全 文 ：毛白杨内生菌优势种毛壳 ‘⁄vx
室内拮抗作用的研究
刘晓光 高克祥 谷建才 杜建玲 唐秀光
k河北农业大学林学院 保定 sztsssl
摘 要 } 对毛白杨内生真菌区系种群分析 o筛选出优势种毛壳 ‘⁄vx o并测试了它对 y种常见林果病害病原真
菌的拮抗作用 ∀结果表明 o毛壳 ‘⁄vx是一种广谱性拮抗菌 o对供试的 y种病菌存在不同程度的抑制作用 ∀可
降低病菌菌丝的生长率和孢子的萌发率 o并对小核菌的菌核进行重寄生 o从而抑制其萌发 ∀毛壳 ‘⁄vx的菌丝
还产生吸器 !附着枝等结构对立枯丝核菌k Ρηιζοχτονιασολανιl等病菌的菌丝进行重寄生 o在显微镜下可观察到病
菌的菌丝被缠绕 !穿透 !断裂等现象 ∀抑菌带和抑菌圈的产生证明抗生活动是毛壳 ‘⁄vx的主要拮抗作用机制
之一 ∀对活体毛白杨组培苗进行人工接种试验 o结果用毛壳 ‘⁄vx预先接种的苗木发病率为零 o明显低于只接
烂皮病菌的对照发病率 xv1vv h o进一步证实了毛壳 ‘⁄vx对植物病害的生物防治潜能 ∀
关键词 } 毛壳 ‘⁄vx o毛白杨 o内生菌 o拮抗作用 o重寄生 o抗生活动
收稿日期 }t||{2tt2sx ∀
基金项目 }河北省自然科学基金资助项目 o编号 }v|ytuv ∀
ΤΕΣΤΙΝΓ ΟΝ ΤΗΕ ΑΝΤΑΓΟΝΙΣΜ ΟΦ ΤΗΕ ∆ΟΜΙΝΑΝΤ ΟΦ ΕΝ∆ΟΠΗΨΤΙΧ ΦΥΝΓΙ
ΦΡ ΟΜ ΠΟΠΥΛΥΣ ΤΟΜΕΝΤΟΣΑ , ΧΗΑΕΤΟΜΙΥΜ Ν∆vx ΙΝ ΤΗΕ ΛΑΒΟΡΑΤΟΡΨ
¬∏÷¬¤²ª∏¤±ª Š¤² Ž¨¬¬¤±ª Š∏¬¤±¦¤¬ ⁄∏¬¤±¯¬±ª פ±ª ÷¬∏ª∏¤±ª
( Φορεστρψ Σχηοολοφ Αγριχυλτυραλ Υνιϖερσιτψοφ Ηεβει Βαοδινγ sztsss)
Αβστραχτ : ׫¨ §²°¬±¤±·¨ ±§²³«¼·¬¦©∏±ª∏¶ Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx º¤¶¶¨¯¨ ¦·¨§¥¼ ¤±¤¯¼¶¬±ª·«¨ ¦²°³²±¨ ±·¶²© ±¨2
§²³«¼·¬¦©¯²µ¤©µ²° Ποπυλυστοµεντοσᤱ§¬·¶¤±·¤ª²±¬¶°·²y ³¯¤±·³¤·«²ª¨ ±¶º¤¶ √¨¤¯∏¤·¨§ιν ϖιτρο ¤±§ιν ϖιϖο o
º«¬¦«¬±¦¯∏§¨§ Μαχροπηοµ α κυωατσυκαι , ςαλσα µ αλι , Χψτοσπορα χηρψσοσπερµ α , ∆οτηιορελλα γρεγαρια , Ρηιζοχτονια
σολανι ¤±§ Σχλεροτιυ µ ρολφσιι . ׫¨ µ¨¶∏¯·¶¶«²º §¨·«¤· Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx «¤§¤±·¤ª²±¬¶·¬¦¤¦·¬√¬·¬¨¶·² ¤¯¯ y
¶³¨¦¬¨¶²© ·¨¶·¨§ ³¯¤±·³¤·«²ª¨ ±¶qΧηαετοµιυ µ ‘⁄vx ¶∏³³µ¨¶¶¨§·«¨ °¼¦¨µ¬¤¯ ªµ²º·« ¤±§¶³²µ¨ ª¨µ°¬±¤·¬²± ²©
³¤·«²ª¨ ±¶q׫¨ ¶¦¯¨ µ²·¬¤²© Σ . ρολφσιι º µ¨¨ «¼³¨µ³¤µ¤¶¬·¨§¤±§·«¨¬µª¨µ°¬±¤·¬²±µ¤·¨¶º µ¨¨ µ¨§∏¦¨§q׫¨ ©¤¦·¶·«¤·
