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Genetic Diversity of Peanut Landraces in Guizhou Province

贵州省花生地方品种的遗传多样性



全 文 :作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2012, 38(8): 1387−1396 http://www.chinacrops.org/zwxb/
ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@chinajournal.net.cn

本研究由国家科技部农业科技成果转化项目(2009GB2F200334), 国家现代农业产业体系建设项目(CARS-14-贵州综合试验站), 贵州
省农业科技支撑项目(黔科合NY字[2011]3015), 贵州省农业攻关项目(黔科合NY字[2009]3004), 贵州省创新能力建设项目(黔科合院
所创新[2010]4002)和贵州省农科院专项资金项目(黔农科院院专项[2009]044号)资助。
∗ 通讯作者(Corresponding authors): 阚建全, E-mail: ganjq1965@163.com, Tel: 023-65250375; 李超, E-mail: gzlichao@126.com, Tel:
0851-3762995
第一作者联系方式: E-mail: linmao@163.com
Received(收稿日期): 2011-12-16; Accepted(接受日期): 2012-04-15; Published online(网络出版日期): 2012-05-11.
URL: http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1809.S.20120511.1812.027.html
DOI: 10.3724/SP.J.1006.2012.01387
贵州省花生地方品种的遗传多样性
林 茂 1,2 李正强 2 郑治洪 2 吕建伟 2 马天进 2 李 超 3,* 阚健全 1,*
1西南大学食品科学学院, 重庆 400716; 2贵州省农作物品种资源研究所, 贵州贵阳 550006; 3贵州省油料研究所, 贵州贵阳 550006
摘 要: 为进一步了解贵州花生地方品种的遗传多样性, 合理、高效利用花生资源, 用 50对 SSR引物评价了贵州不
同地理来源的 68份花生地方品种, 结果多态性较好的 41对引物共扩增出 79个等位基因, 平均每个引物 1.93个; 多
态性信息量(PIC)变幅为 0.045 (PM43)~0.951 (PM169); Shannon信息指数变幅为 0.2518 (PM79)~0.6926 (PM188), 平均
0.5268; Nei遗传多样性指数变幅为 0.1699 (PM79)~0.4995 (PM188), 平均 0.3556。采用类平均法对欧氏距离聚类分析
表明, 在遗传距离为 0.94时将 68个花生地方品种分成 2个大类, 同一地理来源、同一粒型的地方品种的亲缘关系并
不是最近的, 表明地方品种间亲缘关系与地理来源关系不大。说明贵州花生地方品种具有丰富遗传多样性。
关键词: 贵州地方品种; 花生; 遗传多样性
Genetic Diversity of Peanut Landraces in Guizhou Province
LIN Mao1,2, LI Zheng-Qiang2, ZHENG Zhi-Hong2, LÜ Jian-Wei2, MA Tian-Jin2, LI Chao3,*, and KAN
Jian-Quan1,*
1 College of Food Scienc, Southwest University, Chongqing 400716, China; 2 Institute of Crops Germplasm Resources of Guizhou Province, Guiyang
550006, China; 3 Institute of Oil Crops of Guizhou Province, Guiyang 550006, China
Abstract: In order to assess the genetic diversity of peanut in Guizhou province and provide a theoretical basis for breeding, 68
accessions of peanut landraces collected from Guizhou province were evaluated by 50 SSR markers. Seventy-nine alleles were
amplified by forty-one polymorphic SSR primer pairs. The average number of alleles per locus was 1.93 with a range from 0.045
to 0.951. Total Shannon information index per locus varied widely from 0.2518 (PM79) to 0.6826 (PM188) with an average value
of 0.5268; total Nei’s genetic diversity index per locus varied widely between 0.1699 (PM79) and 0.4995 (PM188) with an aver-
age value of 0.3556. Cluster analysis with UPGMA showed that the landraces could be divided into two groups and the genetic
relationship among materials with similar seed sizes was not in accord with their geographical origins. The peanut landrace in
Guizhou showed higher genetic diversity.
Keywords: Guizhou landrace; Peanut; Genetic diversity
花生(Arachis hypogaea L.)是全球重要的油料及
经济作物, 是中国为数不多的具有国际市场竞争力
的纯出口优势农产品, 在中国农业发展和出口创汇
中均居重要地位。我国花生的种植范围较广[1], 西起
新疆喀什 , 东至黑龙江密山 , 南起海南榆林 , 北达
黑龙江爱辉。在贵州花生有 300年的种植历史, 但
是种植品种单一 , 如“兴义扯花生”成为 20 世纪 60
年代到 90年代中期的主导品种[2]。从 20世纪 90年
代中期开始, 贵州先后从国内花生科研单位引进品
种资源 152份, 同时从贵州省 66个县征集到花生地
方资源 278份, 基本掌握了全省花生资源分布[2]。国
内外研究者曾用 RAPD[3]、SSR[4-8]、AFLP[9-10]等分
子标记对花生种质资源遗传多样性广泛研究。陈本
银等[11]对 84 份野生花生种质的聚类结果与花生属
1388 作 物 学 报 第 38卷

