¤±和 Š¨ ±·¼³¨µ软件分析多态性和基因型 ∀
t qu qt 模板 ⁄‘„的制备 利用 ≤ׄ…法提取 ⁄‘„ o并略加以改进 ∀用 ⁄˜2yws核酸蛋白仪对抽提的 ⁄‘„进
行纯度和浓度检测 ∀ ⁄‘„提取质量用 s1{ h琼脂糖凝胶电泳进行检测 o根据检测结果将符合试验要求的
⁄‘„样品稀释到约 tss Λª#°pt用于 „ƒ°试验 ∀
t qu qu „ƒ°试验方法 „ƒ°试验包括模板 ⁄‘„的酶切 p连接 !预扩增 !选择性扩增及扩增产物的电泳检
测等 ∀具体步骤参照美国 „³³¯¬¨§…¬²¶¼¶·¨°¶公司的植物荧光 „ƒ°操作指南 o采用梯度试验确定并建立了人
心果 „ƒ°反应体系k文亚峰 oussyl ∀
t qu qv 数据处理与分析 电泳结果数据由 Š¨ ±¨ ≥¦¤±v1zk„³³¯¬¨§ …¬²¶¼¶·¨°¶l软件获得 o所提供的数据为 xs ∗
xss ¥³区间的 ⁄‘„片断分子质量 ∀由于小片段 ⁄‘„杂带较多 o选取 zx ∗ xss ¥³区间的 ⁄‘„片断 o将分子质
量数值转化为 t os标准数据 o求多态性位点百分率 Π€ kκΠνl ≅ tss h ∀式中 }Κ为多态性位点数目 oν为所
测定的位点数目 ∀
利用 ‘×≥≠≥u1ts¨软件求 ⁄¬¦¨k‘¨¬¤±§¬. ¶l相似性系数 Σ± € uαΠkuα n β n χl o式中 }α为两样品的共有
条带数 oβ为 „样品有 !…样品无的条带数 oχ为 …样品有 !„样品无的条带数 ∀根据求得的 ⁄¬¦¨ 遗传相似性
矩阵 o对各品种资源进行聚类分析k˜°Š„法l o生成聚类图 ∀
t qu qw 表型标记与分子标记的相关性分析 根据人心果生物学特性和树体外部特征 o选取树姿 !叶 !花 !果
sy 林 业 科 学 ww卷
w大外部形态的 us个外形指标作为标记特征 o观察并测定性状数值k特性数据l ∀结合人心果表型分析数据
k文亚峰等 oussyl o利用 ‘×≥≠≥u1ts¨软件中的 ¬¦²°³程序对表型标记与分子标记结果的相关性进行 ¤±·¨¯
检验 ∀
u 结果与分析
2 .1 扩增结果及多态性比例
所筛选的 |个引物对共扩增得到 t tvt条带kzx ∗ xss ¥³o表 ul o其中多态性带为 t s|y条 o多态性比率达
到了 |y1|s h o平均每对引物产生 tux 条带 ∀引物 °2Š×„А2≤„Š扩增效率最高 o共产生 tws 条带 ∀引物
°2Š„≤А2≤„„多态性比率最高 o为 ||1tz h ∀如果去除 w个曼妹人心果品种 k≤tw !≤tx !≤ty !≤tzl o在种的水
平上 o人心果多态性比率达到了 {|1sw h ∀但在品种水平而言 o遗传变异有大有小 o多态性比例在 uu1t| h ∗
wx1{| h之间k表 vl ∀
表 2 9 对引物扩增结果
Ταβ .2 Αµ πλιφιεδ ρεσυλτ ωιτη 9 πριµερ παιρσ
序号
‘²q
引物组合
°µ¬° µ¨¦²°¥¬±¤·¬²±
扩增条带数
„°³¯¬©¬¨§¥¤±§¶
多态性条带数
°²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶
多态性条带百分率
°¨ µ¦¨±·¤ª¨ ²©³²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶Πh
特征性条带数
˜±¬´∏¨ ¥¤±§¶
t °2Š„„А2≤„Š ttx tsx |t1vw |
