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Investigation on Chromosome Ploidy of the Hybrids of Phalaenops is Polyploids

不同倍性蝴蝶兰杂交后代的染色体倍性研究



全 文 :园  艺  学  报  2009, 36 (10) : 1491 - 1497
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2009 - 02 - 27; 修回日期 : 2009 - 07 - 27
基金项目 : 广州市农业局 2004专项 ( F04094)3 通讯作者 Author for correspondence ( E2mail: zszhang@ scau1edu1cn)
不同倍性蝴蝶兰杂交后代的染色体倍性研究
周建金 1 , 曾瑞珍 1 , 刘 芳 1 , 易懋升 2 , 黎扬辉 2 , 张志胜 13
(1华南农业大学广东省植物分子育种重点实验室 , 广州 510642; 2广州花卉研究中心 , 广州 510360)
摘  要 : 对不同倍性蝴蝶兰小孢子母细胞减数分裂及其杂交后代的根尖染色体数进行了检测。结果表
明 , 除三倍体和三倍体杂交未能产生杂交后代外 , 不同倍性蝴蝶兰杂交后代的倍性均出现分离。二倍体和
二倍体、二倍体和四倍体杂交均产生二倍体、三倍体和四倍体 ; 二倍体和三倍体杂交产生二倍体、三倍体、
五倍体和非整倍体 ; 三倍体和四倍体随正反交不同而异 , 三倍体 ×四倍体的后代倍性有三倍体、四倍体、
八倍体和非整倍体 , 而四倍体 ×三倍体的后代倍性有三倍体、四倍体、五倍体和非整倍体 ; 四倍体和四倍
体杂交产生二倍体、三倍体、四倍体、五倍体、六倍体和非整倍体。不同倍性蝴蝶兰的小孢子母细胞减数
分裂普遍存在微核、落后染色体和三分体等异常现象 , 导致小孢子和杂种后代的倍性出现多样性。
关键词 : 蝴蝶兰 ; 多倍体 ; 减数分裂 ; 小孢子
中图分类号 : S 682131; Q 943  文献标识码 : A  文章编号 : 05132353X (2009) 1021491207
Investiga tion on Chrom osom e Plo idy of the Hybr ids of Pha laenopsis Poly2
plo ids
ZHOU J ian2jin1 , ZENG Rui2zhen1 , L IU Fang1 , YIMao2sheng2 , L I Yang2hui2 , and ZHANG Zhi2sheng13
(1 Guangdong Provincial Key Laboratory of P lant M olecular B reeding, South China A gricultural U niversity, Guangzhou 510642,
Ch ina; 2 Guangzhou Flow er Research Center, Guangzhou 510360, China)
Abstract: The m icrospore mother cell meiosis of different p loidy Phalaenopsis and chromosome number
in root tip cell of their hybrids were observed. The results showed that the p loidy segregation appeared in all
combinations excep t that of trip loid ×trip loid, in which no hybrid p lantswere obtained. D ip loid, trip loid and
tetrap loid p lants were identified in the combinations of dip loid ×dip loid, dip loid ×tetrap loid and tetrap loid ×
dip loid Phalaenopsis. D ip loids, trip loids, pentap loids and aneup loids were found in the combinations of dip2
loid ×trip loid and trip loid ×dip loid. Trip loids, tetrap loids, octop loids and aneup loids were identified in the
p lants of trip loid ×tetrap loid combinations, while trip loids, tetrap loids, pentap loids and aneup loids existed
in the p lants of tetrap loid trip loid ones. This indicated that p loidy segregation was related to recip rocal cros2
ses. Tetrap loid crossed with tetrap loid p roduced dip loids, trip loids, tetrap loids, pentap loids, hexap loids
and aneup loids. The p loidy diversity of m icrospore in Phalaenopsis caused by the abnormal meiosis of m icro2
spore mother cells such as chromosome lagging, m icronucleus and triad, was one of the main reasons resul2
ting in p loidy diversity of the hybrids.
