全 文 ：园 艺 学 报 2008，35(8)：1167—1174
Aeta Horticulturae Sinica
覆土对双孢蘑菇茵丝产量的影响
蔡为明 ，金群力 ，冯伟林 ，李南羿 ，范丽军 ，
( 浙江大学农业与生物技术学院，杭州 310029； 浙江省农业科学院园艺研究所，
郑 重
杭州 310021)
摘 要：在双孢蘑菇 (Agaricus bisporus)栽培中，以传统蘑菇砻糠田泥覆土为对照，研究 了不同泥炭
比例覆土配方的理化性状、细菌生长量、双孢蘑菇菌丝生物量及其产量。理化性状分析结果表明，不同泥
炭比例覆土的空隙度、持水率，以及在 一2．16一一l7．28 kPa水柱牵力下的水分释出量，都随着覆土中泥炭
含量的增大而增大。磷脂脂肪酸 (PLFA)分析结果表明，100％、50％和30％泥炭覆土中的菌丝生物量均
显著高于传统砻糠田泥覆土 (P<0．05)，并随着泥炭比例的增大而增高；覆土中的菌丝生物量均于第2潮
菇原基形成期达最大值。覆土中的细菌数量随着双孢蘑菇菌丝的生长而增多，不同覆土的细菌数量与其中
的蘑菇菌丝生物量正相关，覆土中的细菌与蘑菇菌丝存在营养共生关系。栽培试验结果表明，蘑菇子实体
形成量与覆土中的菌丝生物量密切正相关，与覆土持水率 (含水量)正相关；覆土层蘑菇菌丝生物量和持
水率是蘑菇覆土基质优化的重要技术指标。
关键词：双孢蘑菇；覆土；理化性状；磷脂脂肪酸；菌丝生物量；细菌数量；产量
中图分类号：s 646 文献标识码：A 文章编号：0513-353X (2008)08—1 167-08
Efects of Diferent Casing Soil on M ycelium Biomass and Yield of Agaricus
bisporus
CAI Wei—ming · ，JIN Qun—li ，FENG Wei．1in ，LI Nan—yi ，FAN Li-jun ，and ZHENG Zhong
( Colege ofAgricultural and Biological Technology，Zhejiang University，Hangzhou 310029，China； Institute ofHorticulture，
Zhejiang Academy ofAgricultural Sciences，Hangzhou 310021，China)
Abstract：Physical and chemical properties，culturable bacterial population and phospholipid faty acid
(PLFA)profile of diferent casing soils at different mushroom (Agaricus bisporus)cropping stages were inves—
tigated．The air—filed porosity(AFP)，water retention and water released under一2．16 kPa to一17．28 kPa
of the casing soils increase with the increasing in the ratio of peat to soil．The results of phospholipid fatty acid
(PLFA)analysis indicated that mycelium biomass of Agaricus bisporus in 1 00％ ．50％ and 30％ peat casing
were significantly higher than that of traditional casing soil with rice husk(P<0．05)，and the increase in the
ratio of peat to soil was accompanied by an increase in mycelium biomass．Comparatively higher mycelium bio·
