全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 4 期 2015 年 2 月

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金银花中酚酸类成分及其抗炎活性研究
宋亚玲 1, 2，王红梅 1, 2，倪付勇 1, 2，王雪晶 1, 2，赵祎武 1, 2，黄文哲 1, 2，王振中 1, 2，萧 伟 1, 2*
1. 江苏康缘药业股份有限公司，江苏 连云港 222000
2. 中药制药过程新技术国家重点实验室，江苏 连云港 222000
摘 要：目的 研究金银花 Lonicerae Japonicae Flos 中酚酸类成分及其抗炎活性。方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20
柱色谱等方法分离纯化，根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定；采用脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞 RAW264.7 炎症
反应模型，考察金银花中酚酸类成分对巨噬细胞经 LPS 刺激后产生的炎症因子 [NO、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞
介素-6（IL-6）] 的影响，评价其抗炎活性。结果 从金银花醋酸乙酯部位中分离得到 12 个化合物，包括 8 个酚酸、3 个环
烯醚萜苷和 1 个黄酮类成分，分别鉴定为新绿原酸（1）、隐绿原酸（2）、3,5-二咖啡酰奎宁酸（3）、3,4-二咖啡酰奎宁酸（4）、
4,5-二咖啡酰奎宁酸（5）、绿原酸（6）、咖啡酸（7）、咖啡酸甲酯（8）、断氧化马钱子苷（9）、裂环马钱苷（10）、獐芽菜
苷（11）和木犀草素（12）。对其中的酚酸类化合物 1～8 进行了体外抗炎活性实验，结果表明，化合物 1～8 对 LPS 刺激的巨
噬细胞炎症因子均具有不同程度的抑制作用。结论 酚酸类成分是金银花的主要抗炎活性成分之一，其中化合物 7 活性最强。
关键词：金银花；酚酸类；抗炎活性；3,5-二咖啡酰奎宁酸；绿原酸；咖啡酸；裂环马钱苷
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)04 - 0490 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.04.006
Study on anti-inflammatory activities of phenolic acids from
Lonicerae Japonicae Flos
SONG Ya-ling1, 2, WANG Hong-mei1, 2, NI Fu-yong1, 2, WANG Xue-jing1, 2, ZHAO Yi-wu1, 2, HUANG
Wen-zhe1, 2, WANG Zhen-zhong1, 2, XIAO Wei1, 2
1. Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd., Lianyungang 222000, China
2. State Key Laboratory of New-tech for Chinese Medicine Pharmaceutical Process, Lianyungang 222000, China
Abstract: Objective To study the anti-inflammatory of phenolic acids from Lonicerae Japonicae Flos. Methods The compounds in
the EtOAc fraction were isolated and purified by silica gel and Sephadex LH-20 column chromatographies, and preparative HPLC as
well. The structures were identified by various spectroscopic data such as ESI-MS, 1H-NMR, and 13C-NMR data. The
anti-inflammatory effects were evaluated by a in vitro model of LPS-stimulated RAW264.7 macrophages. Results Eight phenolic
acids, three iridoids, and one flavonoid were isolated from the extracts of Lonicerae Japonicae Flos and identified as 5-O-
caffeoylquinic acid (1), 4-O-caffeoylquinic acid (2), 3,5-di-O-caffeoylquinic acid (3), 3,4-di-O-caffeoylquinic acid (4), 4,5-di-O-
caffeoylquinic acid (5), chlorogenic acid (6), caffeic acid (7), methyl caffeate acid (8), secoxyloganin (9), secologanoside (10),
sweroside (11), and luteolin (12). Compounds 1—8 showed the anti-inflammatory activity in different degrees. Conclusion Phenolic
acids are the main anti-inflammatory constituents in Lonicerae Japonicae Flos. Caffeic acid shows the strongest activity in vitro.
