全 文 :作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2012, 38(4): 589−595 http://www.chinacrops.org/zwxb/
ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@chinajournal.net.cn
本研究由国家自然科学基金项目(31071409),国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA100103)和国家重点基础研究发展计划
(973计划)项目(2009CB118300)资助。
* 通讯作者(Corresponding authors): 王长有, E-mail: chywang2004@126.com; 吉万全, E-mail: jiwanquan2003@126.com
第一作者联系方式: E-mail: xueflying@yahoo.cn
Received(收稿日期): 2011-08-08; Accepted(接受日期): 2011-12-19; Published online(网络出版日期): 2012-02-13.
URL: http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1809.S.20120213.1108.021.html
DOI: 10.3724/SP.J.1006.2012.00589
来自野生二粒小麦的抗白粉病基因 PmAS846及其染色体定位和分子
标记分析
薛 飞 1 王长有 1,∗ 张丽华 2 张 宏 1 李 浩 1 王亚娟 1 刘新伦 1
吉万全 1,*
1西北农林科技大学农学院 / 旱区作物逆境生物学国家重点实验室, 陕西杨凌 712100; 2 河南省内乡县种子技术推广站, 河南内乡 474350
摘 要: N9738是经抗性定向选择和农艺性状筛选所培育的抗白粉病普通小麦新种质, 携带来自野生二粒小麦 As846
的抗白粉病基因 PmAS846, 在苗期和成株期高抗白粉菌生理小种 E09 和陕西关中地区流行菌系, 本研究对该种质携
带的抗白粉病基因进行了染色体定位和分子标记分析。对 N9738和高感小麦白粉病的普通小麦品种辉县红杂交的 F1、
F2代分离群体和 F2:3代家系进行白粉病抗性鉴定和遗传分析证实, N9738苗期抗性由 1个显性抗白粉病基因控制, 单
(缺)体分析将该基因定位在小麦 5B染色体上。采用位于 5B染色体的分子标记结合集群分离分析法(BSA法)分析, 筛
选出与 PmAS846连锁的 11个 SSR标记和 2个 EST-STS标记, PmAS846两翼的 SSR标记 Xgwp3191和 Xfcp1与该基
因的遗传距离分别为 7.3 cM和 1.8 cM, EST-STS标记 BF202652和 BF482522与该基因的遗传距离均为 5.1 cM。根据
该基因两翼 SSR标记对中国春 5B染色体缺失系(Bin系)的分析将其定位在 5B染色体长臂 0.75~0.76区域。研究结果
为 PmAS846的分子标记辅助选择和精细定位奠定了基础。
关键词: 白粉病; 野生二粒小麦; 抗病基因; 染色体定位; 分子标记
Chromosome Location and Molecular Mapping of Powdery Mildew Resis-
tance Gene PmAS846 Originated from Wild Emmer (Triticum turgidum var.
dicoccoides)
XUE Fei1, WANG Chang-You1,∗, ZHANG Li-Hua2, ZHANG Hong1, LI Hao1, WANG Ya-Juan1, LIU
Xin-Lun1, and JI Wan-Quan1,∗
1 College of Agronomy, Northwest A&F University / State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Yangling 712100, China; 2 Seed
Technology Extension Station of Neixiang Country in Henan Province, Neixiang 474350, China
Abstract: Powdery mildew, caused by Blumeria graminis f. sp. tritici (Bgt), is one of the most important diseases of wheat
(Triticum aestivum L.) worldwide. Wheat relatives are important donors of resistance genes against this disease in wheat breeding
program. The common wheat line N9738 is highly resistant to Bgt isolate E09 and Shaanxi prevailing races at both seedling and
adult plant stages. The PmAS846 gene in line N9738 was derived from wild emmer (Triticum turgidum var. dicoccoides) acces-
sion As846. Genetic analysis of an F2 population and their F3 families, developed from the cross between N9738 and a susceptible
common wheat cultivar Huixianhong, indicated that N9738 carries one dominant resistance gene. A set of common wheat nulli-
somic (monosomic) lines were used to analyze the chromosomal location of PmAS846. The results revealed that PmAS846 was
located on wheat chromosome 5B. Microsatellite markers on wheat chromosome 5B were used to map the gene using bulked
segregant analysis. Eleven microsatellite markers were used to construct a linkage map for the gene, and two markers, Xgpw3191
and Xfcp1, flanking PmAS846 location at 7.3 and 1.8 cM, respectively. Amplification of 5B chromosome deletion lines of Chinese
Spring with the flanking markers mapped PmAS846 on chromosome 5BL bin 0.75–0.76. Based on expressed sequence tags (ESTs)
information mapped on chromosome 5BL bin 0.75–0.76, we identified EST-derived sequence tagged site (STS) markers
590 作 物 学 报 第 38卷
BF202652 and BF482522 to be closely linked to PmAS846 with genetic distance of 5.1 cM both. These markers can be used in
fine mapping of PmAS846 and marker-assisted selection.
