全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 23期 2015年 12月
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UHPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中裸花紫珠3个酚苷类成分及其药动学研究
郑东昆 1, 2,陈伟康 1,马双成 3,邵 军 1, 2,王 杰 1, 2,罗跃华 1, 2*
1. 江西省药品检验检测研究院/江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心,江西 南昌 330029
2. 南昌大学药学院,江西 南昌 330006
3. 中国食品药品检定研究院,北京 100050
摘 要:目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定大鼠血浆中毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷及连翘酯
苷 B的水平,并计算 3个酚苷类成分在大鼠体内的药动学参数。方法 大鼠 ig给予裸花紫珠提取物(5 g/kg)后不同时间取血
浆,血浆样品经盐酸处理,乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-0.005%甲酸为流动相,通过 Phenomenex® Kinetex C18柱(50 mm×2.1 mm,
1.7 μm)梯度洗脱;采用电喷雾离子化源(ESI)三重四极杆串联质谱,以多反应监测模式(MRM)负离子测定血浆中毛蕊花
糖苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯苷 B。结果 毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯苷 B分别在 7.77~3 880.00 ng/mL(r2=0.995 5)、
5.04~2 520.00 ng/mL(r2=0.994 9)、1.78~890.00 ng/mL(r2=0.995 1)呈良好的线性关系,各成分的提取回收率在 75.2%~
89.9%,日内、日间精密度 RSD均小于 8.8%。大鼠 ig给予裸花紫珠提取物后,毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷及连翘酯苷 B均
在 30 min左右达到最大血药浓度,AUC0~t分别为(93 881.65±18 326.65)、(29 204.97±8 499.88)、(15 027.05±3 763.82)
ng·min/mL,Cmax 分别为(2 179.00±355.60)、(737.57±210.31)、(227.30±48.38)ng/mL,t1/2z 分别为(235.41±117.90)、
(151.56±49.23)、(161.68±63.92)min。结论 建立的 UHPLC-MS/MS 方法简便、快速、专属性强,可用于大鼠血浆中毛
蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯苷 B的同时测定及其药动学研究。
关键词:裸花紫珠;毛蕊花糖苷;异毛蕊花糖苷;连翘酯苷 B;超高效液相色谱-串联质谱法;药动学
中图分类号:R285.51 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2015)23 - 3533 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.23.015
Simultaneous determination of three phenolic glycosides in Callicarpa nudiflora
by UHPLC-MS methods and analysis of their pharmacokinetics in plasma of rats
ZHENG Dong-kun1, 2, CHEN Wei-kang1, MA Shuang-cheng3, SHAO-Jun1, 2, WANG-Jie1, 2, LUO Yue-hua1, 2
1. Jiangxi Provincial Research Institute for Drug Control/Jiangxi Provincial Engineering Research Center for Drug and Medical
Device Quality, Nanchang 330029, China
2. School of Pharmacy, Nanchang University, Nanchang 330006, China
3. National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050, China
Abstract: Objective An UHPLC-MS/MS method was developed for the simultaneous determination of acteoside, isoacteoside, and
forsythoside B in plasma of rats and the pharmacokinetic parameters for three phenolic glycosides were calculated as well. Methods
Samples of plasma of rats were obtained at different time after rats were administrated with Callicarpa nudiflora extract (5 g/kg). After the
addition of acidification (hydrochloric acid, 0.25 mol/L) and deproteinization by acetonitrile, plasma samples were separated on a
Phenomenex® Kinetex C18 column (50 mm × 2.1 mm, 1.7 μm) with gradient elution using acetonitrile-0.005% formic acid as mobile phase.
Mass spectrometric detection was carried out by multiple reaction monitoring (MRM) using electrospray ionization in negative ion mode.