mass of Agaricus bisporus were found in all casing soils at the primordia stage of second flush．The increase of
mycelium biomass of Agaricus bisporus in casing was accompanied by an increase in the bacterial population．
The result may indicate the syntrophism between bacteria and mycelia during growth of mushroom．There is a
strong positive correlation between the number of mushroom primordia and mycelium biomass in casing，and
the yield of mushroom positively corelated with number of mushroom primordia and moisture content of casing
soil．The important aspects of casing soil improvement are to increase mycelium biomass and water retention in
casing．
Key words：Agaricus bisporus；casing soil；physical and chemical properties；phospholipid fatty acid；
mycelium biomass；bacterial population；yield
收稿日期：2008—03—13；修回日期：2008—06—10
基金项目：浙江省科技计划项 目 (2003C32042)
}E—mail：caiwm527@ 126．COB
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园 艺 学 报 35卷
在双孢蘑菇 [Agaricus bisporus(Large)Sing．]栽培中，菌丝长满培养料后，必须覆土才能诱导
形成子实体，获得商业性产量。覆土是影响蘑菇产量、质量和出菇整齐度的重要因素 (Noble&
Gaze，1995)。尽管蘑菇覆土的确切作用目前还不十分清楚，但理想的覆土必须具备特殊的理化特性
和微生物特性 (Colauto&Eira，1998)。已研究明确覆土的某些理化性状，如空隙度、持水率、盐浓
度、渗透势和pH值等可以影响蘑菇生长 (Noble et a1．，1999b)。覆土是蘑菇生长发育所需水分的重
要来源。据 Kalberer(1983，1985)研究，蘑菇子实体生长发育所吸收的水分54％ ～83％来自于培养
料，17％ ～46％来自于覆土。覆土材料是否具备适于蘑菇生长发育的理化特性，尤其是持水率的高低
与蘑菇产量关系密切 (Bels Koning，1950；Edwards&Flegg，1953；Sehroeder&Sehisler，1981；Kal—
berer，1991)。
泥炭是一种优质蘑菇覆土材料，具有均匀合适的空隙度，结构稳定，反复喷水能保持良好的结构
等特性，十分有利于菌丝与子实体的生长发育，并且持水率高达 80％以上，能充分供应蘑菇生长发
育所需的水分。欧美国家蘑菇工厂化生产中普遍采用泥炭覆土，是获得高产的重要因素。我国许多蘑
菇产区缺乏泥炭资源，多采用田土或砻糠田泥混合土作为覆土材料，持水率仅33％～42％；并且喷
水后容易板结，不利于菌丝生长发育，是导致我国蘑菇低产的主要因素 (蔡为明 等，2002)。
本研究中以传统砻糠田泥覆土为对照，对不同泥炭比例覆土配方的空隙度、持水率和水分释放特
征等进行了分析，应用磷脂脂肪酸 (PLFA)法对不同覆土的蘑菇菌丝生物量进行比较分析，采用平
板稀释涂布培养法分析了不同蘑菇生育阶段、不同覆土中的细菌消长动态，并对蘑菇菇蕾形成量和产