Keywords: Powdery mildew; Wild emmer; Resistance gene; Chromosome location; Molecular markers
小麦白粉病属气传真菌病害, 是由禾本科布氏
白粉菌 Blumeria graminis (DC.) Speer. f. sp. tritici
Marchal引起的世界性小麦病害。由于小麦矮秆品种
的推广、水肥条件的改善以及推广品种中小麦白粉
病抗源单一等因素, 不仅有利于小麦白粉病的发生,
也促进了白粉菌生理小种的变异, 导致品种抗性容
易丧失。培育和推广抗病品种是减少病害损失最经
济、安全、有效的方法, 小麦抗白粉病基因的挖掘
是培育抗病品种、合理利用抗病品种的工作基础。
因此, 寻找新的抗源, 拓宽抗病基因的遗传基础成
为育种工作者的重要目标和首要任务。目前已正式
命名的抗小麦白粉病主效基因 58个(包括复等位基
因 Pm1a–1e、Pm3a–3k、Pm4a–4c、Pm5a–5e、Pm8), 位
于 41个位点上(Pm1–Pm45) [1-6]; 以及一些暂时命名的
抗白粉病基因, 定位于相应的染色体臂上。这些抗病
基因除来自普通小麦本身外, 还有很多来自小麦近缘
种属(http://www.shigen.nig.ac.jp/wheat/komugi/genes/sy-
mbolClassList.jsp)。
野生二粒小麦(Triticum turgidum var. dicoccoide,
AABB, 2n = 28)是普通小麦的亲本之一, 它具有籽
粒大、籽粒蛋白质含量高、抗病抗逆等优良性状, 是
进行普通小麦(T. aestivum L.)遗传改良的重要基因
资源[7-8]。由于它具有与普通小麦相同的 A染色体组
和 B 染色体组, 容易将其携带的有益基因导入普通
小麦中。目前, 已定位和命名的来源于野生二粒小
麦的抗白粉病基因有 Pm16 [9]、Pm26 [10]、Pm30 [11]、
Pm36 [12]、Pm41 [13]和 pm42 [14], 分别定位于小麦
5BS、2BS、5BS、5BL、3BL 和 2BS 染色体上。充
分挖掘和利用野生二粒小麦中的抗病基因, 可以丰
富小麦的抗病基因资源, 实现白粉病抗性基因的多
样化、拓宽白粉病抗性基因遗传基础, 对实现小麦
持久抗性具有重要意义。
分子标记技术已广泛应用于小麦遗传作图、遗
传多样性分析、基因标记、定位、克隆及辅助育种
等研究领域, 如 AFLP、RGA、DArT、SSR、STS和
SNP。国际小麦族 EST 协作网(http://wheat.pw.usda.
gov/genome/)的建立, 促进了小麦 EST 研究的迅速
发展。迄今为止, 已开发了超过 100 万条普通小麦
EST标记, 其中 16 000条 EST被定位于相应的染色
体区段上[15], 其序列已公布在相关网站(http://www.