Key words: Phalaenopsis; polyp loid; meiosis; m icrospore
蝴蝶兰 ( Phalaenopsis) 的栽培品种主要为多倍体。刘芳 (2008) 对 85份蝴蝶兰根尖染色体的鉴
定结果表明 , 315%为二倍体 , 1016%为三倍体 ; 8519%为四倍体。蝴蝶兰的多倍体品种主要是通过
不同倍性蝴蝶兰杂交育成的 , 研究蝴蝶兰杂交后代的倍性变化规律 , 弄清不同倍性杂交后代形成的原
因 , 对预测杂交后代的倍性分离、有效开展蝴蝶兰染色体工程育种具有十分重要的意义。
园   艺   学   报 36卷
对不同倍性观赏植物杂交后代的倍性分离及其原因已有一些研究报道 ( Kroon & Vaneuk, 1977;
Negri & Veronesi, 1989; Crespel & Gudin, 2003; Barba2Gonzalez et al. , 2004, 2006; 向仕华 等 ,
2007; Zhou et al. , 2008)。吕复兵 (2005) 对兰属种间杂交后代的倍性进行了鉴定 , 结果表明不同
倍性杂交组合后代的倍性发生分离。廖道龙 (2008) 的研究表明 , 不同倍性石斛兰杂交后代的倍性
出现多样性 , 以三倍体为母本 , 二倍体为父本的组合 , 其后代植株会出现二倍体、三倍体和四倍体 ,
但未对倍性分离的原因进行研究。迄今在蝴蝶兰上尚未见到相关的研究报道。
本研究中对不同倍性蝴蝶兰小孢子母细胞减数分裂及其杂种后代根尖染色体进行观察 , 以期找出
不同倍性亲本杂交后代的倍性分离规律及其产生的原因 , 为进一步开展蝴蝶兰染色体工程育种提供科
学依据。
1 材料与方法
111 试验材料
2007年 1月至 2007年 7月在广州花卉研究中心广东省名优花卉种质资源圃中 , 配制了 11个杂交
组合 (表 1) , 亲本倍性通过根尖染色体数鉴定确定。杂交种子经无菌萌发产生试管苗。以试管苗根
尖为材料进行杂交后代染色体数鉴定。PM30049为资源库中未确定品种名的资源编号。
观察小孢子母细胞减数分裂的材料为 P. Timothy Christonpher (2x)、P. aphrod ite (2x) PM30049
(3x)、D tps. Taisuco Pixie (3x)、P. Rai L in‘Red Angel’ (4x)、D tps. Sogo Roscherz‘T23’ (4x)、
P. B rother Yellew Boy (4x) 和 P. Ever Sp ring L ight (4x) 的花粉块。
112 根尖染色体数鉴定
参照张志胜等 (2007) 的压片法 , 并根据蝴蝶兰特点进行了修改。
材料处理 : 切取蝴蝶兰幼嫩根尖 2~3 mm; 洗净后于 15 ℃黑暗条件下在 01002 mol·L - 1的 8 -羟
基喹啉中浸泡 6~8 h; 清水洗净后用新配制的卡诺固定液 (95%乙醇 ∶冰醋酸 = 3∶1) 在 4 ℃冰箱固
定 12~24 h, 然后放入 1 mol·L - 1 HCl中在 28 ℃恒温摇床上摇 30~60 m in, 再置于 60 ℃的恒温水浴
锅中酸解 3~4 m in。用去离子水洗 2~3次 ; 在水中浸泡 2~3 h。
制片 : 切取根尖的分生组织放在载玻片上 , 用镊子压碎 , 弃去残渣 , 快速经过酒精灯的火焰 2~
3次 ; 滴 1滴石炭酸品红进行染色 , 染液快干时盖上盖玻片 , 用带橡皮的铅笔垂直轻敲后 , 快速经过
火焰 6~7次。
镜检 : 在 O lympus2IX71倒置显微镜下观察 , 选取染色体分散好的细胞拍照 , 统计染色体数目。
计数时 , 每个根尖至少统计 10个细胞 , 取 85%以上具有恒定一致的染色体数作为该植株的染色体
数。一株苗的根尖制 1片 , 每 50株为 1次重复 , 重复 2次。
113 小孢子母细胞减数分裂的细胞学观察
取减数分裂时期的花粉块放入刚配制的卡诺固定液中 , 4 ℃冰箱固定 12~24 h后 , 保存于 75%
乙醇中。制片时 , 取出花粉块 , 放在载玻片上 , 滴水防止花粉过于干燥 , 用镊子使花粉平整分散在载
