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国家/九五0攻关项目/我国南方松树枯梢病防治技术研究0的部分内容 ∀
3 南京林业大学 |z届毕业生魏玉莲同学参加部分试验工作 o谨致谢意 ∀
第 vy卷 第 t期u s s s年 t 月
林 业 科 学
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中国松树枯梢病菌营养体亲和性研究 3
吴小芹
k南京林业大学 南京 utssvzl
摘 要 } 将来自我国 tv省 ty种松树和其它 u种针叶树上的 xx个 Σπηαεροπσισσαπινεα菌株在 °⁄„ 平皿上进
行配对生长试验 o结果绝大多数菌株间产生墨绿色色素隔离带 o少数菌株以及同一菌株不同菌落间不产生此色
素带 ∀显微观察表明 o在产生色素带的菌株间未发现菌丝融合 o而在不产生色素带的菌株间可见到菌丝融合 ∀
测定 Σ . σαπινεα营养体亲和与否可通过观察有无形成色素反应带来确定 ∀ xx 个供试菌株共可分为 w{ 个
∂ ≤ Š≥ o其中 ww个 ∂ ≤ Š≥各只含一个菌株 ov个 ∂ ≤ Š≥分别含 u个菌株 o只有一个 ∂ ≤ Š≥含 x个菌株 ∀
关键词 } 松树枯梢病 o营养体亲和性 o菌丝融合
ΣΤΥ∆Ψ ΟΝ ς ΕΓΕΤΑΤΙς Ε ΧΟΜΠΑΤΙΒΙΛΙΤΨ ΟΦ
ΣΠΗΑΕΡ ΟΠΣΙΣ ΣΑΠΙΝΕΑ ΙΝ ΧΗΙΝΑ
• ∏÷¬¤²´ ¬±
( Νανϕινγ Φορεστρψ Υνιϖερσιτψ Νανϕινγ utssvz)
Αβστραχτ : ƒ¬©·¼2©¬√¨¬¶²¯¤·¨¶²© Σ . σαπινεα º µ¨¨ ²¥·¤¬±¨ §²± ty ³¬±¨ ¶¤±§²·«¨µu ¦²±¬©¨µ¶©µ²° tv °µ²√¬±¦¨¶¬±
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Κεψ ωορδσ: Σπηαεροπσισσαπινεαo ∂ ª¨¨·¤·¬√¨¦²°³¤·¬¥¬¯¬·¼o ‹¼³«¤¯ ¤±¤¶·²°²¶¬¶
真菌的营养体亲和性k∂ ª¨¨·¤·¬√¨¦²°³¤·¬¥¬¯¬·¼l又称体细胞亲和性k≥²°¤·¬¦¦²°³¤·¬¥¬¯¬·¼l或菌丝体
亲和性k  ¼¦¨ ¬¯¤¯ ¦²°³¤·¬¥¯¬·¼l是指真菌菌株间菌丝能融合并交换细胞质或核物质的特性 ∀具有这种相
互亲和能力的真菌通常定为一个营养体亲和群k∂ ª¨¨·¤·¬√¨¦²°³¤·¬¥¬¯¬·¼ ªµ²∏³l ∀由于营养体亲和性间
接反映了真菌在某些遗传位点上的等位基因状况 o因此 o营养体亲和性特征就为揭示真菌的遗传多样
性提供了便利的标记 ∀同时 o它也直接影响着真菌个体间异核体的形成和基因流动的潜力 ∀目前 o营
养体亲和性研究已涉及到许多重要的林木及农作物病原真菌 o如栗疫病菌k Χρψπηονεχτρια παρασιτιχα) !
