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Studies on the Identification of Selaginella heterostachys by Microscopic Observation and Near Infrared Spectra

异穗卷柏的显微与近红外光谱鉴定研究



全 文 :武汉檀物学研究 2006,24(3):250—252
lo1ml 碡 Wulum Botanical Research
异穗卷柏的显微与近红外光谱鉴定研究
万定荣 ,一,江燕2,陈科力。,范晓磊
(1.中南民族大学生命科学学院,武汉 430074;2.湖北省药品检验所,武汉 430064;
3.湖北中医学院,武汉 430061)
摘 要:对两种不同类型的异穗卷柏(Se~ neUa 蹴m咖cJI Baker)药材的外观形态、孢子与茎的显微特征及近红
外光谱特征进行了比较研究。结果表明:两类异穗卷柏的植株性状虽有明显不同,但其孢子形态、茎的解剖特征及
近红外漫反射光谱特征一致。研究结果为异穗卷柏物种分类与药材鉴定提供了依据。
关键词:异穗卷柏;显微鉴定;近红外光谱
中圈分类号:Q949;R282.5 文献标识码:A 文章编号:1000-470X(2006)034)250-03
Studies on the Identification of Selaginela heterostachys by
Microscopic Observation and Near Infrared Spectra
WAN Ding—Rong ,JIANG Yan ,CHEN Ke.Li ,FAN Xiao—Lei
(I.College of & ,South—Cemra/ /orNat/ona/it/es,Wuhan 430074,China;2.Hubei Institutefor
Drug Contro/,Wuhan 430064.China;3.Hubei Colege D,/h~it/ona/CMnese Meal/C/he,Wuhan 430061,China)
Abstract:To establish parameters for identifcation of the medicinal material of two types of Selaginella
heterostachys,several methods,including the morphological,microscopic and near infrared spectroscopic
ones.were used in this study. e two types of S. heterostachys difer obviously in the morphological
characters,but there are few diferences in the spore appearance,histological characters of the stems,
an d the near infrared spe ctra. e results provided basis for classification ofthe species and identifcation
ofthe medicinal materia1.
Key words:SelagineUa heterostachys;Microscopic identifcation;Near infrared spectra
异穗卷柏(Selaginela heterostachys Baker)属卷
柏科(Selaginelaceae)植物。经调查,湖北省产的卷
柏科植物有 l5种,其中 l4种作药用⋯,多具有清热
解毒或清热利湿、抗癌、止血等作用。异穗卷柏全草
则在鄂西民间用于肠炎痢疾、感冒、烧烫伤及外伤出
血等;文献记载其用于蛇咬伤、外伤出血等 。本
种植株在野外有 2个类型:一类是兼有匍匐营养茎
与斜生或直立能育茎(孢子枝)植株,另一类则仅有
直立能育茎,似独立生长的植株 J。二者因生长
状态有明显差异而极易误断为两个种。我们对两种
类型异穗卷柏的大孢子及营养茎与能育茎横切面进
行了比较显微观察,并对二者进行了近红外光谱的
