全 文 :第 18 卷 第 3 期
Vol. 18 No. 3
草 地 学 报
ACTA AGRESTIA SINICA
2010 年 5 月
May 2010
不同剂型联合固氮菌肥对青稞促生效应和固氮能力研究
张 堃1, 2 , 姚 拓1* , 张德罡1 , 辛国荣2 , 师尚礼1
( 1.甘肃农业大学草业学院, 甘肃 兰州 730070; 2.有害生物控制与生物资源利用国家
重点实验室, 中山大学生命科学学院, 广东 广州 510275)
摘要: 利用联合固氮菌( Associative nit rog en- f ix ing bacter ia)制作菌肥, 设 7 个处理: CK1(基质对照, 泥炭拌种 )、
CK2(半量15N 尿素)、1N (全量氮肥)、1/ 2NL (半量15N 尿素+ 液态菌肥)、NL(液态菌肥)、1/ 2NS(半量15N 尿素+ 固
态菌肥)、NS(固态菌肥) , 通过温室盆栽实验,利用15N 稳定性同位素稀释法,测定其对青稞( H ordeum vulgar e var.
nudum H ook. f. )生长及固氮能力的影响。结果表明, 本研究研制的联合固氮菌肥符合农用微生物菌剂质量标
准( GB 20287-2006) ,且固体菌肥的有效活菌数在检测的各个时期都高于液体菌肥。对于株高、地上生物量、地下
生物量、根冠比来说, 联合固氮菌肥与半量氮肥( 110 kg hm- 2 )配合施用,表现出与全量氮肥相近的促生效果, 即
可节约近一半的氮肥用量( 110 kg hm- 2 ) ; 固体菌肥和液体菌肥的固氮百分率和固氮量分别为 17. 44%、14. 03%
和22. 87 kg hm- 2、21. 29 kg hm- 2。并且,固体菌肥对青稞生长的促进作用优于液体菌肥。
关键词:青稞; 联合固氮菌肥;促生效应; 固氮百分率;固氮量
中图分类号: S365 文献标识码: A 文章编号: 1007-0435( 2010) 03-0426-05
Effect of Associative Nitrogen- fixing Biofertilizer Produced with Different Carriers on
Growth and Nitrogen Fixing Ability of Hordeumvulgare var. nudum Hook. f.
ZHANG Kun
1, 2
, YAO T uo
1*
, ZHANG De-gang
1
, XIN Guo-rong
2
( 1. Pratacu ltural Col lege, Gansu Agricul tural U nivers ity, Lanzhou, Gansu Province 730070, Ch ina; 2. State Key L aboratory
for Biocont rol , College of Life S cien ces , Su n Yat-sen University, Guangzh ou, Guangdong Pr ovin ce 510275, Ch ina)
Abstract: T he associat ive nit rog en- fix ing biofert ilizer as a new g reen fer tilizer has been paid mo re at tent ion
recent ly. T he ef fect of bio fert ilizer pr oduced w ith associat ive nit ro gen- fix ing bacteria and different carr iers
( LB liquid culture medium and peat ) on the gr ow th and nit ro gen f ixing ability o f H or deum v ulgare var.
nudum Hook. f. w as studied thr ough po t experiment in greenhouse. 15N iso tope dilut ion method w as em-
ployed w ith 7 tr eatments, including CK1 ( peat ) , CK2 ( half applicat ion rate o f 15N labeled urea) , 1N
( w hole applicat ion rate of urea) , 1/ 2NL ( half applicat ion rate o f
15
N labeled urea+ liquid biofert ilizer) ,
NL ( liquid biofer tilizer ) , 1/ 2NS ( half applicat ion rate of
15
N labeled urea+ peat biofert ilizer) , and NS
( peat bio fert ilizer) . The results indicate that the associat ive nit ro gen- fix ing biofert ilizer accor ded w ith the
quality criterion of ag ricultural micr obial fert ilizer of China ( GB 20287-2006) and the number o f ef fect ive
bacteria in peat biofert ilizer w as much higher than liquid biofert ilizer. T he ef fect o f the biofert ilizer added
w ith half applicat ion rate of chemical nitr ogen fert ilizer ( 110 kg hm- 2 ) on plant height, aboveg round bio-
mass, under ground biomass, and root / shoot rat io w as similar to the w hole applicat ion rate o f chem ical n-i
t ro gen fert ilizer ( 220 kg hm- 2 ) , suggest ing that the half chemical nit rog en fert ilizer could be saved. The
nit rog en fix ing percentage and amount of peat biofert ilizer and liquid biofert ilizer w ere 17. 44%, 14. 03%
and 22. 87 kg hm- 2 , 21. 29 kg hm - 2 , respectiv ely . T he peat biofer tilizer had bet ter grow th per forming
ef fect than liquid bio fert ilizer.
