全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 14 期 2015 年 7 月
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具有杀灭钉螺活性的植物源天然产物研究进展
刘席佑,邹峥嵘*
江西师范大学生命科学学院 江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室,江西 南昌 330022
摘 要:钉螺(oncomelania)是日本血吸虫 Schistosoma japonicum 的唯一中间寄主,是血吸虫病传播过程中不可缺少的环
节。目前用于杀灭钉螺的化学药物存在生产成本高、严重污染环境、钉螺耐药性和对非靶体生物的毒性等诸多问题,这使人
们将研究兴趣转向从植物中寻找天然灭螺药物。从结构类型、作用机制和构效关系等方面入手,对具有杀灭钉螺活性的植物
源天然产物进行归纳总结,以期为新型植物源灭螺剂的开发提供参考。
关键词:植物来源;灭螺活性;天然产物;皂苷类;生物碱类
中图分类号:R284;R285 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2015)14 - 2177 - 12
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.14.027
Research progress on natural products with molluscicide from plants
LIU Xi-you, ZOU Zheng-rong
Key Laboratory of Protection and Utilization of Subtropic Plant Resources of Jiangxi Province, Jiangxi Normal University,
Nanchang 330022, China
Abstract: Oncomelania is the only intermediate host of Schistosoma japonicum as well as an indispensable part of schistosomiasis
transmission. Now synthetic molluscicides have a lot of problems, such as high cost of production, chemical pollution, drug resistance,
and toxicity to non-target body, which makes people’s interest turn to plants and plant-derived compounds. This paper describes the
current existence of chemical snail control methods and biological snail control methods on the view of chemical construction,
mechanism of action, and structure-activity relationships of natural extracts with molluscicidal activity, in order to provide the basis for
the development of the new plant molluscacide.
Key words: plant origin; molluscicidal; natural products; saponins; alkaloids
血吸虫病(schistosomiasis)是严重危害人类身
体健康的传染性疾病。血吸虫病疫区的水资源不能
放心应用于人民群众的生产和生活,严重制约着血
吸虫病疫区的经济发展[1]。钉螺(oncomelania)是
日本血吸虫 Schistosoma japonicum 的唯一中间寄
主,是血吸虫病传播不可缺少的环节,但钉螺也是
血吸虫生活周期中最脆弱的一环,杀灭钉螺将有效
地遏制血吸虫病的传播[2]。近半个世纪以来,灭螺
工作倍受重视,成为血吸虫病控制的中心工作。
灭螺的药物多种多样,根据其来源主要分为 3
类:化学药物、微生物和植物提取物。目前,血吸
虫病疫区控制钉螺广泛采用的方法是化学药物,广
泛使用的杀螺化学药物主要有五氯酚钠、氯硝柳胺、
烟酰苯胺、溴乙酰胺、杀螺胺、杀螺胺乙醇胺盐、
四聚乙醛、聚醛•甲萘威。其中杀螺胺乙醇胺盐、四
聚乙醛属于低毒,其他杀螺剂杀螺作用虽强,但对
鱼和人、畜的毒性大,其中吗啉、沙蚕毒素类因为
毒性大已撤销登记。改造和突破现有杀螺药物的结
构,寻找效果好、毒性小、成本低、使用方便的新
型杀螺药物显得尤为重要。
近年来,国内外研究者从植物源天然产物中发现
