全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 3 期 2013 年 2 月

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HPLC法测定不同主产地莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和 β-榄香烯
毛春芹 1，陆兔林 1，姜国非 1，苏 桃 2，蔡宝昌 2
1. 南京中医药大学药学院，江苏 南京 210046
2. 南京中医药大学 江苏省中药炮制重点实验室，江苏 南京 210046
摘 要：目的 采用 HPLC 法同时测定不同产地莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和 β-榄香烯的量，为临床合理用
药提供科学依据。方法 固定相为依利特 Hypersil ODS 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；乙腈-水为流动相，梯度洗脱；体
积流量 1 mL/min；柱温 25 ℃；检测波长 214 nm；进样量 10 μL。结果 在上述色谱条件下测得莪术二酮、莪术醇、吉
马酮、β-榄香烯分别在 8～264、7～214、2～52、8～253 μg/mL 时与色谱峰面积线性关系良好，平均回收率分别为 98.3%、
98.0%、98.2%、97.3%，RSD 分别为 2.9%、1.5%、2.0%、2.7%。结论 该方法准确、灵敏，可作为不同产地莪术饮片的
质量控制方法；测定结果表明，不同主产地莪术饮片中 4 种成分的量差异较大，临床应用时应注意区分。
关键词：莪术；莪术二酮；莪术醇；吉马酮；β-榄香烯；高效液相色谱法
中图分类号：R286.022 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)03 - 0305 - 04
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.03.014
Determination of curdione, curcumol, germacrone, and β-elemene in processed
Curcumae Rhizoma from different habitats
MAO Chun-qin1, LU Tu-lin1, JIANG Guo-fei1, SU Tao2, CAI Bao-chang2
1. College of Pharmacy, Nanjing University of Chinese Medcine, Nanjing 210046, China
2. Jiangsu Key Laboratory of Chinese Medicine Processing, Nanjing University of Chinese Medcine, Nanjing 210046, China
Key words: Curcumae Rhizoma; curdione; curcumol; germacrone; β-elemene; HPLC

莪术为姜科姜黄属植物蓬莪术 Curcuma
phaeocaulis Val、广西莪术 C. kwangsiensis S. G. Lee
et C. F. Liang 和温郁金 C. wenyujin Y. H. Chen et C.
Ling 的干燥根茎，主产于广西、四川、浙江等地。
现代研究显示，莪术中主要含有挥发油（1%～2.5%）
和姜黄素两大类成分[1]。姜黄素类物质具有抗炎、
抗肿瘤、调血脂、抗氧化等作用[2-3]。挥发油中的主
要成分为单萜和倍半萜类，如莪术二酮、莪术醇、
吉马酮、β-榄香烯等[4]。吉马酮和莪术二酮具有明
显的抗肿瘤生理活性[5]，莪术醇是莪术抗癌、抗病毒、
抗菌等作用的有效成分之一[6]，β-榄香烯作为一种新
型非细胞毒性抗癌药已被广泛应用于临床[7]。《中国
药典》2010 年版莪术饮片定量测定项下仅用总挥发
油量来控制其质量，不能完全真实地反映其内在品
质，有违同质同效的原理。国内外文献对于莪术的
研究主要集中于生药和莪术油[8]，同时测定莪术
饮片中多个挥发性成分的研究报道较少；本实验
首次对莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和
β-榄香烯的量进行同时测定，能更好地控制莪术
饮片质量。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1100 高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）
包括：四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、紫外检
测器；色谱柱：依利特 Hypersil ODS 柱（250 mm×
4.6 mm，5 μm，大连依利特分析仪器有限公司）。
1.2 试药
莪术二酮对照品（批号 13657-68-6）购于上海
沪云医药开发有限公司，莪术醇对照品（批号
100185-200506），吉马酮（牻牛儿酮）对照品（批号

收稿日期：2012-05-16
基金项目：国家科技部重大新药创制项目（2009ZX09308-004）；江苏省高校自然科学研究重大项目（09KJA360001）；《中国药典》2010 年版
课题（YZ-108）
作者简介：毛春芹（1963—），女，江苏南京人，高级实验师，主要研究方向为中药质量控制及新药研发。Tel: (025)85811835 E-mail: mcq63@163.com
网络出版时间：2013-01-08 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20130108.0950.006.html
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 3 期 2013 年 2 月

