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Isolation, Identification and Diversity Analysis of Fungal Endophyte in Astragalus strictus

茎直黄芪内生真菌分离鉴定及其多样性分析



全 文 :!23" !6#
 Vol.23  No.6
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  Nov.  2015
犱狅犻:10.11733/j.issn.10070435.2015.06.018
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CAODandan,LUHao,LIXiaomeng,GUOYazhou,XUERuixu,
WANGHuan,QUANHaiyun,ZHAOBaoyu
(ColegeofVeterinaryMedicine,NorthwestA&FUniversity,Yangling,ShaanxiProvince712100,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Fungalendophytewereisolatedfrom犃狊狋狉犪犵犪犾狌狊狊狋狉犻犮狋狌狊samplescolectedfromGongbujiangda
cityofTibettoinvestigatethespeciesdiversityanddistributionofendophyte.Thespeciesandgenusof
endophytewereidentifiedbythetraditionalmorphologyandrDNAITSsequenceanalysis,anddiversity
indexwascalculatedbyBiodap.Theresultsshowedthat336fungalcolonieswereisolatedfrom424sam
ples,whichwerecombinedto21kindsofdifferentendophyticfungus.Underaltheconditionsofsteriliza
tion,犃犾狋犲狉狀犪狉犻犪狋犲狀狌犻狊狊犻犿犪 wasthedominantspeciesinthesespecieswiththerelativefrequencyof
32.14%,folowedwith犝狀犱犻犳犻犾狌犿狅狓狔狋狉狅狆犻狊(19.05%).Diversityindexesshowedthatthediversityin
dexoffungalendophytedifferedfromdifferenttissues.TheShannonWeinerindex,simpsonindexand
evennessindexoffungalendophyteinflowerwerealhighest,whichwas2.160.154,and0.80,respec
tively,folowedbyleafandstem.Inconclusion,therewasanobviousdifferenceinquantity,speciesand
diversityoftheendophyteamongdifferenttissuesof犃狊狋狉犪犵犪犾狌狊狊狋狉犻犮狋狌狊.Flowerwasthemostvulnerable
tocolonizationbytheendophyte,whosediversitywasthemaximum.
犓犲狔狑狅狉犱狊:犃狊狋狉犪犵犪犾狌狊狊狋狉犻犮狋狌狊;Fungalendophyte;Isolationandidentification;Speciesdiversity
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Tissues
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Sterilizationtime
75%0
75%ethanol/s
2%NaClO/min
6Œ©×
Tissuesnumber
{¸¹×
Colonynumber
xo²
Isolationrate/%
¹xo²
Totalisolation
rate/%
Ó
Flower
30 2.5 47 45 95.74
30 3.0 50 47 94.00
40 3.5 46 31 67.39
86.01
³
Leaf
30 2.5 48 46 95.83
30 3.0 50 49 98.00
40 3.5 43 19 44.19
80.85
w
Stem
30 2.5 48 42 87.50
30 3.0 46 36 78.26
40 3.5 46 21 45.65
70.71
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犃犾狋犲狉狀犪狉犻犪sp.,犃犾狋犲狉狀犪狉犻犪狋犲狀狌犻狊狊犻犿犪,犘犺狅犿狅狆狊犻狊
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Table2 Mainmorphologicalcharacteristicsofenophyteisolatedfrom犃.狊狋狉犻犮狋狌狊
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Species