Key words: Lonicerae Japonicae Flos; phenolic acids; anti-inflammatory activity; 3,5-di-O-caffeoylquinic acid; chlorogenic acid;
caffeic acid; secologanoside

金银花 Lonicerae Japonicae Flos 为忍冬科
（Caprifoliaceae）植物忍冬 Lonicera japonica Thunb.
的干燥花蕾或初开的花，药用历史悠久，为常用中
药之一。金银花味甘，性寒，归肺、心、胃经，具
有清热解毒、疏散风热之功效，用于治疗痈肿疔疮、
喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症[1]，
主要含有挥发油类、有机酸类、黄酮类、三萜皂苷
类和环烯醚萜类等多种成分[2-5]。据报道，金银花具

收稿日期：2014-12-11
基金项目：科技部重大新药创制项目：现代中药创新集群与数字制药技术平台（2013ZX09402203）
作者简介：宋亚玲，女，工程师，从事天然产物化学研究。Tel: (0518)81152323 E-mail: songyaling@yeah.net
*通信作者 萧 伟，男，研究员级高级工程师，博士，研究方向为中药新药的研究与开发。Tel: (0518)81152367 E-mail: kanionlunwen@163.com
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有较强的的抗炎作用[6-8]，然而，这些研究的主要对
象大部分都是金银花提取物，涉及金银花单体化合
物的只有少数，根据文献报道，金银花三萜皂苷忍
冬苦苷 A、忍冬苦苷 C 均具有抗炎作用，效果与阿
司匹林相当[9]；金银花挥发油也具有显著的抗炎活
性[10]。本实验从金银花醇提物的醋酸乙酯部位中分
离鉴定了 8 个酚酸、3 个环烯醚萜苷和 1 个黄酮类
成分，分别为新绿原酸（5-O-caffeoylquinic acid，1）、
隐绿原酸（4-O-caffeoylquinic acid，2）、3,5-二咖啡
酰奎宁酸（3,5-di-O-caffeoylquinic acid，3）、3,4-二
咖啡酰奎宁酸（3,4-di-O-caffeoylquinic acid，4）、4,5-
二咖啡酰奎宁酸（4, 5-di-O-caffeoylquinic acid，5）、
绿原酸（chlorogenic acid，6）、咖啡酸（caffeic acid，
7）、咖啡酸甲酯（methyl caffeate acid，8）、断氧化
马钱子苷（ secoxyloganin ， 9 ）、裂环马钱苷
（secologanoside，10）、獐芽菜苷（sweroside，11）
和木犀草素（luteolin，12）。采用脂多糖（LPS）诱导
的小鼠巨噬细胞 RAW264.7 炎症反应模型，对其中的
酚酸类化合物 1～8 进行了抗炎活性测定，化合物对
LPS刺激的巨噬细胞炎症因子均具有不同程度的抑制
作用，化合物 7 活性最高。并对活性成分的构效关系
进行了初步探讨，为进一步研究其抗炎作用机制以及
金银花的临床应用提供依据。
1 仪器与材料
Reveleris 中低压制备色谱仪（美国 GRACE 公
司），配四元泵、UV、ELSD 检测器；Agilent 1260
高效液相色谱仪（美国 Agilent 公司），配自动进样
器、四元泵、MWD 检测器；Bruker-AV-400 型核磁
共振光谱仪（德国布鲁克公司）；AE240 电子分析
天平（瑞士 Mettler 公司）；SW-CJ-2F 型超净工作台
（苏州安泰空气技术有限公司）；CO2培养箱（Thermo
scientific 3100 ）； 倒 置 显 微 镜 （ OLYPΜS ，
CKX41SF）；96 孔细胞培养板、细胞培养瓶（美国
Costar）；FlexStation 3 钙流工作站（美谷分子仪器）；
移液枪（Eppendorf）；BXM-30R 立式压力蒸气灭菌
锅（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；LD4-2A
离心机（北京众益中和生物技术有限公司）；细胞自
动计数仪（Invitrogen，Cl028）。
柱色谱硅胶（200～300 目）、薄层色谱硅胶 G
（青岛海洋化工厂），Sephadex LH-20（Pharmacia 公
司），乙腈（色谱纯，Oceanpak 公司，瑞典），95%
乙醇（食用级，连云港长和酒业有限公司），水（双
蒸水，自制），甲酸、醋酸乙酯（分析纯，南京化学
试剂有限公司）；DMEM 培养基、胎牛血清（FBS，
Gibco 公司），LPS、DMSO（Sigma 公司），CCK-8
试剂盒（上海贝博生物公司）；NO 检测试剂盒（碧