·«¨ ¬±«¬¥¬·¬²±½²±¨ º¤¶³µ²§∏¦¨§¬± §∏¤¯ ¦∏¯·∏µ¨ º¬·« Χψτοσπορᶳ³q¤±§·«¨ ¦∏¯·∏µ¨ ©¬¯·µ¤·¨¶²© Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx
¬±«¬¥¬·¨§·«¨ ¦²±¬§¬¤ª¨µ°¬±¤·¬²± ²© Μ. κυωατσυκαι ¤±§ ∆ . γρεγαρια µ¨√ ¤¨¯ §¨·«¤··«¨ ¤±·¬¥¬²¶¬¶º¤¶¤ °²§¨ ²©¤¦2
·¬²± ¤¶° ¦¨«¤±¬¶° ²©¤±·¤ª²±¬¶° ²© Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx q׫¨ «¼³¨µ³¤µ¤¶¬·¬¶° º¤¶√ µ¨¬©¬¨§¥¼·«¨ ³«¨ ±²° ±¨¤·«¤·
·«¨ ¦²¬¯¨ §o³¨ ±¨ ·µ¤·¨§¤±§§¬¶¬±·¨ªµ¤·¨§«¼³«¤¨ ²© Ρ . σολανι º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨∏±§¨µ·«¨ °¬¦µ²¶¦²³¨ q׫¨ µ¨¶∏¯·²©¤µ·¬2
©¬¦¬¤¯ ¬±²¦∏¯¤·¬²±·¨¶·º¬·« Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx ¤±§ Χ. χηρψσοσπερµ α ¤¯¶²¶∏³³¯¬¨§·«¨ √¨¬§¨ ±¦¨ ©²µ·«¨ ³²·¨±¦¬¤¯¬·¼ ²©
Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx¬± ¥¬²¦²±·µ²¯ ²©³¯¤±·§¬¶¨¤¶¨¶q
Κεψ ωορδσ: Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx oΠοπυλυστοµεντοσα ,∞±§²³«¼·¬¦©∏±ª¬o„±·¤ª²±¬¶° o‹¼³¨µ³¤µ¤¶¬·¬¶° o„±·¬¥¬²¶¬¶
˜±ª¨µt|vv年根据观察叶片组织内生长的锈菌而最先采用了内生菌k∞±§²³«¼·¨¶l一词 ∀目前 o它
用于泛指一切生活在植物体内的腐生 !寄生和共生真菌及细菌等微生物 ∀植物体在生长发育过程中就
滋养了一大批附生菌和内生菌 o其中包括大量非病原微生物和微病原物 o它们在一定程度上和植物共
栖或弱寄生 o其中有不少是属于植物体的习居者 o是固定地经常生活在植物体内的一些种群 o并起到保
第 vx卷 第 x期t | | |年 | 月
林 业 科 学
≥≤Œ∞‘׌„ ≥Œ∂ „∞ ≥Œ‘Œ≤ „∞
∂ ²¯1vx o ‘²1x
≥ ³¨qot | | |
护植物的作用 ∀因而可作为生防因素加以发掘利用k鲁素芸 ot||vl ∀
毛壳k Χηαετοµιυ µ l是常见霉腐菌的成员 o广布于自然界各种基物和发霉的含纤维素的日常用品
上 ∀大多数种都含有较强的纤维素酶 o其经济重要性在于能分解土壤中的纤维素k中国科学院微生物
研究所 ot|zvl o球毛壳k Χ. γλοβοσυ µ l和卷毛壳k Χ. χοχηλιοδεσl对于多种土传和种传植物病原菌有拮抗
作用 ∀因生长速度的限制 o毛壳对病原菌的拮抗作用机制主要表现为重寄生和产生毛壳素k¦«¤¨·²°¬±l