玻片上 , 酒精灯火焰烤干水分后 , 在材料上方均匀抹上一层改良石炭酸品红染液 , 快干时盖上盖玻
片 , 用带橡皮的铅笔垂直轻敲后 , 快速经过火焰 6~7次。用 O lympus2IX71倒置显微镜观察 , 选取清
晰、典型的细胞拍照。
观察减数分裂异常行为时 , 100个小孢子母细胞为 1次重复 , 重复 3次。
观察孢子倍性时 , 要在形成四分体后观察 , 100个四分体为 1次重复 , 重复 2次。
114 统计分析
采用 SPSS 1010和 M icrosoft office Excel 2003版软件进行统计分析。
2941
 10期 周建金等 : 不同倍性蝴蝶兰杂交后代的染色体倍性研究  
2 结果与分析
211 不同倍性蝴蝶兰杂交后代的倍性多样性
对不同倍性蝴蝶兰杂种后代的根尖染色体数进行鉴定 (表 1)。除 D tps. Queen beer‘Red Sky’
×P. Sogo L it2Sunny和 P. Sogo L it2Sunny (3x) ×P. Sogo L it2Sunny (3x) 三倍体组合未能获得杂种
后代外 , 不同倍性蝴蝶兰杂交后代的染色体数均呈现多样性 (图版 Ⅰ)。
二倍体和二倍体杂交 , 杂种后代出现二倍体、三倍体和四倍体 (图版 Ⅰ, e) , 其中二倍体后代
占 90%以上。倍性相同但亲本不同的组合产生三种倍性后代的比例差异不明显。
二倍体和三倍体以及三倍体和二倍体杂交 , 产生二倍体 (图版 Ⅰ, a )、三倍体、五倍体和
2x~3x非整倍体 (图版 Ⅰ, b) 后代。正反交形成的倍性种类没有差异 , 但不同倍性的后代比例明显
不同 , 二倍体和三倍体杂交后代中 , 二倍体仅占 30100% , 2x~3x非整倍体占 49100% , 三倍体占
19100% , 而三倍体和二倍体杂交 , 二倍体占 53160% , 2x~3x非整倍体仅占 39128% , 三倍体仅占
4107%。
二倍体 ×四倍体和四倍体 ×二倍体的杂种后代倍性包括二倍体、三倍体 (图版 Ⅰ, c) 和四倍
体。正反交形成的倍性种类未见差异 , 但比例明显不同 , 二倍体 ×四倍体的杂交后代中 , 二倍体占
25123% , 四倍体占 74100% , 而四倍体 ×二倍体的杂交后代中 , 二倍体仅占 9195% , 四倍体则占
88186%。
表 1 不同倍性蝴蝶兰杂交后代的倍性分离
Table 1 The plo idy segrega tion of the hybr ids of d ifferen t plo idy Pha laenopsis
杂交组合 Cross combination
不同倍性杂交后代比例 /% Percentage of different p loidy hybrids
2x 2x~3x 3x 3x~4x 4x > 4x
P. Timothy Christonpher(2x) × 93114 ±0198 0 3192 ±0100 0 2195 ±0198 0
P. Timothy Christonpher(2x)
P. Timothy Christonpher(2x) × 91144 ±0187 0 3181 ±0104 0 4176 ±0191 0
P. aphrodite (2x)
P. Timothy Christonpher(2x) × 30100 ±2100 49100 ±1100 19100 ±1100 0 0 2102 ±2100 (5x)
PM30049 (3x)
P. Timothy Christonpher(2x) × 25123 ±6177 0 74100 ±6100 0 0176 ±0177 0
P. Rai L in‘Red Angel’(4x)
PM30049 (3x) × 53160 ±0141 39128 ±3128 4107 ±1194 0 0 3107 ±0194 (5x)
P. Timothy Christonpher(2x)
D tps. Queen beer‘Red Sky’(3x) × 0 0 0 0 0 0
P. Sogo L it2Sunny(3x)
P. Sogo L it2Sunny(3x) × 0 0 0 0 0 0
P. Sogo L it2Sunny(3x)