云天生物技术研究所）；多因子检测试剂盒
（BIO-RAD 公司）。
金银花药材购自安徽亳州药材市场，经南京中
医药大学吴启南教授鉴定为忍冬科植物忍冬
Lonicera japonica Thunb. 的干燥花；小鼠巨噬细胞
RAW264.7 细胞株购于中国科学院典型培养物保藏
中心上海细胞库。
2 方法
2.1 提取与分离
取金银花药材 10.0 kg，依次用 10、8 倍量 70%
乙醇回流提取 2 次，每次 2 h，合并提取液，滤过，
滤液减压浓缩得流浸膏 3.5 kg，浸膏加水悬浮，依次
用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取，分别得到石油
醚部位（121 g）、醋酸乙酯部位（254 g）、正丁醇部
位（380 g）。取醋酸乙酯部位经硅胶柱色谱，以二氯
甲烷-甲醇（100∶0→0∶1）进行梯度洗脱，经 TLC
检识合并得到 8 个部位 Fr. 1～8。Fr. 3 经 Sephadex
LH-20、制备液相色谱分离得到化合物 2（1.6 g）、8
（20 mg）、9（17 mg）、10（0.8 g）；Fr. 5 采用 Sephadex
LH-20、制备液相色谱纯化，得到化合物 1（21 mg）、
3（14 mg）、4（19 mg）、5（23 mg）；Fr. 7 经硅胶柱
色谱、RP18和 Sephadex LH-20 色谱纯化后得化合物
6（32 mg）、7（17 mg）、11（26 mg）、12（9 mg）。
2.2 抗炎活性研究
2.2.1 供试品配制 取化合物 1～8，分别用 DMSO
配制成 50 mg/mL 储存液，加药时用无血清 DMEM
培养基稀释成 50 μg/mL 的供试品药液。
2.2.2 细胞培养 RAW264.7 细胞用含 10% FBS
DMEM 培养，置 5% CO2、37 ℃、饱和湿度的细胞
培养箱中培养。待细胞生长至对数生长期进行传代，
2～3 d 传代 1 次。取至少 3 代后的细胞用于实验。
2.2.3 化合物对 RAW264.7 细胞生长的影响 取对
数生长期的 RAW264.7 细胞 0.25%胰酶 -0.02%
EDTA 消化约 2 min 后，弃胰酶，用 10% FBS DMEM
培养基中和胰酶作用，轻轻吹打成单细胞悬液，离
心弃上清，用完全培养基重悬细胞并计数后，调整
细胞悬液至 3×105/mL，按每孔 100 μL 接种至 96
孔培养板，37 ℃、5% CO2、饱和湿度条件下培养
24 h，吸尽每孔上清，每孔加入 100 μL 无血清
DMEM 培养基，随机分为对照组、化合物 1～8 组
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（50 μg/mL），加入相应药物后，每组设 3 个复孔，
5% CO2、37 ℃、饱和湿度条件下培养 24 h 后，提
前 4 h 按每孔 10 μL 加入 CCK-8，4 h 后酶标仪检测
450 nm 处吸光度值（A450）。
2.2.4 炎症因子检测 取对数生长期的 RAW264.7
细胞 0.25%胰酶-0.02% EDTA 消化约 2 min 后，弃
胰酶，用 10% FBS DMEM 培养基中和胰酶作用，
轻轻吹打成单细胞悬液，离心弃上清液，用完全培
养基重悬细胞并计数后，调整细胞悬液至 3×
105/mL，按每孔 100 μL 接种至 96 孔培养板，37 ℃、
5% CO2、饱和湿度条件下培养 24 h，吸尽每孔上清
液，每孔加入 100 μL 无血清 DMEM 培养基，随机
分为对照组、LPS（1 μg/mL）组、LPS（1 μg/mL）＋
化合物 1～8（50 μg/mL）组，加入相应药物后，每
组设 3 个复孔，5% CO2、37 ℃、饱和湿度条件下
培养 24 h 后，取上清液用于 NO、肿瘤坏死因子-α
（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）等炎症因子的检测。
3 结果
3.1 结构鉴定
化合物 1：白色粉末，mp 193～195 ℃，ESI-MS
m/z: 353 [M－H]−。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ:
1.86～2.01 (4H, m, H-2, 6), 3.78 (1H, m, H-4), 4.12
(1H, m, H-3), 5.21 (1H, m, H-5), 6.26 (1H, d, J = 16.0
Hz, H-8′), 6.77 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′), 6.95 (1H, dd,
J = 2.0, 8.0 Hz, H-6′), 7.05 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2′),