量的影响进行探讨，以期为蘑菇覆土材料的优化提供依据。
1 材料与方法
1．1 材料
蘑菇菌株As2796引自福建省蘑菇菌种推广站；干泥炭购自吉林敦化泥炭开发公司；田土为浙江
省农业科学院水稻试验田表面 20 em以下的田泥，晒至半干，粉碎、过筛，泥粒直径小于 10 mm。按
体积比配制4种覆土配方，用石灰调节酸碱度。A (对照)：田土 85％，砻糠 15％，pH 7．4；B：田
土70％，泥炭 30％，pH 7．3；C：田土 50％，泥炭 50％，pH 7．3；D：泥炭 100％，pH 7．4。采用
NA培养基分离培养覆土中的细菌。
1．2 持水率测定
采用 Noble等 (1999a)和蔡为明等 (2002)的方法，将各覆土样品装入容积为192．5 mL的两端
开口其中一端包扎网纱的圆柱形浸样筒，浸在水中过夜，沥水1 h后，称样品湿样质量，置干燥箱
内，在65℃下干燥4 d至恒定质量，称样品干样质量。重复3次，计算平均持水率。
1．3 水分释放特性测定
取上述浸过的样品连同浸样筒置于水分释放测定装置上，按 Noble等 (1999a)和蔡为明等
(2002)的方法，沥水 1 h后测定不同高度水柱牵力下的水分释出量。每处理重复 3次。计算不同高
度水柱牵力下的水分平均释出量，绘制水分释放曲线。
1．4 空隙度 (AFP)测定
采用 Anon(1990)以及Waler和 Harison(1991)的方法，将样品装入测试筒，在水中充分浸
泡后取出沥水，测量样品中沥出水的体积。按下列公式计算空隙度 (AFP)值 (沥水体积法)：AFP
(1)，％：1OV／1O0。其中V为沥出水的体积。
第2种计算方法为由Waler和 Harrison(1991)提出的根据上述沥水后样品的湿样质量 (M)和
干样质量 (D)计算的经验公式 (干湿质量法)：AFP(2)，％ ：96．72一(100M一61．9D)／1000。
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8期 蔡为明等：覆土对双孢蘑菇菌丝产量的影响
1．5 电导率 (EC)和 pH测定
按干样品和蒸馏水质量比1：6配制样品悬浮液，放置1 h后，测定Ec值和pH值。
1．6 栽培试验
试验于2006年9月至2007年5月在浙江省农业科学院园艺研究所蘑菇试验基地进行。试验小区
随机设置在菇房不同层次床架上，每小区 1 m ，每处理设3个重复。覆土经常规消毒后，覆盖在长
满菌丝的料床上，覆土厚 3 cm。覆土后第 2天调水至覆土材料充分吸水而不渗流人培养料层。按常
规栽培法管理。观测蘑菇菌丝在不同覆土中的生长情况、菇蕾形成数量与蘑菇产量。
1．7 磷脂脂肪酸 (PLFA)分析
通过分析 PLFA组成和含量，定量比较不同覆土中的双孢蘑菇菌丝生物量。分别于首潮、第 2潮
和第3潮菇原基形成期取样。设3个重复，每个重复均在同一菇房中分别随机选择 6个取样点，挖取
直径 5 cm、深3 cm的土样。样品充分混合取50 g，立即冻干备用。
称取0．5 g冻干样品，采用修正的 Bligh和 Dyer(1959)方法进行脂类提取和磷脂脂肪酸分析
(Frosteghrd et a1．，1993a，1993b)。
1．8 覆土细菌消长动态分析
分别于覆土时、蘑菇菌丝生长至覆土层一半高度、原基形成期、采收期和菇潮间隔期 (采收后
2 d)5个时期取样，采用平板稀释涂布培养计数法检测覆土中的细菌数量变化情况。
2 结果与分析
2．1 不同覆土理化性状
从表 1可以看出，4种覆土配方的电导率随着配方中泥炭含量的增加而增大，原因是泥炭呈酸
性，随着覆土中泥炭比例的增加，用于调节 pH的石灰用量随之增加，从而使覆土电导率增大；
100％泥炭配方的空隙度 (AFP)，通过干湿质量法计算的 AFP(2)值高于沥水体积法计算的 AFP
(1)值，而其它3个含不同比例田土的覆土配方的 AFP值相反，AFP (1)值高于 AFP(2)值。3
个不同泥炭含量的配方中，2种不同测试计算方法所得的AFP值均随着泥炭含量的增加而增大；持水
