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THE BIOLOGICAL CHARACTERISTICS OF ACTINORMYCETES FRANKIA LIVING IN ROOTS OF CASUARINA

木麻黄根瘤内生菌生物学特性研究


对与福建、广州的细枝木麻黄、短枝木麻黄和粗枝木麻黄共生的1 7株根瘤内生菌进行了形态培养、生理类群、营养源利用、代谢酶、宿主特异性等生物学特性进行了系统研究。结果表明,17株木麻黄根瘤内生菌具有分枝状菌丝、孢囊、泡囊等Frankia菌的特征性结构,FCc64、FCc92、FCe3 3等菌株还具有串珠状菌丝段。木麻黄内生菌有A、B、AB等3种生理类群,其中B群内生菌多。菌株离体培养具有固氮酶活性,且差异显著。多数木麻黄内生菌能良好利用吐温,只有少数菌株可利用葡萄糖等糖类物质。内生菌不同生理类群在碳氮源利用、有机酸羧化和代谢酶产生等方面没有明显的对应关系,表现出丰富的多样性。侵染试验表明木麻黄Frankia菌株不仅可在木麻黄属内种间进行交叉侵染,还能侵染杨梅、沙枣和桤木等植物结瘤。

Systematic studies of the biological characteristics were carried out on 17 Frankia strains isolated from the root nodules of actinorhizal plants Casuarina in Fujian and Guangzhou, including morphology, culture, physiological group, nutrient utilization, nitrogenase activity and host specificity. The observations by microscopy demonstrated that all the strains tested showed a typical Frankia morphology, with filamentous hyphae, multilocular sporangia borne terminally, laterally, or in an intercalary position on branching hyphae. Terminal or lateral borne vesicles were generally formed on lack of nitrogen, the isolates FCcAC04、FCe75、FCc92 and FCg77 formed occasionally terminal vesicles in presence of nitrogen. Variations in hypha diameter, sporangia and vesicle numbers were noted between media and isolates. The specialized reproducrive torulose hyphae were found in strains FCc64、FCc92、FCe33. The Frankia isolates whether from the same species or a single plant had a quite difference on clonal shape, color and pigment. Fifteen Frankia isolates were found to fall into three physiological groups, two isolates were belonged to group A, eight were group B and five were group AB. There was no apparent correlation of physiological groups with pattern on utilization of carbon, nitrogen and organic acids. Nearly all the isolates were likely to utilize NZ amine, sodium acetate, sodium propionate and Tween-80, but potassium nitrate and sodium benzoate, sodium succinate, sodium citrate used by different strains. Cellulase, pectinase had not been found in all isolates but proteinase was produced in some strains cultured. All strains tested grew well in the media lack of nitrogen and did not produce the cellulase. Nitrogenase activity of strains was monitored in culture and varied greatly among isolates. The inoculation expriment result showed that the strains from Casuarina not only had ability to infect Casuarina, but also to infect Myrica rubra, Elaeagnus angustifoli and Alnus cremastogym. And it reflected that Frankia in roots of Casuarina in China might have a wide diversity.


全 文 :第 v|卷 专刊 t
u s s v年 tu 月
林 业 科 学
≥≤Œ∞‘׌„ ≥Œ∂ „∞ ≥Œ‘Œ≤„∞
∂²¯ qv| o≥³qt
⁄¨ ¦qou s s v
木麻黄根瘤内生菌生物学特性研究 3
李志真tl 谢一青ul 王志洁vl 杨宗武xl
k福建省林业科学研究院 福州 vxsstul
陈启锋wl
k福建农林大学 福州 vxsssul
摘 要 } 对与福建 !广州的细枝木麻黄 !短枝木麻黄和粗枝木麻黄共生的 tz株根瘤内生菌进行了形态培养 !
生理类群 !营养源利用 !代谢酶 !宿主特异性等生物学特性进行了系统研究 ∀结果表明 otz株木麻黄根瘤内生
菌具有分枝状菌丝 !孢囊 !泡囊等 Φρανκια菌的特征性结构 oƒ≤¦yw !ƒ≤¦|u !ƒ≤ v¨v等菌株还具有串珠状菌丝段 ∀
木麻黄内生菌有 „ !… !„…等 v种生理类群 o其中 …群内生菌多 ∀菌株离体培养具有固氮酶活性 o且差异显著 ∀
多数木麻黄内生菌能良好利用吐温 o只有少数菌株可利用葡萄糖等糖类物质 ∀内生菌不同生理类群在碳氮源
利用 !有机酸羧化和代谢酶产生等方面没有明显的对应关系 o表现出丰富的多样性 ∀侵染试验表明木麻黄
Φρανκια菌株不仅可在木麻黄属内种间进行交叉侵染 o还能侵染杨梅 !沙枣和桤木等植物结瘤 ∀
关键词 } 木麻黄 oΦρανκια o生物学特性 o生理类群 o宿主特异性
收稿日期 }ussv p sv p ut ∀
基金项目 }福建省科技厅自然基金项目k…||vsstl资助 ∀
3 tl !ul !vl !wl !xl为作者排序 ∀参加工作的还有王元贞 !郭素珍 !黄琼春 !李朝晖等同志 o在此一并致谢 ∀
ΤΗΕ ΒΙΟΛΟΓΙΧΑΛ ΧΗΑΡΑΧΤΕΡΙΣΤΙΧΣ ΟΦ ΑΧΤΙΝΟΡ ΜΨΧΕΤΕΣ ΦΡΑΝΚΙΑ
ΛΙςΙΝΓ ΙΝ Ρ ΟΟΤΣ ΟΦ ΧΑΣΥΑΡΙΝΑ
¬«¬½«¨ ±tl ÷¬¨ ≠¬´¬±ªul • ¤±ª«¬­¬¨vl ≠¤±ª²±ªº∏xl
k Φυϕιαν Αχαδεµψοφ Φορεστρψ Φυζηουvxsstul
≤«¨ ± ±¬©¨ ±ªwl
k Φυϕιαν Αγριχυλτυρε ανδ Φορεστρψ Υνιϖερσιτψ Φυζηουvxsssul