Key words: H or deum vulg ar e L. var. nudum Hook. f. ; Associat ive nit ro gen- fix ing bio fert ilizer; Grow th
promot ing ef fect ; Nit rogen f ixing percentag e; Nit rog en f ixing amount
自 1974年巴西学者 Dobereiner 首次报道从禾
本科植物根际分离得到联合固氮细菌, 并提出联合
固氮概念以来[ 1] ,植物根际联合固氮研究受到了极
大关注。前人研究表明在水稻 ( Ory z asat iv a L. )、
收稿日期: 2009-10-12;修回日期: 2009- 11-19
基金项目:国家自然基金( 30960265)、农业部燕麦产业体系和现代农业产业技术体系建设专项资金资助
作者简介:张堃( 1979- ) ,男,甘肃天水人,博士研究生,研究方向为土壤肥料与环境生态学, E- mail : gszhangkun@ 163. com; * 通讯作者
Auth or for correspon dence, E-mail: yaotuo@ gsau. edu. cn
致 谢:试验中得到徐长林副研究员、席琳乔硕士、姬承东硕士、潘多峰硕士等的协助,特至谢忱
第 3期 张堃等:不同剂型联合固氮菌肥对青稞促生效应和固氮能力研究
燕麦( A vena sat iva L. )、玉米( Zea may s L. )、高粱
( Sor ghum vulg ar e Pers. )等禾本科植物根际均发
现存在着联合固氮作用[2]。研究禾本科植物根际联合
固氮菌的生态特性、与宿主植物之间的相互关系及其促
生效应等成为国内外学者关注的热点问题之一[ 3] 。
青稞 ( H or deum vulgar e L. var. nud um
Hook. f. )即裸大麦, 是我国青藏高原及西北高寒
地区极为重要的粮食作物及优质饲草, 其种植面积
占西藏地区( 2003年)粮食作物播种面积的 60%, 产
量占西藏地区粮食总产量 56. 4% [ 4] 。青藏高原目
前主要以自然农业生态为主导, 是世界环境组织公
认的环境污染最轻的区域, 所产农牧业产品是无
公害的营养类绿色食品, 也是深加工的重要原料。
目前对于青稞根际联合固氮作用及其菌肥研究尚未
见报道。本研究利用从禾本科作物或牧草根际筛选
的优良促生菌株制作联合固氮菌肥, 通过温室盆栽
实验,利用15N 稳定同位素稀释法, 测定其对青稞的
促生作用,联合固氮菌肥的固氮百分率和固氮量,为
联合固氮菌肥的田间应用提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 菌株
试验用菌株是从高寒地区燕麦(甘肃天祝)和盐
碱地小麦(甘肃兰州)根际分离所得, 通过测定其固
氮酶活性,结合其培养性状、生理生化特点、分泌植
物激素及溶磷能力, 选择生长快、竞争力强、利用碳
源谱广的 5株联合固氮菌株开展研究 [ 5, 6] (表 1)。
表 1 联合固氮菌肥制作所用菌株的基本特征
Table 1 Associative nit rog en- f ix ing bacter ia str ains used fo r biofer tilizer producing
菌株号
St rain
宿主植物
Host plant
固氮酶活性
Nit rogenase act ivity
( C2H 4 nmol m- 1 h- 1 )
溶磷量
P solub ilization capacity
( mg L- 1 )
分泌生长素
IAA secret ing abilit y
( g mL- 1 )
N-4 ( Pseu domonas sp. ) 小麦 T . aest i vum 478. 48 / 4. 31
O-5 ( A z otobac ter sp. ) 燕麦 A . sat iv a 986. 30 83. 80 4. 76
W6 ( Zoogloea sp. ) 小麦 T . aest v um 651. 60 9. 82 5. 74
W5 ( Az otobac ter sp. ) 小麦 T . aest i vum 510. 20 / 13. 91
C6 ( Zoog loea sp. ) 小麦 T . aest i vum. 393. 48 / 6. 21
1. 3 菌肥制作
1. 3. 1 液体菌肥制作 分别接种各联合固氮菌株
于 LB ( luria-bertani ) 液体培养基中, 28 , 125
r min- 1。培养 48 h后, 利用紫外分光光度计测定