D tps. Taisuco Pixie (3x) × 0 0 62144 ±1157 6135 ±2135 16179 ±2179 12144 ±1157 (4x~5x) ;
D tps. Sogo Roscherz‘T23’(4x) 2100 ±1118 (8x )
P. B rother Yellew Boy(4x) × 9195 ±1195 0 88186 ±3115 0 1118 ±1119 0
P. Timothy Christonpher(2x)
P. B rother Yellew Boy(4x) × 0 0 28101 ±2100 6198 ±1100 46102 ±6102 10100 ±0100 (4x~5x) ;
PM30049 (3x) 9100 ±1100 (5x)
P. Ever Sp ring L ight(4x) × 1114 ±1114 0 11137 ±2128 32147 ±5168 36182 ±7182 9109 ±0100 (5x) ;
P. HOpis French Fantasia (4x) 9109 ±9100 (6x)
  注 : 2x = 38, 3x = 57, 4x = 76, 5x = 95, 6x = 114, 8x = 152。2x~3x表示二倍体到三倍体之间的非整倍体 ; 3x~4x表示三倍体到
四倍体之间的非整倍体 ; 4x~5x表示四倍体到五倍体之间的非整倍体 ; > 4x表示倍性超过四倍体。
  Note: 2x = 38, 3x = 57, 4x = 76, 5x = 95, 6x = 114, 8x = 152. 2x - 3x indicated that aneup loid between dip loid and trip loid; 3x - 4x
indicated that aneup loid between trip loid and tetrap loid; 4x - 5x indicated that aneup loid between tetrap loid and pentap loid; > 4x indicated that
the p loidy was higher than tetrap loid.
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园   艺   学   报 36卷
图版Ⅰ说明 : 不同倍性蝴蝶兰杂交后代根尖染色体和植株
a. PM30049 (3x) ×P. Timothy Christonpher (2x) , 二倍体 (2x = 38) ; b. PM30049 ( 3x) ×P. Timothy Christonpher ( 2x) , 2x~
3x非整倍体 (2x + 6 = 44) ; c. P. Timothy Christonpher ( 2x) ×P. Rai L in ‘Red Angel’ ( 4x) , 三倍体 ( 3x = 57 ) ; d. P. Ever
Sp ring L ight (4x) ×P. HO′s French Fantasia (4x) , 3x~4x非整倍体 (3x + 6 = 63) ; e. P. Timothy Christonpher (2x) ×P. Timothy
Christonpher (2x) , 四倍体 (4x = 76) ; f. P. B rother Yellew Boy ( 4x) ×PM30049 ( 3x) , 4x~5x非整倍体 ( 4x + 12 = 88) ; g. P.
B rother Yellew Boy (4x) ×PM30049 (3x) , 五倍体 (5x = 95) ; h. P. Ever Sp ring L ight ( 4x) ×P. HO′s French Fantasia ( 4x) , 六
倍体 (6x = 114) ; i. D tps. Taisuco Pixie (3x) ×D tps. Sogo Roscherz‘T23’ (4x) , 八倍体 (8x = 152) ; j. P. Ever Sp ring L ight ×P.
