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Preliminary Study on Silage of Elymus sibiricns L. and Phalaris arundinacea L. in Alpine Pastoral Regions of Northwest Sichuan

川西北高寒牧区老芒麦和虉草青贮效果初步研究



全 文 :第20卷 第2期
 Vol.20  No.2
草 地 学 报
ACTA AGRESTIA SINICA
   2012年  3月
  Mar.  2012
川西北高寒牧区老芒麦和虉草青贮效果初步研究
李 平1,2,鄢家俊2,白史且1,2*,陈智华1,游明鸿2,苏国鹏2,刀志学1,张利亚1,李 娜1
(1.西南民族大学生命科学与技术学院,四川 成都 610041;2.四川省草原科学研究院,四川 成都 611731)
摘要:为探讨川西北高寒牧区主推草种青贮效果,以收种后的老芒麦(Elymus sibiricns L.)和虉草(Phalaris
arundinacea L.)为原料,对其叶围微生物进行计数,使用纤维素酶、蔗糖、尿素和乙酸作为添加剂,灌装青贮60d后
进行品质分析。结果表明:老芒麦和虉草附着的乳酸菌数量远低于霉菌、酵母菌和丁酸菌;蔗糖和尿素处理下,乳
酸含量显著高于对照,氨态氮与总氮比值显著低于对照(P<0.05),能够改善老芒麦青贮饲料和虉草青贮饲料发酵
品质;乙酸处理下,pH值、氨态氮与总氮比值显著低于对照,乙酸含量显著高于对照(P<0.05),能够改善老芒麦青
贮饲料和虉草青贮饲料的发酵品质;纤维素酶对改善虉草青贮饲料发酵品质无显著影响。
关键词:川西北;老芒麦;虉草;青贮;发酵品质
中图分类号:S816.5    文献标识码:A     文章编号:1007-0435(2012)02-0368-06
Preliminary Study on Silage of Elymus sibiricns L.and Phalaris
arundinacea L.in Alpine Pastoral Regions of Northwest Sichuan
LI Ping1,2,YAN Jia-jun2,BAI Shi-qie1,2*,CHEN Zhi-hua1,YOU Ming-hong2,
SU Guo-peng2,DAO Zhi-xue1,ZHANG Li-ya1,LI Na1
(1.Colege of Life Science and Technology,Southwest University for Nationalities,Chengdu,Sichuan Province 610041,China;
2.Sichuan Academy of Grassland Sicences,Chengdu,Sichuan Province 611731,China)
Abstract:The effects of additives on cultivated grass silage(Elymus sibiricns L.and Phalaris arundinacea
L.)from alpine meadow in northwest Sichuan grassland were studied and the numbers of adhesive microbe
were analyzed.Celulase,sucrose,urea and acetic acid were tested additives.Results showed that the
numbers of lactic acid bacteria were less than that of molds,yeast and butyric acid bacteria in silage.Su-
crose and urea improved the fermentation quality of both forages.Lactic acid and ammonia nitrogen/total
nitrogen(AN/TN)were significantly lower than that of control(P<0.05).Acetic acid improved the fer-
mentation quality of both forages in which pH and AN/TN were significantly lower and acetic acid(AA)
was higher than control group(P<0.05).Celulase did not improve fermentation quality and chemical
composition of Phalaris arundinacea L.significantly.
