免费文献传递   相关文献

Studies On Rapid in Vitro Propagation of Phaeomeria magnisqca

火炬姜离体快繁技术研究



全 文 :园 艺 学 报 2003,30(2):183~186
Aeta Hortieulturae Siniea
— — — —
火炬姜离体快繁技术研究
潘学峰 王昌茂
(海南大学农学院,海口 570228)
摘 要 :试验表明:火炬姜组培快繁以 Ms+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1 mg/L+CW 10%作为增殖培养基
可以获得理想的效果 ,增殖倍数可达 4.3倍 ;以双芽为外植体在该培养基上经 30 d培养可增殖 5.4倍 ;在
不含任何激素的 1/2 Ms+0.15%活性炭培养基上即可形成较发达的根系,生根率达 100%;试管苗移栽对基
质要求不严,移栽到疏松透气、富含有机质的表土中,成活率高达 100%,而且植株生长良好。
关键词:火炬姜 ;丛生芽;组培快繁
中图分类号 :S 68 文献标识码 :A 文章编号 :0513.353X(20o3)02-0183-04
火炬姜 [Phaeomeria rnagmfica(Roscoe)K.Shum]别名菲律宾蜡花,为姜科火炬姜属,分布于印
度尼西亚、马来西亚、印度一带⋯,性喜高温多湿,要求阳光充足,亦耐半荫,生长适温25~30~(2,
低于 15℃则生长停滞;冬季茎、叶干枯,可予剪除并节制浇水,第 2年还可发芽;栽培要求排水 良
好,富含腐殖质的土壤。火炬姜在原产地株高可达 10 m,一般栽培仅达 3~5 m,不需搭架支撑。春
夏自地下茎抽出花茎,花茎高 1~2 m,穗状花序花近圆锥形,蜡质,花径 10~15 em,鲜红色或褐红
色,为切花的上等材料,亦适于庭院栽培。在生产上 ,火炬姜主要是通过地下茎进行繁殖 ,繁殖系数
低,速度慢。国内有人对姜科植物的组织培养进行了研究【2 ],但尚未见有关火炬姜方面的报道。本
研究的目的在于通过组织培养途径,为生产提供大量整齐一致的火炬姜种苗,促进其开发和利用。
1 材料与方法
供试材料为海南大学农学院组培实验室提供的火炬姜无菌苗。以 MS为基本培养基,蔗糖 3%,
pH 5.8,在不同培养阶段加入不同种类和配比的植物激素及某些添加成份,0.08%卡拉胶固化,按常
规方法L6J配制分装,经 121℃ (1.1 kg/cmz)灭菌 20 min后备用。培养室温度 (25 4-2)℃,光照强度
1 200~1 500 lx,每天 10 h光照,采用表土、河沙及其混合土 (1:1)作为移栽基质,日晒消毒后分别
装盆。表土属轻壤土,粒状结构,容重 1.25 s/cm3,有机质含量 1.6%,pH 5.2。数据分析采用单项
分组资料的方差分析法【7]。经 F测验显著性后,用新复极差法 (SSR测验)进行平均数的多重比较。
2 结果与分析
2.1 不同激素配比对丛生芽诱导的影响
以 MS为基本培养基,共 15个处理组合 (表 1),每个处理接种 15~25个生长点或茎节,3次重
复,35 d后调查。结果表明,单独使用细胞分裂素6-BA诱导火炬姜丛生芽的效果不是很理想,当
6-BA为 1.0 mg/L(单位下同)时丛生芽诱导率为 0,只抽单芽;虽然 6-BA为 2.0时丛生芽的诱导率
达 100%,但芽短且难伸长;6-BA浓度再增高,其诱导率却逐步下降,直到浓度为 5.0时诱导率为 0。
只有当生长素和细胞分裂素同时存在时才能很好地诱导丛生芽。其中 6-BA 2.0+NAA 0.1和 6.BA 3.0
+NAA 0.1的处理效果最佳,不但诱导率达到 100%,而且丛生芽生长正常。虽然 6一BA 2.0和6一BA
4.0+NAA 0.1两个处理的诱导率也达到 100%,但单独使用 6-BA诱导的丛生芽短且抽出较慢;而
6.BA 4.0+NAA 0.1处理诱导的丛生芽细且颜色偏 白。由此可见,诱导丛生芽较好的配方是:MS+
收稿日期 :2002—06—05;修回日期:2002—08—06
维普资讯 http://www.cqvip.com
园 艺 学 报 30卷
6.BA 2.0—3.0+N从 0.1。
表 1 不同激素配比对丛生芽诱导的影响
Table 1 Efects ofhortma~ conllmdtion on adveatition s buds induction
2.2 丛生芽的继代培养
2.2.1 细胞分裂素种类的影响 根据上述结果选
用最佳配比,即 NAA为 0.1,细胞分裂素浓度均
为 2.0来进行比较。每种处理接种 15瓶 ,每瓶 3
个芽,3次重复,置于相同条件下培养。6 d后芽
基部开始膨大 ,2周后可见丛生芽长出。30 d后
调查 (表 2),6-BA的增殖效果最好 ,芽的增殖倍
数为 3.5倍,其次是 zI’,增殖倍数为 3.1倍,KT
的增殖倍数最低。继代周期为 25—30 d。试验数
据经过方差分析,结果表明 6-BA与 ZT的差异不
显著,但 6.BA与 zI’和 KT的差异达显著水平,
因此6-BA和zI’都可促进火炬姜丛生芽的继代增
殖,但以6.BA价格较为经济。
2.2.2 不同6-BA浓度对继代繁殖的影响 以 MS
为基本培养基,NAA为 0.1,6.BA设 5个浓度单
芽接,每个处理接种 15 25瓶,3次重复,30 d
后调查结果。在一定范围内,6-BA浓度增加,芽
表2 不同种类的细胞分裂素对继代繁殖的影响
Table2 Ef ects of dife.nmt~ytok~ht on subcumsre proiReration
注:不同小写字母为差异显著;不同大写字母为差异极显著
(下同)。Note:Diferent smal leter indioRe signitleant diference,dif-
ferent capitalleterindicate very signifcant difenmce(The nle below).
表 3 不同 6.BA浓度对继代繁殖的影响
Table3 Efects of dl~erm t conomtrations of 6-BA
on subculture proiReratton
的增殖率也提高,当6-BA为 1.0时,基本抽单芽,随着 6-BA浓度达到 4.0时,芽的增殖系数也上升
到 4.0,但当 6-BA浓度达到 5.0时芽的增殖倍数反而下降为 2.4。经过方差分析,6.BA浓度在 2.0
4.0之间的差异不显著,而2.0—4.0与 1.0和5.0的差异达显著水平。5.0与 1.0的差异也达到显著水
平。另外 6-BA为 4.0时,芽纤细,继代久后畸形芽增多。由此可见,为了减少变异 ,丛生芽增殖的
较优配方是:MS+6-BA 2.0—3.0+NAA 0.1,增殖倍数为 3.5—3.8,继代周期为 25 30 d,经过多次
继代后 6-BA可在植物体内积累,因此,继代 4次后 6.BA浓度应降至 2.0。
维普资讯 http://www.cqvip.com
2期 潘学峰等:火炬姜离体快繁技术研究
2.2.3 添加椰子水 (CW)和水解酪蛋 白 (CH)
的影响 以MS为基本培养基,6.BA浓度为 2.0,
NAA浓度为 0.1,分别添加 CW 和 CH,单芽接 ,
30 d后调查,结果见表4。培养基中添加 10% CW
的效果最好,增殖倍数可达 4.3倍 ,而且芽较健
壮 (见插页 2图版,1);添加 CH,芽的生长虽然
健壮,但在培养过程中细菌污染率较高,且对丛
生芽的形成并无明显促进作用。
2.2.4 接种芽数的影响 以 MS+6.BA 2.0+NAA
0.1+CW 10%为培养基 ,设单 、双、3芽 3个处
理,每种处理接 15—25瓶,3次重复,30 d后调
查,结果见表 5。接种双芽时,芽的增殖倍数最
高 ,为 5.4;其次是单芽,平均为 4.3;3芽的效
果最不理想。芽的抽生是向四周不定向发展的,3
个芽连在一起 ,缩小了芽向四周抽出的空间。双
芽这种影响较小 ,并且双芽在切割时组织不容易
受伤。单芽在切割时容易把基部的芽点切掉 ,不
利于芽的抽出。所以双芽的增殖率最高。
表 4 椰子水 (CW)和水解酪蛋白 (CH)对继代繁殖的影响
Table4 Efects ofadditives ofCooamlt眦 r(CW)and Casein
Hydrolysate(CH)On subcultlreproliferation
添加物 增殖倍数 芽 Buds Addi
tives Proliferation times 。
cWC
oco n
0
ut