Αβστραχτ } ≥¼¶·¨°¤·¬¦¶·∏§¬¨¶²©·«¨ ¥¬²¯²ª¬¦¤¯ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶º¨ µ¨ ¦¤µµ¬¨§²∏·²±tz Φρανκια¶·µ¤¬±¶¬¶²¯¤·¨§©µ²°·«¨ µ²²·
±²§∏¯ ¶¨²©¤¦·¬±²µ«¬½¤¯ ³¯¤±·¶ Χασυαρινᬱ ƒ∏­¬¤± ¤±§ Š∏¤±ª½«²∏o¬±¦¯∏§¬±ª °²µ³«²¯²ª¼o¦∏¯·∏µ¨ o³«¼¶¬²¯²ª¬¦¤¯ ªµ²∏³o
±∏·µ¬¨±·∏·¬¯¬½¤·¬²±o ±¬·µ²ª¨±¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§«²¶·¶³¨¦¬©¬¦¬·¼q ׫¨ ²¥¶¨µ√¤·¬²±¶¥¼ °¬¦µ²¶¦²³¼ §¨ °²±¶·µ¤·¨§·«¤·¤¯¯·«¨
¶·µ¤¬±¶·¨¶·¨§¶«²º¨ §¤·¼³¬¦¤¯ Φρανκια °²µ³«²¯²ª¼o º¬·«©¬¯¤°¨ ±·²∏¶«¼³«¤¨ o °∏¯·¬¯²¦∏¯¤µ¶³²µ¤±ª¬¤ ¥²µ±¨ ·¨µ°¬±¤¯ ¼¯ o
¤¯·¨µ¤¯ ¼¯ o²µ¬±¤±¬±·¨µ¦¤¯¤µ¼³²¶¬·¬²±²±¥µ¤±¦«¬±ª«¼³«¤¨ q× µ¨°¬±¤¯ ²µ¯¤·¨µ¤¯ ¥²µ±¨ √¨ ¶¬¦¯¨ ¶º¨ µ¨ ª¨ ±¨ µ¤¯ ¼¯©²µ°¨ §²± ¤¯¦®
²©±¬·µ²ª¨±o·«¨ ¬¶²¯¤·¨¶ƒ≤¦„≤sw !ƒ≤ z¨x !ƒ≤¦|u ¤±§ƒ≤ªzz ©²µ°¨ §²¦¦¤¶¬²±¤¯ ¼¯ ·¨µ°¬±¤¯ √¨ ¶¬¦¯¨ ¶¬± ³µ¨¶¨±¦¨ ²©±¬·µ²ª¨±q
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µ¨³µ²§∏¦µ¬√¨ ·²µ∏¯²¶¨ «¼³«¤¨ º¨ µ¨ ©²∏±§¬± ¶·µ¤¬±¶ƒ≤¦yw !ƒ≤¦|u !ƒ≤ v¨v q ׫¨ Φρανκια ¬¶²¯¤·¨¶º«¨·«¨µ©µ²° ·«¨ ¶¤°¨
¶³¨¦¬¨¶²µ¤¶¬±ª¯¨³¯¤±·«¤§¤ ∏´¬·¨ §¬©©¨µ¨±¦¨ ²± ¦¯²±¤¯ ¶«¤³¨ o¦²¯²µ¤±§³¬ª°¨ ±·qƒ¬©·¨¨ ± Φρανκιᬶ²¯¤·¨¶º¨ µ¨ ©²∏±§·²
©¤¯¯¬±·²·«µ¨¨³«¼¶¬²¯²ª¬¦¤¯ ªµ²∏³¶o·º²¬¶²¯¤·¨¶º¨ µ¨ ¥¨ ²¯±ª¨§·²ªµ²∏³ „ o ¬¨ª«·º¨ µ¨ ªµ²∏³ … ¤±§©¬√¨ º¨ µ¨ ªµ²∏³ „…q
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¬¶²¯¤·¨¶q׫¨ ¬±²¦∏¯¤·¬²± ¬¨³µ¬°¨ ±·µ¨¶∏¯·¶«²º¨ §·«¤··«¨ ¶·µ¤¬±¶©µ²° Χασυαρινα ±²·²±¯¼ «¤§¤¥¬¯¬·¼·²¬±©¨¦·Χασυαριναo
¥∏·¤¯¶²·²¬±©¨¦·Μψριχα ρυβραo Ελαεαγνυσ ανγυστιφολι ¤±§ Αλνυσ χρεµαστογψµ q „±§¬·µ¨©¯ ¦¨·¨§·«¤·Φρανκιᬱµ²²·¶²©
Χασυαρινᬱ ≤«¬±¤ °¬ª«·«¤√¨ ¤ º¬§¨ §¬√¨ µ¶¬·¼q
Κεψ ωορδσ} Χασυαριναo Φρανκιαo…¬²¯²ª¬¦¤¯ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶o°«¼¶¬²¯²ª¬¦¤¯ ªµ²∏³o‹²¶·¶³¨¦¬©¬¦¬·¼
木麻黄k Χασυαριναl是我国南方沿海防护林的重要树种 o在防风固沙 !保护农田 !提供薪炭材 !改善生
态环境和发展沿海地区经济等方面发挥着巨大的作用 ∀木麻黄同时也是一类放线菌结瘤植物 o在自然
状态下能与放线菌 Φρανκια共生 o形成根瘤 o固定空气中的氮素 o使树木能够在养分贫瘠的沙地上生长
良好 ∀因此开展木麻黄共生固氮研究 o对于提高木麻黄的共生固氮效率 o促进防护林生长更新有着重要
的理论意义和应用前景 ∀
自 ⁄¬¨°等kt|{ul从木麻黄根瘤上成功分离到 Φρανκια纯培养菌株 ⁄Œt 和 Šu 以来 o各国学者在木麻
黄 Φρανκια的分离培养k«¤±ª ετ αλqot|{w ~蒋建德等 ot|{x ~李志真等 ot||{l !形态特征k李忠伟等 ot|{y ~
黄雅丽等 ot|{|l !生理特性k袁长芳 ot|{z¤~t|{z¥~康丽华等 ot||y ~ײµµ¨¼ ετ αλqot|{w ~«¤±ª ετ αλqot|{x ~
¨¦«¨ √¤¯¬¨µot||wl !同功酶k张道海等 ot|{|l !限制性酶切图谱k‘¤½¤µ¨·ετ αλqot|{|l !宿主侵染k…¤®¨µo
t|{z ~ײµµ¨¼ot|{|l !分子多态性k•²∏√¬¨µετ αλqot||yl等诸方面进行了研究 ∀关于 Φρανκια分类 o现今只
确定至/属0 o尚不能进行/种0的划分k胡传炯等 ot||z ~¨¦«¨ √¤¯¬¨µot||wl ∀木麻黄分布广泛 o生态环境多
种多样 o目前分离培养和研究的 Φρανκια菌株来源及数量有限 o菌株间表现出丰富的差异性 o因此有必
要更广泛地收集 Φρανκια菌株 o开展其生物学特性和共生特性研究 o为深入了解 Φρανκια菌 o正确进行分
类提供基础 ∀基于此 o本文针对福建 !广东沿海和山地生长的木麻黄根瘤内生菌开展了形态培养 !生理
类型 !营养源利用 !代谢酶 !宿主特异性等生物学特性的系统研究 ∀
t 材料与方法
111 试验材料
参试木麻黄根瘤内生菌 tz 株 oty 株分离自福建沿海和山地的细枝木麻黄 k Χασυαρινα
χυννινγηαµιαναl !短枝木麻黄k Χq εθυισετιφολιαl和粗枝木麻黄k Χqγλαυχαl等根瘤 ot株来自广州的短枝木
麻黄 o由中国林业科学研究院热带林业研究所康丽华研究员惠赠 ∀以杨梅k Μψριχα ρυβραl Φρανκια菌株
uutx !ƒµx|和四川桤木kΑλνυσχρεµαστογψνεl Φρανκια菌株 ƒ„¦st为对照 ouutx分离自云南杨梅根瘤 o为中
国科学院微生物研究所刘志恒研究员赠送 oƒµx| !ƒ„¦st分别从福建杨梅 !四川桤木根瘤上分离获得 ∀
各菌株的宿主来源见表 t ∀
112 研究内容和方法
t1u1t 形态特征 tz株木麻黄根瘤内生菌和 v株对照菌株分别接种于 ≥k¨¦«¨ √¤¯¬¨µετ αλqot|{vl !…„°
k∏µµ¼ ετ αλqot|{wl !„k„®®¨µ°¤±¶ ετ αλqot|{vl等 v种液体培养基内 ouz ε 静置培养 w ∗ tu周 o于光学
显微镜和电子显微镜下观察各菌株的形态结构 ∀
t1u1u 培养特征 us株根瘤内生菌接种于 ≥ !…„° !„等液体培养基内 ouz ε 静置培养 w ∗ {周 o观察菌
株在液体培养基中的生长特征 ∀同时观察生长于 ≥斜面培养基上的固体菌落特征 ∀
t1u1v 生理类型 根据 ¨¦«¨ √¤¯¬¨µ等kt|{vl的生理类群划分方法 o将经同期预培养的参试菌株接种于
含 ׺¨ ±¨ p {s和不含 ׺¨ ±¨ p {s的 ts ª#pt葡萄糖的 ‘„≥培养基k分别记作 ts≥和 ts≥ n ×l ouz ε 暗处
静置培养 oy周后测定菌丝体的生长量 o以比较其生理类群 ∀另外就不同类群各取 t个菌株在含 ׺¨¨ ±
p {s和无 ׺¨ ±¨ p {s的 ts ª#pt和 us ª#pt的葡萄糖培养液中培养 u !w !y !{周 o根据菌株生长量进一步
检测其生理类群 }‘„≥基础培养基 o简称 ≥ ~≥ n ts ª#pt葡萄糖 o简称 ts≥ ~≥ n us ª#pt葡萄糖 o记为
us≥ ~≥ n u ª#pt׺¨ ±¨ p {s o简称 × n ≥ ~≥ n u ª#pt׺¨ ±¨ p {s n ts ª#pt葡萄糖 o记为 × n ts≥ ~× n ≥ n u ª#
pt׺¨¨ ±p {s n us ª#pt葡萄糖 o简称 × n us≥ ∀接种时先离心收集预培养菌丝体测定其生物量 o根据生
物量匀浆稀释 o使单位体积含相同重量菌丝体 o等量接种于上述各培养基 ∀
t1u1w 营养源利用 碳源 分别以 ts ª#pt的甘油 !山梨醇 !木糖 !甘露糖 !葡萄糖 !果糖 !乳糖 !蔗糖 !