的区组分类基本一致。姜慧芳等[12-15]利用 SSR技术
对我国花生小核心种质和 ICRISAT 资源的分析表明,
多粒型花生的遗传多样性大, 中国地方品种与育成
品种各具有特殊带型及各自独特的遗传特性。陈静
等[16]和王丽丽等 [17]分别对山东省花生区试的 45份
品种和山东省推广面积较大的 28个不同粒型的花
生的遗传多样性分析表明 , 45份品种间的遗传相似
系数介于 0.311~1.000之间, 大粒型品种的遗传多样
性比小粒型丰富。Krishna等[18]用 18对 SSR引物对
48个不同品种花生检测证明, 品种间具有非常丰富
的遗传多样性; Ferguson 等[19]对 3 个不同地理来源
的 6 个花生变种分析显示, 作物变种间遗传多样性
小, 与非洲和亚洲品种相比, 南美地方品种具有较高
的遗传多样性。贵州省拥有丰富的花生不同地方品种
资源, 了解这些品种遗传多样性及其亲缘关系, 对种
质资源收集、保存、遗传多样性评价及新品种的选育
起着重要作用。本研究利用 SSR 分子标记, 结合
Shannon信息指数和 Nei基因多样性指数, 对 68份贵
州花生不同地方品种进行遗传多样性分析, 旨在为贵
州花生地方品种的合理、高效利用和花生新品种的选
育提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
68 份冷库保存的材料, 由贵州省农作物品种资
源研究所提供, 分别收集于贵州省罗甸县、务川县、
兴义市等 25 个县(市), 每 2 年繁殖更新一次。其编
号、名称、来源及类型见表 1。
1.2 基因组 DNA提取
取花生种子 1.0 g左右, 去皮后加液氮研磨, 采
用“天根快速植物 DNA 提取试剂盒”提取总基因组
DNA, 并以 4.0 μL RNA酶纯化DNA, 用无水乙醇洗
涤, DNA样品经风干后溶于 200.0 μL TE缓冲液, 保
存在–20℃冰箱备用。

表 1 68 份贵州供试花生地方品种、类型及来源
Table 1 Landrace type and origin of 68 peanuts from Guizhou province
编号
Code
名称
Landrace
粒型
Seed size
地理来源
Origin
1 边阳花生-5 Bianyang huasheng-5 中粒 Middle 罗甸县 Luoian
2 马山花生-1 Mashang huasheng-1 大粒 Large 湄潭县 Meitan
3 松桃花生-1 Songtao huasheng-1 大粒 Large 松桃县 Songtao
4 务川花生-1 Wuchuan huasheng-1 中粒 Middle 务川县 Wuchuan
5 凹子花生-2 Aozi huasheng-2 大粒 Large 兴义市 Xingyi
6 印江花生 Yinjiang huasheng 中粒 Middle 印江县 Yinjiang
7 水桶花生 Shuitong huasheng 大粒 Large 德江县 Dejiang
8 龙吟花生-3 Longyin huasheng-3 小粒 Small 普安县 Pu’an
9 茂井花生 Maojing huasheng 中粒 Middle 罗甸县 Luodian
10 新寨花生 Xinzhai huasheng 大粒 Large 长顺县 Changshun
11 90-38-2 小粒 Small 贵阳市 Guiyang
12 黔花生 4号 Qian huasheng 4 中粒 Middle 贵阳市 Guiyang
13 坡妹花生-2 Pomei huasheng-2 大粒 Large 册亨县 Ceheng
14 沉渡花生-1 Chendu huasheng-1 大粒 Large 册亨县 Ceheng
15 边阳花生-2 Bianyang huasheng-2 小粒 Small 罗甸县 Luodian
16 边阳花生-3 Bianyang huasheng-3 小粒 Small 罗甸县 Luodian
17 边阳花生-1 Bianyang huasheng-1 中粒 Middle 罗甸县 Luodian
18 务川花生-2 Wuchuan huasheng-2 小粒 Small 务川县 Wuchuan
19 沿河花生 Yanhe huasheng 中粒 Middle 沿河县 Yanhe
20 乐平花生 Leping huasheng 中粒 Middle 平坝县 Pingba
21 浦枣花生 Puzao huasheng 大粒 Large 绥阳县 Suiyang
22 都匀花生 Duyun huasheng 中粒 Middle 都匀市 Duyun
23 碧痕花生 Bihen huasheng 中粒 Middle 晴隆县 Qinglong
24 龙吟花生-1 Longyin huasheng-1 中粒 Middle 普安县 Pu’an
25 交台花生 Jiaotai huasheng 大粒 Large 湄潭县 Meitan
第 8期 林 茂等: 贵州省花生地方品种的遗传多样性 1389