了大量具有杀灭钉螺活性的化合物,并对这些化合物
的理化性质、化学结构和构效关系等进行了深入研
究,为天然灭螺药物的研究开发打下了扎实的基础。
这些化合物包括皂苷类、生物碱类、蒽醌类、黄酮
类、萜类和鞣质酸等,主要分布在百合科(Liliaceae)、
薯蓣科(Dioscoreaceae)、蒺藜科(Zygophyllaceae)、
夹竹桃科(Apocynaceae)、五加科(Araliaceae)、
收稿日期:2014-12-12
基金项目:国家“十二五”科技支撑项目(2011BAC13B04);国家自然科学基金资助项目(31260082)
作者简介:刘席佑(1991—),男,在读硕士研究生,主要从事植物化学研究。Tel: (0791)88120393 E-mail: lxy910407@sina.com
*通信作者 邹峥嵘(1970—),男,教授,医学博士,主要从事天然产物化学研究。Tel: (0791)88120393 E-mail: zouzhr@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 14 期 2015 年 7 月
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报春花科(Primulaceae)、菊科(Asteraceae)、大戟
科(Euphorbiaceae)、夹竹桃科(Apocynaceae)、商
陆科(Pytolaccaceae)、漆树科(Anacardiaceae)、
蓼科(Polygonaceae)等。
1 皂苷类化合物
来源于毛茛科白头翁 Pulsatilla chinensis
(Bunge) Regel 的三萜皂苷有很强的抑螺活性,从中
分离到 15 个单体化合物,它们分属 3 种类型(结构
见图 1-1~3)。其混合提取物杀螺活性 24 h 的半数
致死浓度(LC50)为 0.48 mg/L,效果和 0.16 mg/L
的氯硝柳胺(niclosamide)相当,但目前尚不清楚
是哪几种单体化合物在起作用。经提取物处理后,
钉螺肝脏和头足部的胆碱脂酶(ChE)、乳酸脱氢酶
(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)
的活性均显著下降[3]。
研究结果表明[4],来源于大戟科的三萜皂苷显
示出高效的杀螺活性。从大戟属植物 Euphorbia
retusa Forssk. 分离得到的 3-O-α-L-xylopyranosyl
(1→3)-α-L-xylopyranosyl (1→2)-β-D-glucopyranosyl-
lup-1,12-diene-3,21-diol(4)和从 Euphorbia paralais
L. 中分离得到的 3-O-syringic acid (1→4)-α-L-
xylopyranosyl (1→3)-β-D-rahminopyranosyl hederagenin
(5)、3-O-syringic acid (1→4)-β-D-rahminopyranosyl
(1→3)-β-D-rahminopyranosyl hederagenin(6)属于
三萜皂苷,具有较强的杀螺活性。
丝兰 Yucca smalliana Fern. 的水和甲醇提取物
具有很高的杀螺活性,从中分离鉴定了 2 种新的甾
体皂苷(7、8),它们对双脐螺致死质量浓度分别
为 6 mg/L 和 11 mg/L。不同皂苷类成分对钉螺的致
死浓度不同,这主要取决于皂苷中的糖链,如糖链
的单糖数目、单糖的排列顺序、糖苷键的连接方式
和糖的取代方式。化合物 7 和 8 的苷元部分相同,
但因为糖链上单糖的数目和组成不同而导致其抑
螺活性不同[5]。
四季米仔兰 Aglaia duperreana Merii. 的甲醇提
取物对钉螺的 LC50 为 33.4 μg/mL,从其醋酸乙酯提
取物中分离得到 15 个化合物,其中柚皮素三甲醚
(naringenin trimethyl ether,9)、(2R,3R)-(+)-4′,5,7-
trimethoxydihydroflavonol(10)对钉螺的 LC50 分别
是 3.9、10.6 μg/mL,柚皮素三甲醚显示出比茶皂素
(LC50=4.5 μg/mL)更高的灭螺活性[6]。
来源于夹竹桃 Nerium indicum Mill. 的夹竹桃
糖苷配基(nerium aglycone,11)呈现较强的杀螺
活性,其 LC50 具有时间依赖性,24、48、72、96 h
的 LC50 分别为 80.76、20.12、5.89、3.71 mg/L,其
效力可与四聚乙醛(72 h,LC50=3.88 mg/L)相媲
美。钉螺经夹竹桃提取液处理后,随着时间的推移
其糖原量以及同工酶活性降低;在 24 和 48 h 内蛋
白质的总量不会发生改变,但是在 72 和 96 h 后会
有一个非常显著的下降,ChE 的量先上升然后下降。
这表明夹竹桃提取液严重损害钉螺的生理功能,造
成其体内主要的生化物质发生改变。强心苷处理钉
