全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 10 期 2015 年 5 月 ·1493·

川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素在模型与正常大鼠体内药动学比较研究
冯彬彬 1，张建海 1，牛小花 1，尚芳红 2，徐晓玉 2*
1. 重庆三峡医药高等专科学校，重庆 404120
2. 西南大学，重庆 400716
摘 要：目的 探讨川芎、延胡索中主要活性成分在模型与正常大鼠体内药动学规律与差异。方法 SD 大鼠分为对照组和
子宫内膜异位症模型组，每组 8 只，各组均按川芎嗪 50 mg/kg、阿魏酸 30 mg/kg、延胡索乙素 20 mg/kg ig 给药，采用高效
液相色谱法测定各组大鼠血浆中川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素的质量浓度，DAS2.0 程序计算药动学参数。结果 模型组川
芎嗪药时曲线下面积（AUC0~t）、达峰浓度（Cmax）、达峰时间（tmax）、半衰期（t1/2）和平均驻留时间（MRT0~t）与对照组相
比差异均不显著（P＞0.05）；模型组阿魏酸 AUC0~t、Cmax、tmax 都小于对照组，但差异没有显著性（P＞0.05），t1/2、MRT0~t显
著小于对照组（P＜0.05）；模型组延胡索乙素 AUC0~t、Cmax、tmax、MRT0~t 均显著大于对照组（P＜0.05）。结论 川芎、延
胡索主要活性成分在正常大鼠和模型大鼠的体内过程有所不同。阿魏酸在模型大鼠体内消除更快，延胡索乙素在模型大鼠体
内吸收浓度更高、消除更慢，川芎嗪在正常及模型大鼠的体内过程无显著性差异。
关键词：川芎；延胡索；子宫内膜异位症；药动学；川芎嗪；阿魏酸；延胡索乙素
中图分类号：R285.51 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)10 - 1493 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.10.016
Comparative study on in vivo pharmacokinetics of tetramethylpyrazine, ferulic
acid, and tetrahydropalmatine between model and normal rats
FENG Bin-bin1, ZHANG Jian-hai1, NIU Xiao-hua1, SHANG Fang-hong2, XU Xiao-yu2
1. Chongqing Three Gorges Medical College, Chongqing 404120, China
2. Southwest University, Chongqing 400716, China
Abstract: Objective To study the in vivo pharmacokinetic law and difference of active compounds from Chuanxiong Rhizoma and
Corydalis Rhizoma between control and model rats. Methods Sixteen Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups:
control and model rats with endometriosis, eight rats in each group. All the rats were ig administrated of tetramethylpyrazine (50
mg/kg), ferulic acid (30 mg/kg), and tetrahydropalmatine (20 mg/kg). All the concentration of tetramethylpyrazine, ferulic acid, and
tetrahydropalmatine in plasma was analyzed by RP-HPLC and the data were treated by DAS 2.0 program. Results The main
pharmacokinetic parameters of tetramethylpyrazine in the model group, such as AUC0~t, Cmax, tmax, t1/2, and MRT0~t, were no
significant difference compared with the control group (P > 0.05), and AUC0~t, Cmax, and tmax of ferulic acid in model group were less
than those in the control group with no significant difference (P > 0.05); t1/2 and MRT0~t of ferulic acid in the model group were
obviously less than those in control group (P＜0.05); AUC0~t, Cmax, tmax, and MRT0~t of tetrahydropalmatine in the model group were
bigger than those in the control group with significant difference (P < 0.05). Conclusion There is difference of pharmacokinetics of
the main active compounds from Chuanxiong Rhizoma and Corydalis Rhizoma between model and control rats. Ferulic acid is removed
more quickly in model rats, tetrahydropalmatine is absorbed highly but removed slower, tetramethylpyrazine is no significant
difference comparee with the control group.
Key words: Chuanxiong Rhizoma; Corydalis Rhizoma; endometriosis; pharmacokinetics; tetramethylpyrazine; ferulic acid;
tetrahydropalmatine