比较研究,以确定物种及药材的鉴定方法。
1 材料、仪器与方法
1.1 材料与仪器
实验材料采自湖北省鹤峰县容美镇、宜昌市夷
陵区雾渡河镇、宜昌市土城车溪及湖北省红安县,均
由作者鉴定为异穗卷柏 Se~zgirtela heterostachys Bak—
er(经中国科学院植物研究所张宪春研究员核实)。
MATRIX—F型傅立叶变换近红外光谱仪 (德 国
Bruker公 司),InGaAs检测 器,固体 光 纤探 头;
Olympus显微镜(日本 Olympus光学工业株式会社)。
1.2方法
植物形态描述 根据 4个产地的植株形态并参
考有关文献进行描述,所修订完善的形态上的内容
以标本实物为依据。
显微观察 两种类型异穗卷柏植株的大孢子形
态用光学显微镜观察;茎的显微特征则取样品茎的
中段部位,分别切成厚度为 8 12 m的横切片在
显微镜下观察,用经校正过的显微测微尺测定不同
组织细胞的大小,依据横切面构造用显微描绘装置
绘制茎的显微简、详图。观察研究时均取用 了不同
产地的样品,以保证记述结果的准确可靠。
收稿13期:2005—10—17,修回13期:2005一l1 I。
基金项 目:国家自然科学基金资助项目(30470193);中南民族大学重点科研项 目(YZZD5004)。
作者简介 :万定荣(1958一 ),男,在职博士生,教授,从事植物药与民族药的资源、品质与应用研究。
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第 3期 万定荣等 :异穗卷柏的显微与近红外光谱鉴定研究
近红外光谱测定 测定方式:光纤漫反射;扫描
次数:32次;分辨率:8 em~;扫描范 围:4 000—
9 000 em~。方法:分别取 2份兼具营养茎与能育
茎的异穗卷柏样品 (宜昌车溪、红安)及 1份仅具
能育茎的样品 (宜昌雾渡河)粉末 (40目)各 1 g,
分别置于载样瓶中,将光纤探头置于药材粉末处,
按上述条件进行扫描,每份样品重复测定5次,求
平均光谱,即得)。
2 结果
2.1 植物形态
兼具营养茎与能育茎的植株 具匍匐营养茎
与直立或斜生的能育茎 (孢子枝),能育茎高 l0—
20 em。较嫩的匍匐营养茎多分枝,有时主茎不明
显,根托断续着生。能育茎 1—2回羽状分枝,侧枝
3—5对。叶二型。腹叶(中叶)不对称,卵形至卵状
披针形,渐尖头或先端具短芒,基部圆形或楔形,边
缘具微齿。背叶(侧叶)不对称,主茎上的较大;狭
卵形或卵状长三角形,外展或下折,先端钝头或急
尖,边缘有微齿或近全缘。孢子叶穗紧密,背腹压扁,
生于小枝末端,长 5—15 nun;孢子叶卵状披针形,顶
端锐尖头,较长,边缘有缘毛或细齿。孢子二型。
国内专著均未记载本种在湖北省有分布(《湖
北省药用植物名录》等虽有载,但其标本经核查系
误定)。近年作者发现湖北鹤峰县、宜昌市夷陵区、
红安县等地有分布。国内还分布于安徽、重庆、福
建、甘肃、广东、广西、贵州、海南、河南、香港、湖南、
江西、四川、台湾、云南、浙江等省区【3】。
仅具能育茎的植株 无匍匐营养茎,仅见直立
能育茎(孢子枝),似独立植株。主茎纤细,略挺直
或稍弯曲、稍扭曲,分枝较短。其余形态特征与上述
一 致。
在湖北省宜昌市夷陵区雾渡河等地发现有分
布,成群生于林荫下。
2.2 大孢子形态
兼具营养茎与能育茎的植株 大孢子近球形。
极面观三角状卵圆形或卵圆形;赤道面观扁圆形或
扁卵圆形、卵圆形。近极面侧有时因可见有一凸尖,
而使孢子略呈扁桃状。大小(极轴长度 ×赤道轴长
度)较悬殊,为 (170—320) m×(190—380) m。
三裂缝挺直突出,长度几达赤道线。孢子表面粗糙
不平,具疣状、瘤状、钝刺状或棒状饰纹,有的孢子表
面有连续或断续的网状纹理。
仅具能育茎的植株 其大孢子形态特征几与
上述情况完全一致,惟其赤道面观卵圆形者略多一
些。经初步观察,同科数种其他植物的大孢子形态
与本种有显著差异。
2.3 茎的解剖
兼具营养茎与能育茎的植株 能育茎 (直径
0.5—1.1 rain)中段横切面(水合氯醛片):横切面呈
不规则多角形或卵圆形,外周显凹凸不平或具有 1
至数个较小而明显的脊状突起。表皮细胞 1列,类
方形,类圆形或圆多角形,直径l0—20 ,排列较
整齐,壁增厚,木质化,外被角质层。皮层为 5—8
列圆多角形、多角形或类圆形的薄壁细胞,直径l5—
80 ,皮层最外侧局部可见 1列厚壁细胞,皮层中