率以100％泥炭配方最高，达75．1％，砻糠田土配方最低，仅33．2％，覆土配方的持水率随着泥炭比
例的增加而增高。
表 1 不同覆土的理化特性
Table 1 Physical and chemical properties of diferent casing soil
注：表中数值为3次重复平均值 -iSE。
Note：Each value is the mean-i-SE of three replicates．
2．2 不同覆土配方的水分释放特征
图 1所示，覆土的水分释出量随着泥炭比例的增加而增加，水分释放曲线的上扬幅度也随之
增大。15％砻糠田土覆土的水分释放曲线最为低平，当牵力增大到 一2．16 kPa以上时水分释出增
量少，水分释放曲线上升平缓，当牵力增大到 一8．64 kPa以上时水分释放曲线几乎呈一平直的直
线，在 一17．28 kPa牵力下，总水分释出量仅为 54 mL。100％泥炭覆土的水分释放曲线最为高扬，
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园 艺 学 报 35卷
当牵力增大到 一2．16 kPa以上时仍保持较大的水分释出增量，水分释放曲线上扬，在 一17．28 kPa
牵力下，总水分释出量达92．8 mL。30％和 50％泥炭覆土的水分释放介于上述二者之间，曲线上
扬幅度和水分释出量随着泥炭含量的增加而增大，在 一17．28 kPa牵力下，总水分释出量分别为
61．1和 69．2 mL。
岩
衄】 2
婪 8
耄妻
O ．2．16 ．4．32 ．6．48 ．8．64 ．10．80 ．12．96 ．1 5 12 ．17 28
水牵力／kPa Water tension
图1 不同覆土水分释放曲线
Fig．1 Water release curves for diferent casing soil
2．3 不同覆土处理磷脂脂肪酸 (PLFA)分析
从图2所示的4种覆土处理间菌丝 PLFA量比较来看，覆土中的蘑菇菌丝生物量随着泥炭含量增
大而增大。以100％泥炭覆土中的菌丝生物量最大，首潮菇原基形成期、第 2潮菇基形成期和第3潮
菇原基形成期 3个时期覆土的菌丝 PLFA量分别为531．9、1157．2和 1149．2 nmo]·g～，均显著高于
15％砻糠田土覆土和30％泥炭覆土 (P<0．05)，但与50％泥炭覆土问无显著差异；15％砻糠田土覆
土中的菌丝生物量最小，3个时期覆土的菌丝 PLFA量分别为270．3、807和713．1 nmo]·g～，均显
著低于其它覆土配方 (P<0．05)。
从图2所示的3个不同时期间菌丝 PLFA量比较看，4种覆土中的菌丝生物量均于第 2潮菇原基
形成期达最大，均显著大于首潮菇原基形成期 (P<0．05)，15％砻糠田土覆土第3潮菇原基形成期
的蘑菇菌丝 PLFA量 (713．1 nmo]·g )显著低于第 2潮菇原基形成期的菌丝 PLFA量 (807
nmo]·g～，P<0．05)，而其它 3种覆土第2潮和第 3潮菇原基形成期的蘑菇菌丝土量无显著差异。
2．4 不同覆土可培养细菌生长量
如图3所示，覆土至首潮菇形成期，4种覆土中的可培养细菌数量都随着蘑菇菌丝在覆土层中生
长而增加，以 100％泥炭覆土增幅最大，覆土时的初始细菌数量为 1．5×10 cfu·g～，随着蘑菇菌丝
在覆土中生长至首潮菇原基形成期，覆土中的细菌数量达2．2×10 cfu·g～；首潮菇采收期，4种覆
土中的细菌量均显著下降 (P<0．05)，菇潮间隔期细菌量又显著回升 (P<0．05)。
15％砻糠田土和 30％、50％、100％泥炭 4种不同覆土间的初始细菌量无显著差异，分别为
1．1×10 、1．2×10 、1．1×10 和1．5×10 cfu·g～；各个蘑菇生育阶段覆土中的细菌量都随着泥炭
含量增大而增大。100％泥炭覆土中细菌量最大，在首潮菇原基形成期、首潮菇采收期和菇潮间隔期
∞ ∞ ∞ 如 ∞ 如 加 0
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8期 蔡为明等 ： 覆土 对 双 孢 蘑菇菌丝产量 的影 响