麦芽糖 !吐温和 t ª#pt可溶性淀粉代替 …„°中的丙酸钠 o其它成分不变 ∀以 t1u1v方法稀释菌体等量
接种 ouz ε 暗处静置培养 w周 o观察菌丝体生长 o加入 ts ª#pt的溴甲酚紫数滴以检测菌株是否利用碳
源产酸 ∀以不含碳源的 …„°培养基菌株生长为对照 ∀有机酸 分别以 u ª#pt的乙酸钠 !丙酮酸钠 !丁
二酸钠 !苹果酸钠 !草酸钠 !苯甲酸钠等 y种有机酸取代 …„°中的丙酸钠 o以加入丙酸钠和不含碳源的
swt 林 业 科 学 v|卷
…„°菌株生长为对照 ∀氮源 以 ts ª#pt的硫酸铵 !硝酸钾 !尿素 !蛋白胨 !牛肉膏 !酪蛋白代替 …„°中
的氯化铵 o其它成分不变 o以不含氮源的 …„°菌株生长为对照 ∀每种处理均设 v次重复 ∀
表 1 参试根瘤内生菌及其来源
Ταβ . 1 Στραινστεστεδ ανδ τηε γεογραπηιχαλ διστριβυτιον οφ χολλεχτιον σιτεσ
菌株 ≥·µ¤¬±¶ 宿主植物 ‹²¶·²©²µ¬ª¬± 采集地点 ²¦¤·¬²± 土壤 ≥²¬¯ 土壤 ³‹ ³‹ ²©¶²¬¯
ƒ≤¦„¦su 福州 ƒ∏½«²∏ 珍珠岩 °¨ µ¯¬·¨ z1us
ƒ≤¦„¦sw 福州 ƒ∏½«²∏ 珍珠岩 °¨ µ¯¬·¨ z1us
ƒ≤¦yw 细枝木麻黄 福鼎 ƒ∏§¬±ª 山地红壤 • §¨¶²¬¯ y1st
ƒ≤¦|t Χqχυννινγηαµιανα 惠安 ‹∏¬. ¤± 沿海沙地 ≥¤±§ z1wx
ƒ≤¦|u 厦门 ÷¬¤°¨ ± 山地红壤 • §¨¶²¬¯ p
ƒ≤¦|v 惠安 ‹∏¬. ¤± 沿海沙地 ≥¤±§ z1wx
ƒ≤ t¨| 东山 ⁄²±ª¶«¤± 沿海沙地 ≥¤±§ p
ƒ≤ u¨v 东山 ⁄²±ª¶«¤± 沿海沙地 ≥¤±§ p
ƒ≤ v¨v 惠安 ‹∏¬. ¤± 沿海沙地 ≥¤±§ z1wt
ƒ≤ v¨z 短枝木麻黄 惠安 ‹∏¬. ¤± 沿海沙地 ≥¤±§ z1wt
ƒ≤ z¨u Χqεθυισετιφολια 惠安 ‹∏¬. ¤± 沿海沙地 ≥¤±§ z1u{
ƒ≤ z¨x 惠安 ‹∏¬. ¤± 沿海沙地 ≥¤±§ z1u{
ƒ≤ w¨u 莱舟 ¤¬½«²∏ 山地红壤 • §¨¶²¬¯ x1{v
|xxs 广州 Š∏¤±ª½«²∏ 山地红壤 • §¨¶²¬¯ p
ƒ≤ªsz
ƒ≤ªs{
ƒ≤ªzz
粗枝木麻黄
Χqγλαυχα
东山 ⁄²±ª¶«¤±
东山 ⁄²±ª¶«¤±
福清 ƒ∏´¬±ª
沿海沙地 ≥¤±§
沿海沙地 ≥¤±§
山地红壤 • §¨¶²¬¯
p
p
p
uutx 杨梅 云南 ≠∏±±¤± 山地红壤 • §¨¶²¬¯ p
ƒµx| Μq ρυβρα 福鼎 ƒ∏§¬±ª 山地红壤 • §¨¶²¬¯ w1ws
ƒ„¦st 四川桤木Αq χρεµαστογψνε 莱舟 ¤¬½«²∏ 山地红壤 • §¨¶²¬¯ x1w{
t1u1x 其它生理特性 以无碳源的 …„°为基础培养基进行下列生理试验 ∀纤维素酶 在基础培养基
中加入滤纸条 o如果菌体生长 o说明菌体能分泌纤维素酶 ∀蛋白酶 在基础培养基中加入 t ª#pt酪素 o
如果菌体生长 o说明菌体产生蛋白酶 ∀尿素 在基础培养基中加入 s1x ª#pt丙酸钠和 t ª#pt尿素 o培
养 w周后用酚红作指示剂检测 ∀如果培养液变红为阳性反应 o说明菌株能利用尿素 ∀硫化氢 在基础
培养基中加入 s1x ª#pt丙酸钠 !ts ª#pt胰蛋白胨和 s1x ª#pt柠檬酸钠 o如果培养后有黑色产物出现 o
说明菌体能产生硫化氢 ∀硝酸还原 在基础培养基中加入 s1x ª#pt丙酸钠和 t ª#ptŽ‘’v o培养 w周
后 o加格里斯试剂测定硝酸盐还原反应 ∀苯丙氨酸 在基础培养基中加入 s1x ª#pt丙酸钠和 u ª#pt
的苯丙氨酸 o菌体培养 w周后 o加入 ƒ ≤¨¯ v 观察培养液是否变绿色 o变色的表明菌体能利用苯丙氨酸产生
苯丙酮酸 ∀明胶液化 在基础培养基中加入 s1x ª#pt丙酸钠 !uss ª#pt明胶 o培养 w周后观察明胶是
否液化 ∀每种处理均设 v次重复 ∀
t1u1y 固氮酶活性 将经同期预培养的 us株参试菌株接种于无氮源的 …„°中 ouz ε 暗处静置培养 us
§o收集菌体转移到 | °的玻璃小瓶内 o密封 o注入体积分数为 ts h的乙炔 o振荡培养 x §o用气相色谱仪
测定乙烯生成量k丁鉴等 ot|{yl o同时以考马斯亮兰法测定各菌株菌体蛋白计算其固氮酶活性
k…µ¤§©²µ§ot|zyl ∀
t1u1z 宿主特异性 us株参试内生菌经 …„°或„培养 { ∗ tu周 o离心收集菌体 o匀浆制备成菌液接种
剂 ∀以菌液分别浸泡细枝木麻黄 !短枝木麻黄 !粗枝木麻黄 !杨梅 !四川桤木 !沙枣 k Ελαεαγνυσ
ανγυστιφολιαl等无菌幼苗 u «∀苗木移栽至袋装的灭菌珍珠岩内 ∀每菌株处理 y ∗ tt株 o接种量为每株
s1sx ∗ s1t °ª湿菌体 o每个菌株接菌苗放置在同一育苗框内 o各育苗框单独排放以避免交叉感染 ∀以冷
开水浇育苗木 o每 u ∗ v周浇以 xs ∗ tss °的无氮 ≥¬§¨µ2¼²∏±ª苗木营养液k休伊特等 ot|yxl o接种 w ∗ y
月后调查苗木结瘤状况 ∀
twt 专刊 t 李志真等 }木麻黄根瘤内生菌生物学特性研究
u 结果与分析
211 形态特征
光学显微镜和电子显微镜下的观察结果表明 ous株参试菌株在 w种液体培养基中都具有分枝菌
丝 !孢囊或泡囊等形态特征 ∀
u1t1t 菌丝体 菌丝体呈分枝丝状 o粗细不均 ∀木麻黄根瘤内生菌 ƒ≤¦yw !ƒ≤¦|s !ƒ≤¦|t !ƒ≤¦|u !ƒ≤¦|v !