u °2Š„„А2≤„× tuz ttz |u1tv z
v °2Š„„А2≤ׄ tuz tux |{1wv tx
w °2Š„„А2≤׊ tuv tut |{1vz tx
x °2Š„≤А2≤„„ tus tt| ||1tz |
y °2Š„≤А2≤„Š tt{ ttx |z1wy uz
z °2Š„≤А2≤ׄ tu| tuz |{1wx uu
{ °2Š×„А2≤„Š tws tv{ |{1xz w
| °2Š×ŠΠ2≤„Š tvu tu| |z1zv ty
合计 ײ·¤¯ t tvt t s|y tuw
平均  ¤¨± tux tut |y1|s tv
表 3 不同品种多态性条带及多态性条带百分率
Ταβ .3 Τηε πολψµ ορπηιχ βανδσ ανδ τηε περχενταγε οφ πολψµ ορπηιχ βανδσ οφ διφφερεντ χυλτιϖαρσ
编号
‘²q
多态性条带数
°²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶
多态性条带百分率
°¨ µ¦¨±·¤ª¨ ²©
³²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶Πh
特征性条带数
˜±¬´∏¨ ¥¤±§¶
编号
‘²q
多态性条带数
°²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶
多态性条带百分率
°¨ µ¦¨±·¤ª¨ ²©
³²¯¼°²µ³«¬¦¥¤±§¶Πh
特征性条带数
˜±¬´∏¨ ¥¤±§¶
≤t ww{ v|1yt x ≤tz wys ws1yz y
≤u v|{ vx1t| u ≤t{ vxv vt1ut t
≤v wvz v{1yw t ≤t| w|v wv1x| tt
≤w vs| uz1vu s ≤us xtu wx1uz w
≤x v{u vv1z{ t ≤ut wss vx1vz t
≤y v{y vw1tv v ≤uu wx{ ws1xs v
≤z wws v{1|s v ≤uv wtz vy1{z v
≤{ uyw uv1vw u ≤uw wxw ws1tw v
≤| w{y wu1|z | ≤ux wu{ vz1{w s
≤ts wxz ws1wt y ≤uy vzy vv1uw z
≤tt wuv vz1ws v ≤uz u{| ux1xx t
≤tu vts uz1wt t ≤u{ vws vs1sy t
≤tv w{z wv1sy y ≤u| uxt uu1t| u
≤tw xt| wx1{| uu ≤vs v|u vw1yy u
≤tx vxx vt1v| v ≤vt vtt uz1xs s
≤ty wxx ws1uv tu 合计 ײ·¤¯ tu w|s tuw
平均  ¤¨± wsu vx1yu w
2 .2 特征性条带
|对引物共扩增得到 t tvt 条带 o其中特征带k某品种独有l就有 tuw 条k表 u !vl o占扩增总带数的
ts1|y h o特征带大小一般在 vxs ∗ xss ¥³之间 ∀vt个品种中有 u{个找到了特征性条带 o其中蔓妹人心果的 w
个品种 ≤tw !≤tx !≤ty !≤tz特征带最多 o共有 wv条 o占总带的 vw1y{ h ∀此外 o≤t|k广西 ul特征带也较多 o有
ty 第 |期 文亚峰等 }人心果品种资源亲缘关系的 „ƒ°分析