榆枯萎病菌( Χερατοχψστισ υλµι) !多种镰刀菌( Φυσαριυ µ οξψσπορυ µ 和 Ε µονιλιφορµε等) !核盘菌( Σχλε2
ροτινια σχλεροτιορυ µ ) !黄曲霉( Ασπεργιλλυσ φλαϖυσ)和木腐菌烟色韧革菌( Στερευ µ γαυσαπατυ µ )等k…¤¼2
°¤± ετ αλ. ,t||t ~≤²µµ¨¯ ετ αλ. ot|{z ~ ‹∏¤±ªετ αλ. ot||z ~ Ž²«± ετ αλ. ot||t ~梁宗琦等 ot||z ~¬∏ ετ
αλ. ot||y ~ • ¤¼±¨ µετ αλ. ot|{y ~ ∂¬¯¬²¨ ± ετ αλ. ,t|zzl ∀真菌的 ∂ ≤ Š与真菌的遗传变异性 !种群地理分
布 !流行规律 !生理小种鉴定 !致病性变异以及生物防治等许多方面都有着密切关系 ∀
由 Σπηαεροπσισσαπινεα引起的松树枯梢病是一种世界性的重要病害 o其寄主多 o发病重 o有关该病
表 1 Σπηαεροπσισσαπινεα的供试菌株及其来源
Ταβ .1 Ισολατεσ οφ Σπηαεροπσισσαπινεα υσεδ ιν τηισστυδψ
菌株
Œ¶²¯¤·¨
采集地点
²¦¤·¬²±
纬度
¤·¬·∏§¨
经度
²±ª¬·∏§¨
寄 主
‹²¶·
采集时间
⁄¤·¨ ²©¦²¯¯¨ ¦·¬²±
⁄t 黑龙江哈尔滨 ‹¤µ¥¬± ‹¨¯²±ª­¬¤±ª ‘wx qzβ ∞tuy qyβ 樟子松 Πινυσσψλϖεστρισ √¤µq Μονγολιχα ¬·√¬±q t||z qt
⁄u 黑龙江哈尔滨 ‹¤µ¥¬± ‹¨¯²±ª­¬¤±ª ‘wx qzβ ∞tuy qyβ 长白赤松 Π.σψλϖεστρισ √¤µqσψλϖεστριφορµισ ≤«¨±ª ετ αλ. t||z qtu
≥w 江苏连云港 ¬¤±¼∏±ª¤±ª¬¤±ª¶∏ ‘vw qyβ ∞tt| quβ 日本赤松 Π. δενσιφλορα ≥¬¨¥q ·¨∏¦¦q t||y q|
u 江苏连云港 ¬¤±¼∏±ª¤±ª¬¤±ª¶∏ ‘vw qyβ ∞tt| quβ 海岸松 Π. πιναστερ „¬· t||y q|
v 江苏连云港 ¬¤±¼∏±ª¤±ª¬¤±ª¶∏ ‘vw qyβ ∞tt| quβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||y q|
w 江苏东海 ⁄²±ª«¤¬¬¤±ª¶∏ ‘vw qxβ ∞tt{ q{β 黑 松 Π. τηυνβεργιι °¤µ¯q t||y q|
x 江苏东海 ⁄²±ª«¤¬¬¤±ª¶∏ ‘vw qxβ ∞tt{ q{β 火炬松 Π. ταεδα q t||y q|
| 江苏盱眙 ÷∏¼∏¬¤±ª¶∏ ‘vv qsβ ∞tt{ qxβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||z qw
ts 江苏盱眙 ÷∏¼∏¬¤±ª¶∏ ‘vv qsβ ∞tt{ qxβ 火炬松 Π. ταεδα q t||z qw
‹‘t 河南确山 ± ∏¨¶«¤± ‹ ±¨¤± ‘vu q{β ∞ttw qsβ 火炬松 Π. ταεδα q t||z q{
≥÷t 陕西安康 „±®¤±ª≥«¤¤±¬¬ ‘vu qyβ ∞ts| qsβ 火炬松 Π. ταεδα q t||z qz
≥÷u 陕西安康 „±®¤±ª≥«¤¤±¬¬ ‘vu qyβ ∞ts| qsβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||z qz
„t 安徽滁县 ≤«∏¬¬¤± „±«∏¬ ‘vu qwβ ∞tt{ qvβ 火炬松 Π. ταεδα q t||y qtu
{ 江苏南京 ‘¤±­¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qtβ ∞tt{ q{β 火炬松 Π. ταεδα q t||z qv
tu 江苏南京 ‘¤±­¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qtβ ∞tt{ q{β 马尾松k江西种源l Π. µ ασσονιανα ¤°¥q t||z qx