螺 24~48 h 能导致其肝脏细胞核溶解破碎、核膜缺
损、细胞器变性、胞膜解体等不可逆损伤,特别是
其内质网与解毒作用密切相关,内质网的破损,降
低了肝脏的解毒能力[7-9]。
从吉祥草 Reineckia triandra H. Karst. 中提取
分离的甾体皂苷类化合物(化学结构尚未确定),
当质量浓度为 17.5 mg/L 时,经 72 和 120 h 处理
后,钉螺死亡率分别达到 86.0%和 100.0%;质量
浓度在 130 mg/L 时,168 h 鱼死亡率为 0,显示该
化合物对鱼的毒性非常小[10]。从无患子科塞战藤
属植物 Serjania salzmanniana Schlecht. 中分离出
4 种化合物:齐墩果酸(oleanolic acid,12)、白
头翁皂苷 D(pulsatilla saponin D,13)、salzman-
nianoside A(14)、salzmannianoside B(15)。这 4
种皂苷都具有较强的杀螺活性,质量分数为 1×
10−5 时对双脐螺的致死率达到 70%~100%,其中
齐墩果酸和白头翁皂苷 D 的杀螺活性更强,salzman-
nianoside A 杀螺效果具有浓度依赖性,salzman-
nianoside B 的杀螺效果具有时间依赖性,时间越
长效果越好[11]。
采用水蒸气蒸馏法从道格拉斯菊 Atemisia
douglasiana L. 中得到 vulgarone B(16),其能引起
溶血,24 h 对福寿螺的 LC50 为 30 μmol/L[12]。
从报春花科植物琉璃繁缕 Aglaia duperreana L.
中提取得到 2 种皂苷类化合物 desglucoanagalloside
B(17)和 anagalloside B(18)。Desglucoanagalloside
B 在质量分数 6.25×10−7 时对光滑双脐螺有较好的
活性,1.25×10−6 时所有被测的钉螺全部死亡,表
现出非常强的杀螺活性 [13]。李桂玲等 [14]从商陆
Phytolacca acinosa Roxb. 中提取的皂苷在 24 h 内
对钉螺的致死浓度为 125 mg/L,其杀螺效果与 10
mg/L 的五氯酚钠相当。该研究同时确定了最适杀螺
温度为 28 ℃,最适合的杀螺季节是秋季。具有杀
螺活性的皂苷类化合物见图 1。
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R1=glc (1→4) rha (1→2) ara, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=rha (1→2) ara, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=H, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=ara, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=glc (1→3) rha (1→2) ara, R2=H
R1=rha (1→2) ara, R2=H
O
C
O
O R2
R1
OH
O
C
O
O R2
R1
OH
R1=rha (1→2)[glc(1→4)] ara, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=glc (1→4) ara, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=rha (1→2) ara, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=H, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=ara, R2= glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=glc (1→3) rha (1→2) ara, R2=H
R1=rha (1→2) ara, R2=H
1 2
O
C
O
O R2
R1
R1=rha (1→2)[glc(1→4)] ara, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
R1=glc (1→3) rha (1→2) ara, R2=glc (1→6) glc (1→4) rha
O
OH2030 212812
6
1
2324
27O
OO
O
OH
HOHO
HO OH
3 4
OO
O
OH
HO
O
MeMe
CH2OHC O
OHOHHO
O
COOH
OH2C
HO
OH2C
OO
O
HO
O
MeMe
CH2OHC O
OHOHHO
O
COOH
OH2C
HO
OH2C
5 6
RO
H
H
H
O
H
O
O
OH
OH OH
Glc-1
Me