ncbi.nlm.nih.gov/dbEST/), 同时 EST 数量的不断增
加为小麦 EST-SSR和 EST-STS标记的开发提供了资
源基础。Ma等[5]利用 EST序列开发了位于 Pm45两
侧的 STS标记 Xmag6139和 Xmag6140; Qin等[16]依
据 Pm6基因所在染色体区段与水稻及短柄草的良好
共线性关系, 开发了 29个基于 EST序列的各种类型
标记, 对 Pm6基因实现了精细作图。
普通小麦新种质 N9738来自 N9134与中 4的杂
交后代, 对陕西省关中地区白粉病菌系表现高抗至
免疫, 并且对条锈菌小种条中 32 号和条中 33 号表
现高抗和免疫。其中, N9134 为阿勃 5B 非整倍体/
野生二粒小麦 As846 的后代, 其携带来自野生二粒
小麦 As846的抗白粉病基因 PmAS846[17], 该种质不
仅对陕西省关中地区白粉病菌系表现免疫, 而且对
21 个已知毒性白粉菌小种均表现免疫(数据未发表);
中 4 为普通小麦与中间偃麦草部分双二倍体, 对条
锈病高抗至免疫, 但不抗白粉病。根据 2 个亲本材
料对白粉病的抗性, N9738 的白粉病抗性基因为来
自于野生二粒小麦的 PmAS846, 先前获得的 PmAS-
846 的分子标记距离较远, 而且仅将该基因初步定
位于小麦 5BL染色体臂上[17]。N9738是以 N9134为
白粉病抗源所选育的抗白粉病小麦新种质, 本文利
用常规遗传分析, 单(缺)体定位及分子标记技术研
究该种质携带的来源于野生二粒小麦的抗白粉病
基因 PmAS846, 以期为N9738在小麦育种中的应用
和 PmAS846 的分子标记辅助选择和精细定位奠定
基础。
1 材料与方法
1.1 植物材料和白粉菌系
N9738 及其亲本 N9134 和中 4 用于抗性鉴定;
普通小麦品种阿勃及阿勃的 21 个染色体的单(缺)体
系做母本与N9738的杂交 F2代用于抗病基因的染色
体定位, 其中缺体系与 N9738杂交 F1代套袋自交获
得 F2代, 单体系与 N9738杂交 F1代经花粉母细胞减
数分裂中期 I 细胞学鉴定为单体的植株, 自交套袋
获得 F2代; N9738 与感病普通小麦品种辉县红杂交
F2群体和 F2:3家系用于构建抗白粉病基因的遗传连
锁图; 以上材料由西北农林科技大学农学院染色体
工程实验室提供。普通小麦中国春(Chinese Spring)
第 4期 薛 飞等: 来自野生二粒小麦的抗白粉病基因 PmAS846及其染色体定位和分子标记分析 591
的5B染色体缺失系由日本京都大学(Laboratory of Plant
Genetics, Kyoto University, Kyoto, Japan)的 T. Endo博士
提供, 用于分子标记的染色体 Bin物理定位。
白粉菌生理小种 E09 由中国农业科学院植物保
护研究所段霞瑜研究员惠赠, 对小麦抗白粉病基因
Pm1a、Pm3b、Pm3c、Pm3e、Pm5a、Pm6、Pm7、
Pm8、Pm17和 Pm19具有毒性。陕西省关中白粉菌
菌系由西北农林科技大学植物保护学院提供。
1.2 白粉病抗性鉴定及单缺体定位
采用 E09 对 N9738/辉县红杂交组合的 F2群体,
F2:3家系, N9738及其相关亲本, 阿勃及阿勃的 21个
非整倍体与N9738的杂交 F2群体进行苗期抗白粉病
鉴定, 对每个 F2:3家系至少鉴定 20株幼苗的抗病性,
用于推导 F2单株的抗病基因型。当待鉴定材料幼苗
生长至二叶一心时, 将繁菌盆置于待鉴定幼苗培养
盘的四周, 通过自然传播和人工拂掸等方法进行接
种。待对照品种陕优 225和 Chancellor充分发病时,
按照 0、0;、1、2、3和 4分级标准调查小麦叶片的
反应型, 0~2级为抗病, 3~4级为感病[18]。成株期抗病
性鉴定在西北农林科技大学植保学院白粉病圃进行,
每材料播种 2行, 行长 1 m, 行距 0.25 m, 株距 0.10
m, 试验田四周种感病品种陕优225作为白粉病诱发
行。在苗期, 对感病诱发行接种陕西关中地区白粉
病混合菌系。当对照品种陕优 225 充分发病时, 按
照 0~9 级调查成株期病级, 其中 0~4 级为抗病, 5~9
级为感病[19]。
1.3 分子标记分析
采用 CTAB法[20]提取亲本和 F2群体单株的基因
组 DNA。
根据文献报道[21-22]和 GrainGenes 网站信息(http://
wheat.pw.usda.gov/GG2/index.shtml)合成引物 (北京
奥科公司), 包括位于 5B 染色体上的 gwm、wmc、
barc、gpw等系列引物。根据 F2:3家系的鉴定结果, 从
