全 文 ：园 艺 学 报 2003，30(3)：317—318
Aeta Horticulturae Siniea
中国樱桃半野生种对樱的茎尖培养
陈君帜 李 青 孙 钊2
( 北京林业大学园林学院，北京 100083； 全国农业技术推广中心，北京 100026)
摘 要：以中国樱桃半野生种对樱茎尖为外植体进行试管繁殖 ，最佳灭菌方法为二次灭菌 (70％乙醇
30 S一 0．1％新洁尔灭 15 min一 0．1％升汞 3 min)结合培养基添加抗生素羧苄西林二钠 50 Il I』o最佳培养
条件 ：(1)初代培养基为 F14-I6-BA 0．5 mg／L+IBA0．2 mg／L+GA30．5 mg／L；(2)继代培养基为 F14+6-BA
0．5 mg／L+IAA 1．0 mg／L+GA30．5 mg／L，碳源采用白砂糖 20 L+山梨糖醇5 g／L。同时研究表明，外植体
种类 、茎尖大小及抗氧化剂维生素 c均影响茎尖初代培养成活率。
关键词：樱桃；茎尖培养；繁殖
中图分类号：S 662．5 文献标识码：A 文章编号：0513．353X (2003)03．0317。02
1 目的、材料与方法
对樱 (尸h删岱pseudz~erasua)为北京地区一个半野生树种，其开花早，花色艳，果酸甜可 口，抗
逆性强，是樱花和樱桃栽培品种的优良砧木。近年来对樱受到病毒危害，果实变小 ，出现凹陷斑点，
树干流胶，叶片扭曲坏死。作者对其茎尖进行培养研究，以期获得脱毒效果。
取对樱 (北京市林业果树研究所提供)当年生芽和经水插已萌动的休眠芽作外植体，剥去外层鳞
片，流水冲洗 1～2 h，用 1％维生素 C浸泡 30 min，无菌条件下将茎段放人 70％乙醇中浸 30 s，0．1％
新洁尔灭消毒 15 min，0．1％升汞消毒 3 min，无菌水冲洗 4次。剥取茎尖接种到初代培养基上 (添加
抗生素羧苄西林二钠 50 mg／L)，待茎尖分化的丛生芽萌发展叶后，从基部切下转接人继代培养基。
基本培养基选用 F14uj，激素种类及浓度配比视不同阶段而定【 “]，琼脂 6 g／L，pH 5．2～5．3。培养
温度 (24±2)oC，每天连续光照 14 h，日光灯源，光强 1 400～2 000 lx。
2 结果与分析
2．1 外植体种类及茎尖大小对初代培养成活率的
影响
采用二因子完全随机化试验设计，研究外植
体种类及茎尖大小对初代培养成活率的影响。由
表 1可知，外植体种类对初代培养的成活率有一
定影响，用经水插萌动的休眠芽，初代培养成活
率均高于当年生芽。茎尖大小对初代培养成活率
的影响极为显著，0．5 mnl及 1．0 mnl茎尖培养成
活率均极显著高于0．3 mnl茎尖，0．5 mnl与 1．0
mnl茎尖之间差异不显著。初代培养以经水插萌
动的休眠芽为外植体，取 0．5 Inln茎尖接种为宜。
2．2 激素配比及碳源对初代培养和继代培养的影响
表 1 外植体种类及茎尖大小对初代培养成活率的影响
Table 1 Efect ofdifermt eXlfl~ ts and the length of
ahoot-ap OI1m rviving rate
采用 (34)正交试验设计，比较不同激素浓度配比对茎尖初代培养成活率的影响 (表2)，试
收稿日期：2O02—06—25；修回日期：2003—01—06
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3l8 园 艺 学 报 30卷
验结果表明处理 5(6．BA 0．5 mg／L+IBA 0．2 mg／L
+GA30．5 mg／L)为最佳组合。6．BA大于或小于
0．5 mg／L，IBA大于或小于 0．2 mg／L，GA3小于
0．5 mg／L，茎尖初代培养成活率均较低。
由表 3可知，继代培养激素配比以 6．BA 0．5
mg／L+L 1．0 mg／L+GA3 0．5 mg／L为宜 。
由表4可知，在继代培养中碳源采用白砂糖
20 g／L+山梨糖醇 5异／L为宜。
表2 激素浓度配比对初代培养成活率的影响
Table2 Efect of6-BA． IBA and GA3 Oll serviviag rate
表3 激素浓度配比对继代培养的影响
Table3 Efect ofdifer~t growth regulators on propagation
of Prunusp靴删如c| 嘲
处理 TreaUnents(mg／L)增殖系数 生长系数 增殖度
— — Multiple 0f shoot Averagelength of Multiplication
6-BA IBA IAA proliferation pm Igati∞ shoots degree
*增殖度 =增殖系数 ×生长系数；培养基含 GA3O．5,g／L。
* Multil：Ilication degree= Multiple 0f shoot proliferation× Average
length 0f pn ∞ shoots；GA3O．5 fng／L
表4 碳源对继代培养的影响
Table4 l~ ect 0f dlfer~t cmtmhydrates on propagation
竺里 !! g／¨ 增殖度*
白砂糖 Sugar 山梨糖醇 Sorbitol Multiplication degree
*增殖度=增殖系数 ×生长系数。
Mulfiplication degree=Multiple 0f shoot proliferation × Average
length 0f p,~ tion shoots．
参考文献：
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4 R Daniel~ rger．Shoot proliferation，root~ ，and transplant survival 0f tissue-ctdUutd ‘Haly Jolivete’cherry．Hortscience．1983。18
(2)：182—185
Studies on Shoot·tip Culture of Prunu$pseudocerasus
Chen Junzhi ，U Qing ，and Sun Zhao2
( 删 of ，蜘 An抛 ， Forestry ，
tens／on and Setv~e Centre，＆ IO~E6，Ch／na)
Abstract：Using the shoot—tips a8 the explant，the tube propagation of Prunus pseudocerasus wag studied．
The optimal asepsis and culture condition weie established by a statistical method．The explant was asep~cized as
folows：70％ ethanol 30 seconds 0．1％ benzalkonium bromide solution 15 minutes 0
． 1％ I-~C123 minutes．
besides 50 mg／L carbenicillin must be added to the media．The optimal culture condition as folows：(1)the
砥 uIl for primary propagation contained F14，6·BA 0．5 mg／L，IBA 0．2 mg／L，GA3 0．5 mr／L； (2)the
il~ uln for multiple propagation contained F14， 6·BA 0．5 mg／L， L 1．0 mg／L，GAs 0
．5 mg／L，2％ sugar
and 0．5％ sorbito1．The results also showed that diferent explants． the length of shoot·tip and the application of
anti·oxidant could afect the surviving rate．
Key words： Prunus pseudocerasus； Shoot·tip culture；Tube propagation
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