(续表 1)
编号
Code
名称
Landrace
粒型
Seed size
地理来源
Origin
26 松坎花生 Songkan huasheng 小粒 Small 桐梓县 Tongzi
27 沉渡花生-2 Chendu huasheng-2 小粒 Small 册亨县 Ceheng
28 黎平花生-2 Liping huasheng-2 大粒 Large 黎平县 Liping
29 发耳花生-1 Fa’er huasheng-1 大粒 Large 六盘水 Liupanshui
30 德江花生 Dejiang huasheng 中粒 Middle 德江县 Dejiang
31 兴隆花生 Xinglong huasheng 大粒 Large 湄潭县 Meitan
32 镇宁花生 Zhenning huasheng 小粒 Small 镇宁县 Zhenning
33 谢桥花生 Xieqiao huasheng 中粒 Middle 铜仁市 Tongren
34 从江花生-1 Congjiang huasheng-1 中粒 Middle 从江县 Congjiang
35 兴义花生-2 Xingyi huasheng-2 小粒 Small 兴义市 Xingyi
36 遵义花生 Zunyi huasheng 大粒 Large 遵义县 Zunyi
37 大平花生 Daping huasheng 大粒 Large 普安县 Pu’an
38 扁担花生 Biandan huasheng 大粒 Large 镇宁县 Zhenning
39 罗甸花生 Luodian huasheng 大粒 Large 罗甸县 Luodian
40 坝黄花生 Bahuang huasheng 中粒 Middle 铜仁市 Tongren
41 窝沿花生 Woyan huasheng 中粒 Middle 普安县 Pu’an
42 油果花生 Youguo huasheng 小粒 Small 江口县 Jiangkou
43 兴义花生-1 Xingyi huasheng-1 大粒 Large 兴义市 Xingyi
44 龙吟花生-2 Longyin huasheng-2 大粒 Large 普安县 Pu’an
45 90-38-1 大粒 Large 贵阳市 Guiyang
46 黎平花生-3 Liping huasheng-3 大粒 Large 黎平县 Liping
47 保冲花生 Baochong huasheng 中粒 Middle 普安县 Pu’an
48 三合花生 Sanhe huasheng 小粒 Small 遵义县 Zunyi
49 发耳花生-2 Fa’er huasheng-2 中粒 Middle 六盘水 Liupanshui
50 松桃花生-2 Songtao huasheng-2 小粒 Small 松桃县 Songtao
51 花秋花生 Huaqiu huasheng 大粒 Large 桐梓县 Tongzi
52 罐子窑花生-1 Guanziyao huasheng-1 大粒 Large 普安县 Pu’an
53 罐子窑花生-2 Guanziyao huasheng-2 小粒 Small 普安县 Pu’an
54 丁旗花生 Dingqi huasheng 大粒 Large 镇宁县 Zhenning
55 黎平花生-1 Liping huasheng-1 中粒 Middle 黎平县 Liping
56 黄场花生-1 Huangchang huasheng-1 小粒 Small 绥阳县 Suiyang
57 普定花生 Puding huasheng 大粒 Large 普安县 Pu’an
58 坡妹花生-1 Pomei huasheng-1 大粒 Large 册亨县 Ceheng
59 从江花生-2 Congjiang huasheng-2 中粒 Middle 从江县 Congjiang
60 边阳花生-4 Bianyang huasheng-4 中粒 Middle 罗甸县 Luodian
61 凹子花生 Aozi huasheng-1 大粒 Large 普安县 Pu’an
62 乌纱花生 Wusha huasheng 大粒 Large 兴义市 Xingyi
63 十字花生 Shizi huasheng 大粒 Large 平坝县 Pingba
64 高桥花生 Gaoqiao huasheng 中粒 Middle 桐梓县 Tongzi
65 绥阳花生 Suiyang huasheng 小粒 Small 绥阳县 Suiyang
66 团溪花生 Tuanxi huasheng 大粒 Large 遵义县 Zunyi
67 贵阳红皮花生 Guiyanghongpi huasheng 中粒 Middle 贵阳市 Guiyang
68 荛明花生 Raoming huasheng 中粒 Middle 思南县 Sinan