water
4.3
CH 3
. 6 800 mg/L
无 None 3.5
健壮 ,生长旺盛
Robust,and grew luxuriantly
较壮,但易造成细菌污染
Relatively ldmSt,but the materials
culturedwereliableto C/ulse hacteri.
uln contamination
正常 Budded normaly
*懈 +6-BA 2,0mg/L+NAA0.1 mg/L。
表 5 接种芽数对继代繁殖的影响
Table 5 Efects ofthe number ofInoculated
buds On sulmalture prol~eration
接种芽数 h,cIlaied H哪b目 增殖倍数 Pl~lifexationtimes
双芽 Double buds
单芽 Single bud
3芽 Three buds
5.4且A
4.3 bB
3.1 cB
*MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.1 mg/L+CW 10% 。
2.3 生根诱导及完整植株的形成
当丛生芽长到3—5 cm高时,将其切出转接到生根培养基上 ,经过 30 d的培养即可形成完整植株
(见插页2图版,2)。在所试的生根培养基上,火炬姜试管苗均形成完整根系 (表 6),生根率均达
100%,说明火炬姜试管苗容易生根。根的数量和长度随着 NAA浓度的提高而增加。在不含 NAA或较
低浓度 NAA(0.5)条件下,植株生长健壮 ,叶色浓绿。因此,较好的生根培养基是 1/2MS+0.15%
活性炭。
表 6 不同浓度 NAA对试管苗生根的影响
Table 6 Efects ofdlfermatNAA emmmtration On舶啦 ofthetuleplalts
me/L)
调查
plants
生根
Rootin