O
O
OH
HO
HO OH
HO
OH
O
O O
OH
OH
Gal
Glc-2Glc-3
11
O 1
OH
HO
HO
O
Glc-4 HO
O
OH
HOHO
Xyl
1
R=
1
O
O
OH
HO
HO OH
HO
OH
O
O O
OH
OH
Gal
Glc-2Glc-3
11
O 1
OH
HO
HO
HO
Glc-4 HO
R=
1
1
7 8
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HO
COOH
COOH
H
H
H
H
1
3 5 7
9
12 19
21
20
15
1725 26
27
28
2324
29
30
O
OH
OCH3
H3CO
O
OCH3
O
O
HO
OH
O
O
9 10 11
HO
CH3
CH3
CH3
CH3
H3C
H3C CH3
H
H
H
OH
O
O
O
O
O
O
HO
HO
HO
HO
OHHO
HO
Me
OH
H OH
O
H
O
OH
glc
ara
12 13
O
CH3 CH3
CH3
H3C CH3
H
H
H
OH
O
O
H3C
O
O
O
O
H
OH
HO
H
H3C
OH
OH
O
HO
HO
HO
OH
CH3 CH3
CH3
H
H
H
O
OH
OO
O
HO
OH
H
OH
OH
O
H
HO
OH
H
HO
OH
O
O
OH
OH
OH
O
14 15 16
HO
OHO
HO
O
O O
Ara
Glc-2
1
O
OH
HO
HO
OH
O
OHHO
HO
HO
O
OH
CH2OH
O
Xy1
Glc-1
O
HO
O
HO
O
O O
Ara
Glc-2
1
O
OH
HO
HO
OH
O
OHHO
HO
HO
O
OH
CH2OH
O
Xy1
Glc-1
HO
OHO
HO
OOH
O
17 18
图 1 具有杀螺活性的皂苷类化合物
Fig. 1 Saponins with molluscicidal activity
2 生物碱类
从罂粟科植物血水草 Eomecon chionantha
Hance 提取的血水草总碱(Eomecon chionantha
alkaloids,ECA)具有杀螺活性,其杀灭钉螺的主
要活性成分是白屈菜红碱(chelerythrine,19),抑
制肝细胞生长和损害肝功能是血水草生物碱致钉螺
死亡的主要原因[15]。从 ECA 中分离得到白屈菜红
碱、血根碱(sanguinarine,20)、原托品碱(protopine,
21)、α-别隐品碱(α-allocyptopine,22)、氧化血
根碱( oxysanguinarine, 23)和羽扇豆醇乙酯
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(lupenyl acetate,24)等。钉螺在 ECA 质量浓度为
2.5 mg/L,温度为 25 ℃的情况下浸 72 h,死亡率
达到 100%。ECA 能显著促进钉螺足跖平滑肌张力
增加、收缩幅度减小、收缩频率加快,且有明显的
量效关系。ECA 兴奋钉螺足跖平滑肌,导致其紧
张性收缩或痉挛性麻痹的作用机制可能是通过
mAChR 介导,激活受体依赖性钙通道(ROCC),
促外 Ca2+内流和内钙释放。ALT 水平是肝细胞受
损的一个敏感指标,经过 ECA 处理 24~36 h 后,
ALT 在肝组织中的量升高,且 ECA 浓度越高上升
越快,48~72 h 内下降,ECA 浓度越高下降的也
越快。24 h 内,温度和 ECA 浓度对钉螺死亡率的
影响显著。在 30 ℃时,ECA 对钉螺的死亡率具有
时间和浓度依赖性 [16]。
边缘茄碱(α-solamarrgine,25)来源于黄果茄
Solanum xanthocarpum Schrad. et Wendl.[17]。在 28
℃、质量浓度为 0.2 mg/L,浸泡 48 h,钉螺死亡率
为 100%,显示出很强的杀螺活性。黄果茄果实粉
120 mg/L 浸泡钉螺,24 h 对钉螺的抑爬率达 93.3%,
黄果茄果实乙醇浸提总生物碱 4.32 mg/L浸泡钉螺,
24 h 的死亡率为 96.7%,48 h 的死亡率为 100%[18]。
野生黄果茄广泛分布于我国南方丘陵地带,还有人
工栽培。
喜树 Camptotheca acuminate Decne. 是一种亚
热带植物。尹蔚琳等[19]将喜树叶烘干、研磨、浓缩、
萃取并结晶得到喜树碱(camptothecine,26),并对
其进行了杀螺活性及其机制研究。结果发现,200、
400、800 mg/L 喜树碱处理钉螺,第 4 天钉螺死亡
率均达到 80%以上。
谭苹等[20]应用酶组织化学染色法研究槟榔碱
(arecoline,27)的灭螺作用机制,发现槟榔碱的作
用机制在于阻断钉螺体内氧化磷酸化偶联生成ATP,
进而影响能量代谢,最终因 ATP 生成障碍而使钉螺
丧失机械运动及生物合成等生命功能而死亡。
天南星 Arisaema heterophyllum Blume var.