1390 作 物 学 报 第 38卷

表 2 SSR 引物编号及序列
Table 2 Serial number of SSR primers
引物编号
Primer code
正向引物
Forward (5′–3′)
反向引物
Reverse (5′–3′)
GC25 GGCAGGGGAATAAAACTACTAACT TTTTCCTTCCTTCTCCTTTGTC
GC27 GAAGGACCCCATCTATTCAAA TCCGATTTCTCTCTCTCTCTCTC
GC31 GGTTGGGTTGAGAACAAGG ACCCTCACCACTAACTCCATTA
GC43 ACGACACCCTGAAATCAAGTTT CCGAAGGCACCAAAAAGTAT
GC47 GCAATTTGCACATTATCCGA CATGTTCGGTTTCAAGTCTCAA
GC52 GAAGAAGAAGTCACTGCGGC AAGCTAGTTTCTGATTAAAGCACCA
GC53 GATCCCAAGTCTCCAGAGGA AACAACAAGGAGGCAGAGGA
GC56 GATCTTTCCGCCATTTTCTC GGTGAATGACAGATGCTCCA
GC59 CTCCCTCGCTTCCTCTTTCT ACGCATTAACCACACACCAA
GC61 GATCCAAAATCTCGCCTTGA GCTGCTCTGCACAACAAGAA
GC63 TGCTGTGAGAGAAATGGCAG GCGCATTCTTCGATTAAAGG
GC68 CTCTCCGCCATCCATGTAAT ATGGTGAGCTCGACGCTAGT
GC87 TCGGTTTGGGAGACACTCTT TTGTAAGCAGACGCCACATC
GC88 CTTTCTTCCCCCTTGAACCT GATCAAGTGAAAATGTTAGTATAAG
GC9 CTCGCTATACTAGGTTTTGGGTGT TGGTTTGCCTTTCTAGCCATTA
GC94 TGAAAGATAGGTTTCGGTGGA CAAACCGAAGGAGGAACTTG
PM155 TGACCTCAATTTTGGGGAAG GCCACTATTCATCGCGGTA
PM169 CCGCGTTGTTAAACCAGAAC ATGGAGGATGTGAGTGGGAA
PM171 CATGTCTCCATGAGCATTTCA TGGATGTGGACAGCATATCG
PM183 TGAGTTTCCCCAAAAGGAGA CAACAACAATACGGCCAACA
PM195 CATGCCATCATCACAACACA GGAGGAAGCAATGGTTTCAG
PM205 TTTGTTATGCTCACACCCCA AAAAATGAAGCAATATTTTGTTGTTAG
PM217 TGTTGCCCACTGTTCTAATCA TCAAATGGCATAGTCTCCCC
PM43 TCTGGTTACTTCTGCTTTTGTTTC CCCTTCTTTTTCAAAATCCTCA
PM79 TTCACCCGTACAAACCAGTG CCTCGGCAGATCTGGAGTAA
PM85 TTTGTGTTTAAGAAGGGGTGC GCGGTCCAACATCCTTTTT
PM3 GAAAGAAATTATACACTCCAATTATGC CGGCATGACAGCTCTATGTT
PM5 TGTGAAACCAGATCACTTTCATT TGATAGTTGATATTGAGGAAAATGG
PM15 CCTTTTCTAACACATTCACACATGA GGCTCCCTTCGATGATGAC
PM31 TTCGGCATGACAGCTCTAAG GAAAGAAATTATACACTCCAATTATGC
PM36 ACTCGCCATAGCCAACAAAC CATTCCCACAACTCCCACAT
PM37 GGTGGTGACTGTGGTGGTTT TTCTATCTCTCTCCCTCTCTCTCTC
PM41 GCAAATCATAACCCGATCCA CTCTCTTTCTTGCTTCTTTGGTG
PM42 ACGGGCCAAGTGAAGTGAT TCTTGCTTCTTTGGTGATTAGC
PM45 TGAGTTGTGACGGCTTGTGT GATGCATGTTTAGCACACTTGA
PM50 CAATTCATGATAGTATTTTATTGGACA CTTTCTCCTCCCCAATTTGA
PM65 GGACGTCTGGCTGCTAGAGA TCGGCATCAAAACAGTGAGA
PM73 GGGACTCGGAACAGTGTTTATC AGTGTTGGGTGTGAAAGTGG
PM 106 TGCATTGTGCTTGAACTTCC AGCAAGCAGAGAGCAAAGAGA
PM136 CTTCTTCCCCGTAGGGTAGC AGCACCCATTGTTACTGCTG
PM137 AACCAATTCAACAAACCCAGT GAAGATGGATGAAAACGGATG
PM145 GCTGTAATTAGGTCATTCCACA CAACGGTTGGATCGATGA
PM179 TGAGTTGTGACGGCTTGTGT CTGATGCATGTTTAGCACACTT
PM181 GATGTCCATCGTGGTCACTG CGATCTTTCCTCACACAGCA
PM183 TTCTAATGAAAACCGACAAGTTT CGTGCCAATAGAGTTTTATACGG
PM188 GGGCTTCACTGCTTTTGATT TGCGACTTCTGAGAGGACAA
PM204 TGGGCCTAAACCCAACCTAT CCACAAACAGTGCAGCAATC
PM213 CCCTCTCGTTGAATCACGTC TTGATCAACCTTTGCCTTACG
PM216 GACCTTATGCATTGATGTTCTTG CCCATTTTCCCACTTTTTCA
PM225 CTCTCTCCCCTCGGTTCTCT TTCCCCAATACCCAGCAATA
第 8期 林 茂等: 贵州省花生地方品种的遗传多样性 1391