7.50 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7′)；13C-NMR (100 MHz,
DMSO-d6) δ: 35.1 (C-2), 38.6 (C-6), 70.3 (C-3), 70.6
(C-4), 67.3 (C-5), 72.6 (C-1), 114.5 (C-2′), 114.9
(C-8′), 115.8 (C-5′), 121.1 (C-6′), 125.7 (C-1′), 144.3
(C-3′), 144.7 (C-7′), 145.7 (C-4′), 166.3 (C-9′), 175.4
(-COOH)。以上数据与文献报道基本一致[11]，故鉴
定化合物 1 为新绿原酸。
化合物2：白色粉末，ESI-MS m/z: 353 [M－H]−。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.60 (1H, d, J =
16.0 Hz, H-3′), 7.04 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-5′), 6.95
(1H, dd, J = 2.0, 8.0 Hz, H-9′), 6.77 (1H, d, J = 8.1
Hz, H-8′), 6.30 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-2′), 4.90 (1H,
m, H-4), 2.40 (2H, m, H-6), 2.14 (2H, m, H-2)；
13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 177.3 (C-7), 165.6
(C-1′), 148.6 (C-7′), 145.8 (C-6′), 145.6 (C-3′), 125.5
(C-4′), 121.6 (C-9′), 115.9 (C-8′), 114.9 (C-2′), 113.9
(C-5′), 75.8 (C-1), 71.5 (C-5), 68.6 (C-4), 62.9 (C-3),
36.6 (C-2), 35.8 (C-6)。以上数据与献报道照基本一
致[12]，故鉴定化合物 2 为隐绿原酸。
化合物 3：白色无定形粉末，ESI-MS m/z: 515
[M－H]−。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 2.13～2.34
(4H, m, H-2, 6), 3.98 (1H, dd, J = 3.4, 7.6 Hz, H-4),
5.39 (1H, ddd, J = 4.5, 8.2, 10.8 Hz, H-5), 5.43 (1H,
m, H-3), 6.26 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-8′), 6.33 (1H, d,
J = 16.0 Hz, H-8″), 6.77 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-5′),
6.78 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-5″), 6.96 (1H, dd, J = 2.0,
8.2 Hz, H-6′), 6.97 (1H, dd, J = 2.0, 8.0 Hz, H-6″),
7.06 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2′), 7.07 (1H, d, J = 2.0 Hz,
H-2″), 7.56 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7′), 7.60 (1H, d, J =
16.0 Hz, H-7″)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 36.3
(C-2), 37.5 (C-6), 70.6 (C-4), 72.4 (C-3), 72.8 (C-5),
74.8 (C-1), 115.4 (C-8″), 115.6 (C-8′), 115.8 (C-2′,
2″), 116.7 (C-5′, 5″), 123.1 (C-6′, 6″), 127.9 (C-1′, 1″),
146.8 (C-3′, 3″), 147.4 (C-7′), 147.6 (C-7″), 149.8
(C-4′, 4″), 168.5 (C-9′), 168.9 (C-9″), 175.8 (-COOH)。
以上数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定化合物 3