F2代抗感分离群体中选取 10 株抗病单株和 10 株感
病单株的 DNA, 等量混合建立抗病池和感病池, 用
集群分离分析法(bulked segregant analysis, BSA)筛
选与抗病基因连锁的分子标记。待确定抗病基因所
在染色体位置后, 选取抗病基因所在染色体区域内
的已有 EST 标记(http://wheat.pw.usda.gov/cgi-bin/we-
stsql/map_locus.cgi)进一步筛选与抗病基因连锁的
EST-STS 标记 , 其中 , BF202652 引物序列为 F:
5′-TCAGATCAGCGCAACATTTC-3′和 R: 5′-TCGC
CAGCTCTAATCTTGGT-3′, BF482522 引物序列为
F: 5′-GTTTGCGGGTTTCAAAAGAA-3′和 R: 5′-GA
AATGTTGCGCTGATCTGA-3′。
将筛选出的多态性引物在 F2 群体的单株 DNA
中进行 PCR扩增。扩增反应在 S1000 Thermal Cycler
型 PCR仪上进行, PCR反应体系 10 µL, 含 20 mmol
L−1 Tris-HCl (pH 8.4)、20 mmol L−1 KCl、2 mmol L−1
MgCl2、0.2 mmol L−1 dNTP、0.5 µmol L−1引物、0.4
U Taq DNA聚合酶及 40~100 ng 基因组 DNA。PCR
中所用的酶及相关试剂均购自 TaKaRa公司(大连)。
扩增程序为 94℃变性 3 min; 94℃变性 45 s, 50~65℃
(根据不同引物的退火温度)复性 45 s, 72℃延伸 1
min, 35个循环; 72℃延伸 10 min。扩增产物经 8%非
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳, 硝酸银染色。
1.4 数据分析
用 SAS8.0 作卡方适合性检测, 用 JoinMap4.0
软件计算抗白粉病基因与分子标记之间的距离, 用
MapDraw V2.1绘制连锁图[23]。
2 结果与分析
2.1 N9738的白粉病抗性鉴定
N9738及其亲本 N9134苗期对 E09和成株期对
陕西关中流行白粉菌混合菌系均表现高抗至免疫; 中
4 和辉县红在苗期和成株期均表现高感(图 1 和表 1),
表明 N9738的抗白粉病基因可能来源于亲本 N9134。
图 1 N9738和辉县红在苗期和成株期的反应型
Fig. 1 Infection type of N9738 and Huixianhong at seedling
and adult stages
A1: N9738苗期; A2: 辉县红苗期; B1: N9738成株期;
B2: 辉县红成株期。
A1: N9738 at seeding stage; A2: Huixianhong at seeding stage;
B1: N9738 at adult stage; B2: Huixianhong at adult stage.
2.2 N9738 抗白粉病基因的遗传分析及单(缺)体
定位
根据白粉菌 E09 接种苗期 N9738、辉县红和
N9738/辉县红组合 F2群体的鉴定结果, N9738/辉县
红 F2群体抗病植株和感病植株的分离比例符合 3∶1
的期望比例(表 1), 表明 N9738对 E09的苗期抗性由
592 作 物 学 报 第 38卷
表 1 N9738与辉县红杂交各世代苗期对白粉菌小种 E09的抗性分离
Table 1 Segregation analysis of different generations of the cross between N9738 and Huixianhong for reaction to
Bgt isolate E09 at seedling stage
侵染型 Infection type 亲本及组合
Parents and cross
世代
Generation 0+0; 1 2 3 4
总株数
No. of plants
期望比例
Expected ratio
χ2
N9134 15 15
中 4 Zhong 4 15 15
N9738 P1 13 2 15
辉县红 Huixianhong P2 15 15
N9738/辉县红 N9738/Huixianhong F2 94 (R) 35 (S) 129 3:1 0.313
N9738/辉县红 N9738/Huixianhong F2:3 38 (R) + 56 (H) 35 (S) 129 1:2:1 2.379
χ20.05=3.841, df =1; χ20.05=5.991, df =2.