收稿日期：2014-10-10
基金项目：重庆市重大科技攻关项目（CSTC2008AA5004）；重庆市自然科学基金项目（CSTC2012jjA10012）
作者简介：冯彬彬，女，博士，副教授，主要从事中药药理与新药开发。E-mail: fbb200596@126.com
*通信作者 徐晓玉，女，教授，博士生导师。E-mail: xxy0618@sina.com
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长期以来，中药活性物质体内过程的研究是
中药药动学的研究热点[1]。资料显示中药在生物体
不同的机能状态下，其药理作用和体内过程可能不
同[2]。既往有研究报道中药在证侯动物模型中的药
动学特征与正常动物体内有差异[3-4]，研究中药在病
理情况下药动学特征与在正常动物体内特征的差
异，对临床用药有指导意义。川芎 Chuanxiong
Rhizoma 和延胡索 Corydalis Rhizoma 作为我国传统
活血化瘀中药，常配伍使用治疗血瘀证，其中含有
多种有效成分如川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素等，
目前川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素的药动学研究多
是在正常动物体内进行的[5-9]，而病理状态下的药动
学特点未见报道。如何系统评价川芎嗪、阿魏酸、
延胡索乙素在病理大鼠体内的药动学行为，建立符
合中药多组分、多靶点整体药效作用特征的中药药
动学研究新思路与新方法是本研究所需要解决的
关键科学问题。为此，本实验以活血化瘀中药川芎、
延胡索的 3 种主要有效成分为模型药物，以血瘀为
主的妇科疾病子宫内膜症（痛经或持续下腹痛、不
孕、月经失调[10]）为观察疾病，以子宫内膜异位症
大鼠模型为疾病动物模型，进行 3 种有效成分在大
鼠子宫内膜异位症模型与正常大鼠体内多组分整
合药动学研究。
1 材料
1.1 仪器和药品
高效液相色谱仪（Agilent1200），智能柱温箱，
MWD 紫外检测器；H1650-W 台式微量高速离心机
（长沙湘仪离心机仪器有限公司）；EL-204 电子天平
［梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司］；WH-2 微
型涡旋混合仪（上海沪西分析仪器厂）。甲醇为色
谱纯（迪马公司）；冰醋酸为分析纯；水为去离子
水；川芎嗪（批号 110817-200305）、阿魏酸（批号
110773-200611）、延胡索乙素（批号 110726-200610）
对照品均购自中国食品药品检定研究院；香豆素对
照品购自 Sigma 公司；川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙
素原料药（质量分数均在 98%以上）购自南京泽朗
有限责任公司。
1.2 动物
SD 大鼠 30 只，雌性，SPF 级，体质量为（240±
20）g，由重庆医科大学实验动物中心提供，合格
证号 SCXK（渝）2007-0001，动物饲养于 SPF 级实
验动物中心，实验环境合格证号 SYXK（渝）
2009-0002。
2 方法与结果
2.1 川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素定量测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱为 Agilent SB-C18 ODS
（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.3%冰
醋酸（42∶58）；体积流量 1.0 mL/min；检测波长
280 nm；柱温 30 ℃；进样量 10 μL。
2.1.2 对照品溶液的制备 取川芎嗪对照品 16
mg，精密称定，置 100 mL 量瓶中，加甲醇溶解，
并定容至刻度，得储备液为 0.168 8 mg/mL，并将
储备液稀释成一系列不同质量浓度的对照品溶液；
同样方法配制质量浓度为 0.164 8 mg/mL 阿魏酸储
备液，质量浓度为 0.825 0 mg/mL 延胡索乙素储备
液，并各自稀释成一系列不同质量浓度的对照品溶
液；质量浓度为 0.73 mg/mL 香豆素储备液，再稀
释至质量浓度为 7.3 μg/mL 的内标溶液，备用。
2.1.3 标准曲线的制备 精密吸取 8 份大鼠空白血
浆各 100 μL，分别精密加入 50 μL 不同质量浓度的
川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素对照品溶液和 150 μL
香豆素内标溶液，分别制成含川芎嗪 0.035 1、0.140 6、
0.562 5、1.057 0、2.109 0、4.219 0、8.438 0、16.880 0
μg/mL，阿魏酸 0.032 2、0.129 0、0.515 0、1.030 0、
2.060 0、4.120 0、8.240 0、16.480 0 μg/mL，延胡
索乙素 0.016 1、0.064 6、0.258 3、0.516 5、1.033 0、
2.065 0、4.130 0、8.250 0 μg/mL 的系列溶液，涡旋
2 min，10 000 r/min 离心 5 min，上清液过 0.22 μm
微孔滤膜，取 10 μL 进样，分别以川芎嗪、阿魏酸、
延胡索乙素各成分和内标的峰面积之比（Y）与川
芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素各成分质量浓度（X）
做回归方程，绘制标准曲线。得到各成分的回归方
程分别为川芎嗪：Y＝0.031 8 X＋0.014，r＝0.999 6；
阿魏酸：Y＝0.640 5 X－0.068 6，r＝0.999 8；延胡
索乙素：Y＝0.149 1 X＋0.018 6，r＝0.999 5。川芎
嗪、阿魏酸、延胡索乙素分别在 0.035 1～16.880 0
μg/mL、0.032 2～16.480 0 μg/mL和0.016 1～8.250 0
μg/mL 线性关系良好。
2.1.4 专属性考察 分别取空白血浆，空白血浆与
川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素对照品混合溶液以及
各血浆样品溶液，在上述色谱条件下分别测定，测
得的色谱图见图 1。可见，在本色谱条件下，川芎
嗪、阿魏酸、延胡索乙素 3 种成分和内标（香豆素）
均得到较好分离，无明显干扰峰出现，血浆中杂质
不干扰药物浓度的测定。
2.1.5 精密度试验 样品配制同“2.1.3”项，9 份
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2 4 6 8 10 12