为 3,5-二咖啡酰奎宁酸。
化合物 4：白色粉末，ESI-MS m/z: 515 [M－H]−。
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 2.15～2.30 (4H, m,
H-2, 6), 4.39 (1H, m, H-5), 5.13 (1H, dd, J = 3.1, 9.0
Hz, H-4), 5.63 (1H, m, H-3), 6.17 (1H, d, J = 16.0 Hz,
H-8′), 6.27 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-8″), 6.74 (1H, d, J =
8.2 Hz, H-5′), 6.76 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-5″), 6.90 (1H,
dd, J = 2.0, 8.2 Hz, H-6′), 6.91 (1H, dd, J = 2.0, 8.0 Hz,
H-6″), 7.01 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2′), 7.02 (1H, d, J =
2.0 Hz, H-2″), 7.53 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7′), 7.58
(1H, d, J = 16.0 Hz, H-7″)；13C-NMR (100 MHz,
CD3OD) δ: 38.4 (C-6), 39.4 (C-2), 68.9 (C-3), 69.4
(C-5), 75.8 (C-4), 76.1 (C-1), 114.7 (C-8′), 114.8
(C-8″), 115.2 (C-2′, 2″), 116.5 (C-5′, 5″), 123.1 (C-6′,
6″), 127.7 (C-1′, 1″), 146.8 (C-3′, 3″), 147.6 (C-7′),
147.9 (C-7″), 149.7 (C-4′, 4″), 168.2 (C-9′), 168.6
(C-9″), 176.8 (-COOH)。以上数据与文献报道基本一
致[14]，故鉴定化合物 4 为 3,4-二咖啡酰奎宁酸。
化合物 5：淡黄色粉末，ESI-MS m/z: 515 [M－
H]−。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1.94～2.34 (2H,
m, H-2), 4.35 (1H, m, H-3), 5.02 (1H, dd, J = 3.2, 8.2
Hz, H-4), 5.63 (1H, ddd, J = 4.5, 8.2, 10.8 Hz, H-5),
1.94～2.34 (2H, m, H-6), 7.02 (1H, d, J = 2.0 Hz,
H-2′), 6.74 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′), 6.88 (1H, dd, J =
2.0, 8.0 Hz, H-6′), 7.53 (1H, d, J = 15.9 Hz, H-7′),
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6.24 (1H, d, J = 15.9 Hz, H-8′), 7.04 (1H, d, J = 2.0
Hz, H-2″), 6.76 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5″), 6.89 (1H,
dd, J = 2.0, 8.0 Hz, H-6″), 7.59 (1H, d, J = 15.9 Hz,
H-7″), 6.28 (1H, d, J = 15.9 Hz, H-8″)；13C-NMR (100
MHz, CD3OD) δ: 38.6 (C-2), 39.5 (C-6), 69.4 (C-3),
69.5 (C-5), 75.9 (C-4), 76.2 (C-1), 114.8 (C-8″), 114.9
(C-8′), 115.4 (C-2′, 2″), 116.7 (C-5′, 5″), 123.1 (C-6′,
6″), 127.6 (C-1′, 1″), 146.8 (C-3′, 3″), 147.8 (C-7′),
147.9 (C-7″), 149.8 (C-4′, 4″), 168.5 (C-9′), 168.9
(C-9″), 175.8 (-COOH)。以上数据与文献报道基本一
致[15]，故鉴定化合物 5 为 4,5-二咖啡酰奎宁酸。
化合物 6：白色粉末，mp 207～209 ℃，ESI-MS