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Tissues
¥H)# Morphologicalcharacteristics {¸v‰¥H Obversemorphology {¸ô‰¥H Backmorphology G&±Ð Growthspeed/ mm·d-1 JH3J45 wStem {‰M 、 ×ØG& , {¸dÞ 、 ã , =nÚCM7ÞCM ,^ ȐM , ë! @M , ë! 0.8 JH1J13 ³Leaf ÓFlower {‰M 、 ×ØG& , {¸dÞ 、 ã , z#¾M , =#=ù`´M". M , d#=ùä´M".ªWM , u­! z#¾M , =#=ù` ´M".M , d#=ù ä´M".ªWM , u­ ! 4.17 JH1Y310 ³Leaf {‰M、×ØG&,{¸òO、ÅS、M~,M,ë! M,ë! 0.1 JH1H11 wStem ³Leaf ÓFlower {‰M 、 ×ØG& , {¸òO 、 ã 、 ÅS , {¸=ùÁM".CM CM , ë! 1.17 JH3J17 wStem ³Leaf ÓFlower {‰M 、 ×ØG& , {¸dÞ 、 ".ã=ùåQ , =ù@M".ª M , u­! =ù@M".ÁM , 7 ÞÁM 、 u­! 2.75 JH3J12 wStem ³Leaf ÓFlower {‰M 、 ×ØG& , {¸dÞ 、 ã , @M , ë! =ùCM , 7ސM 、 ë ! 6.3 JH2H31 wStem ÓFlower {‰@M 、 iGG& , {¸dÞ 、 ÅS , =ù@M , 7ÞAÁM , u­! CM , u­! 7.56 JH2H32 wStem ÓFlower {‰CM 、 iGG& , {¸dÞ 、 ÅS , 7ށã , =ù@M , ".CM CM , u­! 3.89 JH1Y410 wStem ³Leaf ÓFlower {‰M 、 iGG& , {¸dÞ , ÅS , Ú@M , ë! =ùÚ@M , 7ސM 、 ë! 0.25 JH2H22 ÓFlower {‰M、×ØG&,{¸dÞ、=ùåQ".ã,Ÿ CM7ސM,ë! CM,ë! 3.33 JH1Y37 ³Leaf ÓFlower {‰AÁM 、 ×ØG& , {¸dÞ 、 =ùåQ".ã , ë! =ùÁ".ûÉ , 7ސ M 、 ë! 1 JH1Y45 ³Leaf ÓFlower {‰M 、 iGG& , {¸dÞ 、 M 、 ÅS , ë! M , ë! 3.16 JH3H16 ÓFlower {‰AÁM、iGG&,{¸dÞ、ÅS,¦MÁMMù,ë! ¦MÁMMù , 7Þ¦ M 、 ë! 8.33 JH1Y210 ³Leaf {‰AÁM、×ØG&,{¸*O、=ùåQ".ã,ë! CM , 7ÞAÁMM 、 ë ! 1.44 JH1Y112 ³Leaf ÓFlower {‰AÁM 、 ×ØG& , {¸*O 、 ÅS 、 ȉæå£ã , ë! CM , ë! 1.33 JH1Y211 ³Leaf {‰M、iGG&,{¸dÞ、ȉæå£ã,M,7ÞÆçM,ë! M,ë! 1.33 JH3H12 ÓFlower wStem {‰M 、 ×ØG& , {¸òO 、 M~ 、 Ú@M , ë! Ú@M , è! 0.33 JH2J21 wStem ³Leaf {‰M 、 ×ØG& , {¸dÞ 、 ã , M , ë! M , ë! 2.33 JH1J44 wStem ÓFlower {‰@M 、 ×ØG& , {¸dÞ 、 ã 、 Ÿ @M 、 7ސM , ë! M , u­! , 6.78 JH1H21 wStem ³Leaf ÓFlower {‰ªM 、 iGG& , {¸dÞ , {¸z#ªM , >ªMjkk´M ß>ªMe´MMù , ì¥ z#M , >jkk´M ß>ªMe´MMù , ë ! 1.75 JH1Y34 ³Leaf {‰@M、×ØG&,{¸dÞ、ã,Ÿ @M7ސM,ë! @M , 7ÞÁM 、 ë ! 4.33 5521 ! " #  !23"
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Fig.1 PhylogenetictreeconstructedwiththeprogramNeighbor-joining(NJ)basedonITSsequences
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!6# ț›¡:wxÁJŸGz{xoGo¶ž|}~x£
W2 òóœôi=õö¦;Ã]
Fig.2 Thepopulationcompositionofendophytefrom犃.狊狋狉犻犮狋狌狊
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Table3 Thediversityindexesoftheendophyticfungiindifferenttissuesof犃.狊狋狉犻犮狋狌狊
Ä×Index
Ä׸3
Indexabbreviation
ÓFlower ³Leaf wStem ¹ÓTotal
Ž4vbÄ×
ShannonWeinerIndex
犎 2.16 1.92 1.78 2.12
c:;Ä×
Simpsondiversityindex
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