1.3 SSR标记及分析
按唐荣华等[20]和张建成等[21]文献选择花生 SSR
引物, 并由上海生物工程公司合成(表 2)。PCR反应
体系 21.0 μL; 含 7.5 μL ddH2O, 1.2 μL 10×buffer (含
Mg2+), 0.2 μL dNTPs (10 mmol L–1), 正、反向 SSR
引物(50 ng μL–1)各 0.5 μL, 0.10 μL Taq酶(5 U μL–1),
1.0 μL DNA 模板(50~100 ng μL–1), 10.0 μL矿物油。
反应程序为 94℃ 5 min; 94℃ 5 s, 55℃ 45 s, 72℃
1 min; 35个循环, 72℃ 10 min, 最后 4℃保温。扩增
产物经 10%聚丙烯酰胺凝胶电泳(额定功率 350 W,
电泳时间 45 min)及银染后拍照存档。
1.4 数据分析
胶片以人工读带, 在同一位点上清晰的条带记
为 1, 无条带记为 0, 不易分辨或空缺记为缺失, 建
立 0 和 1 的数据阵, 分析不同引物的多态性百分比
(多态性谱带数/总谱带数×100%)、通过 POPGENE
(version 1.32)软件计算 Shannon 信息指数和 Nei基
因多样性指数(又称为 Nei遗传多样性指数[22])。
Shannon信息指数: p 1 ln
k
i ii
I P P== − Σ
Nei遗传多样性指数: 21 iH X= −Σ
式中, k为 SSR条带数, Pi为第 i条带在所有材料中出
现的频率, Ip为某引物的种群 SSR分化值; Xi为任一引
物组合第 i个基因位点在所有供试材料中出现的频率。
利用 DPS Version 7.05软件计算供试材料的遗传距离,
采用类平均法(unweighted pair group method with ari-
thmetic average, UPGMA)对欧氏距离进行聚类分析。
2 结果与分析
2.1 68个地方品种的多态性分析
从 50对 SSR引物中筛选出 41对引物, 这些引
物在 68个花生品种之间多态性、重复性均较好, 其
多态性百分率为 82.00%。41对 SSR引物在 68份地
方品种中共扩增出 79 个等位基因(图 1 和表 3)。每
个引物扩增出 1~4 个等位位点 , 平均每个引物为
1.93个, 其中以 GC63的等位变异数最多, 为 4个。
41对 SSR引物在不同类型品种间的多态性信息量
(PIC), 变幅为 0.045 (PM43)~0.951 (PM169), 平均
为 0.641。Shannon信息指数变幅为 0.2518 (PM79)~
0.6926 (PM188), 平均 0.5268; Ne遗传多样性指数变
幅为 0.1699 (PM79)~0.4995 (PM188), 平均 0.3556,
结果表明, 引物 PM79 的检测效果较差, 而 PM188
的检测效果较好。
2.2 不同粒型花生的遗传多样性
将供试的 68 个花生品种按照籽粒大小分成大
中小 3 种籽粒类型, 其中大粒型、中粒型和小粒型
分别为 29、24 和 15 个, 对这 3 种类型的花生进行
遗传多样性分析(表 4), 结果发现大粒型花生品种的
Shannon 信息指数和 Nei 基因多样性指数高于中粒
型和小粒型品种, 表明大粒型花生品种的遗传多样
性比中粒和小粒型花生品种丰富 , 但是差异不显
著。在 68 个花生品种中 , 其 Shannon 信息指数和
Nei 基因多样性指数分别为 0.5056 和 0.3387, 表明
贵州花生不同地方品种遗传多样性较为丰富。