tt条 ∀而 ≤wk’2vl !≤uxk广西 wl !≤vtk广西 xlv个品种未找到特征带 o相信随着筛选引物的增多 o这 v个品种
肯定也有特征带存在 ∀这些特征性条带在人心果品种鉴别及特异性状基因克隆中具有重要作用 ∀
2 .3 聚类分析
供试材料间的遗传相似性系数在 s1ws ∗ s1{z之间 o平均相似性系数为 s1yx ∀ ≤ut与 ≤uuk海南 v与海南
ul之间的相似性系数最大 o为 s1{z o表明其亲缘关系最近 o与表型性状分析结果一致 o从分子角度分析来自
海南的 ≤ut和 ≤uu可能为同一品种 ∀根据遗传相似性系数矩阵按 ˜°Š„法对 vt个品种资源进行聚类分析
k图 tl ∀在相似性系数 s1xu处 o蔓妹人心果 w个品种首先被区分开 o聚为  „ 类群 ouz个人心果品种全部
聚为 ≥„°类群 ∀蔓妹人心果和人心果属于山榄科的 u个不同属 o聚类结果表明这 u个属间存在较远的亲缘
关系 ∀在相似性系数 s1xw处 o≥„°类群又可分为 ≥„°t和 ≥„°u两个亚群 ∀≥„°t亚群由 ≤uy !≤uz !≤u{构成 o
为云南西双版纳和广东湛江的 v个品种 o其表型特征主要体现在嫩梢k嫩叶l为褐红色 o上密被褐毛 ∀在相似
性系数 s1y|处 o≥„°u亚群的 uw个人心果品种被分为 w组k„ !… !≤ !⁄组l ∀ „组只包括 ≤{一个品种 ~…组为
≤w和 ≤u|两个品种 ~≤组为 ≤t|一个品种 ~⁄组的 us个品种k类型l又可分为 v个亚组k⁄2t !⁄2u和 ⁄2vl ∀
⁄2t亚组只有 ≤uv一个品种 ~⁄2u亚组包括 t{个品种 o大部分栽培品种聚在这一亚组 ~⁄2v亚组只含 ≤t一个
品种 o形态表现为大果 ∀
图 t vt个品种资源 „ƒ°分子聚类图
ƒ¬ªqt ⁄¨ ±§µ²ªµ¤° ²© ˜°Š „ ¦¯∏¶·¨µ²©vt ¶¤³²§¬¯¯¤¦∏¯·¬√¤µ¶¥¤¶¨§²± „ƒ° §¤·¤
从分子聚类分析结果可看出 ott个美洲品种和 ts个国内地方类型在相似性系数 s1yy处聚为一大组k≤ !
⁄组l o表现出较近的亲缘关系 o它们并没有按地理来源的不同聚类 o而是互有穿插 o有些国内品种与美洲品
种间的亲缘关系甚至高于本地品种 ∀大部分栽培品种聚于 ⁄2u亚组 o与国内其他地方类型k野生种l有一定
的遗传距离 o说明栽培种的来源较为相近 o可能来自亲缘关系较近的几个母本 ∀
2 .4 表型标记与分子标记结果的相关性比较
根据 ‘×≥≠≥u1ts¨软件的 ¤±·¨¯ 检验结果kt sss次置换l o人心果表型标记k文亚峰等 oussyl与分子标记
之间的相关系数为 s1t|{k Π€ s1sxz  s1sxl o二者相关性并不高 ∀但其中有少数品种 o如海南的 v个品种 !云
南西双版纳和广东湛江品种k类型l相互之间的形态与分子标记聚类结果完全一致 o说明亲缘关系很近或很
远k海南的 v个品种相互间亲缘关系较近 ~云南西双版纳和广东湛江 v个品种与其他品种间遗传距离较远l
uy 林 业 科 学 ww卷
的品种间相关程度高 ∀
v 讨论
3 .1 人心果遗传多样性水平评价
人心果起源于墨西哥和中美洲地区 o早在 w sss ∗ x sss年以前 o古代玛雅人就有利用人心果的历史 ∀在
长期的进化和人工选择过程中 o人心果形成了多种不同的种类和品种 ∀由于其较好的经济用途 o目前已被引
种至大部分热带和亚热带地区 o分布范围逐步扩大 ∀ „ƒ°研究结果表明 o在种的水平k除蔓妹人心果l o人心