等抗生素k⁄¬°¬¨·µ² „等 ot||ul ∀据国外文献记载 o对棉花 !甜菜 !大麦等多种植物的种子腐烂和种苗
猝倒以及洋葱白腐病 !百合灰霉病 !大豆茎秆枯腐病等都有明显的抑制作用 ∀并已用于苹果黑星病 !苗
木猝倒等病害的田间生物防治试验kŽ¤¼ ετ αλqot||w ~Ž²«¯ ετ αλqot||x ~¬¨§·®¨ ετ αλ. ,t||s ~° µ¨¨¬µ¤ ετ
αλ. , t||z ~• ¤¯·«¨µετ αλ. ,t|{{l ∀国内 o原北京农业大学生物防治研究室曾从棉花植株内分离出一种
毛壳 o经人工茎基部注射后 o有抑制致萎镰刀菌扩展的作用k鲁素芸 ot||vl ∀可见 o毛壳菌在自然界植
物体内广泛分布 o具有广阔的开发应用前景 o但国内在应用于林果病害防治方面尚未见报道 ∀
在研究毛白杨内生真菌区系组成基础上 o筛选出优势种毛壳 ‘⁄vx o测试了它对 y种常见林果病害
病原菌的拮抗性 o目的就是通过研究其拮抗机理 o为在林果病害生物防治中的应用提供依据 ∀
t 材料和方法
111 毛白杨内生真菌的组织分离
在生长季 o分别从河北省易县林木种苗场 !西陵林场 !昌黎农校以及保定大集店苗圃和林学院 o采
集不同林龄 !不同冠层高度和方位的 t ∗ u年生毛白杨枝条及根和叶 o冲洗后 o切成 t¦°的小段 o顺次浸
入 zx h乙醇溶液 t °¬±ovs h安替福民溶液k含有效氯 v h ∗ x h lv °¬±ozx h乙醇溶液 vs¶进行表面消
毒kƒ¬¶«¨µετ αλ. ,t||ul o然后取出置于 °⁄„平板上 o于室温下培养 o每个平板按梅花型接种 x点 ot周后
记录不同菌落的分离频率 o并经纯化 o保存于试管斜面上 o进行鉴定 ∀
112 平皿拮抗作用
t1u1t 两点对峙培养 于 °⁄„平板距离中心 u¦°的两点上分别接种 ux ε 下恒温培养 t周的同质等
量的毛壳 ‘⁄vx和供试病原菌的菌丝块 o分别为苹果轮纹病菌 Μαχροπηοµ α κυωατσυκαιk称  l o苹果腐
烂病菌 Χψτοσπορᶳqk ςαλσα µ αλιlk称 ≤ °l o杨树腐烂病菌 Χψτοσπορα χηρψσοσπερµ αk称 ≤³l o杨树水泡
溃疡病菌 ∆οτηιορελλα γρεγαριαk称 ⁄l o立枯丝核病菌 Ρηιζοχτονια σολανιk称 • l o白绢病菌 Σχλεροτιυ µ
ρολφσιιk称 ≥l ∀采用同时接种和 v§后接种病原菌两种方式 o因丝核菌和小核菌的生长速度较快 ∀
t1u1u x点对峙培养 在 °⁄„平板中心接种一点病原菌 o分别为  !≤ ° !≤³!⁄!• !≥ o同时在半径 ρ€
u¦°的圆周上 o等距离接种 w点同质等量的毛壳菌丝块 ∀
以上试验 o每个处理均设 v个重复 o并以只接病原菌不接拮抗菌毛壳的为对照 o置于 us ε 恒温箱中
培养 o逐日观察抑菌作用 o并用毫米刻度尺测量毛壳与病菌菌落生长的相向半径 }ρ毛 !ρ病 !以及对照半
径 ρs ∀病原菌与毛壳菌落相交之后 o观察记录毛壳对病原菌的包围 !抑制 !寄生及侵入病菌菌落 o占领
其营养空间的过程 ∀同时挑取相交界面处的菌丝镜检观察 ∀
病菌的生长抑制率k h l €对照半径 ρs p对峙培养的病菌菌落半径 ρ病对照半径 ρs ≅ tss h
113 载片培养重寄生作用观察
用灭菌的解剖刀切取约 u °°厚的 °⁄„膜成 t¦°u的小块 o置于灭菌的载片上 o在对角线的两个顶
点上 o分别接种少量毛壳 ‘⁄vx和丝核菌的新鲜菌丝 o加盖片后于室温下保温培养 o并以只接病菌的为