1-香豆素（内标） 2-延胡索乙素 3-阿魏酸 4-川芎嗪
1-coumarin (internal standard) 2-tetrahydropalmatine 3-ferulic acid 4-tetramethylpyrazine
图 1 对照组空白血浆(A)、模型组空白血浆(B)、混合对照品溶液(C)、对照组血浆样品 (D) 和模型组血浆样品 (E) HPLC
色谱图
Fig. 1 HPLC of blank plasma in control group (A), blank plasma in model group (B), mixed reference solution (C), plasma
sample in control group (D), and plasma sample in model group (E)
样品各以 1 d 内测得的各物质质量浓度计算日内精
密度，以 1 周内 3 次测定的各物质质量浓度计算日
间精密度。结果川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素低、
中、高质量浓度的日内精密度 RSD 分别为 5.43%、
9.79%、3.43%，13.18%、4.16%、6.74%，2.23%、
9.89%、3.72%（n＝5）；日间精密度 RSD 分别为
12.23%、8.71%、3.32%，6.74%、1.77%、3.40%，
12.18%、7.79%、4.80%（n＝5）。可以看出川芎嗪、
阿魏酸、延胡索乙素低、中、高质量浓度精密度 RSD
均小于 15%，表明精密度良好，符合生物样品精密
度要求。
2.1.6 回收率试验 精密吸取大鼠空白血浆 100
μL，分别加入低、中、高不同质量浓度的川芎嗪、
阿魏酸、延胡索乙素各成分对照品溶液各 50 μL，
再加入 150 μL 香豆素内标溶液，每个质量浓度平行
3 份，配制成川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素各成分
质量浓度分别为 0.562 5、4.219 0、8.475 0 μg/mL，
0.515 0、4.120 0、8.480 0 μg/mL 和 0.258 3、3.854 0、
6.780 0 μg/mL 的 3 种溶液，按“2.1.2”项下方法测
定，代入各自标准曲线分别计算川芎嗪、阿魏酸、
延胡索乙素各成分在血浆中的质量浓度，并计算回
收率。结果川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素低、中、
高质量浓度的平均回收率（RSD）分别为 98.80%
（3.17%）、104.22%（5.12%）、96.66%（1.91%），
97.88% （ 6.98% ）、 110.43% （ 1.96% ）、 98.77%
（1.30%），102.38%（5.44%）、97.34%（3.36%）、
99.88%（1.39%），回收率均在 80%～120%，RSD
均小于 10%，表明该方法回收率符合要求。
2.2 子宫内膜异位症模型的制备
2.2.1 动情期大鼠的选择 实验前 SD 大鼠正常饲
养 2 周适应新环境，自由饮食饮水。选择大鼠的动
情期：每天定时进行阴道涂片检查，选择动情周期
为 4～5 d，并连续有 2 个正常动情周期的大鼠，在
动情期对大鼠行造模手术。具体操作步骤：固定大
鼠，暴露下腹部，将消毒棉签用生理盐水湿润后插
入动物阴道内，并在阴道内轻轻转动一周后取出，
将带有阴道内含物的棉签在载玻片上均匀涂片，空
气中自然挥干。将涂片放入 95%乙醇中固定 30 min，
苏木素染色 2 min，自来水冲洗干净，干燥。载玻片
放在双目显微镜下观察阴道涂片的细胞学变化。根
据大鼠阴道细胞脱落情况确定大鼠动情期。动情间
期：有大量的白细胞和少量有核上皮细胞；动情前
期：有大量有核上皮细胞，偶有少量角化上皮细胞，
无白细胞；动情期：基本全部是大量形态不规则的
无核角化上皮细胞，间有少量上皮细胞；动情后期：
大量白细胞，也有少量融合的角化上皮细胞[11]。
2.2.2 SD大鼠自体子宫内膜异位症模型复制 将动
情期大鼠用 3.5%水合氯醛 ip 麻醉后，固定其四肢及
4
2
3 1
4
C
E
2
1
4
1
A
1
B
D
2
3
1
2 4 6 8 10 12 2 4 6 8 10 12
t/min
3
·1496· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 10 期 2015 年 5 月