ƒ≤ t¨| !ƒ≤ u¨v !ƒ≤ v¨v !ƒ≤ v¨z !ƒ≤ w¨u !ƒ≤ z¨u !ƒ≤ªzz菌丝体粗大 o直径约在 s1xv ∗ t1ss Λ° o波曲不多 ~菌株
ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦„≤sw !ƒ≤ªsz !ƒ≤ªs{ !|xxs菌丝体中等粗细 o直径约在 s1vv ∗ s1xs Λ° o较多分枝 ~菌株 ƒ≤ z¨x
菌丝体细 o高度分枝波曲 o直径约为 s1us ∗ s1ws Λ°∀对照菌株 uutx !ƒ„¦st的菌丝体较粗大 o直径在
s1vv ∗ s1yz Λ° o而 ƒµx|菌丝体比较细 o波曲高 o分枝多 o直径在 s1vx Λ°以内 ∀同一种菌株在不同培养
液的菌丝体粗细大小略有变化 ∀
u1t1u 孢囊 参试菌株形成孢囊的数量因培养基不同而异 ∀培养 w ∗ y周时 o对照杨梅菌株 ƒµx| !
uutx在 v种培养液内均形成大量的孢囊 o且孢子已成熟 o开始发散 ~桤木菌株 ƒ„¦st仅在 …„°中形成少
量孢囊 o但是在 ≥ !„培养基中孢囊数量较多 ~木麻黄参试菌株在 „ 中可形成孢囊 o而在 …„°中只有
ƒ≤¦yw !ƒ≤¦|u !ƒ≤ v¨v !ƒ≤ v¨z !ƒ≤ w¨u等形成孢囊 ∀该结果说明在 …„°培养液中木麻黄菌株的营养生长时
间长 o在 „内菌株较快进入生殖生长 o形成孢囊 o这可能与 „中富含有机物 !营养生长很快得到满足有
关 ∀孢囊形状多为球型 !草莓型 !纺锤型 !豆荚型 !长棒或短棒型 o有的在棒状孢囊中间凸起或凹入 o形成
不规则孢囊k图 t !ul ∀成熟孢囊的宽度为 t1vs ∗ vt1vs Λ° o长度为 u1yz ∗ wy1xs Λ°∀孢子多呈圆型或卵
型 o边缘先成熟 o成熟时大小约 t1ss ∗ t1yz Λ°∀
图 t ƒµx|的孢囊孢子及泡囊
ƒ¬ªqt ≥³²µ¤±ª¬¤¤±§√¨ ¶¬¦¯¨²©ƒµx|
图 u ƒ≤ªsz不规则孢囊
ƒ¬ªqu Œµµ¨ª∏¯¤µ¯¼ ©²µ° §¨¶³²µ¤±ª¬¤²©ƒ≤ªsz
图 v ƒ≤¦yw的串珠状菌丝
ƒ¬ªqv • ³¨µ²§∏¦·¬√¨ ·²µ∏¯²¶¨ «¼³«¤¨ ²©ƒ≤¦yw
u1t1v 泡囊 多数木麻黄菌株在含氮源的液体培养基中不形成泡囊 o但 ƒ≤¦„≤sw !ƒ≤¦|u !ƒ≤ v¨z !ƒ≤ªzz
等 w株菌株在有氮的 …„°和 ≥培养基中能形成泡囊 ∀杨梅菌株 uutx !ƒµty在含氮的 …„° !≥ !„中都能
形成泡囊 o桤木菌株 ƒ„¦st在含氮的 …„°中不形成泡囊 o在含氮的 ≥ !„则产生泡囊 ∀这些观察结果说
明泡囊的形成受到养分和菌株个体的影响 ∀木麻黄内生菌 ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦„≤sw是从同一环境生长的细枝
木麻黄根瘤中分离得到的 o但是它们在 v种培养基中形成泡囊的能力各不相同 ∀所有参试菌株在无氮
…„°中都可以形成泡囊 ∀泡囊的形状为圆形k图 tl o大小约 s1zs ∗ u1ss Λ°∀菌株来源和培养基成分对
泡囊的形状和大小无甚影响 ∀
u1t1w 串珠状菌丝 在木麻黄内生菌 ƒ≤¦yw ! ƒ≤¦|u !ƒ≤ v¨v的菌丝体中 o发现有部分菌丝形成串珠状菌
丝段k图 vl o其长度不等 o类似于链霉菌上的分生孢子链 ~在一些串珠状菌丝的一端或中间有膨大的椭
圆形结构 ∀目前已报道木麻黄 !胡颓子k Ελαεαγνυσπυνγενσl !马桑k Χοριαρια νεπαλενσισl等部分 Φρανκια存在
串珠状菌丝段k⁄¬¨° ot|{x ~胡传炯 ot||zl o⁄¬¨°认为这种结构是 Φρανκια的另一种繁殖方式 ∀
212 培养特征
uwt 林 业 科 学 v|卷
u1u1t 液体培养特征 参试内生菌菌丝体大多生长在试管的底部 o呈致密颗粒状 !疏松絮状或絮状颗
粒等 o部分菌株如木麻黄 ƒ≤ w¨u !ƒ≤ z¨u !ƒ≤ z¨x以及参考菌株 uutx附着在试管壁上生长 o紧密或松散 ∀
一些菌株能形成菌膜 o如菌株 ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦„≤sw在 ≥培养基中形成菌膜 o但在 …„°和 „中不形成菌膜 ∀
u个菌株在 ≥ !…„°中呈颗粒状 o在 „中则为絮状 o这说明了菌株的培养特征因养分不同而发生变化 ∀
木麻黄内生菌多呈浅白色或荔肉白 o与对照桤木内生菌 ƒ„¦st色泽相似 o杨梅内生菌 uutx !ƒµx|则为
浅红色 ∀参试菌株在 v种培养基中均不分泌可溶性色素 ∀各菌株在不同培养基中的生长表现略有差
异 ∀等量接种及相同条件下培养 o菌株 ƒ≤ªsz !ƒ≤ v¨z在 …„°中生长较差 o其它木麻黄菌株在 v种培养基
中均生长良好 o杨梅菌株在 ≥和 „ !桤木菌株在 …„°和 „中生长良好 ∀
u1u1u 固体培养特征 us个参试菌株在 ≥固体斜面上均不产生气生菌丝 o不分泌可溶性色素 ∀木麻黄
菌落多为灰白色 !灰黄色 o菌落凸起 o光滑致密 o有光泽 ~但是 ƒ≤ v¨v !ƒ≤ z¨u菌落质地松软 ∀杨梅 uutx !桤
木 ƒ„¦st菌落凸起致密 o杨梅 ƒµx|在固体斜面上则呈放射状 o坚韧无光泽 ∀
213 生理类群
¨¦«¨ √¤¯¬¨µ等kt|{vl根据 Φρανκια对葡萄糖的利用状况划分生理类群 ∀无 ׺¨ ±¨ p {s条件下菌株能
良好利用葡萄糖 o׺¨ ±¨ p {s存在使菌株生长受到抑制的为生理 „群 ~缺乏 ׺¨ ±¨ p {s菌株对葡萄糖利
用不良 o加入 ׺¨ ±¨ p {s能明显促进菌株生长的为生理 …群 ∀从表 u结果可知 o加入 ׺¨ ±¨ p {s oƒ≤¦|u !