Results A good linearity of acteoside, isoacteoside, and forsythoside B was shown in the ranges of 7.77 − 3 880.00 ng/mL (r2 = 0.995 5),
5.04 − 2 520.00 ng/mL (r2 = 0.994 9), and 1.78 – 890.00 ng/mL (r2 = 0.995 1), respectively. The mean extraction recoveries of analytes were
in the range of 75.2% − 89.9%, and the intra- and inter-day RSD values were less than 8.8%. The tmax of acteoside, isoacteoside, and
forsythoside B was about 30 min, AUC0~t were (93 881.65 ± 18 326.65), (29 204.97 ± 8 499.88), and (15 027.05 ± 3763.82) ng·min/mL,
Cmax were (2 179.00 ± 355.60), (737.57 ± 210.31), and (227.30 ± 48.38) ng/mL, t1/2z were (235.41 ± 117.90), (151.56 ± 49.23), and (161.68 ±
63.92) min, respectively. Conclusion The method is proved to be simple, rapid, and specific, and to be suitable for the simultaneous
收稿日期:2015-06-09
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81373955);中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金课题(2013WA9);江西省自然科学基金
资助项目(20142BAB205085)
作者简介:郑东昆(1987—),硕士研究生,从事药物分析研究。Tel: 18146622300 E-mail: 329747454@qq.com
*通信作者 罗跃华,主任中药师,硕士研究生导师,从事药物分析研究。Tel: (0791)88158689 E-mail: emailluo@sohu.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 23期 2015年 12月
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determination of acteoside, isoacteoside, and forsythoside B in plasma of rats and the pharmacokinetic study.
Key words: Callicarpa nudiflora Hook. et Arn.; acteoside; isoacteoside; forsythoside B; UHPLC-MS/MS; pharmacokinetics
裸花紫珠Callicarpa nudiflora Hook. et Arn. 为马
鞭草科(Verbenaceae)紫珠属Callicarpa L. 植物,为
海南省道地药材[1],具有抗菌止血、消炎解毒、散瘀
消肿、祛风祛湿功效,主治各种炎症、外伤出血、跌
打肿痛、风湿肿痛、肺结核咳血、胃肠出血等症 [2-3]。
裸花紫珠中的化学成分主要有黄酮类、萜类、酚类(含
酚苷类)及挥发油类[4]。据文献报道,酚苷类成分可
能是裸花紫珠止血作用的主要活性成分[5],苷元咖啡
酸与羟基酪醇具有抗炎、抗菌及抗氧化活性[6-7]。动物
实验结果显示毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷具有抗氧化
和抗溶血、血管紧张素转换酶抑制、抗高血压活性[8-9];
而体外研究表明连翘酯苷B具有抗炎、抗菌作用[10-11],
且三者在裸花紫珠中的量较高[12-13]。目前关于裸花紫
珠的研究大部分集中在其药理活性方面,而对其活性
成分的药动学研究很少关注,且缺乏详尽的药动学参
数。本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法
(UHPLC-MS/MS)同时测定大鼠血浆中毛蕊花糖苷、
异毛蕊花糖苷和连翘酯苷 B的方法,研究裸花紫珠提
取物 ig给药后,3个酚苷类成分在大鼠体内的药动学
过程,为裸花紫珠的临床应用和开发提供实验依据。
1 材料
1.1 仪器
BSA124S-CW、BT25S 型电子天平,德国
Sartorius;BUG 25-06型(25 kHz,250 W)超声仪,
上海必能信超声仪器有限公司;Vortex XW-80A型旋
涡混合器,上海精科实业有限公司;pico高速离心机,
德国 SORVALL;Finnpipette移液枪(100~1 000 μL),