果多态性比率达到了 {|1sw h ∀根据 ‹¤°µ¬¦®等kt||sl利用等位酶研究植物遗传变异的结果 o长命多年生木
本植物的多态性比率为 yw1zs h ∀可见在种的水平上 o人心果体现了非常丰富的遗传多样性 ∀
就品种k类型l水平而言 o人心果的遗传变异有大有小 o多态性比例在 uu1t| h ∗ wx1{| h之间 o比荔枝
kΛιτχηι χηινενσισl k易干军等 oussvl !龙眼k ∆ιµοχαρπυσλονγανlk谭卫萍 oussul等其他热带果树要低 ∀这主要与
各地的引种历史和栽培方式有关 o虽然在长期的进化和选择过程中 o人心果种群在其起源地形成了丰富的多
样性 o但各地引种历史并不是很长 o引进品种数量有限 o栽培地域狭小 o不同地区间品种交换少 o外源基因交
流的机会也少 o因此变异程度不大 ∀同时 o长期的实生繁殖方式也限制了遗传变异的发生 ∀
3 .2 人心果表型与分子聚类结果的比较
形态学性状是植物品种最直观 !可以进行描述的外部特征 o尽管形态标记易受发育时期和环境条件影
响 o且标记数量有限 o但形态标记简便易行且快速 o长期以来被广泛应用于物种种质资源鉴定 !分类和多样性
研究 ∀随着现代分子生物学技术的发展 o分子标记可以使人们直接对决定生物性状的基因进行分析 o有着非
常独特的优越性 ∀但形态标记和分子标记结果的一致性一直是争论较多的话题 ∀在观赏桃花k Πρυνυσ
περσιχαlk‹∏ ετ αλqoussxl !大花惠兰k Χψµβιδιυµ ηψριδυσlk朱根发等 ousszl !菠萝蜜k Αρτοχαρπυσ ηετεροπηψλλυσl
k≥¦«±¨ ¯¯ ετ αλqousstl等植物研究中发现分子和形态标记结果较为相近 o可以用分子标记来指导传统的分类
研究 ∀但更多的报道如油橄榄k Ολεα ευροπαεαlk‹¤ª¬§¬°¬·µ¬²∏ ετ αλqoussxl !葡萄kςιτισϖινιφεραlk¤µ·m±¨ ½ ετ αλqo
ussvl !黑麦草kΛολιυµ περεννεlk• ²¯¤§¤±2• ∏¬½ ετ αλqousstl等是关于分子和形态标记结果间的不一致 ∀ ‹ ¤¨·²±
等kt|||l也曾运用 • „°⁄技术对生长在墨西哥尤卡坦州不同地理环境条件k森林和沼泽l下的人心果种群进
行研究 o发现分子与形态标记结果差异非常大 o但不同外部形态的人心果种群在基因型上并无显著差异 o因
此认为环境因素是引起形态差异的主要原因 ∀本研究结果表明 o人心果形态标记和 „ƒ°分子标记聚类结
果间的相关性并不高 o但其中亲缘关系很近或很远的品种形态标记与分子标记间具有较高的相关性 o这与
• ²¯¤§¤±2• ∏¬½等kusstl研究黑麦草时得到的结论相同 ∀
可以从以下几个方面理解形态和分子标记结果的不一致性 ∀首先与自然选择和环境等因素的影响有
关 ∀在生物进化过程中 o自然选择能导致形态的迅速分化 o此外 o自然选择也可引起在进化上不同祖先的种
群承受着某些特征的趋同 o造成形态上的相似性 o而且形态学特征也会受到环境因子 !生物因子以及人类活
动等因素的影响 ∀相对而言 o在种质鉴别上 o分子标记较形态特征有更大的优越性 o如基因位点数量大 o各位
点之间相互独立 o容易比较它们之间的差异以及可以完全排除环境因素的干扰等 ∀就人心果而言 o当它从中
美洲地区被引种后 o为适应不同地方的环境条件 o虽然在形态上产生了一定的变异 o但基因型并没有改变 ∀
标记位点的选择和标记数量也是造成形态与分子标记结果不一致的主要原因 ∀可能所选用的标记并没