图 1 引物 PM137 在部分花生种质资源中的扩增
Fig. 1 Amplified bands using primer PM137 in part of materials

2.3 地方品种间的亲缘关系
采用类平均法对欧氏距离聚类, 建立树状聚类
图(图 2)。由图 2 可知, 在遗传距离为 0.94 时可将
68 份贵州花生地方品种划分为 2 个大类群, 第 I 大
类群包含 66个品种, 包括大、中、小 3种粒型的花
生, 这 66个品种又在遗传距离为 0.93时分成 2个亚
类, 其中第 I亚类包含有 64个品种; 第 II亚类包含
2个品种, 分别为“兴义花生”和“大平花生”, 它们在
遗传距离为 0.63 时相聚, 表明其亲缘关系相对较
远。第 II 大类群只有 2个品种, 分别是“遵义花生”
和“沿河花生”, 但它们在遗传距离为 0.89 时才聚在
一起, 表明其亲缘关系较远。在 68个花生地方品种
中, “印江花生”和“水桶花生”在遗传距离为 0.19 时
聚在一起, 表明其亲缘关系最近。
表 3 SSR 引物扩增 68 份不同类型花生品种的多态信息量、Shannon 信息指数和 Nei 基因多样性指数
Table 3 Primer-wise list of numbers of alleles, Shannon information index, and Nei’s genetic diversity index for 68 landraces with large, small and middle-sized seeds
等位基因数 No. of alleles Shannon信息指数 Shannon information index (I) Nei基因多样性指数 Nei genetic diversity index (H) 引物
SSR primer 大粒
Large
小粒
Small
中粒
Middle
总体
Total
PIC 大粒
Large
小粒
Small
中粒
Middle
总体
Total
大粒
Large
小粒
Small
中粒
Middle
总体
Total
GC25 36 20 35 3 0.268 0.5106 0.5599 0.6010 0.5675 0.3488 0.3837 0.4158 0.3909
GC27 16 10 12 1 0.688 0.6719 0.0000 0.6931 0.6707 0.4789 0.0000 0.5000 0.4777
GC31 16 10 14 1 0.654 0.6922 0.6924 0.6613 0.6866 0.4990 0.4992 0.4685 0.4935
GC47 23 11 19 2 0.592 0.5492 0.0000 0.0000 0.5176 0.3705 0.0000 0.0000 0.3458
GC52 24 9 18 2 0.671 0.5549 0.4993 0.5351 0.5390 0.3742 0.3231 0.3576 0.3601
GC53 20 11 16 2 0.737 0.4842 0.5268 0.5017 0.5109 0.3205 0.3434 0.3217 0.3331
GC56 20 9 16 1 0.562 0.6876 0.6931 0.6929 0.6917 0.4944 0.5000 0.4997 0.4986
GC59 21 11 22 3 0.750 0.4209 0.4397 0.4566 0.4409 0.2604 0.2732 0.2965 0.2781
GC61 16 8 13 2 0.773 0.4151 0.3406 0.4070 0.4039 0.2630 0.2440 0.2603 0.2603
GC63 34 19 30 4 0.467 0.4508 0.4175 0.4227 0.4424 0.2891 0.2868 0.2867 0.2910
GC68 15 10 16 1 0.636 0.6472 0.6924 0.6719 0.6897 0.4547 0.4992 0.4789 0.4966
GC87 27 12 17 3 0.733 0.4565 0.4425 0.4247 0.4521 0.2951 0.2855 0.2582 0.2865
GC9 9 3 12 1 0.875 0.5267 0.3939 0.6701 0.5674 0.3430 0.2321 0.4771 0.3796
GC94 17 11 15 3 0.819 0.4316 0.4067 0.3639 0.4101 0.2670 0.2571 0.2428 0.2581
PM155 16 8 14 3 0.859 0.3454 0.3395 0.3383 0.3422 0.2029 0.2005 0.1997 0.2015
PM169 7 3 5 1 0.951 0.4253 0.3727 0.3809 0.3984 0.2571 0.2157 0.2219 0.2356
PM171 15 6 16 1 0.704 0.6677 0.5794 0.6929 0.6723 0.4747 0.3907 0.4997 0.4793
