全 文 ：作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2008, 34(6): 978−983 http://www.chinacrops.org/zwxb/
ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@chinajournal.net.cn

基金项目: 国家自然科学基金项目(30571275); 云南省自然科学基金项目(2004C0025Q); 云南省“十一五”科技攻关项目(2006NG08)
作者简介: 丁玉梅(1975−), 女, 硕士, 副研究员, 从事植物生物技术研究。Tel: 0871-5131786; E-mail: ymding@163.com
*
通讯作者(Corresponding author): 孙茂林(1958−), 男, 研究员, 硕士生导师。Tel: 0871-5140440; E-mail: sun_maolin@tom.com
Received(收稿日期): 2007-07-01; Accepted(接受日期): 2007-12-16.
DOI: 10.3724/SP.J.1006.2008.00978
马铃薯质体表达载体构建及 GFP 基因在块茎中的瞬时表达
丁玉梅 1 杨正安 2,3 周晓罡 1 张绍松 1 孙茂林 1,*
(1云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 / 云南省农业生物技术重点实验室, 云南昆明 650223; 2 云南大学生命科学学院, 云
南昆明 650091; 3云南农业大学园林园艺学院, 云南昆明 650201)
摘 要: 利用高等植物质体基因组在进化中高度保守的特点, 根据烟草质体基因组全序列设计合成引物, PCR 扩增
并克隆了马铃薯质体的 trnI-trnA基因片段。将测序正确的 trnI基因和 trnA基因作为定点整合外源基因的同源重组片
段, 构建成包含 Prrn-gfp-aadA-TpsbA表达盒的马铃薯质体定点转化载体 pBMLSIA-GFP, 酶切鉴定表明, 所构建载体
符合预期设计。采用该载体对马铃薯块茎进行基因枪法转化, 结果表明, GFP 基因可在质体特异性启动子 Prrn 及终
止子 TpsbA 的调控下在马铃薯块茎中瞬时高量表达, 经基因枪轰击后马铃薯块茎在紫外投射仪下产生很强的绿色荧
光, 在距离为 6 cm, 压力 1 100 psi轰击 2枪的条件下产生的绿色荧光最强。马铃薯块茎可溶性蛋白 SDS-PAGE电泳
分析表明, GFP蛋白表达量约占总可溶性蛋白的 15.4%~30.2%, 均达到了较高的表达水平。该载体对后期马铃薯质体
转化体系的建立和其他功能基因导入马铃薯质体进行性状改良具有重要应用价值。
关键词: 马铃薯; 质体; 载体构建; GFP基因; 瞬时表达
Construction of Potato Plastid Transformation Vector and Transient Ex-
pression of GFP Gene in Tuber
DING Yu-Mei1, YANG Zheng-An2,3, ZHOU Xiao-Gang1, ZHANG Shao-Song1, and SUN Mao-Lin1,*
(1 Biotechnology and Germplasm Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences / Key Laboratory of Agricultural Biotechnology of Yunnan,
Kunming 650223, Yunnan; 2 Shcool of Life Sciences, Yunnan University, Kunming 650091, Yunnan; 3 College of Horticulture and Landscape, Yunnan
Agricultural University, Kunming 650201, Yunnan, China)
Abstract: Plastid transformation in higher plants offers several advantages over nuclear transformation, including maternal in-
heritance of transgenic, lack of position effects and gene silencing, and high levels of transgenic expression, because the high
ploidy level of the plastome in cells and the genes of interest are integrated into the plastome via homologous recombination.
Based on the highly conservative features of trnI and trnA genes during the plastid genome evolution of higher plants, we de-
scribed a distinct construction protocol of species-specific transformation vector of potato. We designed the primers and
PCR-amplified the trnI-trnA targeting region from total genomic DNA of potato line of ‘Hui-2’. After sequencing and digesting
the amplifed 2.7 kb fragment, which was used as homologous targeting sequences, we constructed the potato-specific plastid ex-
pression vector named pBMLSIA-GFP that carries the expression cassette of Prrn-gfp-aadA-TpsbA. Then, verified by digestion
with restriction enzymes, the vector pBMLSIA-GFP was transformed into potato tubers using PDS-1000/He biolistic particle
delivery system. The fluorescence upon excitation with 365 nm light 2 days after bombardment was observed, the results indi-
cated that the transient expression of GFP gene was in high efficiency under the regulation of plastid promoter Prrn and signals
TpsbA. Tubers bombarded twice at 1 100 psi pressure and a target distance of 6 cm emitted the most intensive fluorescence. The
analysis results of SDS-PAGE electrophoresis showed that GFP protein in high-level expression was up to 15.4–30.2% of the total
soluble protein in potato tubers. It indicated that this potato-specific plastid expression vector pBMLSIA-GFP is highly effective
and desirable to be applied in traits improvement of potato via plastid genetic transformation.
Keywords: Solanum tuberosum L.; Plastid; Vector construction; GFP gene; Transient expression
第 6期 丁玉梅等: 马铃薯质体表达载体构建及 GFP基因在块茎中的瞬时表达 979