美国 Thermo;Tripette 移液枪(20~200 μL),德国
BRAND;有机针筒过滤器(0.22 μm),美国Waters;
Agilent 1290 超高效液相色谱仪(在线脱气机、二元
超高压梯度泵、控温自动进样器、柱温箱),美国安
捷伦;API 4000三重串联四极杆质谱仪、Analyst®工
作站,美国Applied Biosystem;Phenomenex® Kinetex
C18色谱柱,广州菲罗门科学仪器有限公司;Millipore
Synergy®UV纯水机,Millipore。
1.2 实验动物
SD 大鼠,雄性,体质量(200±20)g,购自
湖南斯莱克景达实验动物有限公司,许可证号
SCXK [湘] 2009-0004,动物房温度(22±2)℃,
湿度(55±10)%,每日光照时间 12 h;动物饲料
购自北京科澳协力饲料有限公司。
1.3 药品与试剂
裸花紫珠药材 2012年采集于海南五指山,经江
西省药品检验检测研究院袁桂平主任中药师鉴定为
裸花紫珠 Callicarpa nudiflora Hook. et Arn. 的地上
部分。对照品毛蕊花糖苷(批号 1530-200202,质
量分数 93.3%)、连翘酯苷 B(批号 111811-201102,
质 量 分 数 93.9%)、 甘 草 苷 ( 内 标 , 批 号
111610-200604,质量分数 100%)均购于中国食品
药品检定研究院;异毛蕊花糖苷对照品由江西省药
品检验检测研究院从裸花紫珠中分离制备得到,由
MS、1H-NMR 和 13C-NMR 鉴定结构,通过面积归
一化法计算质量分数在 98%以上;水为 Millipore
纯水机制备的超纯水;乙腈为色谱纯,美国 Sigma
公司;其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Phenomenex® Kinetex C18色谱柱(50 mm×2.1
mm,1.7 μm);在线过滤器(0.5 μm,Upchurch Scienti-
fic Ltd);流动相为乙腈(A)-0.005%甲酸水溶液(B);
梯度洗脱程序:0~6.9 min,10%~43% A;7.0~7.1
min,43%~95% A;7.2~9.0 min,95% A;并以 95%
A运行 2 min。柱温 40 ℃;体积流量 0.45 mL/min;
进样体积 1 μL。
2.2 质谱条件
采用电喷雾离子源(ESI);负离子方式检测;
多重反应监测(MRM)模式下扫描;气帘气(N2):
172.4 kPa(25 psi);离子源 GS1(N2):413.7 kPa
(60 psi),GS2(N2):379.2 kPa(55 psi);源内温
度 500 ℃;喷雾电压 −4 500 V;入口电压(EP)
−10 V;出口电压(CXP)−13 V;母离子、子离子
的 m/z,解簇电压(DP)、碰撞能量(CE)见表 1。
2.3 裸花紫珠提取物的制备
取裸花紫珠药材 1 kg,加入 80%乙醇回流 2 h,
提取 3次,提取液合并,减压浓缩,得裸花紫珠提
取物(干浸膏)180 g。采用外标法按上述色谱条件
检测,得出毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯苷
B质量分数分别为 27.57、10.85、4.34 mg/g。精密
称取裸花紫珠提取物 10 g,加入 0.5%的羧甲基纤维
素钠超声溶解配制成 0.5 g/mL的药液。
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表 1 优化后的 3个酚苷类成分和内标MRM参数
Table 1 Optimized multiple reaction monitoring (MRM) parameters for three phenolic glycosides and internal standard
成分 Q1 (m/z) Q3 (m/z) DP/V CE/eV tR/min
毛蕊花糖苷 623.3 161.0 −65 −48 5.65
异毛蕊花糖苷 623.3 161.0 −65 −48 5.98
连翘酯苷 B 755.2 160.7 −60 −56 5.18
甘草苷(内标) 417.2 254.7 −53 −35 5.83
2.4 给药与样品采集
取 6只 SD大鼠,禁食 12 h,自由饮水,按裸
花紫珠提取物(0.5 g/mL)5 g/kg ig给药,分别于给
药后 5、10、20、30、45、60、90、120、180、300、
420 min经眼底静脉丛取血 0.4 mL,置于肝素化离心
试管中,立即 4 ℃、3 000 r/min离心 5 min,取上层
血浆,置于−20 ℃冰箱保存。
2.5 溶液的制备
2.5.1 对照品溶液的制备 精密称取毛蕊花糖苷、
异毛蕊花糖苷、连翘酯苷 B对照品适量,加甲醇溶
解并稀释至刻度,制成质量浓度分别为 38.84、
25.20、8.90 μg/mL对照品溶液。
2.5.2 内标溶液的制备 精密称取甘草苷对照品
适量,加甲醇溶解并稀释至刻度,制成质量浓度为
100 μg/mL的内标母液,精密吸取一定量的母液至
量瓶中,加甲醇稀释至刻度,得质量浓度为 250