Key words:Northwest Sichuan;Elymus sibiricns L.;Phalaris arundinacea L.;Silage;Fermentation
quality
  川西北位于青藏高原的东南缘,是我国6大牧
区之一,也是四川省重要草地畜牧业基地。一方面,
饲草供应季节性与牲畜全年需草相对稳定性之间的
矛盾长期以来不能得到有效解决,影响了该区域畜
牧业的发展;另一方面,近年来,川西北牧区开始大
面积推广老芒麦(Elymus sibiricus L.)、虉草(Pha-
laris arundinacea L.)等优良主栽草种的人工草地,
但由于该地区雨水较多,干草调制难度大,造成了牧
草利用率低,给畜牧业生产带来严重影响。青贮调
制可以很好地保存老芒麦和虉草的营养价值,提高
饲草利用率,调整饲草供应期,受气候变化影响小,
是一种经济实惠易操作的牧草贮藏技术[1,2]。关于青
藏高原特种牧草的品质评定试验说明添加剂青贮能
够改善青贮品质,但是不同添加剂处理的处理效果
收稿日期:2011-09-08;修回日期:2012-01-05
基金项目:现代农业产业技术体系建设专项;公益性行业(农业)科研专项“牧区优质高效饲草生产利用技术研究示范”(201003023);西南
民族大学研究生学位点建设项目(2011XWD-S071012)资助
作者简介:李平(1985-),男,四川资阳人,博士研究生,研究方向为草地生态学,E-mail:lpyzm@sina.cn;*通信作者Author for correspon-
dence,E-mail:baiturf@yahoo.com.cn
第2期 李平等:川西北高寒牧区老芒麦和虉草青贮效果初步研究
不同[3~5];李长慧等[6]、王俊伶[7]对高寒牧区禾本科
和豆科牧草进行了混合青贮,能够调制出优质青贮
饲料。桂荣等[8]、玉柱等[2]对老芒麦附着微生物和
青贮添加剂进行了相关研究,结果表明老芒麦附着
乳酸菌数量远低于霉菌、酵母菌等有害菌数量,但是
可以自然青贮;乳酸菌制剂能够改善老芒麦的青贮
品质,却不能够显著改善其营养价值。Contreras-
Govea等[9]的研究表明虉草青贮料前期pH值降低
较慢,后期较快,同时其最终pH 值偏高。根据Be-
hrendt U等[10]的研究表明,收获时间、添加剂处理
等与青贮效果密切相关。但是目前国内外还未有针
对川西北高原老芒麦和虉草青贮饲料的研究。
本研究通过分别向老芒麦和虉草中添加不同添
加剂制作青贮饲料,讨论不同添加剂对收种后老芒
麦、虉草的青贮效果,探索适宜川西北收种后老芒
麦、虉草青贮添加剂种类,为川西北调制优质青贮饲
料提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验地概况
试验地位于四川省阿坝州红原县瓦切乡国家老
芒麦牧草种子基地(N32°48′,E102°33′,海拔3500m),
属于四川省西北部、青藏高原东南缘,属高原寒温带
季风气候。土层较薄,黄色粘土,沙质基底,土壤
pH 值 5.93。年均温 1.1℃,最热月平均气温
10.9℃,最冷月(1月)气温-10.3℃,年极端最高温
25.6℃,年极端最低温-33.3℃,≥0℃ 的积温为
1432.2℃,年降水量753mm,全年日照时数2417.9h,
无绝对无霜期。土壤为亚高山草甸土,有机质
61.23g·kg-1、速效氮367.41mg·kg-1、速效磷
41.36mg·kg-1、速效钾176.26mg·kg-1。
1.2 试验设计
收种后的牧草刈割留茬高度2~3cm,萎蔫
2h,切碎至2~3cm,装入1000mL塑料罐中,压实
(每罐约500g),密封,置于室温(青贮期间平均温度
为15℃)下发酵60d,取样进行感官评价和实验室
分析。老芒麦设置1个对照组和3个添加剂组,虉
草设置1个对照组和4个添加剂组。添加剂分别为
纤维素酶(成都宝信生物耗材试剂公司提供,11000
U·mg-1)、乙酸(成都宝信生物耗材试剂公司提
供,去离子水稀释成浓度为15%)、蔗糖(分析纯)、
和尿素(AMRESCO公司提供,纯度95%),每种添
加剂设置3个重复,共计27个处理,具体添加量如
表1所示。
表1 老芒麦和虉草青贮试验设计(FD)
Table 1 Experiment design of Elymus sibiricns L.and Phalaris arundinacea L.silage(FD)
老芒麦Elymus sibiricus L. 虉草Phalaris arundinacea L.