tv 江苏南京 ‘¤±­¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qtβ ∞tt{ q{β 马尾松k湖南种源l Π. µ ασσονιανα ¤°¥q t||z qx
tw 江苏南京 ‘¤±­¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qtβ ∞tt{ q{β 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||z qx
us 江苏南京 ‘¤±­¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qtβ ∞tt{ q{β 红松 Π. κοραιενσισ ≥¬¨¥q ·¨∏¦¦q t||z q|
ut 江苏南京 ‘¤±­¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qtβ ∞tt{ q{β 雪松 Χεδρυσ δεοδαραk• ²¬¥ql²∏§ t||z q|
uv 江苏南京 ‘¤±­¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qtβ ∞tt{ q{β 日本冷杉 Αβιεσ φιρµ α ≥¬¨¥q¨·∏¦¦q t||z q|
uw 江苏南京 ‘¤±­¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qtβ ∞tt{ q{β 黑松 Π. τηυνβεργιι °¤µ¯q t||z qtt
y 江苏句容 ∏µ²±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qsβ ∞tt| quβ 火炬松 Π. ταεδα q t||y qtt
z 江苏句容 ∏µ²±ª¬¤±ª¶∏ ‘vu qsβ ∞tt| quβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||y qtt
tx 江苏江宁 ¬¤±ª±¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vt q|β ∞tt{ qzβ 刚松 Π. ριγιδα ¬¯¯ t||z qy
ty 江苏江宁 ¬¤±ª±¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vt q|β ∞tt{ qzβ 马尾松 Π. µ ασσονιανα ¤°¥q t||z qy
tz 江苏江宁 ¬¤±ª±¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vt q|β ∞tt{ qzβ 火炬松 Π. ταεδα q t||z qy
t{ 江苏江宁 ¬¤±ª±¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vt q|β ∞tt{ qzβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||z qy
t| 江苏江宁 ¬¤±ª±¬±ª¬¤±ª¶∏ ‘vt q|β ∞tt{ qzβ 晚松 Π. ριγιδα √¤µq σεροτινα ²∏§qετ αλ. t||z qy
‹t 湖北京山 ¬±ª¶«¤± ‹∏¥¨¬ ‘vt qsβ ∞ttv qsβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||y qtt
‹u 湖北荆州 ¬±ª½«²∏ ‹∏¥¨¬ ‘vs qwβ ∞ttu quβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||y qtt
t 浙江杭州 ‹¤±ª½«²∏«¨­¬¤±ª ‘vs qvβ ∞tus quβ 晚松 Π. ριγιδα √¤µq σεροτινα ²∏§qετ αλ. t||z q|
u 浙江杭州 ‹¤±ª½«²∏«¨­¬¤±ª ‘vs qvβ ∞tus quβ 乔松 Π. γριφφιτηιι ¦≤¯¨ ¯¯¤±§ t||z q|
v 浙江杭州 ‹¤±ª½«²∏«¨­¬¤±ª ‘vs qvβ ∞tus quβ 日本五针松 Π. παρϖιφλορα ≥¬¨¥q¨·∏¦¦ t||z q|
w 浙江杭州 ‹¤±ª½«²∏«¨­¬¤±ª ‘vs qvβ ∞tus quβ 马尾松 Π. µ ασσονιανα ¤°¥q t||z q|