头部于消毒后的手术台板上，下腹部剪毛，进行常
规消毒。在尿道口上约 1 cm 处纵切约 1.5 cm 切口，
剪开皮肤及肌肉，游离右侧子宫，两端结扎，并结
扎两端间的子宫系膜血管，切除远端约 1.5 cm 长的子
宫段，放入盛有生理盐水的培养皿中，去除多余的脂
肪组织，用眼科剪将子宫组织剪成约 5 mm×5 mm 的
3 块，一块送病理检验证实是子宫组织，另 2 块以
其内膜对着腹壁，浆膜朝向腹腔缝于血管丰富的腹
壁，用 3-0 的线固定四角于腹壁内侧；关腹前用生
理盐水冲洗腹腔，并用庆大霉素进行消毒，腹腔用
3-0 线连续缝合，用注射庆大霉素消毒[12]。术后正
常清洁饲养，用庆大霉素注射液消毒 3 d。造模 28 d
后，再次开腹观察异位子宫内膜的生长情况。用游
标卡尺测量异位灶大小，符合以下条件者为模型成
功[13]：移植物体积增大，呈隆起透亮的小囊状，内
有液体积聚，外被结缔组织或大网膜覆盖并有血管
生成；用游标卡尺测量移植物大小，移植物体积≥
8 mm3；切取移植物送病检，证实移植物存活并有
子宫内膜上皮、间质细胞及腺体生长。
2.3 分组及血浆样品制备
取 8 只符合模型成功标准的大鼠作为子宫内膜
异位症模型组，另取 8 只正常大鼠为对照组，受试
大鼠禁食不禁水 12 h 后，根据前期工作及相关预试
验较为理想的结果[5-7]，分别按川芎嗪 50 mg/kg、阿
魏酸 30 mg/kg、延胡索乙素 20 mg/kg ig 给药，并于
给药前与给药后 5、10、20、30、45、60、90、120、
180、300、480、720、1 440 min 眼眶取静脉血 0.5 mL，
所采血液均放入装有肝素钠的 EP 管中，10 000
r/min 离心 5 min；取血浆放−20℃冰箱保存，待测。
2.4 血样处理
精密吸取大鼠血浆样品 100 μL，加 150 μL 内
标溶液和 150 μL 甲醇，按“2.1.3”项下的处理方法
处理检测。
2.5 药动学结果
所得数据采用 DAS 2.0 药动学程序进行处理，
川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素在正常大鼠及子宫内
膜异位症模型大鼠体内药时曲线见图 2，各成分非
房室模型药动学参数见表 1。结果显示，3 种活性
成分主要药动学参数存在不同程度的差异。模型组
川芎嗪药时曲线下面积（AUC0~t）、达峰浓度（Cmax）、
达峰时间（tmax）、半衰期（t1/2）和平均驻留时间
（MRT0~t）与对照组相比差异均没有显著性（P＞
0.05）；模型组阿魏酸 AUC0~t、Cmax、tmax 均小于