添加剂Additives 添加量Content 添加剂Additives 添加量Content
对照组(CK) 5mL蒸馏水 对照组(CK0) 5mL蒸馏水
纤维素酶Celulase(CC) / 纤维素酶(CC0) 0.3%
乙酸Acetic acid(CE) 0.02% 乙酸(CE0) 0.02%
蔗糖Sucrose(CS) 3% 蔗糖(CS0) 3%
尿素Urea(CN) 0.3% 尿素(CN0) 0.3%
1.3 品质分析
老芒麦和虉草青贮60d后,打开青贮罐,取出
青贮饲料,按照我国农业部下发的《青贮饲料质量评
定标准》进行感官指标评定。
常规营养指标的测定:青贮原料和青贮饲料在
65℃烘干至恒重测定干物质含量(dry matter,
DM)、凯氏定氮法测定粗蛋白(crude protein,CP)
含量、范氏法(Van Soest)测定中性洗涤纤维(neu-
tral detergent fiber,NDF)和酸性洗涤纤维(acidic
detergent fiber,ADF)含量 、蒽酮-硫酸比色法测定
水溶性碳水化合物(water soluble carbohydrate,
WSC)含量[2]。
青贮饲料有机酸的测定:采用四分法取青贮饲料
20g放入180mL蒸馏水中,用榨汁机将其榨碎经4
层纱布过滤后静置1h,采用pH值计测定pH值,将
滤液3500g离心15min,取上清液,0.45μm滤膜过
滤后用 HPLC(KC-811column,Shodex;Shimadzu,日
本;柱温500℃;流速1mL·min-1;210nm,SPD检测
器)测定乳酸、乙酸、丙酸和丁酸[2]。小分段青贮饲料
氨态氮测定:苯酚-次氯酸钠比色法[2]。
青贮原料叶围微生物分析:新鲜草样10g置于
250mL三角瓶中,加入90mL无菌生理盐水,在摇床
上震荡30min,4层纱布过滤,取1mL滤液进行梯度
稀释,用平板分离法对稀释度为10-3,10-4和10-5的
963
草 地 学 报 第20卷
稀释液进行分离计数(CFU·g-1,FM);乳酸菌用
MRS培养基、丁酸菌用肉膏蛋白胨培养基、酵母菌马
铃薯葡萄糖琼脂培养基,霉菌用马丁培养基。
1.4 数据处理
使用统计分析软件SPSS 11.5对数据进行方差
分析与多重比较。
2 结果与分析
2.1 老芒麦和虉草原料的化学成分及叶围微生物分析
收种后老芒麦和虉草原料的化学成分如表2所
示。老芒麦干物质(DM)、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤
维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)和可溶性碳水化合
物(WSC)含量分别为41.6%,4.81%,72.67%,
50.12%和6.33%。虉草干物质(DM)、粗蛋白
(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)
和可溶性碳水化合物(WSC)含量分别为38.7%,
4.63%,54.36%,34.33%和23.52%。
青贮前老芒麦和虉草叶围微生物数量如表3所
示。老芒麦和虉草叶围乳酸菌数量分别为2.47×
102 和3.83×102 CFU·g-1 FM,远远低于青贮所
要求的乳酸菌数量≥105 CFU·g-1 FM,而2种牧
草鲜样上叶围酵母菌和霉菌的数量均显著高于乳酸
菌的数量(P<0.05),因而不利于老芒麦和虉草的
自然青贮。
表2 老芒麦和虉草原料的化学成分
Table 2 Chemical composition of Elymus sibiricus L.and Phalaris arundinacea L.