≥y 四川名山 ¬±ª¶«¤± ≥¬¦«∏¤± ‘vs qsβ ∞tus quβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||z qw
‹∏y 湖南岳阳 ≠ ∏¨ ¼¤±ª ‹∏±¤± ‘u| qwβ ∞ttv qtβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||{ qu
÷v 江西景德镇 ¬±ª§¨½«¨ ±ª¬¤±ª¬¬ ‘u| qvβ ∞ttz quβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||{ qt
÷t 江西新余 ÷¬±ª¼∏¬¤±ª¬¬ ‘uz q{β ∞ttx q|β 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||z qx
÷u 江西分宜 ƒ ±¨ª¼¬¬¤±ª¬¬ ‘uz q{β ∞ttw qzβ 晚松 Π. ριγιδα √¤µq σεροτινα ²∏§qετ αλ. t||v
÷w 江西安福 „±©∏¬¤±ª¬¬ ‘uz qwβ ∞ttw qyβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||y qtu
ƒt 福建闽候 ¬±ª«²∏ƒ∏­¬¤± ‘uy quβ ∞tt| qtβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||y qtu
ƒ| 福建闽候 ¬±ª«²∏ƒ∏­¬¤± ‘uy quβ ∞tt| qtβ 马尾松 Π. µ ασσονιανα ¤°¥q t||z q{
ƒz 福建清流 ±¬±ª¯¬∏ƒ∏­¬¤± ‘uy quβ ∞tty q{β 火炬松 Π. ταεδα q t||y qtu
ƒu 福建长乐 ≤«¤±ª¯¨ ƒ∏­¬¤± ‘uy qsβ ∞tt| qxβ 湿地松 Π. ελλιοττιι ∞±ª¨¯° q t||y qtu
ƒ{ 福建长乐 ≤«¤±ª¯¨ ƒ∏­¬¤± ‘uy qsβ ∞tt| qxβ 马尾松 Π. µ ασσονιανα ¤°¥q t||y qtu
ƒx 福建连城 ¬¤±¦«¨ ± ƒ∏­¬¤± ‘ux qzβ ∞tty qzβ 火炬松 Π. ταεδα q t||y qtu
ƒy 福建永定 ≠²±ª§¬±ª ƒ∏­¬¤± ‘uw qzβ ∞tty qyβ 火炬松 Π. ταεδα q t||y qtu
≠ ‘t 云南昆明 Ž∏±°¬±ª ≠∏±±¤± ‘uw qxβ ∞tsu qzβ 辐射松 Π. ραδιατα ⁄q⁄²± q t||z qu
≠ ‘w 云南昆明 Ž∏±°¬±ª ≠∏±±¤± ‘uw qxβ ∞tsu qzβ 加勒比松 Π. χαριβαεα  ²µ¨¯¨·q t||z q{
≠ ‘x 云南昆明 Ž∏±°¬±ª ≠∏±±¤± ‘uw qxβ ∞tsu qzβ 海岸松 Π. πιναστερ „¬· t||z q{
≠ ‘y 云南昆明 Ž∏±°¬±ª ≠∏±±¤± ‘uw qxβ ∞tsu qzβ 墨西哥变种白松 Π. στροβυσ √¤µq χηιαπενσισ  t||z q{
Š⁄t 广东广州 Š∏¤±ª½«²∏ Š∏¤±ª§²±ª ‘uv qtβ ∞ttv qtβ 马尾松 Π. µ ασσονιανα ¤°¥q t||z qu
Š⁄u 广东广州 Š∏¤±ª½«²∏ Š∏¤±ª§²±ª ‘uv qtβ ∞ttv qtβ 马尾松 Π. µ ασσονιανα ¤°¥q t||{ qu
t 广东雷州 ¨¬½«²∏ Š∏¤±ª§²±ª ‘ut qsβ ∞tts quβ 加勒比松 Π. χαριβαεα  ²µ¨¯¨·q t||z qtu
u 广东雷州 ¨¬½«²∏ Š∏¤±ª§²±ª ‘ut qsβ ∞tts quβ 加勒比松 Π. χαριβαεα  ²µ¨¯¨·q t||z qtu
{w 林 业 科 学 vy卷
的侵染规律等已有不少研究 ∀然而 o关于松枯梢病菌k Σ . σαπινεαl群体的营养体亲和性问题 o国内外均
未见研究报道 ∀本文将对我国松枯梢病菌的营养体亲和性进行研究分析 o以探讨我国松枯梢病菌群体
的遗传多样性问题 o力图从与以往研究不同的另一层面来揭示该病菌的遗传分化状况 ∀
t 材料和方法
111 供试菌株来源
t||y年 |月至 t||{年 u月从我国 tv个省的 ty种松树k含变种l和其它 u种针叶树上收集到 Σ .