typicum Makino 根和叶提取物中含有生物碱,具有
很强的灭螺活性,浸液处理后,可引起钉螺肝脏丙
二醛(MDA)水平显著升高,且随处理浓度的升高
和处理时间的延长,MDA 水平进一步升高,表明
天南星生物碱成分通过引起钉螺肝脏的过氧化损伤
而发挥杀螺活性[21]。
分别对一把伞南星 Arisaema erubescens (Wall.)
Schott 石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇提取物进
行杀螺活性检测[22]。结果发现,其正丁醇提取物
(NBE)的杀螺效果最好,48 h 的 IC50 和 LC90 分别
为 60.2、145.6 mg/L;石油醚提取物(BZE)最差,
48 h 的 IC50和 LC90 分别为 486.2、1136.8 mg/L。经
NBE 处理后钉螺中的 ChE 和 ALP 活性显著下降,
同工酶电泳实验显示,钉螺肝脏中的同工酶 [酯酶
(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化
物酶(GSH-Px)]水平相对于头足对 NBE 提取物更
加敏感。NBE 处理 72 h 后,钉螺肝脏中 EST 活性
降低,一些酯酶(EST1 和 EST4)消失,但是 SOD
和 GSH-Px 水平在 NBE 提取物处理 48 h 后升高。
钉螺肝脏解毒能力下降以及氧化损伤是一把伞南星
灭螺的主要机制之一。具有杀螺活性的生物碱类化
合物见图 2。
3 蒽醌类和黄酮类
蓼科植物掌叶大黄 Rheum palmatum L. 中含有
蒽醌类化合物,如大黄素(rheumemodin,28)、大黄
酚(chrysophanol,29)、大黄素甲醚(physcion,30)
和大黄酸(rhein,31)[23]。大黄酸和大黄酚杀螺活性
最好,且对所有钉螺都有毒杀作用,LC50为 0.03%。
大黄酚对小泡螺和钉螺有活性,对双脐螺没有灭杀作
用。Chrysophanol anthron(32)是合成大黄酚的先导
物,对所有钉螺都具有灭杀活性,对双脐螺的灭杀作
用最强。蒽醌类化合物杀螺作用机制主要是干扰细胞
信号通路[24]、影响 Na+, K+-ATPase 和刺激腺苷酸环化
酶。腺苷酸环化酶是 cAMP 信号通路重要的酶。一些
蒽醌类物质亲脂,所以能够通过自由扩散通过细胞
膜,而大黄酸和 franguloside(33)虽然亲水性强,但
是化学性质依然不够活跃。蒽醌类化合物通过调节
Na+, K+-ATPase 的活性来发挥杀螺活性。萘醌类化
合物 7-甲基胡桃醌(7-methyljuglone,34)和白花
丹素(plumbagin,35)互为同分异构体,二者杀螺
LC50 分别为 5×10−6 和 3×10−6。
羊蹄 Rumex japonicus Houtt. 的正丁醇提取物
和水提物具有较强的灭螺活性,其根中含有大黄酚、
大黄素、酸模素等,哪种物质活性最强正在研究之
中。羊蹄生长迅速,植物材料易于获得,而且羊蹄
水提物的灭螺活性相对较强,这将为实际应用中有
效成分的提取以及灭螺环境的形成带来方便[25]。