牧草
Species
干物质
Dry matter
/%
粗蛋白
Crude protein
/%DM
中性洗涤纤维
Neutral detergent
fiber/%DM
酸性洗涤纤维
Acid detergent fiber
/%DM
可溶性碳水化合物
Soluble carbohydrates
/%DM
老芒麦Elymus sibiricus L. 41.60  4.81  72.67  50.12  6.33
虉草Phalaris arundinacea L. 38.87  4.63  54.36  34.33  23.52
表3 老芒麦和虉草叶围微生物组成
Table 3 Adhesive microbe of Elymus sibiricus L.and Phalaris arundinacea L. CFU·g-1FM
牧草
Species
乳酸菌
Lactic acid bacteria
酵母菌
Yeast
霉菌
Molds
丁酸菌
Clostridium butyricum
老芒麦Elymus sibiricus L. 2.47×102  3.65×106  8.41×106  2.49×102
虉草Phalaris arundinacea L. 3.83×102  6.81×106  3.92×106  1.96×102
2.2 青贮饲料的感官评定
所有处理的青贮饲料呈黄绿色,在色泽上无明
显差别;CS处理中一个重复有轻微霉变,其他各处
理组无霉变情况发生;除CK处理中一个重复有轻
微酸臭味外,其他各处理均呈酸香味;质地较好,无
粘手现象。
2.3 添加剂对老芒麦青贮饲料和虉草青贮饲料化
学成分的影响
CE和 CN 处理的 CP含量分别为6.36%和
6.45%,显著高于CK(P<0.05)。各添加剂处理的
NDF含量和 ADF含量与 CK 相比差异不显著。
CN处理的 WSC含量显著高于CK(P<0.05),CS
处理的 WSC含量显著低于CK(P<0.05)。除CN
处理外,老芒麦其他各处理的DM 含量均显著高于
青贮原料DM 含量;与原料相比,各处理青贮饲料
的CP含量提高(P<0.05),ADF和 WSC显著降低
(P<0.05)。
除CE0 处理外,虉草青贮饲料CC0,CS0 和CN0
处理的DM含量和 WSC含量均显著低于CK0,CN0
处理的CP含量显著高于CK0,CE0 处理NDF含量
显著低于CK0(P<0.05)。各处理之间的 ADF含
量无显著性差异。各青贮处理与原料相比,WSC
含量显著降低,CN0 处理后青贮料CP含量显著提
高(P<0.05)。
2.4 添加剂对老芒麦青贮饲料和虉草青贮饲料发
酵品质的影响
老芒麦和虉草青贮饲料的发酵品质如表5所
示。CS和CE处理下后的老芒麦pH 值显著低于
CK(P<0.05)。CE处理下乳酸含量最低(LA=
2.04%DM),CS处理显著高于CK(P<0.05)。CS
和CN处理下乙酸含量显著高于CK(P<0.05),CE
处理与CK差异不显著。老芒麦青贮饲料所有处理
组丙酸较低。只有CK处理检测出丁酸。CN处理
下AN/TN显著低于对照CK(P<0.05)。
073
第2期 李平等:川西北高寒牧区老芒麦和虉草青贮效果初步研究
表4 老芒麦青贮饲料和虉草青贮饲料的化学成分
Table 4 Chemical composition of Elymus sibiricus L.and Phalaris arundinacea L.silage
处理
Treatment
牧草
Species
干物质
Dry matter
/%
粗蛋白
Crude protein
/%DM
中性洗涤纤维
Neutral detergent
fiber/%DM
酸性洗涤纤维
Acid detergent fiber
/%DM
可溶性碳水化合物
Soluble carbohydrates
/%DM
CK 老芒麦Elymus sibiricus L. 39.35c  5.77d  71.72a 47.86a 1.46d
CE 老芒麦Elymus sibiricus L. 39.85c  6.36df  70.54a 47.17a 1.60d