各菌株悬浮液 OD( opt ical density )值。当 OD 值大
于 0. 5(波长 660 nm ) 即发酵菌液中的细胞数目为
10
9 个 mL - 1时,用灭菌水将各发酵菌液调至相同
的光密度值( OD= 0. 7) , 并将菌株 N-4、O-5、W6、
W5和 C6悬浮液等体积混合, 然后在无菌操作下,
将发酵菌液注入灭菌后的玻璃瓶中常温密封保存。
1. 3. 2 固体菌肥制作 将泥炭干燥、粉碎, 过筛
( 0. 15 mm) ,调 pH 值至 6. 5~ 7. 0,将其在 121 下
连续灭菌 3 h 后分装成 500 g 小袋, 分别接种联合
固氮混合菌株悬浮液 150 mL,将菌液与泥炭充分混
匀, 28~ 30 培养 7~ 10 d之后常温保存即可。
1. 4 联合固氮菌肥质量检测
将上述制作的液体、固体联合固氮菌肥按不同
保存时期取样, 进行质量检测,联合固氮菌肥质量检
测采用稀释平板计数法和显微镜观察法, 测定菌肥
有效菌数和污染情况,具体方法见文献[ 7]。
1. 5 联合固氮菌肥对青稞生长的影响及固氮能力测定
1. 5. 1 供试品种 青稞为甘肃省天祝地区当地品
种,青稞种子发芽率为 95%。
1. 5. 2 试验设计 盆栽试验于 2007年 1月上旬至
2007年 5月上旬在甘肃农业大学草业学院人工温
室进行。光照采用自动控制,模拟户外光照条件,实
验期间室内温度变幅在 20~ 23 之间,相对湿度在
35%~ 50%。栽培盆直径 17 cm, 高 23 cm ,每盆装
土 2. 5 kg。供试土壤取自甘肃农业大学草业学院
兰州试验站,土壤全氮 1. 35 g kg- 1、全磷 0. 41 g
kg - 1、全钾18. 4 g kg - 1、有效氮 105 mg kg- 1、
有效磷 25 mg kg- 1、有效钾 158 mg kg- 1、有机
质 13. 7 g kg- 1、pH 值 7. 24。试验采用完全随机
设计,每处理 3个重复。设7个处理: CK1(基质对照,
泥炭拌种,用量为种子重量的10%)、CK2( 1 5N 尿素对
照,半量15N 尿素, 15N 丰度为 2. 24% )、1N (全量氮
肥对照)、1/ 2NL (半量15N 尿素+ 液态菌肥)、NL
(液态菌肥)、1/ 2N S(半量15N尿素+ 固态菌肥)、NS
(固态菌肥处理)。全量氮肥施用量为每盆 0. 5 (相
当于 220 kg hm - 2 ,参考当地农田氮肥施用量) ,为
普通尿素,半量氮肥用量为全量氮肥用量的一半。
1. 5. 3 菌肥施用及播种 将供试种子分别用液态
427
草 地 学 报 第 18卷
菌肥浸泡 6 h、种子用量 10%的固态菌肥拌种4~ 5 h、
基质对照用种子用量10%的泥炭拌种后,播种,保证每
盆至少出苗 15~ 20株,出苗后,每盆定苗为 15株。
1. 5. 4 测定项目及方法 收获前测自然高度(测每
盆青稞植株自然高度, 求其平均值) ;地上和地下生
物量(每盆分别收获地上茎叶部分和地下根系, 70
下烘 72小时至恒重) [ 8] 。15N 同位素稀释法测定联
合固氮菌肥的固氮百分率和固氮量 [ 9] , 用半微量凯
氏定氮仪( F ischer A nalysen Instrument, Leipzig )
测粗蛋白含量( N% ) , 测后向盛有已滴定至终点的
硼酸反应液的三角瓶内滴加 1滴 2%的硫酸使其中
溶液再次酸化, 后移至室温下自然蒸发浓缩, 待浓缩
液中15N浓度达机器检测范围内, 用同位素质谱仪
NOI 7 ( Emission spectr ometer, Fischer Analysen
Instr ument, Leipzig)测定植物样品中15N 原子百分
超( atom% 15N excess)。利用下式计算: 固氮百分
率 ( percentage nitr ogen derived fr om atmos-
pher e, % Ndf a)、固氮量 N 2 f ix ed [ 9]。
%Ndf a= 1-
atom%
1 5
N ex cessF
atom% 15N ex cessNF 100
N y ield( kg hm- 2) = abov . dy r . w eight %N
100
N 2 f ix ed(kg hm- 2)= %Ndf a N y ield(K g/ ha)
100
其中, atom % 15N ex cessF : 固氮菌肥处理植物
样品15N 原子百分超; atom % 15N ex cess NF : 对照
( ck2)样品15N 原子百分超, % N:粗蛋白含量。所有
数据用 Excel 2003软件处理, SAS 8. 0 统计软件进