从大戟属植物 Euphorbia retusa Forssk. 分离得到
glucopyranosyl ( 36 )、 5,7,8,3′,4′-pentahydroxy-3-
methoxyflavone ( 37 )和从大戟科大戟属植物
Euphorbia paralais L. 中分离得到的 3,5,3′- trihydroxy-
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N
OCH3
H3CO
O
O
Cl-
O
O
N+
O
O CH3
O
O
O
O
N
CH3
O
O
O
N
H3C
O
O
O
H3C
CH3
19 20 21 22
N+
O
O
Cl-
O
O
H
H
HO
H
O
O
O N
H
H
O
O
OH
O
HO
H
HH
HO
OH
HO H
OH
OH
23 24 25
N
N
O
O
O
HO
N
O
O
CH3
CH3
26 27
图 2 具有杀螺活性的生物碱类化合物
Fig. 2 Alkaloids with molluscicidal activity
6,7-dimethoxy-4′-(7″-hydroxygeranyl-1″-ether) flavone
(38)的黄酮类化合物具有较强的杀螺活性。何首乌
Fallopia multiflora (Thunb.) Haraldson 叶子含有槲皮
素(quercetin,39),在 1.0×10−5 质量分数下,处理
24 h 可导致椎实螺的死亡率达到 100%。
鬼针草 Bidens pilosa L.含有具有杀卵和灭螺活
性的黄酮类、鞣质酸和皂苷类化合物。钉螺经鬼针
草提取物浸泡后,体内的细胞色素 P450(cytochrome
P450)酶活性降低,该酶是在解毒过程中代谢各种
外源有害物质[26]。
研究表明,崖豆藤属植物 Millettia thonningii
Roxb. 提取液杀螺活性显著[27],其主要有效成分是
猫尾草异黄酮(alpinumisoflavone,40),为吡喃异
黄酮类化合物;黄花夹竹桃 Thevetia peruviana
(Pers.) K. Schum. 具有杀螺活性,其主要活性成分
为芹菜素-5-甲基醚(apigenin-5-methyl ether,41)
和三萜皂苷。从蓼科植物 Polygonum senticosum
(Meisn.) Franch. et Sav. 中提取的没食子酰基类黄
酮也具有杀螺活性[28]。具有杀螺活性的蒽醌和黄
酮类化合物见图 3。
4 鞣质类、烷基水杨酸和没食子酸类
鞣质类是复杂的酚类化合物,从黄酮类物质衍
生而来,具有一定的杀螺作用 [29]。山毛榉科
( Fagaceae )、蔷薇科( Rosaceae )、含羞草科
(Mimosaceae)、桃金娘科(Myrtaceae)、茜草科
(Rubiaceae)等植物的甲醇和水提取物含有鞣质类
化合物。
彭旦明等[30]在探究不同生境下枫杨 Pterocarya
stenoptera C. DC.、乌桕 Sapium sebiferum (L.) Roxb.