CS 老芒麦Elymus sibiricus L. 39.89c  5.56c  73.27a 48.79a 1.10e
CN 老芒麦Elymus sibiricus L. 42.24b  6.45adef  72.93a 48.70a 1.88c
CK0 虉草Phalaris arundinacea L. 40.26ac  4.42eg  58.99b  36.43b  18.73a
CC0 虉草Phalaris arundinacea L. 37.48d  4.5bg  58.32b  36.82b  12.67b
CE0 虉草Phalaris arundinacea L. 40.14c  4.16g  53.28b  33.27b  18.41a
CS0 虉草Phalaris arundinacea L. 36.88d  4.27eg  56.59b  35.23b  13.93b
CN0 虉草Phalaris arundinacea L. 36.31d  6.39f  57.09b  35.39b  11.67b
  注:表内同列中不同小写字母表示平均数差异显著(P<0.05)
Note:Different lowercase letters in the same column mean significant difference(P<0.05)
   虉草青贮饲料各处理的pH 值与CK0 之间均
差异显著(P<0.05),各处理的乳酸含量和乙酸含
量均显著高于CK0(P<0.05),CN0 处理的乳酸含
量最高(LA=5.51%DM),CE0 处理下乙酸含量最
高(AA=1.29%DM),AN/TN显著低于CK0(P<
0.05)。虉草青贮饲料中只有 CC0 处理检测出丙
酸。虉草所有处理均检测到少量丁酸,且CS0 处理
显著高于其他处理(P<0.05)。
表5 老芒麦青贮饲料和虉草青贮饲料的发酵品质
Table 5 Fermentation quality of Elymus sibiricus L.and Phalaris arundinacea L.silage
处理
Treatment
牧草
Species
pH值
pH value
乳酸
Lactic acid
/%DM
乙酸
Acetic acid
/%DM
丙酸
Propionic acid
/%DM
丁酸
Butyric acid
/%DM
氨态氮/总氮
Ammonia nitrogen
/Total nitrogen/%
CK 老芒麦Elymus sibiricus L. 4.41cd  2.04e  1.03b  0.04b  0.03b  8.41a
CS 老芒麦Elymus sibiricus L. 4.17e  3.12b  0.97c  0.02bc  NO  6.83b
CE 老芒麦Elymus sibiricus L. 4.14e  2.07ce  1.08b  0.07a NO  6.56b
CN 老芒麦Elymus sibiricus L. 4.48c  2.14ce  0.64e  0.04b  NO  4.77b
CK0 虉草Phalaris arundinacea L. 4.60b  1.76f  0.08g  NO  0.02b  5.34b
CS0 虉草Phalaris arundinacea L. 4.36d  3.13b  0.17f  NO  0.06a 4.47cd
CE0 虉草Phalaris arundinacea L. 4.21e  2.99b  1.29a NO  0.01b  4.18cd
CN0 虉草Phalaris arundinacea L. 4.04f  5.56ad  0.73d  NO  0.01b  3.72d
CC0 虉草Phalaris arundinacea L. 4.76af  2.07d  0.65d  0.01c  0.01b  3.91d
  注:表内NO为未检测到;同列中不同小写字母表示平均数差异显著(P<0.05)
Note:NO:not detected;different lowercase letters in the same column mean significant difference(P<0.05)