HO′s French Fantasia的三倍体 (2n = 3x)、四倍体 (2n = 4x)、五倍体 (2n = 5x) 和六倍体 ( 2n = 6x) ; k. D tps. Taisuco Pixie ×D tps.
Sogo Roscherz‘T23’, 八倍体 (2n = 8x)。
Explana tion of pla teⅠ: The chrom osom e num ber in root tip cell and plan tlets of the hybr ids of d ifferen t plo idy Pha laenopsis
a. PM30049 (3x) ×P. Timothy Christonpher (2x) , dip loid ( 2x = 38) ; b. PM30049 ( 3x) ×P. Timothy Christonpher ( 2x) , aneu2
p loid (2x + 6 = 44) between 2x and 3x; c. P. Timothy Christonpher (2x) ×P. Rai L in‘Red Angel’ ( 4x) , trip loid ( 3x = 57) ; d. P.
Ever Sp ring L ight (4x) ×P. HO′s French Fantasia (4x) , aneup loid (3x + 6 = 63) between 3x and 4x; e. P. Timothy Christonpher ( 2x)
×P. Timothy Christonpher (2x) , tetrap loid (4x = 76) ; f. P. B rother Yellew Boy (4x) ×PM30049 (3x) , aneup loid (4x + 12 = 88) be2
tween 4x and 5x; g. P. B rother Yellew Boy (4x) ×PM30049 (3x) , pentap loid (5x = 95) ; h. P. Ever Sp ring L ight ( 4x) ×P. HO′s
French Fantasia (4x) , hexap loid (6x = 114) ; i. D tps. Taisuco Pixie (3x) ×D tps. Sogo Roscherz‘T23’ ( 4x) , octop loid ( 8x = 152) ;
j. P. Ever Sp ring L ight ×P. HO′s French Fantasia, trip loid (2n = 3x) , tetrap loid ( 2n = 4x) , pentap loid ( 2n = 5x) and hexap loid ( 2n =
6x) ; k. D tps. Taisuco Pixie ×D tps. Sogo Roscherz‘T23’, octop loid (2n = 8x) .
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 10期 周建金等 : 不同倍性蝴蝶兰杂交后代的染色体倍性研究  
三倍体 ×四倍体和四倍体 ×三倍体的杂交后代均包括 5种倍性。三倍体 ×四倍体的杂交后代 5种
倍性分别为 3x、4x、8x (图版 Ⅰ, k)、3x~4x非整倍体和 4x~5x非整倍体。而四倍体 ×三倍体的后
代倍性分别为 3x、4x、5x (图版 Ⅰ, g)、3x~4x的非整倍体和 4x~5x的非整倍体 (图版 Ⅰ, f)。三
倍体 ×四倍体的杂交后代中 , 3x占 62144% , 4x占 16179% , 四倍体 ×三倍体杂交后代中 , 3x仅占
28101% , 4x则占 46102%。表明正反交不仅影响后代倍性种类 , 而且不同倍性后代比例也明显不同。
四倍体和四倍体杂交产生二倍体、三倍体、四倍体、五倍体、六倍体 (图版 Ⅰ, h) 和 3x~4x
非整倍体 (图版 Ⅰ, d、 j) , 以四倍体和 3x~4x非整倍体为主 , 分别占 36182%和 32147%。
212 不同倍性蝴蝶兰的小孢子染色体数