σαπινεα的 xx个菌株 ∀供试菌株的寄主树种 !采集地点及其纬度等见表 t ∀
112 供试菌体配对生长的培养基
°⁄„培养基 !改良 °⁄„ktru°⁄„l培养基和 u h • „培养基按常规方法配制k方中达 ot|{ul ∀
组合培养基tl }酵母膏 vªo蛋白胨 xªo葡萄糖 usªo磷酸二氢钾 t1xªo氯化钾 s1xªo琼脂 usªo硫酸镁
t1xªo硫酸亚铁 s1stªo蒸馏水 tsss°∀
tl丁国云 q栗疫病菌的群体结构与遗传 q硕士学位论文 ot||y ow| q
113 测定营养体亲和性的配对生长试验
用直径 x °°的无菌取样器从菌龄一致的松枯梢病菌不同菌株的菌落边缘切取带菌培养基块 o移
入盛有培养基的平皿中进行配对试验 ∀配对排列方式采用 v种作比较 }一是每平皿中心一块 o周围等
距离放置 {块 ~二是每平皿中心一对 o周围等距离放置 {对 ~三是每平皿中心一块 o周围等距离放置 tu
块 ∀在 ux ε 下无光照培养 w ∗ y §后观察各菌株菌落边缘相互接触后的反应 ∀为了区别菌体间的真假
排斥现象 o以相同菌株不同菌落间的接触反应作为对照 ∀
114 玻片配对培养的显微观察
将 u h • „培养基趁热滴在斜置的灭菌载玻片上 o待其凝固后 o在同一块载玻片上移入两个不同菌
株的直径 x °°的菌落圆片k相距 t qx ∗ u¦°l进行配对生长 ∀将此载玻片置入保湿皿内在 ux ε 黑暗下
培养 z ∗ tw §后用 ’ ¼¯°³∏¶2„ ‹…≥型全自动显微镜观察两菌落菌丝间的融合情况 ∀用同一菌株配对作
对照 ∀
u 结果与分析
211 Σ . σαπινεα营养体亲和性测定方法的确定
u1t1t 先期配对生长试验结果 在先期配对生长试验中 otu个供初试的菌株在 °⁄„ 培养基上生长 w
∗ y §后 o大多数不同菌株的菌落之间产生了明显的墨绿色变色线 ∀在此变色线区的双侧 o菌落形成一
个稍高 !稍厚的生长层 o有的菌株在变色线区周围还产生黑色小点k分生孢子器前身l ∀而在相同菌株
的菌落之间以及少数不同菌株的菌落之间却没有出现此变色线 ∀见图 t ∀显然 oΣ . σαπινεα的营养体
亲和与否在平皿配对培养的菌丝体水平上有明显异同的表征 ∀
u1t1u 配对菌体间的显微观察 对在玻片 • „ 培养基上配对生长约 t ∗ u周的先期试验的各菌株进
行显微观察表明 o在经平皿配对试验已知相互间产生色素带的两个不同菌株的菌落相邻处未见有菌丝
融合 o这些菌丝或交错 !或接触后避开或仅触未融 ~而在同一菌株或不产生色素带的不同菌株的两个菌
落相邻处可见菌丝间有融合现象存在 o融处无壁 o可见胞质 ∀
u1t1v 营养体亲和性标记的确定 上述先期配对试验结果和显微观察结果表明 o在菌丝体水平上 oΣ .