ƒ≤ w¨u等 u株菌株生长受到抑制 o属生理 „群 ∀ ƒ≤¦|t !ƒ≤¦|v !ƒ≤ u¨v !ƒ≤ v¨v !ƒ≤ v¨z !|xxs !ƒ≤ªsz和 ƒ≤ªs{
等 {株菌株在加入 ׺¨ ±¨ p {s后能更好地利用葡萄糖 o生长得到促进 o为生理 …群 ∀另外 x株菌株无论
׺¨ ±¨ p {s存在与否 o菌丝体都能达到相同的最大生长量 o表明这些菌株同时包含 „群或 …群的特性 o
为 „…混合群 o它们是 ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦„≤sw !ƒ≤ t¨| !ƒ≤ªzz ∀参考菌株杨梅 ƒµx| !uutx和桤木 ƒ„¦st在加入
׺¨ ±¨ p {s后生长更好 o属生理 …群 ∀随机取不同生理类群的 v个菌株 ƒ≤¦|u !ƒ≤¦„≤su和 ƒ≤ u¨v进行 u !
w !y !{周的生长动态观察 o其结果验证了上述生理类群的划分k图 wl ∀
从上述试验结果可知 o木麻黄内生菌属生理 …群的多 ∀在同一种植物的根瘤内有不同生理类群的
内生菌存在 o如细枝木麻黄内生菌 ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦„≤sw属 „…群 oƒ≤¦|u为 „群 oƒ≤¦|t和 ƒ≤¦|v则为 …群 ∀
来自同一地点的同一种木麻黄 o其根瘤内生菌也有不同的生理类群 o如同是来自惠安的短枝木麻黄内生
菌 oƒ≤ v¨v和 ƒ≤ z¨x为 …群 oƒ≤ z¨u则为 „…群 ∀
214 营养源利用
u1w1t 碳源 除了菌株 ƒ≤ z¨x外 o所有木麻黄和参照杨梅 !桤木菌株都能在以吐温为碳源的培养基中
良好生长 ∀个别菌株能利用少数单糖 !双糖或多糖 o如 ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦„≤sw能少量利用甘油 oƒ≤¦|u !ƒ≤ u¨v !
|xxs能良好利用葡萄糖 oƒ≤¦|u可稍微利用蔗糖 oƒ≤¦„≤sw !ƒ≤¦yw !ƒ≤¦|u和 |xxs能少量利用淀粉 o参试木
麻黄菌株均不能利用山梨醇 !木糖 !甘露糖 !果糖 !乳糖 !麦芽糖 ∀参考菌株杨梅 ƒµx| 和桤木 ƒ„¦st能
少量利用甘露糖并产酸 ouutx能利用葡萄糖 ∀所有菌株在无碳源的培养基中均不生长 ∀
u1w1u 有机酸 us株参试菌株在以乙酸钠 !丙酸钠 !丙酮酸钠为碳源的培养基中生长良好 ∀少数菌株
能利用丁二酸钠 !苹果酸钠 !草酸钠 !苯甲酸钠等有机酸 o如 ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦|u !ƒ≤ªs{和桤木菌株 ƒ„¦st能
良好利用丁二酸钠 oƒ≤¦|u可较好地利用苹果酸钠 oƒ≤ t¨|和 ƒ≤ w¨u在草酸钠培养基中有一定生长 ∀
ƒ≤ t¨|可少量利用苯甲酸钠 o其它参试菌株则均不利用 ∀
u1w1v 氮源 各菌株利用各种氮源的能力有差异 ∀除了 ƒ≤¦„≤ su和 ƒ≤ªzz外 o其它木麻黄内生菌和 v
株参考菌株均能很好地利用酪蛋白 ∀能同时利用铵态氮 !硝态氮和牛肉膏的菌株有 tt 株 o它们是
ƒ≤¦yw !ƒ≤¦|t !ƒ≤¦|u !ƒ≤ u¨v !ƒ≤ v¨v !ƒ≤ v¨z !ƒ≤ z¨x !|xxs和参考菌株 uutx !ƒµx|和 ƒ„¦st ∀ ƒ≤ªs{可利用
氨态氮 oƒ≤¦|s和 ƒ≤ªsz能利用硝态氮 oƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦|s !ƒ≤ w¨u !ƒ≤ªsz !ƒ≤ªs{和 ƒ≤ªzz等 y个菌株还能利
用牛肉膏 ∀所有菌株不能利用尿素和蛋白胨 o但在缺乏氮源的培养基中都能良好生长 ∀
vwt 专刊 t 李志真等 }木麻黄根瘤内生菌生物学特性研究
表 2 Τωεεν − 80 对木麻黄根瘤内生菌生长量的影响
Ταβ . 2 Ινφλυενχε οφ Τωεεν − 80 ον γροωτη οφ στραινσ ≈°ª#k x°lpt 
菌 株
≥·µ¤¬±¶
培养基  §¨¬¤
ts≥ × n ts≥
类群
°«¼¶¬²¯²ª¬¦¤¯
ªµ²∏³
菌 株
≥·µ¤¬±¶
培养基  §¨¬¤
ts≥ × n ts≥
类群
°«¼¶¬²¯²ª¬¦¤¯
ªµ²∏³
ƒ≤¦„≤su v1ys v1|s „… ƒ≤ z¨u x1us w1zs „…
ƒ≤¦„≤sw v1xx v1|x „… ƒ≤ z¨x u1ss v1zs …
ƒ≤¦|t u1tx v1vx … |xxs v1vx w1sx …
ƒ≤¦|u w1ss v1ws „ ƒ≤ªsz u1{x v1{s …
ƒ≤¦|v u1zs v1ys … ƒ≤ªs{ v1tx w1yx …
ƒ≤ t¨| v1wx v1xs „… ƒ≤ªzz v1ts v1yx „…
ƒ≤ u¨v u1|s w1us … uutx u1{x w1{s …
ƒ≤ v¨v u1vx w1ts … ƒµx| v1tu w1zs …
ƒ≤ w¨u v1ws u1yx „ ƒ„¦st v1vx w1xx …
≠ ts≥ }‘„≥ ° §¨¬∏°¬±¦¯∏§¬±ªt h ª¯∏¦²¶¨ o× n ts≥ }‘„≥ ° §¨¬∏°¬±¦¯∏§¬±ªt h ª¯∏¦²¶¨ ¤±§s1u h ׺¨¨ ± p {s o׫¨ ¶¤°¨ ¥¨ ²¯º q
