全 文 ：园 艺 学 报 2003，30(3)：358—360
Aeta Hortieulturae Siniea
唐菖蒲组培脱毒技术研究
李昌禹 郭太君 焦培娟 张雅凤 杜令阁
(中国农业科学院特产研究所 ，吉林 132109)
摘 要：在 MS培养基上 ，附加 5 mg／L病毒唑培养唐菖蒲，再经 38 4o℃热处理，切取微茎尖两次，
去除了危害唐菖蒲的 3种主要病毒 TMV、CMV和 TvY。以 MS+BA 0．5 mg／e+NAA 0．5 mg／L+KT l me／e为
继代培养基，I／2MS无激素培养基为成球培养基，进行快繁获得了脱毒种球，移植后，植株生长发育状况
得到明显改善。
关键词：唐菖蒲 ；脱毒
中图分类号：S 68 文献标识码 ：A 文章编号：0513．353X (2003)03．0358．03
1 目的、材料与方法
唐菖蒲病毒病会导致植株茎叶萎缩、根部腐烂 、花朵变形、杂色，严重时全株死亡，是造成品种
退化的重要因素。我们于 1996—2000年进行了唐菖蒲组培脱毒技术研究。唐菖蒲外植体为中国农业
科学院特产研究所培育的 ‘橙红娇’与 ‘紫英华’品种【l|2J的小籽球。以 MS为基本培养基，附加不
同浓度的 BA、KT和 NAA，筛选分生、继代及成球培养体系。在继代培养基中加入 5—20 mg／L的病
毒唑L3J继代培养两次 (每代 3O d)，随后置于光照培养箱内进行热处理脱毒培养【3】(白天 38 4o℃ 12
h，夜间35oC12 h，培养 4周，培养基为MS+BA 2 mg／L+NAA 0．02 mg／L)。采用蔡文启等HJ方法进行
病毒检测。芽的接种数量均为 6个／丛。芽分化率指初次接种籽球形成芽的百分数，芽增殖系数指单
个芽在一个月内形成不定芽的倍数，成球率指在成球培养基中组培苗形成籽球的百分数。
2 结果与分析
2．1 继代培养体系的建立
以MS(糖 2％)为固体基本培养基，附加不
同浓度的 BA、KT和 NAA (表 1)，均诱导形成了
不定芽。附加较高浓度 KT的处理芽增殖系数明
显提高，随着 BA浓度的降低和NAA浓度的升高，
芽的增殖系数提高幅度较大 (本文仅列出 ‘紫英
华’品种的数据)。
2．2 脱病毒培养体系的建立
表 l 不同的培养体系对唐蕾蒲组培苗芽繁殖系数的影响
Table 1 F~ect ofdiferent eulttmal system OI1 rate of
reproduction of buds of 删 璐 eullamal plant
2．2．1 病毒唑对唐菖蒲组培苗芽增殖的影响 脱毒培养以培养体系 1为基本培养体系 (因在其上生
长的唐菖蒲芽丛单个芽较大，分散，直径可达 2—3 rain，适于微茎尖的切取)，在附加不同浓度病毒
唑的 3种培养体系 (表 2)中培养 2代 ，结果表明，在病毒唑中培养的芽丛生长较培养体系 1缓慢，
芽增殖系数随病毒唑浓度从 5 mg／L到 10 mg／L的增加而呈降低趋势，以5 mg／L为宜，但 1O 20 mg／L
增殖系数相同。
2．2．2 热处理对唐菖蒲芽增殖的影响 组培苗在接种 2 d后 ，即进行热处理脱毒试验。在培养的第 1
周，不定芽生长较快，叶片大量发生 ，但没有芽的增殖。在随后的 3周内，由于长时间的高温处理，
收稿日期：2002—08—06；修回日期：2002—11—21．
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3期 李昌禹等：唐菖蒲组培脱毒技术研究 359
叶片逐渐失绿。第 2周，50％叶片中上部开始失绿，在第 3和第 4周，叶片完全干燥萎黄。第 4周时
培养基和不定芽的叶片及苞片均出现失水，但不定芽生长正常。
2．3 成球培养体系的建立
唐菖蒲组培苗的移植一般采用籽球。表 3是不同培养体系对唐菖蒲组培苗成球率的影响。结果显
示不加激素的 1／2MS培养体系成球率最高 (80％)，其次是 1／10MS培养体系 (50％)。
表2 病毒唑处理对唐蕾蒲组培苗芽繁殖系数的影响
Table 2 Eff缸 ofdiferent rilmvirin∞ rate of
pl附由 岫 ofbuds of adi0II璐 cultural ptant
表3 不同成球培养体系对唐蕾蒲成球率的影响
Table3 Efect ofdiferent cultural system offorming bulbs
蚰 rate of reproduction ofbuds ofg~diolus cultural plant
2．4 脱毒效果检测
2000年 6月 15 Et，由中国科学院微生物研究所采用间接酶联免疫吸附试验法 (Indirect ELISA)L4J