σαπινεα的营养体不亲和反应可表现为在不同菌株的菌落间菌丝不融合 o相互间产生抗衡作用的墨绿
色色素分界线 ~而其营养体亲和反应则表现为在同一菌株菌落间和不同菌株菌落间菌丝可融合 o不产
生这种抗衡色素分界线 ∀由此得出 o测定 Σ . σαπινεα营养体亲和与否可通过平皿配对培养观察两菌落
间有无形成抗衡反应的标记 ) 色素沉积的隔离带来确定 ∀
|w t期 吴小芹 }中国松树枯梢病菌营养体亲和性研究
图 t Σπηαεροπσισσαπινεα ∂ ≤ Š配对试验的代表性反应
ƒ¬ªqt °¤µ¬±ª¶²©¬¶²¯¤·¨¶²© Σπηαεροπσισ σαπινεα ·«¤·
§¨ °²±¶·µ¤·¨ µ¨³µ¨¶¨±·¤·¬√¨µ¨¤¦·¬²±¶}¤¦²°³¤·¬¥¯¨¬±·¨µ2
¤¦·¬²± ¥¨·º¨¨ ± ty ¤±§ty ~¤¦²°³¤·¬¥¯¨¬±·¨µ¤¦·¬²± ¥¨ 2
·º¨¨ ± tv ¤±§ ≥y ~¤± ¬±¦²°³¤·¬¥¯¨¬±·¨µ¤¦·¬²± o º¬·« ¤
µ¨¤¦·¬²± ¬¯±¨ o¥¨·º¨¨ ± ty tu otv ty ¤±§ty ≥y
212 Σ . σαπινεα平皿配对生长的适宜培养基的选择
将先期试验的 tu 个菌株在 • „ 培养基 !°⁄„
培养基 !tru°⁄„培养基和组合培养基等 w种培养基
上作配对生长比较试验 ∀结果表明 o在 • „ 培养基
上各菌株菌落稀疏透明生长极慢 o难以用肉眼观测
其营养体亲和与否 ~在组合培养基上 o各菌株气生菌
丝极为茂密隆起 o向上长的趋势优于边侧的接触生
长 o在培养 w §时 o尚有些菌落的边侧未靠近 o而 Σ .
σαπινεα在这些培养基上人工培养 w ∗ y §左右在菌
落底部就会开始分泌墨绿色素 ∀因此 o若延长观测
时间待所有菌落两侧生长接触 o则会由于全皿底部
产生色素而较难观察作用区带的形成 o故组合培养
基也非测定 Σ . σαπινεα营养体亲和性的最佳培养
基 ∀在 °⁄„和 tru°⁄„培养基上 o各菌株配对生长
w §时 o菌落底部尚未见明显的色素分泌 o而在两菌
落接触部位则产生了清晰可辨的色素隔离带 ∀鉴于
从总体观察效果而言 o°⁄„ 略优于 tru°⁄„ ∀因此 o
用平皿配对试验来观察 Σ . σαπινεα营养体亲和性的
适宜培养基以 °⁄„为好 ∀
另外 o在配对生长的 v种排列方式中 o第 u种排
列方式费时繁琐 o且菌块间缝隙太小不易观测 ~第 t
和第 v种排列方式较好 o其配对结果简单明了 o其中尤以第 v种为宜 o因为所有菌株均能在较易观察的
皿四周配对 ∀
213 Σ . σαπινεα的营养体亲和类群
所有供试的 xx个 Σ . σαπινεα菌株在 °⁄„培养基上以第 t和第 v种排列方式进行配对生长 ∀结果
表明 oxx个菌株中绝大多数菌株间的营养体呈现不亲和反应k菌落间产生色素带l o只有少数菌株间呈
现营养体亲和反应k菌落间不产生任何色素带l ∀在菌株间的不亲和反应中 o大多数菌株是在相互菌落
间形成明显的中间共有的色素分界带 o这种表征占所有配对不亲和反应的 || h左右 ~另有极少数菌株
间产生半段或较淡不甚明显的色素带 o如 ƒx与 tu和 t|之间 o≠ ‘x与 ƒz之间以及 ≥y与 ≥÷t之间 ~
还有少数菌株间的不亲和反应则在相互间形成双色素带 o如 t与 Š⁄u之间以及它们与一些菌株特
别是与在形态和培养性状上趋于一类的 v个菌株kƒu ou和wl之间 ∀作为对照的所有同菌株的菌落间