图 w v株木麻黄菌株在 y种培养基中的生长
ƒ¬ªqw ׫¨ ªµ²º·«²©·«µ¨¨¶·µ¤¬±¶¬±¶¬¬§¬©©¨µ¨±·°¨ §¬¤
) υ ) × n ≥ o) ω ) × n ts≥ o) σ ) × n us≥ o) τ ) ≥ o) ϖ ) ts≥ o) ρ ) us≥ q
k× }s1u h ׺¨¨ ± p {s ~≥ }‘„≥ ° §¨¬∏° ~us≥ }≥ n u h ª¯∏¦²¶¨l
215 其它生理特性
参试 us个菌株均不能使明胶液化 o不能水解纤维素 o不能产生硫化氢 o不利用苯丙氨酸 o但都能水
解尿素 ∀部分菌株还能水解酪素 o这些菌株为 ƒ≤¦„≤ su !ƒ≤ v¨z !ƒ≤ w¨u !ƒ≤ªs{ !ƒ≤ªzz和参考菌株 ƒµx| o
能还原硝酸盐的菌株有 ƒ≤¦|u !ƒ≤ t¨| !ƒ≤ªzz !|xxs和参考菌株 uutx !ƒµx|和 ƒ„¦st ∀
木麻黄根瘤内生菌在营养源利用和相关生理特性上的差异反映出 Φρανκια菌表型多样性的特点 ∀
216 固氮酶活性
tz株内生菌在离体培养下的乙炔还原活性见表 v ∀从表中可知 o菌株间固氮酶活性差异很大 ∀
ƒ≤ v¨z的固氮酶活性最高 o达 w1u| Λ°²¯k°ª#«lpt o其次是 |xxs !ƒ≤¦yw !ƒ≤ªzz !uutx和 ƒ≤ t¨| o其它菌株活
性均较低 ∀通过显微镜检查发现 o乙炔还原活性高的菌株 o泡囊形成的数量多 o活性低的菌株泡囊的数
量也少 ∀
217 宿主特异性
来自细枝木麻黄 !短枝木麻黄和粗枝木麻黄的 tt株根瘤内生菌回接 y种放线菌结瘤植物的试验结
wwt 林 业 科 学 v|卷
果见表 w ∀从表中看出 ott株木麻黄内生菌在木麻黄属内种间可以进行交叉侵染 ∀少数木麻黄内生菌
对杨梅 !沙枣 !四川桤木的侵染试验结果表明 o一些木麻黄内生菌能侵染杨梅 !沙枣 !桤木等结瘤 o而一些
木麻黄内生菌则不能感染杨梅或沙枣 o如菌株 ƒ≤ªsz不能侵染杨梅 oƒ≤ªs{不能感染沙枣结瘤 ∀这些试
验结果说明参试木麻黄 Φρανκια菌株有一定的宿主特异性 ∀
表 3 参试菌株的固氮酶活性 ≠
Ταβ . 3 Νιτρογενασε αχτιϖιτψ οφ πυρε χυλτυρεδ Φρανκια στραινσ
菌株 ≥·µ¤¬±¶ ≤u ‹wΠ≈Λ°²¯#k°ª#«l pt  泡囊形成数量 ∂ ¶¨¬¦¯ ¶¨±∏°¥¨µ¶
ƒ≤ v¨z w qu| n n n
|xxs w qs| n n n
ƒ≤¦yw v q{x n n n
ƒ≤ªzz u qyy n n n
ƒ≤ t¨| t qsw n n
ƒ≤¦„≤su s q{| n n
ƒ≤ z¨x s qyt n n
木麻黄 Χασυαρινα ƒ≤ªs{ s qxx n n
ƒ≤¦|u s qxv n n
ƒ≤ v¨v s quv n
ƒ≤¦|t s qut n
ƒ≤ªsz s qut n
ƒ≤¦„≤sw s1ts n
ƒ≤ z¨u s qs| n
杨 梅 uutx t1uy n n
Μqρυβρα ƒµx| s1tu n
桤 木 Αqχρεµαστογψνε ƒ„¦st s qs| n
≠ n n n }多 ∏¦«~n n }中等 ¬§§¯¨~n }少 ¬·¯¨q
表 4 木麻黄内生菌侵染苗木试验
Ταβ . 4 Χροσσινοχυλατιον ον διφφερεντ αχτινορηιζαλ πλαντσ
接种植物
Œ±©¨¦·¨§³¯¤±·¶
试验菌株
× ¶¨·¨§≥·µ¤¬±¶
结瘤率
‘²§∏¯¤·¬²±µ¤·¨Πh
不结瘤菌株
‘² ±²§∏¯¤·¨§≥·µ¤¬±¶
细枝木麻黄
Χq χυννινγηαµιανα ƒ≤¦
„≤su !ƒ≤¦ys !ƒ≤¦|s !ƒ≤ w¨u !ƒ≤ªsz !ƒ≤ªs{ vz qxs∗ tss1s p
短枝木麻黄
Χqεθυισετιφολια
ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦|s !ƒ≤ t¨| !ƒ≤ u¨v !ƒ≤ v¨v !ƒ≤ w¨u !
ƒ≤ªsz !ƒ≤ªs{
ys1ss
∗ tss1s p
粗枝木麻黄
Χqγλαυχα
ƒ≤¦„≤su !ƒ≤¦ys !ƒ≤ u¨v !ƒ≤ u¨z !ƒ≤ w¨u !ƒ≤ z¨x !
ƒ≤ªsz !ƒ≤ªs{
xs1ss
∗ tss1s p
杨梅
Μq ρυβρα ƒ≤¦|s !ƒ≤ w¨u !ƒ≤ªsz tss1s ƒ≤ªsz
沙枣
Ε qανγυστιφολια ƒ≤¦|s !ƒ≤ z¨x !ƒ≤ªs{ tss1s ƒ≤ªs{
四川桤木
Αqχρεµαστογψνε ƒ≤ªsz tss1s p
v 小结与讨论
参试木麻黄根瘤内生菌都具有分枝状菌丝 !孢囊或泡囊等 Φρανκια的特征性结构 o菌株 ƒ≤¦yw !
xwt 专刊 t 李志真等 }木麻黄根瘤内生菌生物学特性研究
ƒ≤¦|u !ƒ≤ v¨v等还具有串珠状菌丝段 ∀根据国际上公认的弗兰克氏菌属的定义 o在形态特征方面描述
为/内生菌纯培养呈放线菌样 o在液体培养中产生不动孢子的孢囊 o有可能形成泡囊0k¨¦«¨ √¤¯¬¨µετ αλqo
t|{|l o所以 o本试验研究的 tz株木麻黄根瘤内生菌都是属于 Φρανκια菌的成员 ∀菌株在菌丝体大小 !孢
囊数量 !泡囊形成等方面存在着明显的差异 o并随着培养基成分而变化 ∀但是这些菌株在菌丝体形态 !