1对显性基因控制。
阿勃及阿勃的 21个非整倍体与 N9738 的杂交
F2代白粉病抗性鉴定结果表明, 阿勃与 N9738 组合
的 F2代抗病与感病植株分离比例经 χ2测验符合期望
比例 3∶1; 在 21个非整倍体组合中, 20个组合的 F2
代抗病与感病植株分离比例符合期望比例 3∶1, 只
有 5B 单体系与 N9738 杂交组合 F2代的抗病植株和
感病植株比例极显著偏离 3∶1 (表 2)。这一结果说
明 N9738 的抗白粉病显性单基因位于小麦 5B 染色
体上 , 与其亲本 N9134 携带的抗白粉病基因
PmAS846的染色体定位结果相吻合[17]。
2.3 N9738抗白粉病基因的分子标记及其缺失系
定位
利用集群分离分析法, 在 N9738/辉县红 F2构建
的抗感池间筛选多态性 SSR引物, 经 F2抗感单株验
证发现 11 个 SSR 标记与抗病基因连锁 , 如标记
Xfcp1 (图 2-A)。标记 Xgpw3191和 Xfcp1位于抗白粉
病基因 PmAS846的两侧, 与该基因的遗传距离分别
为 7.3 cM和 1.8 cM。根据这 2个标记对中国春及其
5B 染色体缺失系的分析结果(图 3), 将 2个标记和
PmAS846物理定位于 5B染色体长臂末端 5BL-0.75~
0.76区域。
为了寻找与抗病基因连锁更紧密的标记, 又筛
选了位于 5BL-14染色体区间的EST-STS标记, 发现
2个 EST-STS标记 BF202652和 BF482522与抗病基
因连锁(图 2-B), 遗传距离 5.1 cM, 并将其加到连锁
图谱中(图 4)。
3 讨论
N9738 对陕西关中地区白粉病菌表现免疫至高
抗, 对当前条锈病优势小种(条中 31 号、条中 32 号
和条中 33号)均表现高抗至免疫, N9738是选育抗白
粉病及条锈病小麦新品种的重要种质资源和基因资
源 , 其抗白粉病基因来自 N9134, 与 SSR 标记
Xgwm67 连锁[17]。而 N9134 的抗性基因为来自野生
二粒小麦 As846的基因 PmAS846, 因此, N9738携带
的抗白粉病基因为 PmAS846。N9134自 1996年育成
以来, 历经 15 年仍然保持良好的抗性, 对陕西关中
地区流行小种一直保持高抗至免疫的抗性水平, 并
且对已知毒性的 21 个白粉菌小种表现为免疫(数据
未发表), 并以该抗源育成多个抗白粉病或兼抗条锈
病小麦新品系。N9738不仅遗传了 N9134 优良的白
粉病抗性, 而且抗条锈病, 并改良了其亲本 N9134
褐颖、籽粒粉质等不利性状, 可以作为抗白粉病基
因 PmAS846的更好的载体材料应用于小麦育种中。
自 Sears 等[24]1954 年从普通小麦品种中国春中
获得了全套的单体系以来, 许多单体、缺体、缺体-
四体系和端体系以及缺失系先后育成, 用于 Pm 基
因的染色体定位, 为小麦抗白粉病基因染色体定位
奠定了基础。采用非整倍体定位的抗白粉病基因有
Pm32[25]、Pm29[26]、Pm28[27]和 Pm5e[28]等。随着分
子标记技术的发展及广泛应用, 非整倍体分析方法
已经较少用于抗病基因的染色体定位, 然而该方法
可以大大降低多态性引物筛选的工作量 , 能够快
速、准确地找到连锁标记。本研究将非整倍体定位
和分子标记相结合, 有效地发现了与 PmAS846连锁
的分子标记 13个。
本研究将抗白粉基因 PmAS846 定位于 5B 染色
体长臂 Bin 5BL-0.75~0.76 区域, 该区域属于 5B 染
色体重组交换热点区和基因富集区[29-30]。小麦 5BL
染色体臂与水稻第 9 染色体及短柄草第 4 染色体具
有较好的同源关系[31-32], 为从已知基因组序列植物
短柄草的基因推测小麦同源基因的位置和功能提供
了线索, 也为 PmAS846基因的标记开发和克隆提供
了一个快捷的途径。
第 4期 薛 飞等: 来自野生二粒小麦的抗白粉病基因 PmAS846及其染色体定位和分子标记分析 593
表 2 N9738与感病普通小麦阿勃非整倍体杂交的 F2代苗期对白粉病小种 E09的抗性鉴定
Table 2 Segregation for seedling reaction to Bgt isolate E09 in progenies of monosomic F1 plant from crosses of Abbondanza (Abb)
and 21 Abb monosomics (M) or nullisomic (N) lines with N9738
组合
Combination
鉴定株数
No. of observed plants
抗病株数
No. of resistant plants
感病株数
No. of susceptible plants
χ2 P
1AM/N9738 118 88 30 0.011 0.915
1BN/N9738 164 125 39 0.130 0.718
1DN/N9738 216 155 61 1.210 0.271
2AN/N9738 194 145 49 0.007 0.934
2BM/N9738 247 175 72 2.269 0.132
2DN/N9738 210 154 56 0.311 0.577
3AM/N9738 106 79 27 0.013 0.911
3BM/N9738 131 96 35 0.206 0.650
3DN/N9738 172 121 51 1.985 0.159
4AN/N9738 194 146 48 0.007 0.934
4BM/N9738 142 105 37 0.085 0.771
4DN/N9738 218 163 55 0.006 0.938
5AM/N9738 140 103 37 0.152 0.696
5BM/N9738 211 187 24 20.893** 0.000
5DM/N9738 153 114 39 0.020 0.889
6AN/N9738 262 187 75 1.837 0.175
6BN/N9738 265 197 68 0.062 0.804
6DN/N9738 224 157 67 2.881 0.090
7AN/N9738 233 174 59 0.013 0.910
7BN/N9738 184 139 45 0.029 0.865
7DM/N9738 119 85 34 0.810 0.368
Abb/N9738 162 130 32 2.379 0.123
Total (excluding 5B) 3854 2838 1016 3.814 0.051
χ20.05=3.841, χ20.01=6.635, df =1. **Significant at the 0.01 probability level.