行方差分析,多重比较采用 LSD法。
2 结果与分析
2. 1 联合固氮菌肥质量检测
将本研究制作的固体固氮菌肥于室温下储存,
菌肥经 150 d,其有效联合固氮菌数量均在 5. 00
10
8 个 g- 1以上, 但 180 d时其有效联合固氮菌数
量为4. 58 108个 g- 1略低于5. 00 108 个 g- 1 (表
2) ,无杂菌污染; 液体固氮菌肥于室温下储存,菌肥经
75 d,其有效联合固氮菌数量均在 5. 00 108 个 g- 1
以上, 180 d时其有效联合固氮菌数量为 1. 40 108 个
g- 1 (表 2) ,且无杂菌污染。可见,各个时期固体固
氮菌肥中有效联合固氮菌数量均高于液体固氮菌肥。
表 2 联合固氮菌肥的质量检查结果
Table 2 Quality contr ol record o f biofert ilizer s
储存天数
Storage period
固态固氮菌肥 Solid biofert iliz er
有效菌数
Ef fect ive bacteria (个 g- 1)
污染情况
Contamination
液态固氮菌肥 Liquid biofert ilizer
有效菌数
Ef fect ive bacteria (个 g- 1)
污染情况
Contaminat ion
30d 2. 00 109 - 1. 50 109 -
45d 1. 86 109 - 9. 84 108 -
60d 1. 77 109 - 9. 34 108 -
75d 1. 54 109 - 5. 51 108 -
90d 1. 00 109 - 3. 22 108 -
120d 7. 50 108 - 2. 67 108 -
150d 7. 44 108 - 2. 23 108 -
180d 4. 58 108 - 1. 40 108 -
注: + 表示污染, -表示无污染
Note: + means contaminated; - mean s u ncontam inated
2. 2 联合固氮菌肥对青稞生长的影响
2. 2. 1 联合固氮菌肥对青稞株高的影响 各处理
下青稞株高均显著高于 CK1(表 3) ( P< 0. 05) , 增
加幅度为 11. 67% ~ 20. 11%。处理 1/ 2NS 和处理
NS均略高于处理 1N;而处理 1/ 2NL 和处理 NL 均
低于处理 1N; 处理 NS 也略高于处理 1/ 2NS。可
见,固体菌肥无论在单独施用还是与半量氮肥共同
施用下对青稞株高的促进作用均好于液体菌肥, 且
略高于全量氮肥对照。
2. 2. 2 联合固氮菌肥对青稞生物量的影响 生物
量是研究植被净初级生产力的基础, 是衡量植被碳
库的重要指标,也是评价生态系统结构与功能的重
要参数。结果表明, 各施肥处理地上生物量均高于
CK1(表 3) ,增加的幅度为 27. 34% ~ 42. 16%, 且差
异显著( P< 0. 05)。处理 1N、处理 1/ 2NS、处理 1/
2NL 间无显著差异。可见,固体菌肥和液体菌肥对
青稞地上生物量都有显著的促进作用, 固体菌肥或
液体菌肥与半量氮肥同时施用对青稞地上生物量的
促进作用与全量氮肥相当,且固体菌肥的促生效果
好于液体菌肥。
428
第 3期 张堃等:不同剂型联合固氮菌肥对青稞促生效应和固氮能力研究
表 3 不同施肥处理对青稞生长的影响
Table 3 Effect of fer tilizer application on H . v ulg ar e gr ow th
处理
Treatm ent
株高
H eigh t ( cm )
地上生物量
Aboveground biomass
( g plan t- 1)
地下生物量
Underground biomass
( g plant- 1 )
根冠比
Root / Sh oot R/ T
CK1 25. 67 2. 34b 0. 7017 0. 0330 b 0. 1341 0. 0138d 0. 1914 0. 0214a
1N 30. 13 1. 62a 0. 9975 0. 0537a 0. 1977 0. 0118a 0. 1982 0. 0079a
1/ 2NS 30. 67 0. 81a 0. 9784 0. 0587 a 0. 1918 0. 0093ab 0. 1963 0. 0107a
1/ 2NL 29. 50 0. 50a 0. 9256 0. 0062 a 0. 1773 0. 0122abc 0. 1916 0. 0143a
NS 30. 83 1. 46a 0. 9125 0. 0104 a 0. 1739 0. 0139bc 0. 1905 0. 0133a