对钉螺的影响实验中发现,2 个月内钉螺糖原量无
明显变化,4 个月时,糖原量则明显下降。从乌桕
叶分离出 4 种抑螺化学物质,分别为山柰酚
(kaempherol,42)、没食子酸乙酯(ethyl gallate,
43)、槲皮素(quercetin,39)、没食子酸(gallic acid,
44)[31]。
白果富含银杏酸(ginkgolic acid,45)[32],质
量分数为 5.46%,表现出强烈的杀螺活性(LD50=
1.49×10−6)。在 24 h 内其石油醚、醋酸乙酯、乙醇
提取物的 LD50分别为 7.81、27.33、64.14 mg/L。通
过高效液相色谱分析,银杏酸包括 3 种类型:C13:0、
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C15:1和 C17:1,考察三者对钉螺杀灭活性,钉螺死亡率
分别为 45%(C13:0)、65%(C15:1)、0(C17:1),烷基
侧链的长度对杀螺效果有重要影响。具有杀螺活性的
鞣质类、烷基水杨酸和没食子酸类化合物见图 4。
5 萜类
过江藤属 Phyla Lour. 植物中含有灭杀光滑双
脐螺的单萜类化合物百里酚(thymol,46)、香芹
酚(carvacrol,47)、柠檬烯(cinene,48)。从海
南蒲桃 Syzygium hainanense Chang & Miau 叶提取
的精油中富含单萜类化合物(87.12%),包括
31.85%的 α-蒎烯(α-pinene,49),28.98% (Z)-β-
罗勒烯 [(Z)-β-ocimene,50] 和 11.71% (E)-β-罗勒烯
OHOOH
O
CH3HO
OHOOH
O
CH3H
OHOOH
O
CH3OH2C
OHOOH
H
CH3H
H
28 29 30 31
OHOOH
O
COOHH
OHOOH
CH3RO
O
O
OOH
H3C
O
OOH
CH3
32 33 34 35
OH O
HO
O O CH2OH
OHHO OH
OH
O
OH O
HO
OMe
OH
OH
OH
O
OH O
MeO
OH
O
OH
MeO
OH
36 37 38
OHO
OH O
OH
OH
OH
O O
OH
H3C
H3C
OH O
O
OH
OO
HO
O
HO O
OH
OHHO
39 40 41 42
图 3 具有杀螺活性的蒽醌和黄酮类化合物
Fig. 3 Anthraquinones and flavonoids with molluscicidal activity
HO
HO
HO
O
O OH
OH
OH
HO
O
COOH
OH
R
R=C13H27 (C13:0)
R=C15H29 (C15:1)
R=C17H33 (C17:1)
43 44 45
图 4 具有杀螺活性的鞣质、烷基水杨酸和没食子酸类化合物
Fig. 4 Tannins, alkyl salicylic acids, and gallic acids flavonoids with molluscicidal activity
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 14 期 2015 年 7 月
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[(E)-β-ocimene,51]。海南葡桃叶精油 48 h 对光滑
双脐螺和亚马逊利什曼原虫的 LC50 分别为 9×10−5
和 6×10−5,对预防血吸虫病和利什曼病有很好的开
发前景。但对于到底是那种化合物起主要作用或者
是哪几种成分起到协同作用还未清楚[33]。
佛波醇酯(phorbol esters,52)是新发现的二
萜类化合物,来源于麻风树 Jatropha curcas L.。麻
风树的种子对双脐螺和钉螺均有作用,但对钉螺更
为敏感,研究表明,麻风树种子中含有的佛波醇酯
发挥了灭螺作用,质量分数为 0.001%时即能杀死这
2 种钉螺。麻风树果的外壳和内壳的甲醇提取物
比水提物有更强的杀螺活性,且对湖北钉螺的活
性最强[23],从其内核的甲醇提取物中分离得到的化
合物 4β-phorbol-13-decanoate(53)表现出最强的杀