ng/mL的内标溶液,放置冰箱内避光冷藏。
2.6 血浆样品的处理
室温下融化血浆,涡旋混匀,精密吸取大鼠血
浆 100 μL,依次加入 10 μL 内标、50 μL 盐酸(0.25
mol/L)、10 μL 甲醇,涡旋混匀 1 min,加入乙腈 300
μL,涡旋 2 min灭活蛋白。13 000 r/min离心 10 min,
取上清液于 40 ℃水浴下氮气吹干,残渣加 50%乙
腈 100 μL 复溶,涡旋混匀后 13 000 r/min离心 10
min,取上清液 1 μL 进样。
2.7 方法学考察
2.7.1 专属性考察 取大鼠空白血浆(不加内标溶
液,用等体积甲醇代替),其余按“2.6”项方法操作;
将毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和连翘酯苷 B 对照品
溶液加入空白血浆中,取大鼠给药后 20 min的血浆
样品,均按“2.6”项方法操作。上述 3 种样品进行
UHPLC-MS/MS分析,得空白血浆、空白血浆+对照
品、给药后 20 min的血浆样品色谱图,结果见图 1。
3个酚苷类成分及内标峰形良好,大鼠空白血浆中
图 1 空白血浆 (A)、空白血浆+对照品 (B) 和给药 20 min后的血浆样品 (C) UHPLC-MS/MS色谱图
Fig. 1 UHPLC-MS/MS chromatogram of blank plasma (A), blank plasma + reference substances (B), and plasma samples
at 20 min after oral administration of C. nudiflora extract (C)
毛蕊花糖苷
异毛蕊花糖苷
连翘酯苷 B
甘草苷(内标)
A B C
0 5 10 0 5 10 0 5 10
t/min
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的内源性物质、代谢产物及裸花紫珠提取物中其他
成分对测定无干扰,方法专属性良好。
2.7.2 线性关系考察 在空白血浆中分别加入不
同质量浓度的毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯
苷 B 系列对照品溶液,配制成质量浓度为 7.77、
15.54、77.68、388.40、776.80、1 553.60、3 107.20、
3 884.00 ng/mL的毛蕊花糖苷血浆样品;质量浓度
为 5.04、10.08、50.40、252.00、504.00、1 008.00、
2 016.00、2 520.00 ng/mL的异毛蕊花糖苷血浆样
品;质量浓度为 1.78、3.56、17.80、89.00、178.00、
356.00、712.00、890.00 ng/mL的连翘酯苷 B血浆
样品。按“2.6”项方法操作,进样检测。以各成
分与内标峰面积之比(Y)对各成分质量浓度(X)
分别进行线性回归,求得的回归方程即为标准曲
线,根据信噪比 S/N=10 计算各成分的最低定量
限。毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷与连翘酯苷 B 的
标准曲线回归方程、相关系数、线性范围及定量下
限结果见表 2。
2.7.3 精密度和准确度试验 取大鼠空白血浆,配
制毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯苷 B 的高、
中、低 3 个质量浓度的含药血浆,按“2.6”项方法
处理,每个质量浓度 6 样本进样分析,以当日标准
曲线计算血浆药物浓度、精密度与准确度,准确度
以 RE[RE=(测定浓度-配制浓度)/配制浓度表
示]。日内、日间精密度 RSD<8.8%,RE在−9.6%~
9.8%,符合生物药品分析测试要求。结果见表 3。
表 2 3个酚苷类成分在大鼠血浆中的标准曲线、相关系数、线性范围、定量下限
Table 2 Standard curves, correlation coefficients, linear ranges, and LLOQs of three phenolic glycosides in plasma of rats
成分 标准曲线 r2 线性范围/(ng·mL−1) 定量下限/(ng·mL−1)
毛蕊花糖苷 Y=3.55×10−3 X+9.49×10−3 0.995 5 7.77~3 880.00 3.88
异毛蕊花糖苷 Y=2.32×10−3 X+3.13×10−4 0.994 9 5.04~2 520.00 2.52
连翘酯苷 B Y=1.93×10−3 X+6.67×10−4 0.995 1 1.78~ 890.00 0.89
表 3 大鼠血浆中 3个酚苷类成分的日内、日间精密度和准确度 ( x±s, n = 6)
Table 3 Intra-day and Inter-day precision and accuracy of three phenolic glycosides in plasma of rats ( x±s, n = 6)
成分 质量浓度/
(ng·mL−1)
日内 日间