3 个时期 的细菌量分别为 2． 2 × 10。 、 1 ． 1 × 10’和 2． 3 × 10
。
cfu ? g
一
， 均显 著高于 其它覆土 配 方 (P <
0 ． 05 )； 15 ％ 砻糠 田 土 覆土 在蘑菇各个生育时期的细菌量 均低于其它覆土 配 方 ， 其 中 ， 首潮菇原基 形
成期和菇潮 间隔期覆土 中的细菌量分别为 8． 1 × 10
。和 6． 2 × 10。 cfu ? g
～
， 均 显 著低 于 其它覆 土 配 方
(P < 0． 05 )。
15％ 砻糠 + 850 0 田土 30％ 泥炭 + 700b田土 50％ 泥炭+ 50％ m土 100％ 泥炭
15。 o rice husk+ 30％ peat+ 70
~
o soil 50％ peat+ 50％ soil 100
~
~ 。 peat
图 2 不 同覆土 中生长 的菌丝 生物 量
F ig． 2 M ushroom m ycelium biom ass in diferentcasing soil
┏━
━
┳ ┳
┳
┓┃
口 菌丝 半上土时 M yoeialhalf- p~ let
┃
纛
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┃
O C
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0
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“ 囊
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0
壬 王
缓， 厂0i 0垂耋内 00 秦． 广i薹一 闺 ， 广 0； j室。 i 。塞 ┃√ 甏i蚕
┃
┗━┻
┻
┻
┛150 0 砻糠 + 85。 o 田土 30~ a泥 炭+ 70qb田土 50％ 泥炭 + 50％ 田土15。 o rice husk+ 30％ peat+ 7000 soil 50％ peal+ 50％ soil 100％ 泥炭100％ peat图 3 不 同蘑菇生 育 阶段 不 同覆土 中细 菌生长量F ig． 3 N um bers ofcultu rable bacteria in diferentcasing so ilatdiferentcropping stages
2． 5 不 同覆土蘑菇 出菇量 与产量
首潮菇蕾形成量 随着覆土 中泥 炭含量增 大而增多 (表 2)。 100％ 、 50％ 和 30％ 泥炭覆土 的首潮菇
蕾形成量均显 著高于 15 ％ 砻糠 田土 覆土 ， 以 100％ 泥 炭覆土 最高 ， 平均菇蕾数达 286． 1 个 ? m
。 。
， 菇
蕾形成量 比砻糠 田土 覆土 多 4 8． 8％ ； 100％ 和 50％ 泥炭覆土 的菇蕾形成量均显 著高于 30％ 泥 炭覆土
(P < 0． 05 )， 而 100％ 和 50％ 泥炭覆土 之 间无显 著性 差异 。
蘑菇产量也 随着覆土 中泥炭 含量增大而 增高 (表 2)。 100％ 、 50％ 和 30％ 泥炭覆土 的产量均显 著
高于 砻糠 田 土 覆 土 ， 以 100％ 泥 炭 覆 土 最 高 ， 平 均 产 量 达 1 1 ． 3 kg ? m
～
， 比砻 糠 田 土 覆 土 增 产
4 3 ． O ％ ， 其次是 50％ 泥 炭覆土 ， 比砻糠 田 土 覆土 增产 38． 0％ ； 100％ 和 50％ 泥炭覆土 的产量均显 著高
于 30％ 泥炭覆土 (P < 0． 05 )， 而 100％ 和 50％ 泥炭覆土 之 问无显 著差异 。
O O O 0 O 0 0 O∞ 加 ∞ ∞ ∞ ∞ 如
导 叵rI厶一盛 量 ‘
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K M M M K ●
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1172 园 艺 学 报 35卷
