作 者 ：程在全，丁玉梅，曾黎琼，黄兴奇，WU RAY
期 刊 ：云南植物研究 2002年 24卷 03期 页码：1-3
关键词：绿色荧光蛋白；报告基因；遗传转；水稻；
Keywords:Green fluorescence protein(GEP), Reporter gene, Genetic transformation, Rice(Oryza sativa),
摘 要 ：本研究中，构建了含有编码绿色荧光蛋白的改进型基因质粒 pJPM5。用基因枪法分别把pJPM5 和另一带有绿色荧光蛋白基因的质粒pSBG700转入水稻TNG67愈伤组织。用Southern杂交法证实了转基因的存在，而且表明多数转基因植株含有1到8个拷贝的转基因。取2个月的转基因植株上的叶片用于分析绿色荧光蛋白基因表达。用SLM-8000荧光分析仪定量测定绿色荧光蛋白。多数转基因植株具有很高的绿色荧光蛋白信号。虽然水稻植株有少量自发荧光，但是绿色荧光蛋白基因表达出的绿色荧光蛋白信号比植株的自发荧光强得多，其测定不会受自发荧光的太大影响。在荧光显微镜下观察到了绿色荧光蛋白基因的表达。借助观察分析绿色荧光蛋白基因的瞬时表达，本研究还发现基因枪法转化中，如果两枪的气压为900psi & 1350 psi，比两枪的气压都为900psi或者1350psi更好，因其能使质粒进入更多的细胞。研究结果表明，绿色荧光蛋白基因可以作为水稻(甚至小麦、玉米)转基因研究中的报告基因。研究还显示，MAR序列能明显增强绿色荧光蛋白基因的表达能力(这一结果在另文讨论).
Abstract:In this study,a plasmid pJPM5 containing modified GFPgene which encode the green fluorescent protein(GFP)was constructed.Microprojectile bombardment was used to separately introduce two plasmids pJPM5 and pSBG700 into rice TNG67 calli.