马铃薯 (Solanum tuberosum L.)是世界上继水
稻、玉米、小麦之后的第四大粮食作物, 我国马铃
薯常年种植面积大约有 420 万公顷, 鲜薯年总产量
达 6 200万吨, 居世界第一位。利用植物基因工程技
术是进行马铃薯性状改良的重要途径。目前, 已将
抗病、抗虫、品质改良等基因转入马铃薯核基因组
中并获得了相应的种质材料[1]。但由于细胞核转化
体中外源基因整合到核基因组是随机的, 常出现基
因沉默、位置效应和外源基因转录不稳定等, 导致
外源基因表达量低、表达不稳定[2]。与核转化不同
的是, 质体转化是通过同源重组的方式实现外源基
因的定点整合, 加之质体基因组在细胞中的拷贝数
达 5 000~10 000个, 可大幅度提高基因的表达效率,
已成为植物基因工程研究热点; De Cosa等[3]报道 Bt
蛋白在烟草质体中的表达量可达总可溶性蛋白的
45.3%。另外, 质体母系遗传的特性增加了转基因植
物的生态安全性[4]。
目前, 质体基因组转化已在烟草、水稻、棉花、
油菜等十余种重要作物中实现 [5]。一般来说, 质体
表达载体基本上都具有物种的特异性, 同源重组片
段来自哪种植物 , 所构建的载体就适用于该物种 ,
同一来源的同源重组片段虽然可以用于不同作物
的质体转化, 但效率较低。在马铃薯中采用异质同源
序列(约 98%同源性)实现了质体转化, 转化效率比
烟草低 10~35 倍 [6-7], 而采用完全同源的重组序列
在烟草、胡萝卜、棉花和大豆中的转化效率相对较
高[8]。为使质体转化技术更好地应用于马铃薯等重
要作物的遗传改良, 构建具有物种特异性的质体表
达载体是很有必要的工作。本研究利用植物质体
trnI和 trnA基因在高等植物中高度保守的特点, 根
据烟草质体的 trnI和 trnA基因序列设计引物, 从马
铃薯中克隆 trnI-trnA基因片段, 并以此作为定点整
合的同源片段, 构建包含 GFP基因(外源基因)、筛
选标记基因 aadA及质体特异性启动子 Prrn和终止
子 TpsbA的马铃薯质体表达载体, 通过马铃薯块茎
的瞬时表达验证载体的有效性, 为进一步将改善马
铃薯农艺性状的有用基因导入马铃薯质体奠定
基础。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
材料为云南广泛栽培的马铃薯品种会-2。GFP
基因烟草质体表达载体 pBIO3-GFP由丁雄飞博士惠
赠 (Bioclone Inc, San Diego, USA), 带 有 烟 草
trnI-trnA基因片段, 筛选标记基因 aadA(壮观霉素抗
性基因)及质体特异性启动子 Prrn和终止子 TpsbA。
GFP 基因属于三点突变型绿色荧光蛋白[9]。克隆载
体 pUC18来自 Promega公司, Pyrobest DNA聚合酶、
限制性内切酶、T4 DNA 连接酶、胶回收纯化试剂
盒和 DNA Marker来自 TaKaRa公司; 0.6 μm金粉和
基因枪耗材购自美国 Bio-Rad 公司。宿主菌 DH5α
为本实验室保存, 其他试剂均为国产分析纯。
1.2 方法
1.2.1 DNA 的提取 用 CTAB 法[10]提取马铃薯
幼嫩叶片中的总基因组 DNA。
1.2.2 马铃薯 trnI和 trnA基因片段的克隆及序列分
析 参考 NCBI 数据库中的烟草质体基因组全序
列(编号为 Z00044, gi:76559634), 设计合成 1对寡核
苷酸引物 C1(5′-TAAGGTGTTGGGTTAAGTCCCGC
AACGAGC-3′)和 C2(5′-AACTCCCCGAAGCATTTC
GTCGATTACTACGCCC-3′)克隆 trnI-trnA 基因片
段。以马铃薯的总 DNA为模板, 在 100 μL PCR反
应体系中加 10×PCR反应缓冲液 10 μL, 5′端和 3′端
引物各 0.2 μmol L−1, 5 U Pyrobest DNA聚合酶, 50
ng模板DNA, MgCl2 2.0 mmol L−1, dNTP各 0.2 mmol
L−1。反应程序为: 95℃总变性 3 min, 94℃变性 60 s,
55℃退火 60 s, 72℃延伸 180 s, 共 30个循环, 最后
72℃延伸 10 min。PCR产物在 1%琼脂糖凝胶中电泳
检测并回收, 以平端方式克隆到 pUC18 载体 Sma I
位点上, 转化大肠杆菌 DH5α, 通过蓝白菌落挑选阳
性克隆, 命名为 pUCMLSIA, 挑取 2个克隆, 委托北
京华大基因有限公司进行 DNA 序列测定。利用
DNAstar 软件对 trnI-trnA 基因进行核苷酸分析。并
与 GenBank 数据库资料(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)
核苷酸序列进行同源性比较。
1.2.3 GFP基因马铃薯质体表达载体的构建和鉴定
以 trnI-trnA基因片段的Pvu II为分界, 设计两对引
物GLI1(5′-CCATCGATAAGGTGTTGGGTTAAGT-3′)
(加 Cla I)和 GLI2 (5′-GCCAAGCTTCTGGGCCA
TCCTGGATT-3′) (加 Hind III), 及 GLA1(5′-CGG
ACGCGTCTGCGCCAAGGAAAAGAA-3′) (加 Mlu I)
和 GLA2 (5′-GATCGGCCGAACTCCCCGAAGCAT
TT-3′)(加 Eag I), 分别扩增经测序分析正确的 trnI
和 trnA 片段。经相应限制性内切酶消化后, 连入
pBIO3-GFP 载体, 取代烟草的 trnI-trnA 同源片段,
载体命名为 pBMLSIA-GFP, 载体构建流程如图 1。
980 作 物 学 报 第 34卷