川芎嗪
Normal 川芎
Model 川芎嗪


阿魏酸
Normal 阿魏
Model 阿魏酸


延胡索乙素
Normal 延胡索乙素
Model 延胡索乙素


图 2 对照组和模型组大鼠 3 种成分药-时曲线
Fig. 2 Mean plasma concentration-time curves of
tetramethylpyrazine, ferulic acid, and tetrahydropalmatine
of rats in control and model groups
对照组，但差异没有显著性（P＞0.05），t1/2、MRT0~t
显著小于对照组（P＜0.05）；模型组延胡索乙素
AUC0~t、Cmax、tmax、t1/2、MRT0~t 均大于对照组，
其中 AUC0~t、Cmax、tmax、MRT0~t 均有显著性（P＜
0.05），二者 t1/2 没有差异（P＞0.05）。
3 讨论
3.1 测定方法的选择
本实验采用本课题组建立的稳定方法[5-7]确定
色谱条件为甲醇-0.3%冰醋酸（42∶58），体积流量
1.0 mL/min，柱温 30 ℃。该测定方法精密度高，
回收率好，3 种活性成分和内标峰型良好，无杂质
干扰，基线稳定，适用于生物样本的测定。经方法
学确证，复方在色谱条件下，分离效果好，空白血
浆对川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素没有干扰。各方
法回收率在 80%～120%，日内、日间精密度均小于
15%，方法专属性强，灵敏度高，符合生物制品
HPLC 检测要求。
血
药
浓
度
/(μ
g·
m
L−
1 )

10
8
6
4
2
0
0 5 10 15 20 25
5

4

3

2

1

0
血
药
浓
度
/(μ
g·
m
L−
1 )

4

3

2

1

0
血
药
浓
度
/(μ
g·
m
L−
1 )

0 5 10 15 20 25
t/h
0 5 10 15 20 25
川芎
对照组
模型组
延胡索乙素
阿魏酸
对照组
模型组
对照组
模型组

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表 1 川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素在对照组和模型组大鼠中药动学参数 ( ± = 8x s , n )
Table 1 Pharmacokinetic parameters of tetramethylpyrazine, ferulic acid, and tetrahydropalmatine of rats in control and
model groups ( ± = 8x s , n )
参数 单位
川芎嗪 阿魏酸 延胡索乙素
对照组 模型组 对照组 模型组 对照组 模型组
AUC0~t mg·h·L−1 13.375±7.135 14.550±2.896 8.586± 4.781 6.816±0.980 2.895±1.606 16.079±5.877*
MRT0~t h 1.412±0.417 1.398±0.124 6.158± 3.038 1.646±0.281* 1.985±0.346 3.717±1.778*
t1/2 h 1.102±0.433 0.880±0.313 14.746± 1.485 4.801±2.263* 1.179±0.391 2.081±1.987
tmax h 0.375±0.077 0.361±0.068 0.510± 0.246 0.417±0.091 0.844±0.129 2.500±0.548*
Cmax mg·L−1 8.796±3.276 8.828±1.520 4.087± 2.245 3.895±0.455 1.165±0.644 3.370±0.617*
与对照组比较：*P＜0.05
*P < 0.05 vs control group
3.2 造模方法的确定
子宫内膜异位症是妇科领域重要研究课题之
一。本实验采用的动物模型的制作主要基于子宫内
膜种植学说，通过手术将子宫内膜组织自体移植于
腹腔各处（人体异位内膜的常见部位），手术移植
法诱发大鼠模型，成功率较高，是目前国内外建立
该模型的主要方法。造模过程中首先要掌握好大鼠
的动情期，其次要注意内膜对着腹壁，浆膜朝向腹
腔缝于血管丰富的腹壁固定。
3.3 药动学特征
本实验结果表明川芎嗪的 AUC0~t、MRT0~t、
tmax、Cmax 在正常和病理状态下没有差异，但是病理
状态下的 AUC0~t和 Cmax 大于对照组，MRT0~t和 t1/2
较正常状态下短，表明川芎嗪成分在病理条件下有
吸收增加趋势，消除有加快趋势；模型组阿魏酸
AUC0~t、Cmax、tmax 都小于对照组，但差异没有显著
性（P＞0.05），t1/2、MRT0~t 显著小于对照组（P＜
0.05），提示阿魏酸在大鼠病理状态下吸收快，消除
也快，不宜在体内蓄积；模型组延胡索乙素 AUC0~t、
Cmax、tmax、t1/2、MRT0~t 均大于对照组，其中 AUC0~t、
Cmax、tmax、MRT0~t 均有显著性（P＜0.05），提示延
胡索乙素成分在大鼠病理状态下吸收显著增加，作
用时间明显延长。本实验结果说明病理条件均不同
程度影响 3 种活性成分的吸收和消除。另外，本实
验通过病理状态下给药从药动学角度证明了药物
在不同环境下体内动力学特征存在差异，实验结果
也为临床试验提供了依据。
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