的营养体均呈亲和反应 o相互间没有形成色素隔离带 ∀
研究表明 o来自我国不同地区不同针叶树上的 xx个 Σ . σαπινεα菌株共可分为 w{个营养体亲和类
群k∂ ≤ Š≥l o这说明供试菌体中存在着较大的遗传分化 ∀在 w{个 ∂ ≤ Š≥中 o有 ww个 ∂ ≤ Š≥分别只含一
个菌株 o有 v个 ∂ ≤ Š≥分别含有 u个菌株 ~只有一个 ∂ ≤ Š中含有 x个菌株k图 ul ∀
214 Σ . σαπινεα的 ς ΧΓΣ与寄主和地理来源的关系
Σ . σαπινεα的 ∂ ≤ Š≥与寄主种类和地理来源无明显关系 ∀供试的 xx个菌株中有 w{个 ∂ ≤ Š≥其本
身就说明一定问题 ∀如 tu和 tv来自南京同一马尾松林地的不同种源林 o但它们的营养体却分属 u
个 ∂ ≤ Š≥ ~而地理来源相差很远k南北纬度相距 utβ左右l且寄主也有所不同的 „tk安徽火炬松l !⁄tk黑
龙江樟子松l !⁄uk黑龙江长白赤松l以及 ƒy和 ƒzk福建火炬松l却同在一个 ∂ ≤ Š中 ∀但从另一侧面来
看 o似乎也不能完全排除地理来源的影响 ∀试验中含有 u个菌株的 v个 ∂ ≤ Š≥中就有 u个 ∂ ≤ Š≥的菌
株与地理来源有一定联系 ∀如来自南京的 utk雪松l和 uvk日本冷杉l同属一个 ∂ ≤ Š ~来自昆明的
≠ ‘wk加勒比松l和 ≠ ‘yk墨西哥变种白松l也同属一个 ∂ ≤ Š ∀
sx 林 业 科 学 vy卷
图 u 中国松枯梢病菌菌株的营养体亲和类群
ƒ¬ªqu ׫¨ ±∏°¥¨µ¶²©¬¶²¯¤·¨¶¬± ¤¨¦«²©w{ ∂ ≤Š≥ µ¨³µ¨¶¨±·¬±ª ≤«¬±¤³²³∏¯¤·¬²± ²© Σπηαεροπσισσαπινεα
∂ ≤Št }„t !⁄t !⁄u !ƒy !ƒz ~∂ ≤Šu }tv !≥y ~∂ ≤Šv }ut !uv ~∂ ≤Šw }≠ ‘w !≠ ‘y q
v 讨论
关于 Σ . σαπινεα的营养体亲和性问题过去无人研究过 ∀目前 o用于鉴定真菌营养体亲和性的方法
主要有 v种 }一是通过隐性的营养缺陷型或色素标记的互补作用来测定异核体的形成 ~二是通过抗衡
区的产生来直接测定不能形成异核体 ~三是通过菌系k这些菌系部分为双倍体 o即在一个或多个不亲和
位点是异核的l的生长特性来观察测定k¨¶¯¬¨ ot||vl ∀本研究应用第 u种方法采用 °⁄„ 平皿配对培
养快速测定了 Σ . σαπινεα群体的营养体亲和性 o明确了该菌不亲和性所表现出的抗衡作用反应为相互
间形成明显的色素隔离带 ∀这种抗衡区带的形成在许多真菌的营养体不亲和反应中均有发生 o如柄孢
壳属k Ποδοσπορα) ,脉孢菌属( Νευροσπορα)和 Χρψπηονεχτρια等 ∀少数菌株配对生长时在两菌落间形成
半段或较淡的色素带 o这可能是菌株间存在亲和与不亲和的过渡类型 o这些菌株在遗传上可能比相互
间形成明显色素带的菌株间要近缘一些 ∀另外 o还有部分菌株配对时产生各自独立的双色素带而非绝
大多数菌株间表现出的共有中间带 o这似乎意味着这些菌株间存在着较大的遗传差异 ∀
真菌的营养体不亲和反应通常可发生在不同的阶段 o即融合前不亲和反应与融合后不亲和反应 o
而融合后的不亲和反应又可分为致死反应和分离反应k„±¤ª±²¶·¤®¬¶ot|{{ ~ ≤²µµ¨¯¯ ετ αλ. ot|{zl ∀从
本研究情况来看 oΣ . σαπινεα的营养体不亲和反应可能属于融合前不亲和反应 ∀ ײ§§和 • ¤¼±¨ µ认为