图 1 pBMLSIA-GFP构建流程
Fig. 1 Construction protocol of pBMLSIA-GFP

1.2.4 GFP 基因在马铃薯块茎中的表达及 SDS-
PAGE 电泳分析 将表达载体 pBMLSIA-GFP 用
CaCl2 法转化大肠杆菌 DH5α[11], 挑取转化单菌落,
接种于附加 100 mg L−1氨苄青霉素的 LB液体培养
基中, 37℃振荡过夜, 进行质粒大量提取, 浓缩后质
粒浓度达μg μL−1 级。用 0.6 μm 金粉包埋质粒
pBMLSIA-GFP后, 按照标准的 PDS-1000/He基因枪
系统操作方法进行基因枪转化[12], 选择 600、900 和
1 100 psi的可裂膜, 在轰击距离为 6 cm条件下转化
马铃薯新鲜薯片(厚度 2~3 mm), 每皿放置一块薯片,
每个处理重复 3 次。块茎轰击完成后置铺有浸湿滤
纸的培养皿中 , 于 23℃温箱中暗培养 , 2 d 后在
UVD-19M型紫外分析仪下观察、拍照。用可溶性蛋
白提取缓冲液(1%SDS+1%巯基乙醇+0.02%溴酚蓝
+40%蔗糖+0.01 mol L−1 Tris-HCl pH 8.0)提取块茎总
可溶性蛋白, 先称取薯片重量, 再按每克块茎加入
1.5 mL 缓冲液的比例提取总可溶性蛋白, 12 000×g
离心 10 min, 上清液煮沸 10 min, 取 15 μL 进行
SDS-PAGE电泳(12%分离胶, 3%浓缩胶)分析GFP蛋
白瞬时表达 [13], 电泳胶块脱色后拍照, 采用 Glyko
公司 Bandscan V 5.0蛋白定量软件进行 GFP蛋白表
达量分析。
2 结果与分析
2.1 trnI-trnA基因片段的克隆和序列测定
以马铃薯基因组 DNA为模板, C1和 C2为特异
引物, 进行 PCR扩增, 得到长度约为 2.7 kb的片段
(图 2)。将该 DNA片段连接到 pUC18载体中, 挑取
第 6期 丁玉梅等: 马铃薯质体表达载体构建及 GFP基因在块茎中的瞬时表达 981