3 讨论
3.1 老芒麦和虉草原料上的叶围微生物
青贮发酵是一个叶围微生物活动的生物化学过
程。刚收获的牧草中带有细菌、霉菌、酵母菌等微生
物,其中腐败菌较多,乳酸菌较少。青贮制作成功与
否取决于青贮原料上叶围乳酸菌的数量和类
型[11,12],但是在新鲜牧草上叶围乳酸菌数量一般都
达不到青贮自然发酵所需数量(105 CFU·g-1
FM),若要达到理想青贮效果,就需要改变青贮发
酵条件或者增加乳酸菌数量。在青贮制作前期,霉
菌和酵母菌对牧草青贮发酵无促进作用,且会消耗
氧气和降低干物质含量,随着pH 值降低及厌氧环
境的形成,霉菌和酵母菌的活动将逐渐受到抑
制[13,14]。老芒麦和虉草原料上叶围微生物以霉菌
和酵母菌为主,远远高于乳酸菌的数量。与内蒙古
地区乳熟期老芒麦叶围微生物数量[8]比较,本研究
中收种后老芒麦叶围霉菌数量较多,可能与老芒麦
原料物候期有关:取样时间已进入川西北地区的秋
季,气温较低(平均温度在15℃以下),微生物活动
受到了抑制。
3.2 添加剂对老芒麦青贮品质的影响
本试验自然青贮条件下老芒麦青贮饲料pH值
173
草 地 学 报 第20卷
为4.41,且有一个重复产生少量丁酸和轻微腐臭
味,说明老芒麦不易自然青贮成功。在原料中添加
蔗糖,可为乳酸菌提供更多底物,从而促进发酵[15]。
对于 WSC含量在10%以上的禾本科原料,只要添
加1%的蔗糖就可以获得优质的乳酸菌发酵型青贮
饲料[16]。玉柱等[2]在老芒麦青贮饲料中添加蔗糖
(2%和4%)后,乳酸含量较高,AN/TN较低,获得
了优质老芒麦青贮饲料。本试验中,老芒麦在蔗糖
处理下pH值和 AN/TN低于对照,乳酸含量显著
高于对照(P<0.05),说明蔗糖处理能够改善老芒
麦青贮饲料发酵品质,与玉柱等[2]的研究一致。乙
酸是公认的好氧腐败抑制剂[17,18],本试验通过尝试
直接向老芒麦当中添加乙酸,但老芒麦青贮饲料乳
酸含量未提高,可能原因是本试验乙酸添加量抑制
了乳酸菌代谢。添加尿素可以提高粗蛋白含量和青
贮饲料品质、改善好氧环境[19],本试验尿素处理后
老芒麦青贮饲料的CP含量显著高于对照(P<0.
05),但是AN/TN显著低于对照(P<0.05),说明
添加尿素能够改善老芒麦青贮饲料化学成分和发酵
品质,与玉柱等[20]用尿素处理玉米(Zea mays)得到
的研究结果基本一致。
3.3 添加剂对虉草青贮品质的影响
虉草主要用于干草生产、草地管理和水土流失
防治,但虉草同时是湿地上的一种主要入侵草,早在
1924年Piper就提出青贮是虉草主要的利用方式。
虉草原料的 WSC含量较高,能够为青贮制作提供
足够的发酵底物,但是高干物质含量往往使其利用
率较低[21]。虉草青贮饲料的发酵品质受原料的质
地、叶围微生物数量等因素影响[10]。自然青贮条件
下,虉草青贮饲料的pH值为4.60,乳酸含量较低,
AN/TN较高,说明需要加入添加剂改善虉草发酵
条件。蔗糖处理和乙酸处理均能够改善虉草青贮饲
料的营养价值和发酵品质。尿素改善了青贮罐内的
好氧稳定性,增加饲草含氮量,抑制酵母菌、霉菌等
的活性,增加乳酸菌数量。纤维素酶可以降低青贮
饲料细胞壁组分,增加青贮预处理(酸处理,碱处理
等)能够提高纤维素酶的转换率,为乳酸菌发酵提供
充足发酵底物,减少纤维含量,但是纤维素酶的活性
受温度的影响较大[2],因而在纤维素酶处理下虉草
青贮饲料的发酵品质并未得到显著改善(P<
0.05)。虉草青贮饲料的粗蛋白均比老芒麦青贮饲
料的含量高,可能原因是青贮饲料粗蛋白的降解率
与牧草的物候期及保藏方式有关[22]。
4 结论
川西北高寒牧区老芒麦和虉草收种后牧草上附
着乳酸菌较少,不利于直接调制优质青贮饲料,需要
添加剂来改善老芒麦青贮饲料和虉草青贮饲料发酵
品质。添加剂能改善老芒麦青贮饲料和虉草青贮饲
料的发酵品质和化学成分,但不同添加剂处理青贮
效果有差异。蔗糖、乙酸和氨态氮能够显著改善老
芒麦青贮饲料和虉草青贮饲料的发酵品质,纤维素
酶不能够显著改善虉草青贮饲料的发酵品质。
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