对 ‘紫英华’与 ‘橙红娇’的试管苗与组培球进行了病毒检测，结果为 98％以上呈阴性，即采用本
试验的方法基本去除了唐菖蒲 ，IMV (烟草花叶病毒)、CMV (黄瓜花叶病毒)和 TvY (马铃薯 Y病
毒)病毒。
2．5 脱毒植钻生产性能
2000年栽培直径 1 cm左右的脱毒原种球 ，两个品种与同规格未脱毒种球生长发育状况见表 4。
脱毒种球的生长发育明显优于对照种球，叶片无皱缩、扭曲、退绿等病毒病症状 ，花朵颜色趋于一
致 ，特别是 ‘紫英华 ’，白心基本消除。
表4 脱毒与未脱毒球生产性能比较
Table4 C‘朋 呻 凼 蚰 ofproductiml ability between bIllbs virus-free anti bulbs谢tlI virus
3 结论
唐菖蒲的诱导体系较易建立，以MS为基本培养体系，附加 BA、NAA和 KT后可直接诱导成芽，
进而形成芽丛。继代培养体系宜采用较低 BA含量 (0．5 mg／L)，相对较高的 KT (1 mg／L)和 NAA
(0．5 mg／L)含量，芽的增殖系数可高达 20，生长旺盛，适于大量快速繁殖。成球培养体系宜采用
1／2MS无激素培养，经 3 5个月可生成大量的籽球。每个培养瓶内接种 18 20个不定芽，产生的籽
球大小均匀，直径在 7舢 左右。本试验采用的 1／2MS体系与崔徵等L5]采用 1／10MS体系有差异，这
可能是由于不同的唐菖蒲品种的遗传性不同所致。
唐菖蒲脱毒处理以培养体系7为宜 ，白天 38 40℃光照培养 12 h，夜间于35℃暗培养 12 h。这种
培养方式保证了组培苗的大量存活，为微茎尖的切取提供了大量的材料。经间接酶联免疫吸附试验检
测，采用此法脱除了唐菖蒲的TMV、CMV和TvY等病毒。脱毒种球栽培后生长发育状况明显优于对照。
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360 园 艺 学 报 3O卷
参考文献：
l 郭太君，焦培娟，张雅风 ，等．唐菖蒲新品种 ‘橙红娇’．园艺学报，2001，28(2)：184
2 焦培娟，郭太君，张雅凤 ，等．唐菖蒲新品种 ‘紫英华’．园艺学报 ，2001，28 (2)：185
3 曹为玉，郑燕棠，张福庆 ，等．葡萄茎尖脱毒培养和快速繁殖．华北农学报 ，1993，8(2)：69～72
4 蔡文启，赵淑珍，奚仲兴，等．间接酶联免疫吸附试验快速检测无毒唐菖蒲试管苗．微生物学报 ，1985，25(4)：329～333
5 崔 徵，桂耀林 ．经济植物的组织培养与快速繁殖．北京：农业出版社 ，1985．260
Studies on Virus—free and Rapid Reproduction in Cultural Plant of Gladiolus
and Its Efect
Li Changyu，Guo Taijun，Jiao Peijuan，Zhang Yafeng，and Du Lingge
(Institute ofsm~i,a Economic Animal and Plant，Chinese Academy ofAgricultural Sciences，Jilin 132109，Ch／na)
Abstract：A study on tissue culture of gladiolus hybridus of‘Chenghongjiao’and‘Ziyinghua’was carried
out in MS medium with diferent phyto—hormone BA，KT and NAA．A MS medium supplemented with BA 0．5 mg／
L+NAA 0．5 mg／L+icy 1 mg／L was for the regenerated and 1／2MS medium without hormone Was for bulbs
forming． I1le three main viruses of TMV，CMV and’n in gladiolus were removed from cultural plant ofgladiolus
in the regenerated medium through 5—20 mg／L concentration of ribavirin，treatment of high temperature 38-40~C
and 2 times of meristem-tip culture．
Key words：G1adiolus；Virus—free；E t
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