色素等培养特征上较为一致 o与桤木参照菌株相近 o但明显不同于杨梅参照菌株 ∀
由 ¨¦«¨ √¤¯¬¨µ等建立的生理类群划分是研究 Φρανκια菌生理学特性的重要方法之一k¨¦«¨ √¤¯¬¨µετ
αλqot|{v ~…¨ ±¶²± ετ αλqot||vl ∀本研究中木麻黄 Φρανκια有 „ !… !„…等 v种生理类群 o其中 u个菌株为 „
群 o{个菌株为 …群 ox个菌株为 „…混合群 ∀国际上从木麻黄根瘤分离获得的 Φρανκια菌株多为生理 „
群k…¨ ±¶²± ετ αλqot||vl o本试验结果却相反 o…群菌株多 o„群菌株少 o这预示着我国南方沿海木麻黄共
生 Φρανκια类群可能不同于其它木麻黄 Φρανκια∀试验结果还表明在同一种植物的根瘤内有不同生理类
群的内生菌共存 ∀
绝大多数参试木麻黄 Φρανκια菌株可以很好地利用吐温 o但只有少量菌株kƒ≤¦|u !ƒ¦¨vu !|xxsl能较
好利用葡萄糖 ov个菌株能少量利用甘油或蔗糖 ∀这与国际上木麻黄菌株在含糖类物质的培养基生长
良好相比有较大的差异k…¨ ±¶²± ετ αλqot||vl o但对有机酸的利用是相同的 o即都能利用乙酸钠 !丙酸钠 !
丙酮酸钠 o这说明木麻黄 Φρανκια菌株之间对有机酸的脱羧作用比较一致 ∀部分参试菌株对酪蛋白 !牛
肉膏等有机氮和对硫酸铵 !硝酸盐等无机氮都能良好利用 o而一些菌株则只能利用某一种氮源 o这显示
出木麻黄 Φρανκια在氮源利用上的差异性 ∀参试菌株在氮源缺乏环境中均能良好生长 o这表明内生菌
在无氮源环境下能够自行固氮 o为菌丝体生长提供氮源 o这一结论可以在无氮诱导的离体培养菌丝体中
检测到固氮酶活性试验得到证实 ∀
所有参试木麻黄 Φρανκια菌株都不能产生纤维素酶 o不利用苯丙氨酸 o能水解尿素 o部分菌株还可
以水解酪素 o还原硝酸盐 ∀各种生理类群的木麻黄 Φρανκια菌株在碳源和氮源利用 !有机酸羧化 !代谢
酶产生等方面没有明显的对应关系 o表现出明显的个体差异和丰富的生物多样性 ∀
离体条件下木麻黄 Φρανκια菌株的固氮活性差异显著 o这种差异与泡囊的数量变化相对应 ∀该结
果与其它研究结论一致 o即固氮酶活性与泡囊的存在呈正相关k¨¨¤·¨µ¶ ετ αλqot|{x ~׬¶¤ ετ αλqot|{z ~
×­¨³®¨ °¤ ετ αλqot|{sl ∀不少试验已经证实了固氮酶位于泡囊上 o其活性随着泡囊的发展增大k‘²µ¬§ª¨
ετ αλqot|{y ~׬¶¤ ετ αλqot|{zl ∀
Φρανκια具有跨越科属侵染植物结瘤的特性 o与根瘤菌宿主专一性强相比有显著不同 ∀本试验参试
木麻黄 Φρανκια菌株可以在木麻黄属内种间进行交叉感染 o一些菌株能侵染杨梅 !沙枣和四川桤木 o但
一些则不能感染杨梅或沙枣结瘤 ∀关于 Φρανκια宿主特异性 o…¤®¨µ建立的宿主特异类群划分获得普遍
认可k…¤®¨µot|{zl ∀他根据交叉侵染试验结果将 Φρανκια 分为 w 个类群 }第 t 类群为侵染桤木属
kΑλνυσl !香蕨木属k Χοµπτονιαl和杨梅属k Μψριχαl植物 o第 u类群侵染木麻黄科k≤¤¶∏¤µ¬±¤l和杨梅属植
物 o第 v类群感染胡颓子属k Ελαεαγυνσl和杨梅属植物 o这三个类群的菌株同时还侵染 Γψµνοστοµα属的
宿主植物 o第 w类群菌株只能侵染胡颓子属植物 ∀ ײµµ¨¼等kt|{|l总结了 us株木麻黄内生菌 !t株异果
木麻黄kΑλλοχασυαριναλεηµαννιαl内生菌和 t株裸孔木麻黄k Γ qπαπυανυµl内生菌的宿主特异性 }能感染原
宿主木麻黄但不能侵染沙枣或水牛果kΣηεπηερδια ανγεντεαl ~不能侵染原宿主木麻黄 o但可以侵染沙枣或
裸孔木麻黄 o所有试验木麻黄菌株均可侵染甜香杨梅k Μqγαλεl和蜡杨梅k Μqχεριφεραl ∀ ⁄∏等kt||ul对
来自中国 !泰国和澳大利亚的 z株木麻黄 Φρανκια菌进行了宿主侵染特性研究 o结果与 ײµµ¨¼等kt||vl
相同 ∀本研究结果表明 o来自中国福建 !广东的木麻黄 Φρανκια菌株 o除了有以上相同的侵染结果外 o还
有不同之处 }一些木麻黄菌株能侵染桤木 o但不能感染杨梅 ∀这一结果初步反映出我国南方木麻黄
Φρανκια菌的宿主侵染特性多样化 ∀由于本研究用于跨科属侵染试验的菌株数量较少 o我国木麻黄
Φρανκια菌株的宿主侵染特性将有待于进一步深入了解 ∀
参 考 文 献
丁 鉴 o张忠泽 o李忠伟等 q用气相色谱法测定 Φρανκια菌的自生固氮活性 q微生物学报 ot|{y }tyu p tyw
ywt 林 业 科 学 v|卷
胡传炯 o周平贞 o周 启 q弗兰克氏菌分类学研究进展和现状 q微生物杂志 ot||z otzktl }wv p w|
黄雅丽 o丁 鉴 o张忠泽等 q不同属宿主来源的 Φρανκια菌株形态特征的研究 q微生物杂志 ot|{| o|kvl }u| p vw
蒋建德 o朱宝琴 q木麻黄根瘤菌内生菌k Φρανκιαl的分离 !培养和感染性 q科学通报 ot|{x ov }uu{ p uvt
康丽华 o•²¶¥µ²²® ° „ o • §¨§¨¯¯ ° q木麻黄根瘤中分离德三株弗兰克氏菌生长与培养方法的研究 q林业科学研究 ot||y o|ktl }wz p xt
休伊特 ∞q崔 微译 q植物营养研究的砂培和水培法 q北京 }科学出版社 ot|yx }|t p |{
李忠伟 o丁 鉴 q木麻黄根瘤共生放线菌 Φρανκια的研究 q微生物学报 ot|{y ouykwl }u|x p vst
李志真 o李朝晖 o俞如礼等 q木麻黄根瘤内生菌分离培养和宿主范围的研究 q福建林业科技 ot||{ ouxkvl }t{ p uv