测定值/(ng·mL−1) 精密度 RSD/% RE/% 测定值/(ng·mL−1) 精密度 RSD/% RE/%
毛蕊花糖苷 7.77 8.41± 0.28 3.3 8.2 7.21± 0.48 6.7 −7.2
776.80 792.69±15.87 2.0 2.0 732.39± 21.41 2.9 −5.7
3 107.20 3
2.2 3.3 3 289.50±185.30 5.6 5.8
异毛蕊花糖苷 5.04 5.34± 0.32 6.0 6.0 5.42± 0.43 7.9 7.5
504.00 551.25±25.59 4.6 9.4 551.89± 25.59 4.6 9.5
2 016.00 2
2.8 6.2 1 876.70±132.20 7.0 −7.1
连翘酯苷 B 1.78 1.84± 0.16 8.8 3.4 1.61± 0.09 5.6 −9.6
178.00 176.90± 2.68 1.5 −0.6 173.23± 4.48 2.6 −2.7
712.00 778.36±19.49 2.5 9.3 781.50± 37.23 4.8 9.8
2.7.4 提取回收率与基质效应试验 取大鼠空白血
浆,操作同“2.7.3”项(A);另取 6 份不同来源的
空白血浆(B)及超纯水(C),同法处理,取上清液,
加入 3 个酚苷类成分及内标,配制高、中、低 3 个
质量浓度的含药样品;每个质量浓度 6 样本分析,
记录样品与内标的峰面积,以 B与 C的比值计算基
质效应,以 A与 C的比值计算提取回收率。结果表
明本实验条件下 3 个酚苷类成分的提取回收率均良
好,血浆基质对其离子化及测定无影响。结果见表 4。
2.7.5 稳定性试验 取大鼠空白血浆,操作同
“2.7.3”项,每个质量浓度进行 6样本分析,用于考
察样品经处理后 3 个冻融循环、室温放置 8 h 及
−20 ℃放置 14 d的长期稳定性。血浆中的毛蕊花糖
苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯苷 B在不同处理条件的
稳定性结果见表 5。各成分在血浆中经过 3 次冻融
循环、室温放置 8 h、−20 ℃下储存 14 d均稳定。
2.8 3个酚苷类成分的体内药动学
应用所建立的 UHPLC-MS/MS方法测定各时间
点血药浓度,将所得的 3个酚类成分的血药浓度-时
间数据用 DAS 3.0 药动学软件拟合,计算毛蕊花糖
苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯苷 B 在大鼠体内各项药
动学参数。药时曲线见图 2,主要药动学参数见表 6。
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表 4 3个酚苷类成分在大鼠血浆中的提取回收率与基质效应 ( x±s, n = 6)
Table 4 Recovery and matrix effect of three phenolic glycosides in plasma of rats ( x±s, n = 6)
成分 质量浓度/(ng·mL−1) 提取回收率 基质效应 平均值/% RSD/% 平均值/% RSD/%
毛蕊花糖苷 7.77 84.4 6.7 101.8 5.1
776.80 77.8 3.3 94.8 4.5
3 107.20 84.8 7.2 103.3 3.6
异毛蕊花糖苷 5.04 82.5 6.9 91.0 3.6
504.00 79.5 2.5 96.3 2.2
2 016.00 89.9 4.7 92.5 2.7
连翘酯苷 B 1.78 77.8 2.4 107.6 4.5
178.00 75.2 4.6 93.8 2.1
712.00 86.9 6.1 109.8 4.9
表 5 大鼠血浆中 3个酚苷类成分的稳定性 ( x±s, n = 6)
Table 5 Stability of three phenolic glycosides in plasma of rats ( x±s, n = 6)
成分 质量浓度/
(ng·mL−1)
冻融实验 8 h室温 −20 ℃放置 14 d
RE/% RSD/% RE/% RSD/% RE/% RSD/%
毛蕊花糖苷 7.77 −4.5 2.3 −5.1 1.1 −8.9 8.3
776.80 −3.4 4.7 −3.1 6.0 −9.1 7.2
3 107.20 3.4 5.5 −8.8 2.8 5.4 8.7
异毛蕊花糖苷 5.04 −5.6 1.5 −5.8 2.7 −3.8 1.9
504.00 −4.3 5.3 −2.3 5.8 5.1 7.7
2 016.00 −3.6 6.8 −6.3 6.5 3.3 9.5
连翘酯苷 B 1.78 −5.1 5.3 −3.4 6.4 −8.2 7.2
178.00 −2.7 4.2 −5.4 6.3 3.8 7.5
712.00 −3.3 4.8 −4.0 7.4 −2.8 4.7
图 2 大鼠 ig裸花紫珠提取物后 3个酚苷类成分的药时曲线
Fig. 2 Mean concentration-time profiles for three phenolic glycosides in plasma of rats after ig administration of C.
