全 文 ：ll74 园 艺 学 报 35卷
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番茄雌核发育诱导及胚珠植株再生研究初报
王孝宣 ，杜永臣，朱德蔚，高建昌，国艳梅，李 菲，戴善书
(中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081)
In vitro Gynogenesis Induction and Ovule Plant Regeneration in Tomato
WANG Xiao—xuan ， DU Yong—chen，ZHU De—wei，GAO Jian—chang，GUO Yan—mei，LI Fei， and DAI
Shan—shu
(Institute of Vegetables and Flowers，Chinese Academy ofAgricultural Sciences，Be ng 100081，China)
关键词：番茄；雌核发育；子房；胚珠；大孢子；单倍体
中图分类号：S 641．2 文献标识码：A 文章编号：0513—353X (2008)08—1174-01
番茄单倍体培养技术的建立对于番茄育种、分子标记、遗传图谱构建、基因定位、基因克隆等均有极其重要的意
义。目前诱导番茄雄核发育——花药和小孢子培养是获得单倍体的主流技术，但未获得理想的结果。作者探索另一条
获得番茄单倍体的途径——诱导雌核发育，目前已从离体胚珠获得大量愈伤组织，并获得一再生植株 ，其来源有待鉴
定，现将方法报道如下。
试材为中国农业科学院蔬菜花卉研究所育成的两个番茄杂交品种 ‘中杂 101’和 ‘中杂 105’，常规种植和管理。
定植后选取单核期的花蕾 ，剥离出子房 ，用 10％次氯酸钠灭菌 l6～20 min，再用去离子无菌水冲洗3—4次。无菌条
件下在诱导培养基上接种 4种外植体：(1)完整子房；(2)半子房 (将子房外部果皮切除使胚珠外露)；(3)胚珠块
(将半子房切成长与宽均1～3 mm的胚珠块)；(4)离体胚珠。在每个离心管中接种2～3个子房、半子房或胚珠块，
接种 100～2013个胚珠，每种外植体接种 l0个离心管。诱导培养基以 B5和 Ms为基本培养基，附加不同浓度 (1～100
t~mol·L )的生长素 (IAA、NAA、2，4-D、IBA)和细胞分裂素 (KT、6-BA、TDZ、ZT)，共组成 20种培养基，
蔗糖2％，琼脂糖 0．8％ ，pH 5．8～6．0。在 28 c、70％相对湿度下进行暗培养。分化培养基以 B5、MS、DBMⅡ、
Nitsch和 N6为基本培养基，附加不同浓度 (0．1～1 000 txmol·L )的生长素 (IAA、NAA、2，4-D)和细胞分裂素
(KT、6一BA、TDZ、ZT)，蔗糖2％，琼脂糖0．8％，pH 5．8～6．0。
两个品种的子房、半子房和胚珠块均未获得愈伤组织，离体胚珠在培养 7～12 h后开始膨大，颜色逐渐变白，呈
不透明状。1周后体积增加 1倍 ，60％以上的胚珠成长为不透明的白球状。l0～15 d开始形成愈伤组织，20 d后愈伤
组织可达 2～3 mm，每个离心管中均可生长出50～100个愈伤组织。两个品种均获得了上千个愈伤组织。
当愈伤组织达到2 mm大小时转移至分化培养基上，16 h光照 (90 t~mol·m一 ·s )，8 h黑暗，温度28℃，
70％相对湿度，每20～40 d更换 1次培养基，1周后开始膨大，随后表面稍变褐，3周左右开始变绿，2～3个月后完
全变绿，随后继续生长。‘中杂 l0l’番茄未能诱导出芽。‘中杂 105’番茄在 B5+IAA 0．0l mg·L +zT 2．0 mg·
L 培养基中培养，更换 l0～l2次培养基，生长 l5个月后，一个愈伤组织开始出现绿色的芽点，再过 2～3周后形成
2 cm高的植株。当芽生长至2～3片叶时，将其转移至 MS+0．2 mg·L IAA+2％蔗糖 +0．8％琼脂 ，pH 5．8的生根
培养基中培养，1周后根即长成。根尖染色体鉴定结果其染色体数为 24条。该植株是来源于体细胞还是来 自胚囊中
的单倍体细胞，正在鉴定中。
收稿日期：2008—05—30；修回日期：2008—07一l7
基金项目：国家 ‘863’计划资助项 目 (2007AA10ZI78)；农业部蔬菜遗传与生理重点开放实验室资助项目
}E-mail：wxxlhy@ yaho．COB．cn
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