NL 28. 67 1. 53a 0. 8936 0. 1356 a 0. 1555 0. 0129cd 0. 1784 0. 0432a
注:表中数据为各处理下的平均值 标准差( M SD) ,不同小写字母表示差异显著( P< 0. 05) ,下同
Note: Data are average valu es of replicates in each t reatm ent standard division ( m ean SD) ; m eans w ith dif f erent small let ters are s ignif-
icant ly dif feren t at the 0. 05 level; same as b elow
各施肥处理地下生物量均高于 CK1(表 3) , 增
加幅度为 15. 95% ~ 47. 41% ,且差异显著(处理 NL
除外) ( P< 0. 05)。处理 1N、1/ 2NS、1/ 2NL 间无显
著差异。处理 1N 分别比处理 NS、NL 高 13. 69%
和 27. 14%, 且差异显著( P< 0. 05)。可见, 固体菌
肥和液体菌肥对青稞地下生物量均有显著促进作
用,二者单独施用均达不到全量氮肥对照的效果, 而
固体菌肥或液体菌肥与半量氮肥同时施用对青稞地
下生物量的促进作用与全量氮肥相当, 且固体菌肥
的促生效果好于液体菌肥。
2. 2. 3 联合固氮菌肥对青稞根冠比的影响 结果
表明,各处理根冠比均低于处理 1N(表 3) , 处理 1/
2NS 略高于处理 1/ 2NL, 处理 NS 也略高于处理
NL,且各处理间差异不显著。
2. 3 不同处理下青稞粗蛋白含量及联合固氮菌肥
的固氮百分率和固氮量
2. 3. 1 联合固氮菌肥对青稞地上部粗蛋白含量的
影响 处理 1/ 2NS和处理 1/ 2NL 分别比处理 CK2
高 14. 88%和 10. 12%, 且差异显著 ( P< 0. 05) (表
4)。可见,菌肥与半量氮肥共同施用可显著增加青
稞的粗蛋白含量, 且固体菌肥的效果好于液体菌肥。
表 4 青稞的粗蛋白含量及联合固氮菌肥的固氮百分率和固氮量
Table 4 Crude protein content, nit rog en derived from atmosphere percentage, and nitro gen fix ing
amount of H . vulgare by associative nitro gen- fix ing bio fertilizer
处理
Treatm ent
粗蛋白含量
N concent
( % )
15N 原子百分超
Atom 15N% ex ces s
( % )
固氮百分率
Percentage of Nit r ogen derived f rom
atm osphere ( % Ndfa)
固氮量
N 2 f ixed
( kg hm- 2)
CK2 3. 36 0. 14b 0. 656 0. 003 / /
1/ 2NL 3. 70 0. 12a 0. 564 0. 002 14. 03 0. 32b 21. 29 1. 36a
1/ 2NS 3. 86 0. 09a 0. 541 0. 012 17. 44 1. 89a 22. 87 1. 58a
2. 3. 2 联合固氮菌肥的固氮百分率和固氮量 处
理 1/ 2N S和处理 1/ 2NL 的15N 原子百分超均低于
CK2,证明青稞施用联合固氮菌肥后,由于其中固氮
微生物的作用, 与未施用联合固氮菌肥的处理 CK2
相比, 15N 原子百分超均有不同程度的降低。处理
1/ 2NS 和处 理 1/ 2NL 的固氮百 分率分别 为
17. 44%和 14. 03%, 处理 1/ 2NS 比处理 1/ 2NL 高
24. 31%, 且差异显著( P< 0. 05) (表 4) ;处理 1/ 2NS
和处理 1/ 2NL 的固氮量分别为 22. 87 kg hm- 2和
21. 29 kg hm- 2。可见,固体菌肥的固氮百分率和
固氮量都高于液体菌肥。
3 讨论
3. 1 微生物肥料作为一类农用活菌制品,其中微生
物生存受许多环境因素的影响, 如: 水分含量、pH、
温度、载体性质、保存方式等。有效活菌数是衡量其
质量的重要指标。农用微生物菌剂质量标准( GB
20287-2006) [ 7]要求,联合固氮菌肥保存半年时的有
效活菌数不低于 2. 00 108 个 g- 1 , 杂菌率小于等
于 20%。本研究基于各联合固氮菌株生理生化特
性及培养特征, 以 LB培养基和泥炭为载体制作的
固体菌肥经 180 d , 其有效联合固氮菌数量均在 2.