为了便于取材 , 测定了小孢子母细胞减数分裂期的花苞直径 (表 2)。结果表明 , 小孢子母细胞
处于减数分裂期的二倍体、三倍体和四倍体蝴蝶兰的花苞直径随着倍性的增加而显著增大 , 倍性与花
苞直径呈极显著的正相关 , 其相关系数为 0184 ( t = 20106 > t(0101, 30) = 2175) , 说明根据不同倍性蝴蝶
兰减数分裂期的花苞直径取材是可靠的。
不同倍性蝴蝶兰产生的小孢子染色体数呈现多样性 (表 2)。二倍体蝴蝶兰产生 16140% 0x~1x
非整倍和 83160%单倍小孢子。三倍体蝴蝶兰产生单倍、1x~2x非整倍、二倍和多倍小孢子 , 其比例
分别为 9173%、85141%、4122%和 0164%。四倍体蝴蝶兰主要产生单倍、1x~2x非整倍和二倍小孢
子 , 比例分别为 3174%、42194%和 53133%。小孢子染色体数多样性是导致杂种后代染色体数多样
性的重要原因之一。
表 2 不同倍性蝴蝶兰减数分裂期的花苞直径及其形成的不同染色体数小孢子和比例
Table 2 The floret d iam eter a t m icrospore m other cell m e iosis stage and the percen tage of m icrospores genera ted
in d ifferen t plo idy Pha laenopsis
亲本倍性
Parent p loidy
花苞直径 / cm
Floret diameter
不同染色体数小孢子的比例 /% Percentage of m icrospore with different
1~18 19 20~37 38 > 38
二倍体 D ip loid 0147 ±0106 c 16140 ±2162 83160 ±2162 0 0 0
三倍体 Trip loid 0181 ±0109 b 0 9173 ±1144 85141 ±1145 4122 ±1109 0164 ±0117
四倍体 Tetrap loid 1105 ±0125 a 0 3174 ±1147 42194 ±5161 53133 ±4110 0
213 不同倍性蝴蝶兰小孢子母细胞减数分裂的异常行为
观察了小孢子母细胞减数分裂行为 (表 3) , 发现二倍体、三倍体和四倍体的小孢子母细胞减数
分裂行为均出现异常 (图版 Ⅱ)。二倍体的小孢子母细胞减数分裂存在微核和落后染色体的异常行
为。三倍体的小孢子母细胞减数分裂异常行为有微核 (图版 Ⅱ, d)、落后染色体 (图版 Ⅱ, a)、染
色体桥 (图版 Ⅱ, f) 和不均等分裂 (图版 Ⅱ, d、 e)。四倍体的小孢子母细胞减数分裂出现微核
(图版 Ⅱ, b)、落后染色体 (图版 Ⅱ, c) 和染色体桥的异常行为。三倍体和四倍体的小孢子母细胞
减数分裂还会出现三分体 (图版 Ⅱ, d、 e) 和六分体 (图版 Ⅱ, c) 等异常行为。
表 3 不同倍性蝴蝶兰减数分裂的异常行为及其比例
Table 3 The type and percen tage of abnorma l behav ior of m icrospore m other cell m e iosis of d ifferen t plo idy Pha laenopsis
亲本倍性
Parent p loidy
减数分裂异常行为比例 /% Percentage of abnormal behavior of meiosis
微核
M icronucleus
落后染色体
Chromosome lagging
染色体桥
Chromosome bridge
不均等分裂
A symmetric division
二倍体 D ip loid 9108 ±1108 30115 ±9185 0 0
三倍体 Trip loid 58160 ±11173 71190 ±9140 12182 ±3144 3161 ±0176
四倍体 Tetrap loid 40109 ±10109 72146 ±4154 27182 ±5118 —
  注 : —表示数据未收集。
  Note: — indicated that data were not collected.