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111665-200902，β-榄香烯对照品（批号 100268-
200401）购于中国药品生物制品检定所。
样品均购自莪术主产地（四川、广西、浙江），
经南京中医药大学药学院巢建国教授鉴定为姜科植
物蓬莪术 Curcuma phaeocaulis Val、广西莪术
Curcuma kwangsiensis S. G. Lee et C. F. Liang及温郁
金 Curcuma wenyujin Y. H. Chen et C. Ling 的干燥根
茎。分别取净莪术按《中国药典》2010 年版制得各
产地相应的莪术饮片。样品来源及批次见表 1。乙
腈、甲醇为色谱纯，其他所用试剂均为分析纯。
表 1 样品来源及批次
Table 1 Sources and batches of samples
批号 产地 来源
SW080716 浙江 浙江中医药大学饮片厂
SW091203 浙江 浙江中医药大学饮片厂供原药自制
SW100124 浙江 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司
SW100118 浙江 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司
SW080717 浙江 浙江中医药大学饮片厂
SW091204 浙江 浙江中医药大学饮片厂供原药自制
SW100204 浙江 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司供原药自制
SW100207 浙江 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司供原药自制
SP100123 四川 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司
SP100127 四川 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司
SP100203 四川 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司供原药自制
SK100122 广西 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司
SK100202 广西 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司供原药自制
SK100209 广西 安徽丰原铜陵中药饮片有限公司供原药自制

2 方法与结果
2.1 色谱条件[9]
以依利特 Hypersil ODS-C18 色谱柱（250 mm×
4.6 mm，5 μm）；乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，
乙腈（A）-水（B），0～30 min，40%～60% A；30～
40 min，60%～80% A；40～60 min，80%～90% A。
下一个循环前用 100%乙腈冲洗色谱柱 10 min，继
续用 40%乙腈平衡 10 min。柱温 25 ℃；体积流量
1.0 mL/min；检测波长 214 nm。
2.2 溶液的配制
2.2.1 对照品储备液的制备 精密称取各对照品适
量，置于 10 mL 量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，
即得含莪术二酮 0.264 mg/mL、莪术醇 0.214
mg/mL、吉马酮 0.052 mg/mL、β-榄香烯 0.253 mg/mL
的对照品储备液。
2.2.2 供试品溶液的制备 取莪术饮片粉末 0.5 g，
精密称定，加乙醚超声提取 3 次，每次用量为 10
mL，时间为 10 min，合并滤液，用少量乙醚洗涤残
渣及滤器，合并乙醚液，挥干乙醚，残渣加甲醇溶
解并定容至 10 mL，摇匀，滤过，即得。
2.2.3 混合对照品溶液的配制 精密吸取上述对照
品储备液 5 mL，置于 10 mL 量瓶中，甲醇定容至刻
度，摇匀，重复此操作再连续稀释 4 次，最终使莪术
二酮分别为 264、132、66、33、17、8 μg/mL；莪术
醇分别为 214、107、53、27、13、7 μg/mL；吉马酮
分别为 52、26、13、7、3、2 μg/mL；β-榄香烯分别
为 253、127、63、32、16、8 μg/mL。
2.3 专属性试验
分别取混合对照品溶液、供试品溶液，注入液
相色谱仪中，按“2.1”项色谱条件，进样 10 μL，
测定，结果见图 1。表明，莪术二酮、莪术醇、吉
马酮和 β-榄香烯分离良好，在各出峰处均无干扰。
2.4 标准曲线及线性范围
各对照品溶液分别进样 10 μL，重复 2 次，按
“2.1”项下测定峰面积值，以峰面积平均值和对照
品质量浓度进行回归处理，计算线性回归方程、线
性范围和相关系数（r），结果见表 2。
2.5 精密度试验
取同一混合对照品储备液（莪术二酮、莪术醇、
吉马酮、β-榄香烯分别为 0.264、0.214、0.052、0.253
mg/mL），连续进样 6 次，进样量 10 μL，测定莪
术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的峰面积值，
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1-莪术二酮 2-莪术醇 3-吉马酮 4-β-榄香烯
1-curdione 2-curcumol 3-germacrone 4-β-elemene
图 1 混合对照品 (A) 和样品 (B) 的 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of mixed reference
substances (A) and sample (B)
计算得其 RSD 分别为 0.7%、0.6%、0.8%、0.5%。
2.6 稳定性试验
取批号为 SW100204 的样品粉末 0.5 g，按
“2.2.2”项方法制备供试品溶液，每隔 2 h 进样 10
μL，进行测定，计算峰面积在 12 h 内的 RSD 值，
结果莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的 RSD
分别为 0.8%、0.5%、0.3%、0.6%，表明供试品溶
液在 12 h 内稳定。
2.7 重复性试验
取批号为 SW100204 的样品粉末 0.5 g，精密称
定，按“2.2.2”项方法制备供试品溶液，平行制备
6 份，在上述色谱条件下，进样量 10 μL，进行测定，
计算莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯峰面积
的 RSD，结果分别为 2.1%、2.0%、2.8%、2.3%。
2.8 加样回收率试验
精密称取 9 份批号为 SW100204 的莪术粉末
0.25 g，分别置于具塞锥形瓶中，再精密加入 1.320
表 2 对照品的标准曲线、线性范围及相关系数
Table 2 Standard curve, linearity range, and correlation coefficient of reference substances
对照品 标准曲线 线性范围 / (μg·mL−1) r
莪术二酮 Y＝1.643×104 X＋284.31 8～264 0.999 7
莪术醇 Y＝3.271×103 X＋ 45.98 7～214 0.999 8
吉马酮 Y＝3.851×104 X＋128.51 2～ 52 0.999 9
β-榄香烯 Y＝1.981×103 X＋ 33.55 8～253 0.999 8