其中 4 个白色菌落, 提取质粒, 获得 4 个经 PCR 鉴
定的阳性克隆。对其中的 2 个克隆进行了 trnI-trnA
基因片段的序列双向测定, 结果表明, 在所测定的序
列中, 包含了全长的 trnA基因和 trnI基因, 为 2 745 bp,
与 GenBank数据库资料(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)
中的马铃薯质体核苷酸序列的同源性为 99%, 与烟
草、甘蓝型油菜、番茄、拟南芥、大豆和菠菜的质
体核苷酸同源性分别为 98%、98%、99%、95%、93%
和 93%。

图 2 马铃薯质体 trnI-trnA基因同源片段 PCR扩增
Fig. 2 PCR products of trnI-trnA gene region from potato
plastid genome
M: 分子量标准 λ-EcoT14 I digestion; 1: trnI-trnA基因同源片段。
M: DNA marker λ-EcoT14 I digestion; 1: the amplification frag-
ment of trnI-trnA region.

2.2 GFP 基因马铃薯质体表达载体的构建和酶
切鉴定
以 trnI-trnA基因间隔区的 Pvu II内切酶位点为
分界, 设计两对引物 GLI1、GLI2 和 GLA1、GLA2,
分别扩增 1.5 kb的 trnI同源片段和 1.2 kb的 trnA同
源片段, 将所扩增的 trnI片段分别用Cla I和Hind III
进行消化, 连接入经 Cla I和 Hind III内切酶消化的
pBIO3-GFP 载体, 转化大肠杆菌 DH5α 后提取质粒
DNA, 采用 EcoR I和 Hind III酶切鉴定,获得 5.0 kb、
1.3 kb 和 300 bp 的预期片段(图 4 泳道 2), 定名为
pBMLSI-GFP, 再用 Mlu I 和 Eag I 消化所扩增的
trnA基因片段, 连接入经 Mlu I和 Eag I内切酶消化
的 pBMLSI-GFP 载体, 转化大肠杆菌 DH5α 后提取
质粒 DNA, 分别采用 GLI1、GLI2和 GLA1、GLA2
两对引物进行 PCR鉴定, 分别获得 1.5 kb和 1.2 kb
预期片段(图 3), 采用 Mlu I和 Eag I进行酶切鉴定,
获得 5.8 kb和 1.2 kb的预期片段(图 4泳道 3), 完成
GFP 基因马铃薯质体表达载体 pBMLSIA-GFP 的构
建, 具体流程见图 1。
2.3 GFP基因在马铃薯块茎中的瞬时表达
经基因枪轰击后, 培养 2 d 的马铃薯块茎在紫
外投射仪下拍照的荧光如图 5所示。由图 5可看出,

图 3 质体表达载体 pBMLSIA-GFP的 PCR鉴定
Fig. 3 PCR analysis of pBMLSIA-GFP clone
M: 分子量标准DL2000; 1: trnI基因同源片段; 2: trnA基因同源片段。
M: DL2000 marker; 1: fragment of trnI gene; 2: fragment of trnA gene.

图 4 pBMLSI-GFP和 pBMLSIA-GFP的酶切鉴定
Fig. 4 Restriction enzyme digestion analysis of pBMLSI-GFP
and pBMLSIA-GFP clone
M: 分子量标准 DL2000; 1: pBMLSI-GFP; 2: pBMLSI-GFP
EcoR I & Hind III酶切; 3: pBMLSIA-GFP Mlu I & Eag I酶切; 4:
pBMLSIA-GFP。
M: DL2000 marker; 1: pBMLSI-GFP; 2: pBMLSI-GFP digested
with EcoR I & Hind III; 3: pBMLSIA-GFP digested with Mlu I &
Eag I; 4: pBMLSIA-GFP.