对照 ∀两菌相交后 o在光学显微镜下直接观察缠绕 !穿透 !菌丝消解 !细胞质变稀薄等现象 ∀
114 对菌核重寄生作用的检测
将纯培养的小核菌k Σχλεροτιυ µ ρολφσιιl的新鲜菌核 o表面消毒后用无菌水冲洗 v次 o浸入室温下培
养 w周的毛壳 ‘⁄vx的菌丝悬浮液中处理 x °¬±o再转至无菌湿沙平板表面 oux ε 恒温培养 v§o待菌核表
面有寄生物长出 o将菌核取出 o洗净并表面消毒 o分别移至琼脂平板上 o测定菌核萌发力 o并以未用毛壳
{x 林 业 科 学 vx卷
处理的菌核作对照 ∀每皿 vs粒菌核 ov次重复 ∀
115 培养滤液测定法
为检测毛壳 ‘⁄vx所产生的抗生素的活性 o将在马铃薯 !葡萄糖液体培养基中振荡培养 v周的培
养液先经离心 o再取上清液采用纤维素微孔滤膜过滤后得无菌滤液 ∀
t1x1t 滤纸片法 将野外采集的杨树烂皮病菌的分生孢子角用无菌水配成孢子悬浮液 o浓度  tsw个
r°o取 w °孢子悬浮液均匀地涂在直径 |¦°的 °⁄„平板上 o再取直径 t¦°的滤纸圆片灭菌后 o将其
浸入培养滤液中 o取出晾干后 o再将其等距移放到平板上四周及中心共 x片 o四周纸片距皿壁 t1x¦° o
设 v个重复 o然后置于 ux ε 温箱培养 o观察是否在滤纸片周围出现抑菌圈 ∀
t1x1u 孢子萌发检测 于清洁无菌的凹面载玻片的凹陷穴中 o滴加 s1u °的培养过滤液 o室温下晾
干后再加入等量待测的杨树水泡溃疡病菌和苹果轮纹病菌的分生孢子液 o孢子浓度为 us ∗ vs个r每视
野k低倍镜l o并设不加毛壳培养滤液的为对照 o移入 ux ε 温箱内 ots«检察孢子萌发率 ∀
116 室内盆栽试验
用烧热的解剖刀烫伤盆栽的 t年生毛白杨组培苗的主茎 o用培养 t周的毛壳 ‘⁄vx菌丝块接种 ox
周后再用培养 u周的杨树烂皮病菌的菌丝块在伤口处接种 o接种后需用脱脂棉和塑料薄膜包扎保湿 o
每天用蒸馏水保湿 v次 oy§后解除包扎 o并以烫伤后只接烂皮病菌的毛白杨组培苗为对照 ∀两种处理
各为 tx株 ∀逐日观察记载发病情况 ∀
u 结果与分析
211 毛白杨内生真菌区系的组成
表 1 毛白杨内生真菌区系的组成
Ταβ .1 Χοµ πονεντ οφ τηεενδοπηψτιχ µψχοφλορα οφ Ποπυλυστοµεντοσα
内生真菌属
∞±§²³«¼·¬¦©∏±ª¬
分离频率
ƒµ¨ ∏´¨ ±¦¼
内生真菌属
∞±§²³«¼·¬¦©∏±ª¬
分离频率
ƒµ¨ ∏´¨ ±¦¼
Αλτερναρια n n Γλιοχλαδιυ µ n
Ασπεργιλλυσ n Πενιχιλλιυ µ n
Χηαετοµιυ µ n n n Πηοµοπσισ n
Χψτοσπορα n Πηψλλαχτινια n
Χονιοτηψριυ µ n n n Στε µ πηψλιυ µ n
∆ιπλοδια n Τριχηοδερµ α n n
∆οτηιορελλα n ςερτιχιλλιυ µ n
Φυσαριυ µ n 不产孢菌丝 n
通过常规的组织分离和真菌学鉴
定 o杨树内生真菌区系的种群组成及分
离频率见表 t ∀由此可见杨树内生菌中
既包 括 有 益 的 拮 抗 菌 o如 毛 壳
k Χηαετοµιυ µ ) !木霉 ( Τριχηοδερµ α)
等 ,也包括壳囊孢( Χψτοσπορα) !小穴壳