m/z: 353 [M－H]−。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ:
7.55 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7′), 7.04 (1H, d, J = 2.0
Hz, H-2′), 6.96 (1H, dd, J = 8.4, 2.0 Hz, H-6′), 6.77
(1H, d, J = 8.4 Hz, H-5′), 6.25 (1H, d, J = 16.0 Hz,
H-8′), 5.32 (1H, m, H-3), 4.15 (1H, m, H-5), 3.72 (1H,
dd, J = 8.4, 3.2 Hz, H-4), 2.23～2.04 (4H, m, H-2, 6)；
13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 177.8 (COOH),
169.4 (C-9′), 150.4 (C-4′), 147.9 (C-7′), 147.6 (C-3′),
128.6 (C-1′), 123.8 (C-6′), 117.2 (C-5′, 8′), 116.0
(C-2′), 76.9 (C-1), 74.3 (C-4), 72.8 (C-5), 72.1 (C-3),
39.6 (C-2), 39.0 (C-6)。以上数据与文献报道一致[16]，
故鉴定化合物 6 为绿原酸。
化合物 7：浅黄色粉末，ESI-MS m/z: 179 [M－
H]−。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 6.18 (1H, d, J =
15.9 Hz, H-8), 6.76 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 6.92 (1H,
dd, J = 2.1, 8.4 Hz, H-6), 7.01 (1H, d, J = 2.0 Hz,
H-2), 7.52 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-7)；13C-NMR (100
MHz, CD3OD) δ: 127.9 (C-1), 115.6 (C-2), 146.8
(C-3), 149.3 (C-4), 116.6 (C-5), 122.8 (C-6), 147.0
(C-7), 115.0 (C-8), 171.2 (C-9)。以上数据与文献报道
基本一致[11]，故鉴定化合物 7 为咖啡酸。
化合物 8：白色针晶（甲醇），ESI-MS m/z: 193
[M－H]−。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.44 (1H,
d, J = 16.0 Hz, H-7), 7.03 (1H, d, J =2.0 Hz, H-2),
6.98 (1H, dd, J = 2.0, 8.0 Hz, H-6), 6.77 (1H, d, J =
8.0 Hz, H-5), 6.25 (1H, d, J = 16.0 Hz, H-8), 3.67 (3H,
s, -OCH3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 125.9
(C-1), 116.5 (C-2), 146.4 (C-3), 149.3 (C-4), 121.6
(C-5), 115.3 (C-6), 145.6 (C-7), 114.0 (C-8), 167.6
(C-9), 51.6 (-OCH3)。以上数据与文献报道基本一
致[17]，故鉴定化合物 8 为咖啡酸甲酯。
化合物 9：白色粉末，1H-NMR (400 MHz,
CD3OD) δ: 7.47 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-3), 5.49 (1H, d,
J = 3.8 Hz, H-1), 4.66 (1H, d, J = 7.9 Hz, H-1′), 3.68
(3H, s, -OCH3), 5.65 (1H, ddd, J = 10.1, 9.9, 17.1 Hz,
H-8), 2.95 (1H, dd, J = 16.5, 4.9 Hz, H-6), 2.27 (1H,
dd, J = 9.0, 16.5 Hz, H-6), 2.82 (1H, m, H-9)；13C-NMR
(100 MHz, CD3OD) δ: 176.7 (C-7), 169.4 (C-11), 154.1
(C-3), 135.0 (C-8), 121.0 (C-10), 110.6 (C-4), 100.5
(C-1′), 98.1 (C-1), 78.9 (C-5′), 78.5 (C-3′), 75.1 (C-2′),