PM183 23 8 21 2 0.664 0.5752 0.3223 0.5514 0.5301 0.3874 0.2261 0.3714 0.3515
PM195 17 8 16 2 0.771 0.4176 0.4526 0.4443 0.4426 0.2663 0.2795 0.2875 0.2807
PM205 18 9 15 2 0.684 0.4449 0.3436 0.3974 0.4122 0.2905 0.2470 0.2675 0.2740
PM217 20 10 20 2 0.632 0.5109 0.4715 0.4290 0.4917 0.3351 0.3093 0.2815 0.3263
PM43 49 21 45 3 0.045 0.6530 0.5951 0.6849 0.6643 0.4613 0.4063 0.4918 0.4714
PM79 21 12 19 3 0.458 0.2594 0.1968 0.2639 0.2518 0.1748 0.1336 0.1780 0.1699
PM85 23 12 16 2 0.571 0.4901 0.4176 0.4381 0.4617 0.3264 0.2761 0.2904 0.3074
PM3 32 16 26 2 0.392 0.6788 0.6572 0.6204 0.6591 0.4858 0.4648 0.4305 0.4667
PM15 18 8 15 2 0.751 0.4256 0.3655 0.4221 0.4121 0.2684 0.2297 0.2675 0.2597
PM31 22 9 17 2 0.654 0.4858 0.4345 0.4219 0.4545 0.3188 0.2758 0.2781 0.2962
PM36 25 13 23 3 0.579 0.3964 0.3867 0.4014 0.3974 0.2475 0.2407 0.2552 0.2493
PM42 15 3 9 1 0.842 0.6365 0.3727 0.5132 0.5507 0.4444 0.2157 0.3311 0.3644
PM45 34 14 30 1 0.340 0.6344 0.6218 0.6912 0.6735 0.4432 0.4309 0.4981 0.4805
PM50 33 17 26 3 0.555 0.6678 0.6217 0.6677 0.6605 0.4749 0.4309 0.4747 0.4677
PM65 19 8 15 1 0.619 0.5188 0.5600 0.4834 0.5162 0.3390 0.3732 0.3121 0.3367
PM 106 29 8 23 2 0.604 0.6892 0.6640 0.6677 0.6782 0.4961 0.4711 0.4747 0.4851
PM136 9 4 8 1 0.905 0.6184 0.4310 0.5879 0.5761 0.4280 0.2617 0.3991 0.3883
PM137 14 5 10 1 0.818 0.6685 0.6465 0.5863 0.6489 0.4758 0.4545 0.3995 0.4574
PM145 39 16 34 3 0.341 0.4552 0.4115 0.4767 0.4537 0.2816 0.2460 0.2997 0.2804
PM179 19 12 18 1 0.481 0.6273 0.4979 0.5467 0.5736 0.4357 0.3179 0.3609 0.3853
PM183 20 9 19 2 0.578 0.5602 0.4663 0.5721 0.5544 0.3803 0.3085 0.3872 0.3747
PM188 24 8 19 2 0.662 0.6924 0.6631 0.6931 0.6926 0.4993 0.4702 0.5000 0.4995
PM204 16 5 14 1 0.735 0.4443 0.3863 0.3447 0.4093 0.2921 0.2492 0.2481 0.2738
PM213 13 4 12 1 0.878 0.5566 0.4293 0.4603 0.5034 0.3721 0.2691 0.3044 0.3303
PM216 36 20 35 3 0.268 0.6544 0.5212 0.6502 0.6319 0.4618 0.3382 0.4577 0.4400
PM225 16 10 12 1 0.688 0.3733 0.2691 0.3614 0.3499 0.2250 0.1455 0.2212 0.2083

第 8期 林 茂等: 贵州省花生地方品种的遗传多样性 1393



图 2 68 个贵州花生地方品种的聚类图
Fig. 2 Dendrogram of 68 peanut landraces in Guizhou province
1394 作 物 学 报 第 38卷

