全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（增刊）：2527 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com

收稿日期：2011–08–01
基金项目：国家自然科学基金项目（31071794）；农业部‘948’项目（2011-Z61）；北京市常规育种财政专项（2011-509）
* 通信作者（E-mail：wyqty@sohu.com；Tel：010-51503125）
北京地区侵染大葱的胡葱黄条病毒外壳蛋白基
因的克隆与分析
田保华 1,2，王永勤 1,*
（1 北京市农林科学院蔬菜研究中心，北京 100097；2山西大学生命科学学院，太原 030005）
我国是葱的原产地，长期以来品种改良多以产量和品质为主要目标，加之栽培面积的扩大和连
作栽培，葱病毒病发病日趋严重，田间发生率一般为 20% ~ 30%，严重的高达 75%。大葱病毒病已
成为葱高产优质栽培的主要限制因素之一。本研究中对北京地区胡葱黄条病毒 SYSV 病毒进行克隆
和序列分析。
感病大葱植株采自北京市农林科学院蔬菜研究中心试验田。病毒总 RNA 的提取参照试剂盒说
明书进行。根据 GenBank 上已发表的 SYSV 病毒的 CP 基因序列，设计特异性引物，由上海生工合
成。
按照天根公司的 Quant Reverse Transcriptase 合成第一链 cDNA 试剂盒说明书操作。以反转录产
物为模板进行 PCR 反应，取 5 μL 扩增产物用 1.5% 琼脂糖凝胶进行电泳检测。回收目的条带并克
隆测序。
以感染 SYSV 的大葱叶片总 RNA 为模板，利用 SYSV 病毒特异性引物 SY-CP1 和 SY-CP2 进行
RT-PCR 扩增，得到一条特异片段，长度约为 1 kb，而阴性对照无此特异片段。
测序结果显示，目的片段长 1 008 bp。开放阅读框 774 bp，编码 258 个氨基酸，其中 A：267 个，
C：147 个，G：190 个，T：170 个，G + C 含量 43.54%。将开放阅读框序列与 GenBank 中查找来
自不同国家和地区的其他 SYSV 分离物 CP 基因序列进行比较，表明核苷酸序列同源性最高达 96%，
氨基酸序列同源性最高可达 99%。

关键词：大葱；病毒；外壳蛋白基因；序列分析
中图分类号：S 633.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2527-01