图 5 GFP基因在马铃薯块茎中瞬时表达后产生的绿色荧光
Fig. 5 Transient expression of GFP gene in high efficiency
after 2 days of bombardment with pBMLSIA-GFP using
PDS-1000/He biolistic particle delivery system
A: 1 100 psi; B: 600 psi; C: 1 100 psi, 2次; D: 900 psi; E: 未转化块茎。
A: 1 100 psi; B: 600 psi; C: 2 × 1 100 psi; D: 900 psi; E: untrans-
formed tuber.

经过含 GFP基因的质体表达载体 pBMLSIA-GFP转
化后, 都有绿色荧光的产生, 说明 GFP 基因在马铃
薯块茎中得到了高效表达。不同轰击压力及轰击次
数影响了蛋白表达的量 , 根据荧光强弱初步判定 ,
就轰击一次而言, 1 100 psi 的蛋白表达效果最好,
900 psi次之, 600 psi最弱, 在 1 100 psi气压下轰击 2
982 作 物 学 报 第 34卷

枪的荧光最强, 蛋白表达量最高。
2.4 GFP 基因在大肠杆菌和马铃薯块茎中的蛋
白表达分析
将表达载体 pBMLSIA-GFP转化大肠杆菌 DH5α,
提取总可溶性蛋白进行 SDS-PAGE电泳分析(图 6)。用
基因枪法转化马铃薯块茎, 2 d后提取总可溶性蛋白进
行SDS-PAGE电泳分析(图7), 出现了预期的大小为27
kD 的 GFP 蛋白条带, 经轰击的马铃薯块茎细胞中均
有 GFP蛋白表达。用 Bandscan V 5.0软件对电泳条带
进行 GFP蛋白相对表达量分析, 在大肠杆菌、600 psi、
900 psi、1 100 psi、2 × 1 100 psi转化条件下, GFP蛋

图 6 质体表达载体 pBMLSIA-GFP在大肠杆菌 DH5α中的可
溶性蛋白 SDS-PAGE电泳
Fig. 6 SDS-PAGE electrophoresis of total souble protein of
pBMLSIA-GFP in E. coli DH5α
M: 蛋白质标准; 1: 未转化质粒的DH5α; 2: 转化 pBMLSIA-GFP
的 DH5α。
M: protein marker; 1: untransformed E.coli DH5α; 2: DH5α trans-
formed with pBMLSIA-GFP.


图 7 质体表达载体 pBMLSIA-GFP在块茎中的可溶性蛋白
SDS-PAGE电泳
Fig. 7 SDS-PAGE electrophoresis of total souble protein of
tuber after 2 days of bombardment with pBMLSIA-GFP using
PDS-1000/He biolistic particle delivery system
M: 蛋白质标准; 1: 未转化薯块; 2: 2 d后未转化薯块; 3: 600 psi;
4: 900 psi; 5: 1 100 psi; 6: 2 × 1 100 psi。
M: protein marker; 1: fresh tuber control; 2: untransformed tuber after 2
days culture; 3: 600 psi; 4: 900 psi; 5: 1 100 psi; 6: 2 × 1 100 psi.
白占总可溶性蛋白百分含量分别为 48.0%、15.4%、
17.6%、22.6%和 30.2%, 均达到了较高的表达水平。
3 讨论
3.1 质体同源片段的选择
质体表达载体同源重组片段越长, 发生交换重
组的可能性就越大, 转化频率就越高。在烟草的质
体转化裁体 pZSl97中, 所用的同源重组片段为 accD
和 rbcL, 长度分别为 1.56 kb和 1.29 kb, 每片受轰击
的叶片可得到 1 株转化植株[14]。而烟草的另一个质
体转化载体 pRB15, aadA基因两边同源片段分别是
1.56 kb和 3.60 kb, 每片受轰击的叶子得到了 5株转
化植株[15]。同源重组片段过短会降低重组频率, 而
过长虽然能增加转化效率, 但在构建载体时操作较
为复杂。根据文献报道 , 同源重组片段的长度在
l.0~2.0 kb比较合适[16]。为了兼顾载体构建和转化效
率, 与 Kumar 等[17]“通用载体”相比, 在设计引物时
对 trnI-trnA基因同源片段的长度进行了相应的延长,
本实验中的同源重组片段为 1.2 kb和 1.5 kb。
采用本实验所设计的引物 C1 和 C2, 已实现了
甘蓝、马铃薯、油菜、番茄、生菜、水稻和矮牵牛
等作物 trnI 和 trnA 基因片段的扩增和克隆, 作物之
间的同源性高达 93%以上(未发表资料)。通过该对
引物, 可以在植物质体基因组序列未测定的情况下,
方便地扩增多种植物的同源片段, 进而构建相应的
质体表达载体, 实现多种作物的质体转化。我们从
马铃薯中克隆 trnI-trnA 基因同源片段, 构建马铃薯
质体转化的特异定点整合载体, 以期提高马铃薯质
体转化效率。在序列分析中, 所克隆 trnI-trnA 基因
片段与马铃薯栽培品种的同源性为 100%(Gargano
等, 2006未发表资料), 与 Daniell等[18]所测定的马铃
薯质体基因组同源性为 99%, 仅有 2 个碱基的差异,
产生突变的原因可能是品种的差异, 会-2 是云南栽
培的马铃薯地方品种, 由于云南特殊的地理生态条
件 , 某些基因在其长期栽培过程中可能会发生变
异。突变对不同马铃薯品种的转化效率是否有影响
及影响程度, 需要进一步质体遗传转化验证。
3.2 质体表达元件的选择与蛋白表达
在质体转基因研究中, 大都采用来源于质体的
Prrn 作为基因启动子[16], 如用来源于细菌的启动子
(如 trc), 则外源基因的表达效率低, Sidorov 等[6]用
Prrn为启动子得到的马铃薯转化植株中 GFP蛋白占
可溶性蛋白的 5%, 而Nguyen等[7]以 trc为启动子时,
第 6期 丁玉梅等: 马铃薯质体表达载体构建及 GFP基因在块茎中的瞬时表达 983