g rate(%)
根敬
Root
根长Root length( )根 ‰ 植株 叶色 ( esti 硝 %) nufn (cⅡI)⋯ 一 ⋯ ⋯ ⋯ ~
注:基本培养基为 1/2MS+0.15%活性炭,接种 40 d后调查。
Note:Themedium is1/2MS+0.15% AC, calculated 40 days after culture
2.4 试管苗移栽成活率和移栽后的生长情况
选用 3种移栽基质 (表 7),当生根的试管苗
长至 5~6 cm高、2~4片叶、5~6条根时即可出
瓶移栽。移栽前先炼苗 2—3 d。在保证基质湿润
不积水的情况下,试管苗移栽 20 d后即生出新根
成活。所试的3种基质成活率都很高,其中以表
土为佳,成活率可达 100%,而且植株建壮,茎
粗叶绿,长势 良好 (见插页 2图版,3),这可能
表 7 不同基质移栽试管苗成活情况
Table 7 The mlrvlv~rat嚣On dlfeleat仃硼嘲蛳 matrix
维普资讯 http://www.cqvip.com
l86 园 艺 学 报 30卷
是表土养分多、蓄水能力强之缘故。移栽表土 42 d后,苗平均叶片长度达 5.9(3m,平均叶宽 2.1(3m,
平均株高 9.9(3m,平均高度增加 65%。
3 结语
用6一BA 2.0~3.0+NAA 0.1的配比诱导火炬姜丛生芽的效果较佳,丛生芽的诱导率可达 100%。
丛生芽在 6一BA 2.0+NAA 0.1的组合中,继代增殖效果较好,增殖倍数可达 3.5倍 ;如果条件允许还
可以在培养基中加入椰子水,增殖倍数可达 4.3倍 ;在继代增殖过程中,以双芽为外植体在较好的继
代增殖培养基上的增殖率最高,增殖倍数可达 5.4倍;火炬姜试管苗的生根比较容易,在 1/2MS+
0.15%活性炭培养基上都能很好地诱导生根,且生根率达 100%;火炬姜试管苗移栽基质适应性广,
以疏松透气、有机质含量高的表土为佳,在管理良好的情况下,移栽成活率可达 100%,并且植株叶
色浓绿,生长健壮 ,长势良好。
参考文献:
l 薛聪贤.景观植物实用图鉴 (第 5辑).郑州:河南科学技术出版社,1999.52
2 潘学峰,李绍良,符 明.生姜茎尖离体培养研究 .海南大学学报 (自然科学版),1999,(1):59~63
3 何奕昆,奚 惕,朱有光.生姜组培简报 .植物生理学通讯,1989,(1):47
4 梅贝坚,艾 华.花叶良姜的组织培养.植物生理学通讯,1990,(2):44~45
5 胡玉娘 .红姜花的组织培养和植株再生.植物生理学通讯,1989。(1):43—44
6 李浚明.植物组织培养教程.北京 :北京农业大学出版社,1992.柏 一43
7 南京农业大学主编.田间试验和统计方法.北京:农业出版社,1987.1Ol—l1O
Studies 01 Rapid in Vitro Propagation of Phaeomeria magnisqca
Pan Xuefeng and Wang Cha
(Agr/cu/tura/College,Hainan ,ltaikou 570228,Ch/na)
Abstract:The research result of the in vitro propagation of the Phaeomeria magnif~ is presented in this pa—
per.The results showed that: Using MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+CW 10% ills proliferation median3.
an optimal proliferation rate Wills obtained,the proliferation rate could reach 4.3 times: Using double shoots ills ex—
plants,after 30 clays of culture in this median3, it could amplify 5.4 times. The root formation of Phaeomeria
m8j tissue culture shoots had a low demand for exotic hormones,even in a medium of no hormones it could
still form a gooa root system, the rooting rate could reach 100% .The transplantation of Phaeomer/a m l c0 tis—
SUe culture shoots Wills simple and feasible.There Wills no strict demand for matrix,when the planflets were trans—
planted to superficial soil,the survival rate could reach 100% .and the plants grew wel1.
Key words:Phaeomer/a mag,~ a;Adventitious shoot;Rapid propagation via tisue culture
《英汉园艺学词典》 章文才主编
该词典共收集专业词汇约两万条,按照全 、新、准、精的收词原则,收录了园艺科学的基本
词汇和与园艺科学有密切联系的基础科学和边缘科学词汇,其中从现代外文书刊中摘录的拼合新
词约 100多条。为了便于检索,本词典将主要的果树、蔬菜、花卉种名,按植物属分类汇编。可供
我国园艺界的教学、科研、生产方面的专业人员和广大园艺工作者参考使用。定价:23元 (含邮费)
购书者请通过邮局汇款至北京中关村南大街 12号中国农科院蔬菜花卉所 《园艺学报>编辑
部 。邮编 100081。
维普资讯 http://www.cqvip.com