mg/mL 莪术二酮、1.068 mg/mL 莪术醇、0.316
mg/mL 吉马酮、0.506 mg/mL β-榄香烯对照品溶液
1.2、1.0、0.8 mL（每个质量浓度取 3 份），照供试
品溶液制备项下方法制备样品，注入液相色谱仪中，
色谱条件同前，进样 10 μL，计算加样回收率。结
果莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的平均回
收率分别为 98.3%、98.0%、98.2%、97.3%，RSD
分别为 2.9%、1.5%、2.0%、2.7%。
2.9 样品测定
取样品（过 3号筛）约 0.5 g，精密称定，按“2.2.2”
项方法制备供试品溶液。按上述测定方法分别测定
其中 4 种成分的量，结果见表 3。
3 讨论
中药饮片是中成药、中药汤剂和中药配方颗粒
的处方药。既可根据处方调配入汤药，又可作为原
料生产中成药和中药配方颗粒。其质量优劣和能否
合理地应用，直接关系到中药的临床疗效。所以必
须制定安全、有效和可控的临床常用中药饮片的质
量标准，使中药饮片、中药汤剂、中成药的安全、
有效及可控性得到保证。本实验结果表明，3 个主
产地的莪术饮片中 4 种所测成分差异较大，同一产
地差异也较大，《中国药典》2010 年版规定莪术来
源有 3 个，而其成分的种类和数量均有较大的差异，
这样的差异使其在临床的疗效无法保持一致性，建
议《中国药典》2005 年版中如葛根、粉葛，关黄柏、
云黄柏等一样，将其分列使用以保证临床使用的有
效性和准确性。建立规范的 GAP 生产基地，保证
中药饮片原料的一致性。
贮藏时间也是保证莪术饮片质量的一个重要因
素[10-11]。研究发现莪术饮片贮存 2 年以上，本实验
所测 4 种成分损失均较大，提示饮片在使用过程中
应注意贮藏条件，注意样品保质期。因本实验收集
的批次较少，没有系统跟踪其成分损失的变化规律
和贮存环境的相关性，相关研究有待下一步开展。
在流动相的选择方面，选用依利特 Hypersil
ODS 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，分别



0 10 20 30 40 50 60
0 10 20 30 40 50 60
A
B
1
2
3
4
1
2
3 4
t / min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 3 期 2013 年 2 月

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表 3 不同产地莪术中 4种成分的量 (n＝3)
Table 3 Determination of four ingredients in Curcuma Rhizoma from different habitats (n＝3)
批 号 莪术二酮 / (mg·g−1) 莪术醇 / (mg·g−1) 吉马酮 / (mg·g−1) β-榄香烯 / (mg·g−1)
SW080716 0.10 0.10 0.09 0.43
SW091203 0.20 2.00 0.23 1.33
SW100124 2.60 2.98 0.59 0.56
SW100118 2.99 1.78 1.62 0.99
SW080717 0.19 0.48 0.05 0.42
SW091204 0.19 1.70 0.19 0.73
SW100204 2.62 2.99 0.70 0.88
SW100207 3.30 1.90 1.56 1.80
SP100123 2.80 1.50 0.85 0.94
SP100127 2.67 1.52 0.51 1.00
SP100203 3.00 2.82 0.98 3.01
SK100122 1.85 2.13 0.89 1.86
SK100202 1.73 2.17 0.89 2.13
SK100209 1.87 1.93 0.75 0.41

采用不同梯度的流动相进行色谱分离，结果表明流
动相为乙腈（A）-水（B），0～30 min，40%～60%
A；30～40 min，60%～80% A；40～60 min，80%～
90% A，分离效果最佳。
在供试品溶液提取制备条件方面，对提取溶剂、
提取方式及提取次数进行了考察。发现采用乙醚超
声提取，提取效果较好，为保证超声提取温度不至
升高到影响成分测定的程度，确定提取时间为 10
min；提取次数为 3 次。
本实验方法简便、快速、准确，为制定莪术饮
片的质量标准和质量控制提供了依据，同时对于含
莪术饮片的中成药制剂的质量标准和质量控制也有
参考价值。
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