真菌个体间的营养体不亲和性可能存在接触前识别系统 !细胞壁识别系统 !质膜识别系统和融合后识
别系统 ∀接触前识别系统可能主要针对种间而非种内的识别 o而后 v种识别系统则似乎涉及种下区别
个体间差异的物异性识别分子等k王克荣等 ot||tl ∀根据对 Σ . σαπινεα部分菌株配对间的显微观察结
果推测 oΣ . σαπινεα的营养体亲和与不亲和反应机制可能受细胞壁识别系统所控制 ∀当菌丝间细胞壁
相互接触时 o壁上呈特定空间排列的蛋白质或类外源凝集素等大分子间发生相互作用 }若不产生排斥
反应 o则相互菌丝间可融合 ~若产生排斥反应 o则相互菌丝间不能融合 o这就造成两菌株先端菌丝生长
受阻k或菌丝交错网结l而老化直至死亡 o导致色素沉积形成抗衡隔离带 ∀ ‘¨ º«²º¶¨ 和 ¤¦⁄²±¤¯§对
栗疫病菌k Χ. παρασιτιχα)营养体亲和与不亲和菌丝进行超微观察后认为 o抗衡区是由一个含有濒死细
胞或死细胞的中间区所组成的k ‘¨ º«²∏¶¨ ετ αλ. ,t||tl ∀这与我们的观察研究与推测结果一致 ∀当
然 o有关 Σ . σαπινεα营养体不亲和色素带的形成机制尚有待进一步研究 ∀
植物病原真菌营养体不亲和性的作用之一即是保护同核体免受真菌病毒或有害的显性细胞质因
子的侵入k„±¤ª±²¶·¤®¬¶ot|zz ~…µ¤¶¬¨µot|{y ~≤¤·¨±ot|zul这种特性对人们试图利用胞质有害因子来
实施病原真菌的生物防治极为不利k…µ¤¶¬¨µot|{yl ∀国内外对栗疫病菌k Χ. παρασιτιχα)的营养体亲和
性研究较多 o特别在利用低毒力菌株生物防治栗疫病方面 ∀在该病菌 ∂ ≤ Š≥数量少的欧洲此生防效果
tx t期 吴小芹 }中国松树枯梢病菌营养体亲和性研究
较好 o但在 ∂ ≤ Š≥数量多的美国和中国则生防效果较差k∞¯ ¬¯¶·²±ot|{ul ∀松枯梢病k Σ . σαπινεαl普遍发
生于世界各地 o在不少国家为害严重 ∀据说有人发现该病菌带毒 o设想也用低毒菌系通过菌丝间亲和
融合传递低毒因子来防治该病 ∀从本研究结果来看 o该病菌在中国的营养体亲和群数量较多 o尽管本
研究的供试菌株有限 o但也有一些菌株是来自同一地理区域或同一林分的 o而这些菌株却很少同属一
个营养体亲和群 ∀因此 o松枯梢病菌的此生防途径至少在中国可能存在较大的难度 ∀
真菌的营养体亲和性反映了真菌群体中个体差异的部分信息 o其 ∂ ≤ Š标记不仅快捷而且稳定 ∀
有数据表明 o大部分 ∂ ≤ Š≥在自然时空上以及在实验室中都是稳定的k¨¶¯¬¨ ot||vl ∀因此 o∂ ≤ Š≥可作
为划分真菌亚群体的一种天然手段 o这对我们研究真菌的群体生物学提供了帮助 ∀然而 o应该说真菌
的这种特性仅只是个表征的标记 o因为单凭其营养体亲和与否是无法清楚阐明群体中各个亚群内菌系
间的差异距离及其亲缘关系远近的 ∀因此 o对 Σ . σαπινεα群体遗传多样性的深入分析尚需研究其群体
或个体差异的分子基础 ∀
参 考 文 献
方中达编 q植病研究方法 o北京 }农业出版社 ot|{u
梁宗琦 o福克斯 • × ∂ q粉被虫草无性型单孢子株间和单孢子株内的营养亲和性 q菌物系统 ot||z otykvl }uty ∗ uuv
王克荣 o邵见阳 o陆家云 q苏皖地区栗疫病菌营养体亲和性研究 q南京农业大学学报 ot||t otwkwl }ww ∗ w{
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