nudiflora extract
表 6 大鼠 ig裸花紫珠提取物后 3个酚苷类成分的主要药动学参数 ( x±s, n = 6)
Table 6 Main pharmacokinetic parameters of three phenolic glycosides in plasma of rats after ig administration of C. nudiflora
extract ( x±s, n = 6)
参数 单位 毛蕊花糖苷 异毛蕊花糖苷 连翘酯苷 B
AUC0-t ng·min·mL−1 93 881.65±18 326.65 29 204.97±8 499.88 15 027.05±3 763.82
AUC0-∞ ng·min·mL−1 100 776.25±25 227.72 30 006.63±8 709.22 16 237.88±3 872.06
Cmax ng·mL−1 2 179.00±355.60 737.57±210.31 227.30±48.38
t1/2z min 235.41±117.90 151.56±49.23 161.68±63.92
tmax min 23.33±5.16 23.33±5.16 30.00±0.00
0 100 200 300 400 0 100 200 300 400 0 100 200 300 400
t/min
3 000
2 500
2 000
1 500
1 000
500
0
1 000
800
600
400
200
0
300
250
200
150
100
50
0
血
药
浓
度
/(n
g·
m
L−
1 )
血
药
浓
度
/(n
g·
m
L−
1 )
血
药
浓
度
/(n
g·
m
L−
1 )
毛蕊花糖苷 异毛蕊花糖苷 连翘酯苷 B
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 23期 2015年 12月
·3538·
3 讨论
实验中考察了多种流动相组成,结果发现“2.1”
项下条件时,各分析物与内标响应较高,且峰形较
好;同时对比了不同色谱柱 Phenomenex® Kinetex
C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)、Agilent Eclipse
XDB-C18柱(100 mm×3.0 mm,1.8 μm)、Waters
ACQUITY UPLC® BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,
1.7 μm),结果表明 Phenomenex® Kinetex C18柱(50
mm×2.1 mm,1.7 μm)分离效果很好。
固相萃取方法操作较复杂,且成本相对较高,
因此采取了有机溶剂沉淀蛋白法。实验中比较了不
同种常用有机溶剂的提取效果,结果发现乙腈蛋白
沉淀法对生物样品进行前处理,简便快速、且样品
损耗低。此外在蛋白沉淀前加入 0.25 mol/L盐酸能
增强各分析物的响应,这可能与酸化能促进血浆蛋
白中分析物的释放有关。
从药时曲线中可看出毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖
苷及连翘酯苷 B均在 30 min左右达到最大血药浓
度,说明 3个成分在大鼠体内可被迅速吸收,这可
能与其相对较大的极性有关。毛蕊花糖苷的药时曲
线与文献报道基本一致[14];而裸花紫珠提取物中
连翘酯苷 B 的药动学规律与其他提取物中略有不
同[15-16],其原因可能是裸花紫珠中众多化合物的相
互作用所造成的。
此外,本实验尝试采用 Q1(100-800)监测模
式,对各时间点的血浆样品进行扫描,总离子流图
提取中发现了 m/z 179与 m/z 158峰,这种现象可能
是因为裸花紫珠中 3个酚苷类成分毛蕊花糖苷、异
毛蕊花糖苷及连翘酯苷B在肠道菌的水解作用下转
化成相应的苷元所造成的。
本实验建立的 UHPLC-MS/MS法专属性强、准
确度高、基质效应低,可用于大鼠血浆中毛蕊花糖
苷、异毛蕊花糖苷、连翘酯苷 B 的药动学研究。由
药动学参数可知毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、连翘
酯苷 B 在大鼠体内可被迅速吸收,根据这些特征可
为裸花紫珠的临床应用提供指导,为新剂型及新药
的开发提供依据。
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