00 108 个 g- 1以上,且无杂菌污染, 符合农用微
生物菌剂质量标准。各个时期固体固氮菌肥中有
效联合固氮菌数量均高于液体固氮菌肥。
3. 2 施用本研究制作的固体联合固氮菌肥和液体
联合固氮菌肥对青稞株高、地上生物量和地下生物
量均有显著的促进作用, 固体菌肥或液体菌肥与半
量氮肥同时施用对青稞生长的促进作用与全量氮肥
相当,可节省一半的氮肥( 110 kg hm- 2 ) , 且固体
菌肥的效果好于液体菌肥。这与李凤霞 [ 10]等、席琳
429
草 地 学 报 第 18卷
乔[ 11]等分别利用联合固氮菌株制作的接种剂接种
于禾本科作物燕麦,对其株高、叶绿素含量、生物量
及粗蛋白等都有不同程度的增加结果相一致。近年
来国外学者,有关联合固氮细菌对禾本科植物促生
作用的研究已有大量深入、细致的报道。如 Yan-
ni[ 12]等在田间用 1/ 3氮肥用量加联合固氮( R. t ri-
f ol i i)菌肥施用于水稻,获得了与施用全量氮肥( 144
kg hm- 2 )相当的产量, 相当于节约氮肥 96 kg
hm 2。Gov indarajan[ 13] 等将 Bur kholderia MG43接
种于甘蔗,发现其可代替一半氮肥, 可节省氮肥 70
kg / hm- 2。而本试验的结果高于上述研究, 但上述
结论均是在田间试验的条件下得出,而本试验为温
室盆栽试验。类似的, Okon[ 14] 等总结前人研究成
果时也发现, 有 60% ~ 70%的试验结果证实, 接种
Az osp ir il lum 后可使宿主植物的产量增加 5% ~
30% ,并且宿主植物促生效应最大的实验结果都是
由温室实验得出的。
3. 3 目前,测定固氮量多采用15N 同位素稀释法( 15
N isotope dilution) 和15N 自然丰度法( 15N natural
abundance) [ 15] , 15N 同位素稀释法在试验中加入
被15N 稳定同位素标记的氮肥,固氮系统在富含15N
基质中经过一定时间生长后, 由于有固氮系统的植
物能从空气中摄取 N, 因此, 增多了14N 而稀释了15
N含量,使植物体内15N 原子百分超下降,该法可直
接测出植物体内分别来自土壤和空气(生物固定)的
氮素及其百分比,避免其他因素对固氮量测定的影
响, 被认为是确定生物固氮作用定性和定量最直
接、最可靠、最标准的方法 [ 16]。
3. 4 Oliveira[ 17]等通过温室试验证实,水稻接种联
合固氮菌 H er basp i ri l lum 和 A z osp ir i llum 后的固
氮百分率分别为 19%和47% ,均高于本研究结果。
3. 5 不同的土壤类型、不同的宿主植物、不同土壤
中的氮含量、不同的接种方式等诸多因素都可显著
地影响联合固氮菌对宿主植物的促生效果[ 18]、固氮
百分率及固氮量[ 14, 16]。本研究研制的联合固氮菌
肥的田间实际应用效果还需进一步深入研究。
4 结论
本研究制作的固体菌肥和液体菌肥均符合农
用微生物菌剂质量标准( GB 20287-2006)。施用固
体菌肥和液体菌肥对青稞生长均有显著的促进作
用,固体菌肥无论是保存期内的有效活菌数还是对
青稞的促生效果、固氮百分率及固氮量都优于液体
菌肥。
参考文献
[ 1] Doereiner J, Day J M . As sociat ive symbios es in t ropical gras-
ses: characterisat ion of micro-organism s and dinit rogen- fixin g
sites [ R] . In: New ton W E, Nym an C J. ( Eds. ) Proc. 1 st
Intern. Symp. on Nit rogen Fixat ion, Washin gton State Un-i
versity Pres s, 1976. 518-538
[ 2] Dobb elaer e S, C roon enborgh s A, T hys A et al . Responses of
agr on om ically important crops to inocu lat ion w ith A z osp i ri l-
lum [ J] . Aus t. J. Plan t Physiol. , 2001, 28: 871- 879
[ 3] Dobbelaere S, Vanderleyden J, Okon Y. Plant grow th-pr om o-
tin g effect s of diaz ot roph s in the rhizospher e [ J] . C riti cal Re-
view s in Plant Sciences, 2003, 22( 2) : 134-177
[ 4] 西藏自治区农牧业特色产业发展研究课题组.西藏自治区农
牧业特色产业发展研究 [ M ] . 中国农业科学技术出版社,