72.0 (C-4′), 63.2 (C-6′), 52.1 (-OCH3), 45.8 (C-9), 35.6
(C-6), 29.1 (C-5)。以上数据与文献报道基本一致[18]，
故鉴定化合物 9 为断氧化马钱子苷。
化合物 10：白色粉末，ESI-MS m/z: 389 [M－
H]−。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.31 (1H, d, J =
3.6 Hz, H-1), 7.32 (1H, s, H-3), 3.05 (1H, m, H-5),
2.89 (1H, dd, J = 16.6, 5.0 Hz, H-6a), 2.10 (1H, dd,
J = 16.8, 9.6 Hz, H-6b), 5.49 (1H, m, H-8), 2.67 (1H,
m, H-9), 5.12 (1H, s, H-10a), 5.08 (1H, m, H-10b),
4.50 (1H, d, J = 7.9 Hz, H-1′)；13C-NMR (100 MHz,
CD3OD) δ: 97.5 (C-1), 153.3 (C-3), 110.1 (C-4), 28.4
(C-5), 34.9 (C-6), 176.4 (C-7), 134.5 (C-8), 45.2
(C-9), 120.3 (C-10), 170.5 (C-11), 99.8 (C-1′), 74.5
(C-2′), 78.5 (C-3′), 71.5 (C-4′), 78.3 (C-5′), 62.9
(C-6′)。以上数据与文献报道基本一致[18]，故鉴定化
合物 10 为裂环马钱苷。
化合物 11：白色粉末，ESI-MS m/z: 357 [M－
H]−。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.56 (1H, d, J =
7.3 Hz, H-1), 7.60 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-3), 3.14 (1H,
m, H-5), 1.75 (1H, m, H-6a), 1.69 (1H, m, H-6b), 4.40
(1H, m, H-7a), 4.30 (1H, m, H-7b), 5.56 (1H, m, H-8),
2.70 (1H, ddd, J = 1.6, 5.6, 9.4 Hz, H-9), 5.30 (1H, m,
H-10a), 5.26 (1H, m, H-10b), 4.68 (1H, d, J = 7.9 Hz,
H-1′)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 98.1 (C-1),
154.2 (C-3), 106.1 (C-4), 28.4 (C-5), 25.9 (C-6), 69.7
(C-7), 133.5 (C-8), 43.9 (C-9), 120.6 (C-10), 168.5
(C-11), 99.5 (C-1′), 75.0 (C-2′), 77.9 (C-3′), 71.4
(C-4′), 78.5 (C-5′), 62.9 (C-6′)。以上数据与文献报道
基本一致[18]，故鉴定化合物 11 为獐芽菜苷。
化合物 12：淡黄色粉末，ESI-MS m/z: 285 [M－
H]−。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.98 (1H, s,
5-OH), 7.43 (1H, dd, J = 2.0, 8.4 Hz, H-6′), 7.41 (1H, d,
J = 2.0 Hz, H-2′), 6.90 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′), 6.67
(1H, s, H-3), 6.45 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-8), 6.20 (1H, d,
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J = 2.0 Hz, H-6)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ:
94.3 (C-8), 99.3 (C-6), 103.3 (C-3), 104.2 (C-10), 113.8
(C-5′), 116.5 (C-2′), 119.5 (C-6′), 122.0 (C-1′), 146.2
(C-4′), 150.2 (C-2′), 157.8 (C-3′), 161.9 (C-9), 164.4
(C-5), 164.6 (C-7), 182.1 (C-4)。以上数据与文献报道
基本一致[19]，故鉴定化合物 12 为木犀草素。