图 2 SSR标记 Xfcp1 (A)和 EST-STS标记 BF482522(B)在 N9738/辉县红 F2群体抗、感单株上的 PCR扩增结果
Fig. 2 Polymorphic DNA fragments detected by SSR marker Xfcp1 (A) and EST-STS marker BF4825222 (B) in N9738/Huixianhong
F2 population
M: D2000; 1: N9738; 2: 辉县红; 3: 抗池; 4: 感池; 5~10: 纯合感病单株; 11~16: 杂合抗病单株; 17~22: 纯合抗病单株。箭头示多态性片段。
M: D2000; 1: N9738; 2: Huixianhong; 3: resistant bulk; 4: susceptible bulk; 5–10: homozygous susceptible plants; 11–16: heterozygous
resistant plants; 17–22: homozygous resistant plants; Arrows indicate the polymorphic amplification products.
594 作 物 学 报 第 38卷
图 3 SSR引物 Xgpw3191(A)和 Xfcp1(B)在中国春及其 5B染色
体缺失系 DNA上扩增结果
Fig. 3 Amplification pattern of SSR marker Xgpw3191 (A) and
Xfcp1 (B) in Chinese Spring and its 5B chromosome deletion lines
M: 100 bp ladder; CS: Chinese Spring; 1–6: CS deletion lines
5BL-13 (FL = 0.82), 5BL-09 (FL = 0.76), 5BL-11(FL = 0.59),
5BL-14 (FL = 0.75), 5BL-16 (FL = 0.79), and 5BS-04 (FL = 0.43),
FL: fraction length.
图 4 N9738抗白粉病基因 PmAS846分子标记连锁图谱(A)和染
色体物理图谱(B)
Fig. 4 Linkage (A) and physical bin (B) map of powdery mil-
dew resistance gene PmAS846 in N9738
A图的左侧数据表示两标记之间的遗传距离(cM); B图的右侧标
注为片段长度。
Kosambi map distances (cM) are shown on the left side of map A.
Fragment lengths are shown on the right of map B.
定位于该区域的抗白粉病基因还有 Pm36[12]和
Ml3D232[33], Pm36来自野生二粒小麦 MG29896, 该
基因定位于 5B染色体 Bin 5BL6-0.29~0.76, 并已导
入硬粒小麦 5BIL-29 和 5BIL-42 中, PmAS846 与
Pm36 都位于标记 Xwmc75 之上, 遗传距离分别为
14.8 cM和 10.0 cM; Ml3D232同样来自野生二粒小
麦(I222), 并已导入普通小麦 3D232, 定位于 5B 染
色体 Bin 0.59~0.76, 并找到 8 个 EST-STS 标记与
Ml3D232 共分离, 其中 EST CJ683537 具有 NBS-
LRR 结构, 为候选抗病基因, PmAS846 与 Ml3D232
都位于引物 Xwmc75和 Xwmc415之间。仅从基因所
定位的染色体 Bin 和遗传连锁图 , 目前还不能将
PmAs846 与 Pm36 或 Ml3D232 区分开, 有待进一步
通过等位性测验来确定它们是等位基因、紧密连锁
还是同一基因。
4 结论
普通小麦新种质 N9738携带 1个来源于野生二
粒小麦 As846 的显性抗白粉病基因 PmAS846, 该基
因位于 5B 染色体 Bin 0.75~0.76 区间。获得了与
PmAS846连锁的 11个 SSR标记和 2个 EST-STS标
记, 构建了分子标记连锁图谱, 为该基因的分子标
记辅助选择和精细定位奠定了基础。
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