2003. 109-191
[ 5] Yao T, Yasmin S and H afeez F Y. Potent ial role of rhiz ob ac-
teria isolated from northw estern China for enhancing wh eat
an d oat yield [ J ] . T he Journal of Agricultural S cien ce, 2008
( 1) : 49-56
[ 6] 朱颖,姚拓,李玉娥,等.红三叶根际溶磷菌分离及其溶磷机制
初探[ J] . 草地学报, 2009, (2) : 259- 263
[ 7] 农用微生物菌剂质量标准[ S ] . GB 20287-2006
[ 8] 章家恩. 生态学常用实验研究方法与技术[ M ] . 北京:化学工
业出版社, 2006. 62-78
[ 9] Use of isotope and radiat ion methods in soil and w ater m anage-
ment an d crop nut rit ion [ M ] . Vienn a: Internat ional Atomic
Energy Agency ( IAEA) , 2001. 27-29
[ 10] 李凤霞, 姚拓, 张德罡. 植物生长促生菌浸种对高寒地区燕麦
生长及固氮的效应[ J] . 草业科学, 2005, 23 ( 1) : 22-25
[ 11] 席琳乔, 姚拓, 张德罡. 固氮菌对燕麦不同生育期促生作用的
研究[ J] . 草业学报, 2007, 16 ( 3) : 38-42
[ 12] Yann i Y G, Rizk R Y, E-l Fattah F K, e t a l . T he b eneficial
plant grow th- promot ing ass ociat ion of Rhiz obium leg uminosa-
rum bv . tr if ol i i w ith rice root s [ J] . Aust rian J ou rnal of Plant
Physiology, 2001, 28: 845-870
[ 13] Govindarajan M , Balandreau J, M uthukum arasamy R et al .
Improved yield of micropropagated su garcane fol low ing inocu-
lat ion b y endoph ytic Bur khold eria v i etnamiensi s [ J ] . Plant
Soil, 2006, 280: 239-252
[ 14] Okon Y, Labandera-Gon zalez C A . Agronomic appl ication s of
A z osp ir il lum: an evaluat ion of 20 years worldwide f ield inocu-
lat ion [ J] . S oil Biology and Biochem ist ry, 1994, 26: 1591-
1601
[ 15] Unkovich M J, Pate J S. An apprai sal of recent f ield measure-
ments of s ymbiot ic N 2 fixat ion by an nual legumes [ J ] . Field
Crops Research, 2000, 65: 211-228
[ 16] J ames E K. Nit rogen fix at ion in en dophyt ic and ass ociat ive
symbios is. Field Crops Research, 2000, 65: 197-209
[ 17] Oliveira A M, U rquiaga S, Dobereiner J, Baldani J I. T he
ef fect of inoculat ing en dophyt ic N 2-f ixing bacteria on micro-
propagated sugarcane plants [ J] . Plant S oil, 2002, 242: 205-
215
[ 18] de Oliveir a A L, d e Canuto E L, U rquiaga S, et al . Y ield of
micr op ropagated sugarcane variet ies in diff erent soil t ypes fol-
low ing in oculat ion w ith diaz ot r oph ic bacteria [ J] . Plant S oil ,
2006, 284: 23-32
(责任编辑 李 扬)
430