3.2 抗炎活性
在 LPS 刺激 RAW264.7 细胞的炎症反应中，与
对照组比较，化合物 1～8 在 50 μg/mL 的质量浓度
下对 RAW264.7 细胞生长均无明显影响。在筛选结
果中，化合物 1～8 对 LPS 刺激 RAW264.7 细胞释
放 NO、TNF-α 和 IL-6 均具有不同程度的抑制作用，
显示了较好的体外抗炎活性，其中化合物 7 对炎症
因子的抑制作用最强，结果见表 1。
4 讨论
炎症是人体对感染、体内抗原抗体结合以及机
械损伤的一种自身反应，众多种类的细胞以及活性
成分参与了这个过程。适度的炎症反应对人体是有
表 1 化合物 1～8 对 LPS 刺激 RAW264.7 细胞产生 NO、TNF-α和 IL-6 的影响 ( x ±s, n = 3)
Table 1 Effects of different compounds 1—8 on production of NO, TNF-α, and IL-6 in LPS-stimulated RAW264.7 cells ( x ±s, n = 3)
组别 质量浓度/(μg·mL−1) NO/(μmol·mL−1) TNF-α/(ng·mL−1) IL-6/(ng·mL−1)
对照 — 0.604 5±0.009 8 0.017 3±0.002 5 0.000 5±0.000 0
模型（LPS） — 6.745 8±0.342 8## 45.363 3±0.255 9## 0.604 6±0.004 5##
LPS＋1 50 4.090 4±0.442 4** 29.813 0±0.165 8** 0.523 2±0.003 0**
LPS＋2 50 5.056 5±0.245 2** 27.566 3±0.112 2** 0.304 7±0.004 0**
LPS＋3 50 3.666 7±0.230 1** 30.860 3±0.100 0** 0.277 1±0.005 0**
LPS＋4 50 4.288 1±0.269 1** 32.413 3±0.057 7** 0.288 1±0.006 6**
LPS＋5 50 3.028 2±0.420 8** 28.565 6±0.100 0** 0.216 6±0.003 5**
LPS＋6 50 2.045 2±0.332 7** 31.853 6±0.100 0** 0.313 6±0.002 5**
LPS＋7 50 0.124 3±0.146 1** 22.666 1±0.152 8** 0.206 5±0.002 1**
LPS＋8 50 0.175 1±0.035 3** 26.025 0±0.200 0** 0.214 4±0.002 6**
与对照组比较：##P＜0.01；与模型组比较：**P＜0.01
##P < 0.01 vs control group; **P < 0.01 vs model group
益的，而过度的或持续的炎症反应却会引起组织损
伤和诱发疾病。诱发炎症的因素有很多，如烧伤、
化学刺激、物理损伤以及毒素等。其中，LPS 是细
菌感染性炎症反应中最主要的促炎因子，LPS 可诱
导单核巨噬细胞等炎症细胞合成并释放多种炎症因
子，诸如 NO、TNF-α、IL-6 等炎症介质和炎症因子，
导致机体出现一系列的病理生理反应，严重时可引
起感染性休克、全身炎症反应综合征、多器官功能
衰竭甚至死亡[20-22]。
金银花作为常用清热解毒中药，具有很好的抗
炎作用[8]。本研究结果表明金银花中酚酸类成分对
LPS 诱导 RAW264.7 细胞释放 NO、TNF-α 和 IL-6
均具有不同程度的抑制作用，进一步证实了酚酸类
成分是金银花抗炎作用的有效成分之一，其中，在
50 μg/mL 的质量浓度下，化合物 7 对 LPS 刺激的
RAW264.7 细胞释放 NO、TNF-6 和 IL-6 的抑制作
用最强，其次是化合物 8，说明游离的咖啡酸及其
酯类化合物的抗炎活性最强；其次，二咖啡酰奎宁
酸类化合物对 IL-6 的抑制作用强弱为化合物 5＞化
合物 3＞化合物 4，说明咖啡酰基取代位置和空间位
阻对其活性有很大的影响。综上可知，咖啡酰基是
金银花中酚酸类成分发挥抗炎活性的重要基团，而
且取代基的位置及空间构型也会对其活性产生一定
的影响，但是抗炎作用的强弱与剂量之间的关系还
需要进一步的研究。
我国金银花植物资源丰富，金银花化学成分
复杂、药理作用多样，临床上已有很多形式的金
银花制剂[23]，另外，近年来金银花还被用于保健
饮料、牙膏以及化妆品等[24]中，这些大都与其清
热解毒、抗菌消炎等功效有关，而本实验结果也
证实酚酸类成分是金银花发挥抗炎作用的有效成
分。因此，加强对金银花化学成分及其各类成分
的药理活性研究，为金银花的进一步开发及临床
应用提供参考。
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