袁长芳 q木麻黄根瘤内生菌株的变异性研究 q微生物杂志 ot|{z¤ozkvl }t{ p ut
袁长芳 q一株木麻黄根瘤内生菌的培养条件研究 q微生物学报 ot|{z¥ozkvl }uww p uw{
张道海 o苏凤岩 o丁 鉴 qΦρανκια菌同功酶图谱分析和分类 q微生物杂志 ot|{| o|kvl }tx p ut
„®®¨µ°¤±¶„ ⁄o • ²¨ ²¯©¶¨± • o …¯²°  ετ αλq ˜·¬¯¬½¤·¬²± ²©¦¤µ¥²± ¤±§±¬·µ²ª± ¦²°³²∏±§¶¥¼ Φρανκιᬱ¶¼±·«¨·¬¦° §¨¬¤¤±§¬±µ²²·±²§∏¯ ¶¨²© Αλνυσ
γλυτινοσα oΗιπποπηαε ρηαµνοιδεσo¤±§ ∆ατισχα χανναβινα q≤¤± …²·ot|{v oyt }uz|v p u{ss
…¤®¨µ⁄q • ¨¯¤·¬²±¶«¬³¶¤°²±ª³∏µ¨ ¦∏¯·∏µ¨§¶·µ¤¬±¶²© Φρανκια ¥¤¶¨§²± «²¶·¶³¨¦¬©¬¦¬·¼q°«¼¶¬²¯ °¯ ¤±·ot|{z ozs }uwx p uw{
…¨ ±¶²± ⁄ • o≥²¯√¨ ¶·¨µ• …q…¬²¯²ª¼ ²© Φρανκια στραινσo αχτινοµψχετε σψµβιοντσ οφ αχτινορηιζαλπλαντσq ¬¦µ²¥¬²¯²ª¬¦¤¯ • √¨¬¨º¶ot||v oy }u|v p vt|
…µ¤§©²µ§   q „ µ¤³¬§¤±§¶¨±¶¬·¬√¨ °¨ ·«²§©²µ·«¨ ∏´¤±·¬©¬¦¤·¬²± ²© °¬¦µ²ªµ¤° ∏´¤±·¬·¬¨¶²© ³µ²·¨¬± ³µ¬±¦¬³¯¨²© ³µ²·¨¬± §¼¨ ¥¬±§¬±ªq „±¤¯ …¬²¦«¨ ° o
t|zy ozu }uw{ p uxw
⁄¬¨° ‹ Š oŠ¤∏·«¬¨µ⁄o⁄²°° µ¨ª∏¨¶≠ • qŒ¶²¯¤·¬²± ²© Φρανκια©µ²° ±²§∏¯ ¶¨²© Χασυαρινα εθυισελιφολια q≤¤±  ¬¦µ²¥¬²¯ ot|{u ou{ }xuy p xvs
⁄¬¨° ‹ Š o⁄²°°¨ µª∏¨¶ ≠ • qŒ± √¬·µ² ³µ²§∏¦·¬²± ²©¶³¨¦¬¤¯¬½¨ §µ¨³µ²§∏¦µ¬√¨·²µ∏¯²¶¨ «¼³«¤¨ ¥¼ Φρανκια ¶·µ¤¬± ’• ≥sutsst ¬¶²¯¤·¨§©µ²° Χασυαρινα
ϕυνγηυηνιαναµ²²·±²§∏¯ ¶¨q°¯ ¤±·¤±§≥²¬¯ot|{x ot{z }t p u|
⁄∏⁄¤½«¬o…¤®¨µ⁄ ⁄q„¦·¬±²µ«¬½¤¯ «²¶·2¶³¨¦¬©¬¦¬·¼ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ Φρανκια¶·µ¤¬±¶q°¯ ¤±·¤±§≥²¬¯ot||u otww }ttv p tty
‹∏¤±ª…o«¤²  ≠ o≤«¨ ± Š ÷ ετ αλq ‹²¶·µ¤±ª¨ ²© Φρανκια ±¨§²³«¼·¨¶q°¯ ¤±·¤±§≥²¬¯ot|{x o{z }yt p yx
¨¦«¨ √¤¯¬¨µ ° qפ¬²±²°¼ ²©·«¨ ª¨ ±∏¶ Φρανκια k Αχτινοµψχεταλεσl qŒ±·≥¼¶·…¤¦·¨µ¬²¯ ot||w owwktl }t p {
¨¦«¨ √¤¯¬¨µ ° o…¤®¨µ⁄o‹²µµ¬¨µ¨ ƒ q°«¼¶¬²¯²ª¼ o¦«¨ °¬¶·µ¼o¶¨µ²¯²ª¼ o¤±§¬±©¨¦·¬√¬·¼ ²©·º² Φρανκιᬶ²¯¤·¨¶©µ²° Αλνυσινχανα¶∏¥¶³qρυγοσα q≤¤± 
…²·ot|{v oyt }u{uy p u{vv
¨¦«¨ √¤¯¬¨µ ° o¨¦«¨ √¤¯¬¨µ ‹ „ q Š¨ ±∏¶ Φρανκια ¥µ∏±¦«²µ¶·t{{y otzw„qŒ±} • ¬¯¯¬¤°¶≥ × o ≥«¤µ³¨  ∞o ‹²¯· Š §¨¶qo …¨ ¼ª¨¼. ¶ °¤±∏¤¯ ²©
¶¼¶·¨°¤·¬¦¥¤¦·¨µ¬²¯²ª¼ q׫¨ • ¬¯¯¬¤°¶ • ¬¯®¬±¶≤²o…¤¯·¬°²µ¨ ot|{| ow }uwts p uwtz
¨¨¤·¨µ¶×  o∂¤±ª¨ ±¨ ¶¨± ≥ × o„®®¨µ°¤±¶„ ⁄ q Šµ²º·«o¤¦¨·¼¯ ±¨¨ µ¨§∏¦·¬²± ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§ ²¯¦¤¯¬½¤·¬²± ²©±¬·µ²ª¨ ±¤¶¨ ¬± µ¨ ¤¯·¬²±·² √ ¶¨¬¦¯¨©²µ°¤·¬²±¬±
Φρανκια¶·µ¤¬±¶≤¦t1tz ¤±§≤³t1u1 „µ¦«q¬¦µ²¥¬²¯ ot|{x otwv }tvz p twu
∏µµ¼  „ oƒ²±·¤¬±¨  ≥ oײµµ¨¼Š qŠµ²º·«®¬±¨ ·¬¦¶¤±§±¬·µ²ª¨ ±¤¶¨ ¬±§∏¦·¬²±¬± Φρανκιᶳq‹ƒ°„Œv ªµ²º±¬± ¥¤·¦«¦∏¯·∏µ¨ q°¯ ¤±·¤±§≥²¬¯ot|{w o
z{ }yt p z{
‘¤½¤µ¨·≥ o≥¬°²±¨ ·° o‘²µ°¤±§° ετ αλq Š¨ ±¨ ·¬¦§¬√¨ µ¶¬·¼ ¤°²±ª Φρανκιᬶ²¯¤·¨§©µ²° Χασυαρινα ±²§∏¯ ¶¨q°¯ ¤±·¤±§≥²¬¯ot|{| ott{ }uwt p uwz
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zwt 专刊 t 李志真等 }木麻黄根瘤内生菌生物学特性研究