注：表中数值为 3次重复平均值 4-SE。
Note：Each value is the mean 4-SE of three replicates
3 讨论
蘑菇覆土的空隙度是影响蘑菇生长的重要理化因素之一，有研究认为覆土空隙度与蘑菇产量正相
关 (Rainey et a1．，1986)。本试验结果表明，随着覆土中泥炭含量的增多、空隙度的增高，蘑菇菌丝
量和蘑菇产量均增加；然而尽管传统的砻糠田土覆土的空隙度高于3个泥炭／田土混合覆土配方，但
蘑菇菌丝量和蘑菇产量均显著低于3个泥炭／田泥混合覆土配方，可见，不同覆土原料间的空隙度与
蘑菇产量不存在相关性。Noble和 Gaze(1995)对不同泥炭覆土的空隙度与产量问关系研究表明，由
于不同泥炭的团粒结构与空隙度均处于适宜于蘑菇生长发育的范围，空隙度并非影响蘑菇生长发育的
决定性因素，二者也不存在相关性。
Hayes(1981)的试验表明覆土的电导率在 350～900 IxS·cm 之间不影响蘑菇产量；当添加可
溶性盐使电导率增大到 1 500 IxS·cm 时会导致蘑菇减产 (Awad&Nair，1989)。而本试验中 100％
泥炭覆土的电导率达 1 532 IxS·elTl～，未见影响蘑菇生长和产量。
磷脂脂肪酸 (PLFA)分析方法是基于生物化学手段的一种微生态学研究新技术 (陈振翔 等，
2005)，能很好地测定有繁殖能力的微生物生物量 (王曙光和侯彦林，2004)。本试验中首次应用该
技术，通过分析覆土中的真菌指示性不饱和PLFA，进行定量比较分析覆土层蘑菇菌丝生物量。结果
表明，覆土层中的蘑菇菌丝生物量与子实体发生量紧密正相关，而子实体发生量与蘑菇产量密切相
关 。
覆土中的细菌对双孢蘑菇产量、质量和出菇整齐度具有重要作用，Eger(1961)发现，双孢蘑菇
在覆土层无菌的情况下不能形成子实体，此后研究表明覆土中的臭假单孢杆菌 Pseudomonas putida与
双孢蘑菇子实体的形成密切相关 (Hayes et a1．，1969；Rainey&Cole，1987；Fermor et a1．，2000)。
Wood(1976)认为可能是假单孢杆菌 Pseudomonas消除了蘑菇菌丝产生的 “自我抑制结实”物质而
引发蘑菇子实体形成。本试验中对覆土中的可培养细菌量分析和 PLFA分析表明，可培养细菌量随着
蘑菇菌丝在覆土层中生长而显著增加；出菇后，蘑菇菌丝转人生殖生长，至蘑菇采收期，覆土中的细
菌量显著下降；采收后的菇潮间隔期，随着蘑菇菌丝恢复生长，细菌量随之显著增加；不同覆土问的
细菌量与蘑菇菌丝生物量正相关。这些现象表明覆土中的细菌与蘑菇菌丝存在营养共生关系。
提高覆土的持水率、增加覆土的含水量是提高蘑菇产量的有效措施 (Kalberer，1991)。我国当前
应用的覆土材料持水率低、供水不足，是影响蘑菇产量的一个关键因素，水分释放特征是优质覆土的
重要指标 (蔡为明 等，2002)。本试验表明，蘑菇产量与覆土持水率正相关，随着覆土持水率的提
高，产量也随之增加，因此，提高我国蘑菇覆土材料的持水率是提高当前蘑菇产量有效可行的技术措
施。100％泥炭覆土与50％泥炭／田土混合覆土的产量无显著性差异，综合考虑覆土成本因素，生产
应用以50％泥炭覆土为佳。
综上所述，覆土的蘑菇菌丝生物量、持水率和含水量，是蘑菇覆土基质优化的重要技术指标。
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8期 蔡为明等：覆土对双孢蘑菇菌丝产量的影响 l173
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ll74 园 艺 学 报 35卷
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番茄雌核发育诱导及胚珠植株再生研究初报
王孝宣 ，杜永臣，朱德蔚，高建昌，国艳梅，李 菲，戴善书
(中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081)