有时可见叶迹维管束;内皮层细胞稍小。其内为一
大型气室,呈长椭圆形、扁圆形、卵圆形或类圆形,前
三者长径410—530 ,短径200—250 ,后者直
径200—300 。气室中央为一椭圆形或椭圆状四
菱形的中柱,长径 110—220 m,短径6o一100 m,
由内皮层分裂出的多数横条(丝状体)将其悬挂于
气室中。横桥由3—4(6)个薄壁细胞组成,细胞呈
细长棒状、香肠状或不规则管状 ,有时可见部分横桥
相互缠结成乱团状。中柱鞘为 1列环状排列的类方
形、多角形薄壁细胞。维管束周韧型;木质部管胞多
呈类 圆形、圆多角形,直径多小 于10 ,壁木化
(图 1)。
营养茎(直径约0.6 rain)横切面:与能育茎横切
面构造 一致。区别仅在茎横 切面直 径较小,约
0.6 rain;气室较小,长径约300 ,短径约 180 m;
中柱较小,长径约 140 m,短径约70 m。
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武 汉 植 物 学 研 究 第 24卷
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1.表皮;2.厚壁细胞;3.皮层;4.内皮层;5.气室;6.横桥;7.中柱鞘;8.韧皮部;9.木质部
1.Epidermis;2.Sclerenchyma;3.Cortex;4.Endodennis;5.Air chamber;6.CIo88-bridge;7.Pericycle;8.Phloem ;9.Xylem
圈 1 异穗卷柏能育茎横切面 (A.简图 ;B.详图)
Fig.1 The transection of& lel heteroaachys’stem (A.Diagram ;B.Detailed drawing)
仅具能育茎的植株 其横切面特征与上述一
致,惟能育茎主茎较纤细,横切面直径仅约0.6 mil。
气室与中柱也略小。
2.4 近红外光谱
2种类型 3个产地的异穗卷柏样品的近红外漫
反射光谱见图2。仔细观察,发现上述 3份样品的
近红外光谱几乎完全一致。而根据我们对同属9种
其它植物样品的近红外光谱的测定结果可知。不同
种的光谱图在不同波数区段有较明显的差异。由此
提示,隐藏在不同类型不同产地的异穗卷柏样品的
光谱信息中的化学本质无明显差异。仅具能育茎的
9000 800C 7500 7000 6500 6000 5500 5000 4500
Wave number(cm )
1.宜昌车溪 ;2.宜昌雾渡河(仅具能育茎);3.红安
1.Yichan8 Chexi;2.Yichan8 Wuduhe (only fertile stem);
3.Hon
圈 2 3个产地的异穗卷柏近红外光谱圈
Fig.2 Near infrared spectra ofSe/ag/ne/a
heterostachy~from three habitats
异穗卷柏在野外易误认为是其它种,但其近红外光
谱的测定结果为其种类鉴定提供了光谱学依据。
3 讨论
本研究表明,异穗卷柏两种不同类型植株的样
品虽在外观性状上具有很大不同,但它们却具有稳
定一致的显微(孢子形态与茎的解剖)特征,这些特
征可作为该药材的鉴定依据。
近红外光谱技术的显著特点是操作分析简便快
捷,不使用化学试剂不污染环境,不损害样品。重现
性高。目前在植物分类鉴定中的应用并不多见。本
研究中对两种不同类型及不同产地的异穗卷柏样品
的近红外光谱测定结果表明,异穗卷柏种内的近红
外光谱具有较好的一致性。说明这种简单快速的技
术方法同样可协助用于解决某些植物或植物药鉴定
中的难点问题。
致谢 :湖北省襄樊市中医医院王兵娥副主任药师对部
分研究工作给予帮助。
参考文献:
[1] 万定荣,陈科力,詹亚华.湖北省卷柏科药用植物调查与研究
[J].中国中药杂志,2005。3o(19):1 507.1 510.
[2] 丁恒山.中国药用孢子植物[M].上海:上海科学技术出版
社,1982.149.
[3] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第 6卷。第
3分册)[M].北京 :科学出版社。2004.91。196.
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