GFP蛋白只达 0.018%。一些研究者在构建质体表达
载体时, 还要设计该种植物的 Prrn及 TpsbA的引物,
来扩增相应的基因表达元件, 增加了载体构建的难
度。Sidorov等[6]报道来源于烟草质体的 Prrn启动子
对马铃薯具有很强的启动活性。在本实验中, 采用
的是来源于烟草的 Prrn 和 TpsbA调控元件, 在这些
元件的调控之下, 突变型的 GFP基因在马铃薯块茎
中 得 到 了 瞬 时 高 量 表 达 ( 占 可 溶 性 蛋 白 的
15.4%~30.2%)。为了增加转录后 mRNA 的稳定性,
同时在 Prrn 启动子后加入了 5′-UTR 序列。含有
pBMLSIA-GFP 大肠杆菌转化菌株在自然光下就可
发出绿色荧光, 这些结果进一步说明 Prrn 属于强启
动子, 不仅在马铃薯中能调控基因的表达, 而且在
大肠杆菌中也有同样的调控效果。载体构建完成后,
将对马铃薯质体基因组进行稳定的遗传转化, 为了
减少后期转化的盲目性, 我们采用瞬时表达来验证
基因表达的有效性。一般情况下, 质体稳定表达外源
蛋白含量占可溶性蛋白范围在 0.02%~45.30%之间[5],
从瞬时表达看, 本实验结果属于正常范围。如何提
高马铃薯质体转化效率和基因稳定表达效率, 需要
进一步深入研究。
我们构建的马铃薯质体表达载体 pBMLSIA-
GFP在块茎中瞬时表达 GFP基因的有效性, 预期稳
定整合到马铃薯质体后也能高效表达。另外, 我们
建立的马铃薯块茎瞬时表达 GFP 蛋白的高效体系,
为利用马铃薯表达有用蛋白(抗体、疫苗等药用蛋白)
进行了初步探索。
4 结论
构建的 GFP 基因马铃薯特异性质体转化载体
pBMLSIA-GFP, 经酶切验证符合预期设计, 基因枪
法转化马铃薯块茎后, GFP 基因能够在质体特异性
启动子 Prrn及终止子 TpsbA的调控下产生瞬时高量
表达, 说明该载体能在马铃薯中高效表达外源基因,
可作为构建马铃薯实用基因质体表达载体的基础载
体(将 GFP 基因替换为功能基因), 也可用于马铃薯
质体转化体系的建立。
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