( ∆οτηιορελλα) !拟茎点( Πηοµοπσισ)等一
些引起枝干溃疡的潜伏侵染性弱寄生
菌 ,还有叶部专性寄生菌球针壳( Πηψλ2
λαχτινια) ∀其中毛壳和盾壳霉( Χονιο2
τηψριυ µ )为毛白杨内生菌的优势种群 o而且在根 !茎的木质部和韧皮部及叶中皆有分布 ∀
212 平皿拮抗作用
对峙培养的结果表明 o毛壳 ‘⁄vx对苹果轮纹病菌 !苹果腐烂病菌 !杨树烂皮病和水泡溃疡病菌以
及立枯丝核菌都有明显的拮抗作用 o可观察到病菌菌落被覆盖 !发生萎缩 ~两菌落之间产生抑菌带 o毛
壳菌继续生长以及两菌相邻的边缘 o病菌菌丝尖端形成褐色瘤状物 o发生畸变等现象 ∀但毛壳 ‘⁄vx
对小核菌的菌丝生长无抑制作用 o小核菌可覆盖毛壳菌落并产生菌核 ∀以上 y种病原菌与 ‘⁄vx对峙
培养的拮抗反应结果见表 u o毛壳 ‘⁄vx对 y种病原菌的生长抑制率见表 v ∀
213 毛壳 ‘⁄35 对丝核菌菌丝的重寄生作用
光学显微镜下可见 o毛壳 ‘⁄vx的菌丝可与丝核菌菌丝平行生长 o并形成分枝状附着胞吸附并侵
入寄主菌丝 o有的甚至在寄主菌体细胞中贯穿生长 ∀ ‘⁄vx还可缠绕 !穿透丝核菌丝 o使之原生质变稀
薄甚至消失 o还有丝核菌菌丝变细 !菌丝在分隔处断裂的现象发生 ∀
214 对小核菌菌核的重寄生作用
用毛壳 ‘⁄vx的菌丝悬浮液处理 w§后 o小核菌菌核的萌发率和被毛壳的寄生率分别为 uu1uu h和
vy1yz h o而对照的菌核萌发率则高达 {s1ss h ∀经 τ检验 , τ € ty1wwt  τs1st € w1ysw o表明用菌丝悬浮
|x x期 刘晓光等 }毛白杨内生菌优势种毛壳 ‘⁄vx室内拮抗作用的研究
液处理的菌核萌发率与对照存在极显著差异 o毛壳 ‘⁄vx通过对小核菌菌核的重寄生 o降低其萌发率 o
从而起到抑制病菌的作用 ∀
表 2 毛壳 Ν∆35 与 6 种病原菌对峙培养的拮抗反应结果
Ταβ .2 Ανταγονισµ οφ Χηαετοµιυµ Ν∆35 ιν δυαλ χυλτυρε ωιτη 6 πατηογενσ
病原菌 °¤·«²ª¨ ±¶
拮抗反应类型 ×¼³¨ ¶²©¤±·¤ª±¬¶° ¥¨·º¨¨ ± Χηαετοµιυ µ ¤±§³¤·«²ª¨ ±¶
两菌落间产生抑菌带 o
拮抗菌继续生长 ∀Œ±2
«¬¥¬·¬²± ½²±¨ ²¦¦∏µµ¨§
两菌落相接触后病菌
菌落萎缩 o毛壳继续发
展 ∀ °¤·«²ª¨ ±¬¦ ¦²¯²±¼
¶«µ¬±®¨ §
病菌菌落被毛壳覆盖
或重 寄 生 ∀ °¤·«²ª¨ ±
¦²¯²±¼ º¤¶²√ µ¨¦²√ µ¨¨§
²µ«¼³¨µ³¤µ¤¶¬·¨§
两菌相邻的边缘 o病菌
菌丝尖端发生畸变 ∀
׬³ ²© ³¤·«²ª¨ ±¬¦ «¼2
³«¤¨ §¨©²µ° §¨
Μαχροπηοµ α κυωατσυκαι n n n p
ςαλσα µ αλι n n n n n
Χψτοσπορα χηρψσοσπερµ α n n n n n
∆οτηιορελλα γρεγαρια p n n p
Ρηιζοχτονια σολανι p n n p
Σχλεροτιυ µ ρολφσιι p p p p
表 3 毛壳 ‘⁄35 对 6 种病原真菌的生长抑制率k h l
Ταβ 3 . Τηε περχενταγε οφ γροωτη ινηιβιτιον οφ 6 βψ Χηαετοµιυµ Ν∆35
病原真菌
°¤·«²ª¨ ±¶
对峙培养时的病菌菌落半径