In vitro Gynogenesis Induction and Ovule Plant Regeneration in Tomato
WANG Xiao—xuan ， DU Yong—chen，ZHU De—wei，GAO Jian—chang，GUO Yan—mei，LI Fei， and DAI
Shan—shu
(Institute of Vegetables and Flowers，Chinese Academy ofAgricultural Sciences，Be ng 100081，China)
关键词：番茄；雌核发育；子房；胚珠；大孢子；单倍体
中图分类号：S 641．2 文献标识码：A 文章编号：0513—353X (2008)08—1174-01
番茄单倍体培养技术的建立对于番茄育种、分子标记、遗传图谱构建、基因定位、基因克隆等均有极其重要的意
义。目前诱导番茄雄核发育——花药和小孢子培养是获得单倍体的主流技术，但未获得理想的结果。作者探索另一条
获得番茄单倍体的途径——诱导雌核发育，目前已从离体胚珠获得大量愈伤组织，并获得一再生植株 ，其来源有待鉴
定，现将方法报道如下。
试材为中国农业科学院蔬菜花卉研究所育成的两个番茄杂交品种 ‘中杂 101’和 ‘中杂 105’，常规种植和管理。
定植后选取单核期的花蕾 ，剥离出子房 ，用 10％次氯酸钠灭菌 l6～20 min，再用去离子无菌水冲洗3—4次。无菌条
件下在诱导培养基上接种 4种外植体：(1)完整子房；(2)半子房 (将子房外部果皮切除使胚珠外露)；(3)胚珠块
(将半子房切成长与宽均1～3 mm的胚珠块)；(4)离体胚珠。在每个离心管中接种2～3个子房、半子房或胚珠块，
接种 100～2013个胚珠，每种外植体接种 l0个离心管。诱导培养基以 B5和 Ms为基本培养基，附加不同浓度 (1～100
t~mol·L )的生长素 (IAA、NAA、2，4-D、IBA)和细胞分裂素 (KT、6-BA、TDZ、ZT)，共组成 20种培养基，
蔗糖2％，琼脂糖 0．8％ ，pH 5．8～6．0。在 28 c、70％相对湿度下进行暗培养。分化培养基以 B5、MS、DBMⅡ、
Nitsch和 N6为基本培养基，附加不同浓度 (0．1～1 000 txmol·L )的生长素 (IAA、NAA、2，4-D)和细胞分裂素
(KT、6一BA、TDZ、ZT)，蔗糖2％，琼脂糖0．8％，pH 5．8～6．0。
两个品种的子房、半子房和胚珠块均未获得愈伤组织，离体胚珠在培养 7～12 h后开始膨大，颜色逐渐变白，呈
不透明状。1周后体积增加 1倍 ，60％以上的胚珠成长为不透明的白球状。l0～15 d开始形成愈伤组织，20 d后愈伤
组织可达 2～3 mm，每个离心管中均可生长出50～100个愈伤组织。两个品种均获得了上千个愈伤组织。
当愈伤组织达到2 mm大小时转移至分化培养基上，16 h光照 (90 t~mol·m一 ·s )，8 h黑暗，温度28℃，
70％相对湿度，每20～40 d更换 1次培养基，1周后开始膨大，随后表面稍变褐，3周左右开始变绿，2～3个月后完
全变绿，随后继续生长。‘中杂 l0l’番茄未能诱导出芽。‘中杂 105’番茄在 B5+IAA 0．0l mg·L +zT 2．0 mg·
L 培养基中培养，更换 l0～l2次培养基，生长 l5个月后，一个愈伤组织开始出现绿色的芽点，再过 2～3周后形成
2 cm高的植株。当芽生长至2～3片叶时，将其转移至 MS+0．2 mg·L IAA+2％蔗糖 +0．8％琼脂 ，pH 5．8的生根
培养基中培养，1周后根即长成。根尖染色体鉴定结果其染色体数为 24条。该植株是来源于体细胞还是来 自胚囊中
的单倍体细胞，正在鉴定中。
收稿日期：2008—05—30；修回日期：2008—07一l7
基金项目：国家 ‘863’计划资助项 目 (2007AA10ZI78)；农业部蔬菜遗传与生理重点开放实验室资助项目
}E-mail：wxxlhy@ yaho．COB．cn
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