表 4 68 个贵州花生地方品种的遗传多样性分析
Table 4 Genetic diversity analysis of 68 peanut landraces in Guizhou province
品种类型
Seed size
品种数
No. of landrace
Shannon信息指数
Shannon information index (I)
Nei基因多样性指数
Nei genetic diversity index (H)
大粒 Large seed 29 0.5139 0.3444
中粒 Middle-size seed 24 0.4981 0.3354
小粒 Small seed 15 0.4573 0.3025
总体 Total 68 0.5056 0.3387

同一地理来源、同一粒型的地方品种的亲缘关
系并不是最近的, 如来自罗甸县的“边阳花生”有中
粒和小粒两种类型 , 但亲缘关系较远 ; 而“镇宁花
生”和“遵义花生”, 从地理位置上相距较远, 但是亲
缘关系较近, 表明花生地方品种间亲缘关系与地理
来源关系不大。
3 讨论
掌握花生种质资源材料之间的遗传多样性有利
于提高花生遗传育种研究的效率。在过去, 花生品
种之间的遗传多样性常用植物学性状来判别, 如株
高、分枝数、叶型、粒型等, 但是, 农艺性状的表型
特征受环境的影响较大, 环境稍有变化, 表型特征
就会相应变化 , 有的变化较为显著 , 因此 , 传统的
遗传多样性鉴定手段不足以满足现代育种要求。随
着生物技术的发展, DNA 分子标记广泛应用于花生
种质资源的遗传多样性研究[23-26], 不同的研究者采
用 10~206 对引物来鉴定遗传多样性, 筛选出 10~26
对多态性引物, 每对引物产生的条带数不等, 同时
在遗传相似系数 0.242~1.000 之间将供试品种分成
不同的大类 , 变化范围最小的为 0.20, 最大的为
0.758, 这些研究结果说明不同花生地方品种其遗传
多样性差异较大; 不同的标记类型也会带来不一样
的分析结果, 如 Jiang 等[8]利用 SSR 标记分析花生
的遗传多样性时, 平均遗传距离为 0.53, 而当采用
AFLP标记时, 平均遗传距离只有 0.25, 这与王传堂
等[27]的研究结果相似。本研究结果显示, 贵州地方
花生品种之间遗传距离变化范围为 0.19~0.94, 并且
同一地理来源的品种, 不同籽粒大小的花生并不首
先聚为一类, 比如来自务川县的“务川花生-1”和“务
川花生-2”, 以及来自罗甸县的“边阳花生-1”到“边
阳花生-5”等, 虽然它们具同一地理来源, 但品种之
间的遗传距离较远。也有同一地理来源的不同籽粒
大小的花生, 其品种间遗传多样性小, 如来自普安
县的 2个“罐子窑花生”品种和来自册亨县的 2个“沉
渡花生”品种等。本研究认为, 不同花生品种之间的
亲缘关系与品种的地理来源关系不大。
此外, 受花生地方品种种质资源的限制, 选育
品种之间的遗传多样性逐渐变小, 如采用单一的分
子标记类型以及聚类方法来分析品种之间的遗传多
样性, 已经不能满足科学研究的需要, 并制约着分
子标记在花生辅助育种方面的应用, 除了采用多种
分子标记类型来分析外, 有效的统计和分析方法都
能达到预期的效果。近年来, 利用 Shannon 信息指
数和 Nei 遗传多样性指数来评价作物的遗传多样性
已经在油菜、小麦、玉米和水稻等主要农作物上得
到广泛应用。本研究以 SSR 分子标记为基础, 采用
Shannon 信息指数和 Nei 遗传多样性指数分析贵州
花生地方品种的遗传多样性, 结果表明贵州花生地
方品种的遗传多样性丰富, 为了进一步弄清楚这些
地方品种之间的亲缘关系 , 为花生地方品种的合
理、高效利用提供理论依据, 还需要更多的验证分
析。
花生地方品种以及地方种质资源的原生态保护
和保存更新至关重要, 尤其是特殊种质资源材料的
生态保存、保护其原有地方品种的特征特性对于种
质资源的利用具有重要意义。本研究初步弄清了贵
州花生地方品种的亲缘关系, 为贵州花生地方品种
的收集、整理以及合理、高效利用提供了重要理论
依据。
4 结论
用 50 个引物对 68 个贵州地方花生品种进行遗
传多样性分析, 有 41对引物在品种之间多态性明
显。聚类分析表明, 在遗传距离为 0.94时将 68个花
生地方品种分成 2 个大类。贵州花生地方品种具有
丰富遗传多样性, 但品种间亲缘关系与地理来源关
系不大。
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