°¤·«²ª¨ ±¬¦¦²¯²±¼ µ¤§¬∏° ¬± §∏¤¯ ¦∏¯·∏µ¨k°°l
平均值
„√ µ¨¤ª¨ k°°l
抑菌率
° µ¨¦¨±·¤ª¨ ²©ªµ²º·«¬±«¬¥¬·¬²±k h l
Χ. χηρψσοσπερµ α tw tu tu tu1yz ? t1tx {s1xt
ςαλσα µ αλι tv tw tx tw1ss ? t1ss z{1wy
∆ . γρεγαρια t| us t| t|1vv ? s1x{ zs1uy
Μ . κυωατσυκαι us t| us t|1yz ? s1x{ y|1zw
Ρ . σολανι ≠ { y { z1vv ? t1tx {{1zu
Σ . ρολφσιι ≠ yx yx yx yx s
≤Ž yx yx yx yx
≠ v§后接种病原菌 ∀ ׫¨ ³¤·«²ª¨ ±¶º µ¨¨ ¬±²¦∏¯¤·¨§¬± v§¤©·¨µ Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx q
215 培养滤液测定结果
u1x1t 抑菌圈的产生 ux ε 温箱中培养 v§时 o在滤纸圆片周围产生了明显的抑菌圈 o为宽 x °°左右
的透明环带 o而对照平皿中则无抑菌圈产生 ∀这说明毛壳 ‘⁄vx在代谢过程中可产生具有抑菌活性的
抗生物质 ∀
u1x1u 对病菌孢子萌发的抑制作用 在室温下保湿培养 ts«后 o镜检孢子萌发率结果见表 w ∀经 τ检
验 , τt € ux .uvsw , τu € ws .ttxt  τs .st € w .ysw ,由此可见 o经培养滤液处理的和以无菌水作对照的两种
病菌孢子的萌发率存在极显著的差异 o说明毛壳 ‘⁄vx培养滤液中存在的代谢产物可明显抑制苹果轮
纹病菌和杨树水泡溃疡病菌的孢子萌发 ∀
表 4 培养滤液对病菌孢子萌发的影响
Ταβ .4 Ινφλυενχε οφ χυλτρυεφιλτρατε ον πατηογενιχ σπορε γερµινατιον
病原菌 °¤·«²ª¨ ±¶
ts«的孢子萌发率 ≤²±¬§¬¤ª¨µ°¬±¤·¬²± µ¤·¨¬± ts«²∏µ¶k h l
经滤液处理的平均萌发率 Š µ¨2
°¬±¤·¬²± µ¤·¨ º¬·«©¬¯·µ¤·¨k h l
对照的平均萌发率 Š µ¨°¬±¤·¬²±
µ¤·¨ ¤¶¤¦²±·µ²¯k h l
Μαχροπηοµ α κυωατσυκαι us1ts z{1wu
∆οτηιορελλα γρεγαρια x1xs zt1sy
216 室内人工接种对杨树烂皮病的抑制作用
用毛壳 ‘⁄vx的菌丝块预先接种毛白杨组培苗 ou周后取小枝的韧皮部作徒手切片镜检 o可观察到
寄生在韧皮部的毛壳子囊壳 o并已产孢 o说明毛壳已在树体内定植成功 ∀在烫伤处再次接种杨树烂皮
病菌的新鲜菌丝块 o并以只接烂皮病菌的 tx株组培苗为对照 ∀解除包扎后可见 o对照组培苗的伤口已
向四周扩展 ou周左右 o有 {株组培苗在伤口处长出桔黄色烂皮病分生孢子角 o并逐渐扩展至全株 o发病
率达 xv1vv h ∀而预先接种毛壳 ‘⁄vx的 tx株组培苗则无一发病 o也未见伤口向外扩展 o只是在伤口
sy 林 业 科 学 vx卷
处长出毛壳的子囊壳 ∀这说明毛壳 ‘⁄vx在活体上同样可抑制杨树烂皮病的发生 ∀
v 结论与讨论
由毛白杨内生真菌的区系组成分析可知 o毛壳菌为毛白杨体内习居的自然内生菌优势种群 o而非