有较好地反映各样本之间实质性的差异 ∀形态标记数量非常有限 o一般选取能观察到的外部特征作为标记
位点 o而分子标记检测的基因位点数也只有几百至几千个 ∀高等植物基因组包含有 w ∗ ts万个编码蛋白质
的基因 o这些有限的分子标记位点不一定正好就是控制某一形态性状的结构基因 o因此 o产生形态与分子标
记结果的不一致性是正常的 o也是难以避免的 ∀除此之外 o样本数量 !不同的分析方法 !人为误差等也会在一
定程度上造成形态与分子标记结果的不一致 ∀目前 o越来越多的研究表明 o形态与分子标记的一致度既与物
种的进化背景有关 o也与物种生存环境 !生态习性及标记方法本身有较大关系 o可以根据研究目的不同而选
用不同的方法 ∀人们通常把多种标记方法结合起来使用 o相互补充 o相互完善 o以求从不同层次 !不同水平对
生物系统进化过程做更完美的解释 ∀
3 .3 人心果品种及其分类
种是植物分类学上的基本单位 o品种是在种以下划分出的生产资料 ∀如果严格按照/品种0的概念 o试验
vy 第 |期 文亚峰等 }人心果品种资源亲缘关系的 „ƒ°分析
所选用的 uz人心果材料中 o除美国的 tv个和我国海南 w个栽培品种外 o其他材料尚不能称为/品种0 o最多
只能算/地方类型0 ∀根据笔者前期表型分析结果 o可初步将人心果分为几个大的类型 k文亚峰等 oussyl o但
要对人心果品种进行系统分类 o就必须在长期观察的基础上 o寻找标记性状较为明显且能稳定遗传的质量或
数量形态性状 ∀结合形态标记与分子标记结果来看 o嫩梢k叶l颜色可能为质量性状 o适合作为分类依据 ∀大
部分栽培品种聚在 ⁄2u亚组 o而地方类型k野生种l分布于其他不同的组内 o这种差异可能与果实品质性状相
关 o分类研究时可重点考虑果实性状特征 ∀就花器特征而言 o虽然形态与分子聚类结果一致 o但取样的海南
v个品种亲缘关系过近 o花器特征是否能作为分类依据 o有待进一步观察 ∀
参 考 文 献
宋红竹 o张绮纹 o周春江 qussz1 杨树部分种的 „ƒ°遗传多样性分析 q林业科学 owvktul }yw p y|1
谭卫萍 qussu1龙眼种质资源遗传多样性分子评价及分类研究 q长沙 }湖南农业大学硕士学位论文 q
王 利 o邢世岩 o王 芳 o等 quss{1 银杏雌株种质遗传关系的 „ƒ°分析 q林业科学 owwkwl }w{ p xv q
王 献 o张启祥 o杨秋生 o等 qussx1 利用 „ƒ°研究紫薇的亲缘关系 q北京林业大学学报 ouzktl }x| p yv1
文亚峰 o谢碧霞 o潘晓芳 o等 qussy1 人心果品种资源表型遗传多样性研究 q中南林学院学报 ouzkyl }uz p vt1
文亚峰 qussy1人心果品种资源亲缘关系及其授粉亲和性的研究 q长沙 }中南林业科技大学博士学位论文 q
谢碧霞 o文亚峰 o何 钢 o等 qussx1 我国人心果的品种资源 !生产现状及发展对策 q经济林研究 ouvktl }t p v1
易干军 o霍合强 o陈大成 o等 qussv1 荔枝品种亲缘关系的 „ƒ°分析 q园艺学报 ovskwl }v|| p wsv1
朱根发 o李冬梅 o郭振飞 qussz1 大花惠兰遗传多样性及亲缘关系的 „ƒ°分析 q园艺学报 ovwkul }wtz p wuw1
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k责任编辑 徐 红l
wy 林 业 科 学 ww卷