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  三倍体和四倍体的小孢子母细胞减数分裂的异常频率均明显高于二倍体 , 说明二倍体小孢子母细
胞减数分裂比三倍体和四倍体正常。四倍体出现染色体桥的频率高于三倍体 , 而微核频率小于三倍
体 , 两者的落后染色体频率差异不明显。
图版Ⅱ说明 : 不同倍性蝴蝶兰小孢子母细胞减数分裂的异常行为
a. PM30049 (3x) , 落后染色体 (箭 ) ; b. P. Ever Sp ring L ight (4x) , 落后染色体 (箭 ) , 微核 (箭头 ) ; c. P. B rother Yellew Boy
(4x) , 六分体 (箭 ) , 落后染色体 (箭头 ) ; d. PM30049 (3x) , 三分体 (箭 ) , 微核 (箭头 ) ; e. D tps. Taisuco Pixie ( 3x) , 三分体
(箭头 ) , 不均等分裂 (箭 ) ; f. PM30049 (3x) , 染色体桥 (箭 ) , 微核 (箭头 )。
Explana tion of pla teⅡ: The abnorma l behav ior of m icrospore m other cell m e iosis of d ifferen t plo idy Pha laenopsis
a. PM30049 (3x) , chromosome lagging ( arrow ) ; b. P. Ever Sp ring L ight ( 4x) , chromosome lagging ( arrow ) , m icronucleus ( arrow
head) ; c. P. B rother Yellew Boy (4x) , hexad ( arrow) , chromosome lagging ( arrow head) ; d. PM30049 ( 3x) , triad ( arrow) , m icro2
nucleus ( arrow head) ; e. D tps. Taisuco Pixie (3x) , triad ( arrow head) , asymmetric division ( arrow) ; f. PM30049 ( 3x) , chromosome
bridge ( arrow) , m icronucleus ( arrow head) .
3 讨论
本研究中三倍体和二倍体或四倍体杂交能产生一定数量的杂种后代 , 但三倍体和三倍体杂交未能
获得杂种后代 , 其原因是三倍体蝴蝶兰主要产生非整倍性配子 (表 2) , 可育配子比例低 , 产生后代
的概率小。本研究还发现 , 相同组合正反交得到的杂种后代的倍性类型一致 , 但不同倍性后代的比例
不同。这可能是由于不同倍性小孢子通过花粉和胚囊的传递能力不同所致 , 倍性超过 1x的配子通过
花粉传递的能力强 , 导致 2x ×3x组合的多倍性后代比例高。
导致不同倍性植物杂交后代倍性多样性的可能原因有配子倍性多样性、内生多倍化和培养过程中
的染色体变异等 (Dujardin & Hanna, 1988; Mokadem et al. , 2002; 刘文革和阎志红 , 2005; 魏婉
如 , 2007)。本研究结果表明 , 蝴蝶兰小孢子母细胞的减数分裂存在微核、落后染色体、染色体桥、
不均等分裂等异常行为 , 这与向仕华等 ( 2007 ) 在东方百合中的观察结果相同 , 与 Bolanos等
(2008) 研究朵丽蝶兰花粉母细胞的减数分裂异常行为相似。蝴蝶兰小孢子母细胞减数分裂行为异常
形成的多样性配子是杂种后代倍性多样性的重要原因之一。大孢子母细胞减数分裂过程中也会出现各
种异常现象 , 导致不同倍性的大孢子产生 , 如在兰科的许多属里发现存在 2n雌配子 (Veilleux,
1985)。蝴蝶兰大孢子母细胞减数分裂是否存在和小孢子母细胞减数分裂诸多异常现象 , 对杂种后代
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 10期 周建金等 : 不同倍性蝴蝶兰杂交后代的染色体倍性研究  
的倍性多样性形成有什么影响有待于进一步研究。
染色体数变异是组织培养过程中的常见现象 , 与植物种类、倍性、培养基中植物生长调节剂的种
类和浓度、继代次数等密切相关。本研究的供试材料是由杂交种子直接培养形成 , 培养基中的植物生
长调节剂浓度较低 (012 mg·L - 1 ) , 诱导染色体数变异的可能性小 , 不同倍性蝴蝶兰杂交种子的萌
发率差异明显 (资料待发表 ) , 说明不同倍性蝴蝶兰杂交种子对植物生长调节剂的反应可能不同 , 植
物生长调节剂对杂种后代中不同倍性植株比例的影响有待于进一步研究。
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