引进的生防因素 ∀在与寄主长期协同进化的过程中在生理上已彼此适应 ∀因而具有较强的适生性 o相
对比较稳定 o易于在短期内形成种群优势 o比引进的外来拮抗菌具有更强的竞争能力 ∀其次 o毛壳产生
的是有性的子囊孢子 o因其孢子壁厚 o是真菌赖以越冬或越夏的结构 o对干燥 !低温等不良环境的抵抗
能力和寿命都明显高于无性的分生孢子 ∀据报道 o毛壳的子囊孢子在空气中干燥 u1x年之久 o萌发率
仍大于 |s h k • ¤¯·«¨µετ αλ. ot|{{l ∀对室温下干燥 u年的毛壳 ‘⁄vx的子囊孢子冷藏 v§后进行孢子
萌发试验 ots«孢子萌发率为 |v1{{ h o说明毛壳的子囊孢子具有较强的生命力 o有利于在植物体内定
植并发挥拮抗作用 o是一种比较理想的生防用菌 ∀
平板对峙培养的结果表明 o除小核菌k Σχλεροτιυ µ ρολφσιιl外 o毛壳 ‘⁄vx对其它 x种供试的林果病
害病原真菌的生长都有不同程度的抑制作用 o而且可以寄生于小核菌的菌核 o在试验过程中也观察到
对细菌的寄生现象 ∀这说明毛壳 ‘⁄vx是一种广谱拮抗性真菌 o具有在枝干溃疡 !果实腐烂及苗木立
枯等林果病害的生物防治中开发应用的潜力 ∀
毛壳 ‘⁄vx的拮抗机理主要是对病菌菌丝以及小核菌菌核的重寄生作用 o抑菌带和抑菌圈的产生证
明它在代谢过程中产生了具有抑菌活性的抗生物质 o并能抑制苹果轮纹病菌和杨树水泡溃疡病菌的孢子
萌发 ∀它对环境因子的稳定性远远高于活菌体 o便于贮存和应用 ∀但对其化学组成还有待于研究 ∀优良
菌株的筛选和抗生素的批量生产可望为毛壳菌在林果病害生物防治中的应用开辟更为广阔的前景 ∀
参 考 文 献
鲁素芸 q植物病害生物防治学 q北京 }北京农业大学出版社 ot||v oxx ∗ uxt
中国科学院微生物研究所 q常用与常见真菌 q北京 }科学出版社 ot|zv ots|
⁄¬°¬¨·µ² „ ετ αλ. • ²¯¨²©¤±·¬¥¬²·¬¦¶³µ²§∏¦¨§¥¼ Χηαετοµιυ µ γλοβοσυ µ ¬± ¥¬²¦²±·µ²¯ ²© Πψτηιυ µ υλτι µ υ µ ,¤¦¤∏¶¤¯ ¤ª¨ ±·²©§¤°³¬±ªp
²©©q°«¼·²³¤·«²¯²ª¼ ot||u o{u }tvt ∗ tvx
ƒ¬¶«¨ µ° o° ·¨µ¬±¬’ ετ αλq„ ³µ¨ ¬¯°¬±¤µ¼ ¶·∏§¼ ²©©∏±ª¬¬±«¤¥¬·¬±ª¬¼¯ ¨° ¤±§ º«²¯¨¶·¨°¶²© Ολεα ευροπαεα .≥¼§²º¬¤ot||u oww }ttz ∗ tut
Ž¤¼ ≥ o≥·¨º¤µ·„ q∞√¤¯∏¤·¬²± ²©©∏±ª¤¯ ¤±·¤ª²±¬¶·¶©²µ¦²±·µ²¯ ²©²±¬²± º«¬·¨ µ²·¬± ¶²¬¯ ¥²¬·µ¬¤¯¶q°¯ ¤±·°¤·«²¯²ª¼ ot||w owv }vzt ∗ vzz
Ž²«¯ o ²¯«²¨ ® •   ετ αλq∞©©¨ ¦·²© Υλοχλαδιυ µ ατρυ µ ¤±§²·«¨µ¤±·¤ª²±¬¶·¶²±¶³²µ∏¯¤·¬²± ²© Βοτρψτισχινερεα ²± §¨¤§ ¬¯¯¼ ¯¨ ¤√ ¶¨ ¬¨2
³²¶¨§·²©¬¨ §¯¦²±§¬·¬²±¶q°«¼·²³¤·«²¯²ª¼ ot||x o{x }v|v ∗ wst
¬¨§·®¨ ˜ oŽ¨±±¨ ¯ • qΑτηιλια βοµ βαχινα ¤±§ Χηαετοµιυ µ γλοβοσυ µ ¤¶¤±·¤ª²±¬¶·¶²©·«¨ ³¨µ©¨ ¦·¶·¤ª¨ ²©·«¨ ¤³³¯¨¶¦¤¥³¤·«²ª¨ ±k ςεν2
τυρια ιναεθυαλισl∏±§¨µ©¬¨ §¯¦²±§¬·¬²±¶q ¬¨·¶¦«µ¬©·©∏µ°©¯¤±½¨ ±®«¨¬·¨± ∏±§°©¯¤±½¨ ±¶¦«∏·½ot||s ok|zlt }uw ∗ vu
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图 版 说 明
t1 毛壳 ‘⁄vx与 Χ. χηρψσοσπερµ α两点对峙培养 o产生明显的抑菌带kl ∀ u1‘⁄vx与 ς . µ αλι两点对峙培养 o产生明显的抑菌带
kl ∀同时毛壳侵入病菌区域 ∀v1‘⁄vx与 ∆ . γρεγαριαx点对峙培养 o病菌菌落被包围 o生长受到限制 ∀ w1‘⁄vx与 Μ. κυωατσυκαιx点
对峙培养 o毛壳包围病菌菌落 o并在周围产生抑菌带kl ∀ x1‘⁄vx 对齐整小核菌k Σ . ρολφσιιl的菌核进行重寄生 o降低其萌发力 ∀
y1‘⁄vx与 Ρ . σολανιx点对峙培养 o毛壳包围并覆盖病菌菌落 ∀
Εξπλανατιον οφ Πλατεσ
t1 Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx¬± §∏¤¯ ¦∏¯·µ∏¨ º¬·« Χ. χηρψσοσπερµ α ,Œ±«¬¥¬·¬²± ½²±¨ kl²¦¦∏µµ¨§qu qΧηαετοµιυ µ ‘⁄vx ¬± §∏¤¯ ¦∏¯·µ∏¨ º¬·« ς .
µ αλι ,Œ±«¬¥¬·¬²± ½²±¨ kl²¦¦∏µµ¨§¤±§ ‘⁄vx ¬±√¤§¨§³¤·«²ª¨ ±¬¦¦²¯²±¼qv qΧηαετοµιυ µ ‘⁄vx ¬± §∏¤¯ ¦∏¯·µ∏¨ º¬·« ∆ . γρεγαρια ¤·x ³²¬±·o
³¤·«²ª¨ ±¬¦¦²¯²±¼ º¤¶¶∏µµ²∏±§¨§¤±§ªµ²º·« º¤¶ ¬¯°¬·¨§qw qΧηαετοµιυ µ ‘⁄vx ¬± §∏¤¯ ¦∏¯·µ∏¨ º¬·« Μ. κυωατσυκαι ¤·x ³²¬±·o³¤·«²ª¨ ±¬¦
¦²¯²±¼ º¤¶¶∏µµ²∏±§¨§¤±§Œ±«¬¥¬·¬²± ½²±¨ kl²¦¦∏µµ¨§qx qΧηαετοµιυ µ ‘⁄vx «¼³¨µ³¤µ¤¶¬·¨§¤ª¤¬±¶·¶¦¯¨ µ²·¬¤²© Σ . ρολφσιι ,µ¨§∏¦¨§·«¨ ª¨µ°¬±¤2
·¬²±µ¤·¨ ²©¶¦¯¨ µ²·¬¤qy qΧηαετοµιυ µ ‘⁄vx¬± §∏¤¯ ¦∏¯·µ∏¨ º¬·« Ρ .¤·x ³²¬±·o³¤·«²ª¨ ±¬¦¦²¯²±¼ º¤¶¶∏µµ²∏±§¨§¤±§²√ µ¨¦²√ µ¨¨§q
ty x期 刘晓光等 }毛白杨内生菌优势种毛壳 ‘⁄vx室内拮抗作用的研究
刘晓光等 }毛白杨内生菌优势种毛壳 ‘⁄vx的室内拮抗作用的研究 图版 ´
¬∏ ÷¬¤²ª∏¤±ª ετ αλ. }× ¶¨·¬±ª²±·«¨ ¤±·¤ª²±¬¶° ²©·«¨ §²°¬±¨ ±·²© ±¨§²³«¼·¬¦©∏±ª¬©µ²°
Ποπυλυστοµεντοσα , Χηαετοµιυ µ ‘⁄vx ¬±·«¨ ¤¯¥²µ¤·²µ¼ °¯ ¤·¨ ´
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