螺活性,其LC50为1×10−5,而4β-phorbol-12-myristate-
13-acetate(54)活性较弱,没有酯基团的 4α-phorbol
(55)也表现出相对较弱的活性。由此可见,佛波醇
酯至少含有一条脂肪酸侧链才具有杀螺活性。佛波
醇酯还可以通过刺激蛋白激酶 C,干扰磷酸肌醇/
Ca2+信号通路来实现杀螺[34]。佛波醇酯的碳链骨架
称为巴豆萜烷[35],包括 A、B、C、D 4 个环,在不
同的位置羟基化以及在酯部结合不同的酸可形成不
同的佛波醇酯化物。佛波醇酯分为 2 类 α型和 β型,
它们的不同在于 C 环上的羟基位置不同,这将导致
D 环的空间位置影响构象。天然来源的佛波醇酯不
稳定,在分离的过程中容易发生氧化、水解、酯交
换以及差相异构等反应,所以分离必须在无氧的环
境下进行。
从大戟属植物 Euphorbia paralias L. 中提取到 9
个具有一定杀螺活性的二萜类化合物。化合物 56 具
有最强的杀螺活性,质量分数为 1.5×10−5和 1×10−5
时杀螺率分别为 100%和 30%。在质量分数为 5×10−5
时,化合物 56~59 均具有 100%杀螺活性,在 2.5×
10−5时只有化合物 56 有 100%杀螺活性[36]。
倍半萜烯 warburganal(60)及其同系物和倍
半萜烯内酯二氢豚草素(damsin,61)及其衍生
物表现出高效的杀螺活性,其中 2×10−6 的
warburganal 在 24 h 内可以杀灭所有实验钉螺。从
斑鸠菊族植物中分离得到 16 种具有杀螺活性的
倍半萜烯内酯,其中 10 种化合物(65、67、68、
70、71、72、74、75、76、77)在质量浓度小于
100 mg/mL 时表现出很好的杀螺活性;化合物 62、
63、64、69、72、73 表现稍差的杀螺活性。16 种
化合物属于 4 种化学结构类型:hirsutinolide 型
(62~66)、glaucolide 型(67~69),goyazensolide
型(70~73)和 isogoyazensolide 型(74~77)。
其中 goyazensolide 型和 isogoyazen- solide 型(除
76、77 外)有 exomethylidene-γ-lactone 结构。通
过杀螺活性结果显示,不是所有具有 exomethylidene-
γ-lactones 结构的化合物都具有杀螺活性,因此,
这个功能结构对于杀螺活性也许是必需的但还不
够充分。Isogoyazensolide 类化合物中 C4=C15 双键
以及 exomethylidene-γ-lactone 部分具有的 C7=C11
双键在杀螺活性上起到了重要作用。所以推断合
成衍生物 77 是因为 2 个双键都被还原,而不具有
杀螺活性(LD50>100 mg/mL)。Goyazensolide
类化合物杀螺活性依靠 C-8 上的酯链,化合物 67
具有甲基丙烯酸酯,杀螺活性最高;glaucolide 类
化合物 67 和 68 有一个 C1=O 双键。Hirsutinolide
类化合物 65 和 66 也具有杀螺活性,发现这 2 种
化合物在 C-1 和 C-10 位上有 2 个相邻的羟基。由
此可见,倍半萜内酯的杀螺活性主要与大根香叶
内酯骨架以及相关的官能团相关 [37]。石胡荽
Centipeda minima (L.) A. Braun & Asch. 的水提物
和醇提物均具有灭螺作用,其水提物灭螺效果优
于醇提物,石胡荽中灭螺的有效成分是倍半萜内
酯类和甾醇类,但石胡荽的灭螺有效成分对钉螺
作用较缓慢,浸泡处理钉螺 3 d 后其死亡率才明显
上升,可能其毒性存在一个蓄积的过程[38]。具有
杀螺活性的萜类化合物见图 5。
6 其他物质
研究发现,质量浓度大于 10 mg/L 的蛇床子总
香豆素溶液处理钉螺 3~4 d 可 100%杀死钉螺,且
处理液浓度和处理时间与钉螺的死亡率呈显著的正
相关[39]。从橄榄科植物没药 Commiphora myrrha
(Nees) Engl. 中提取的精油比树脂具有更高的杀椎
实螺活性,精油在 24、48、96 h 的 LC50 分别为
5×10−6、4×10−6 和 3×10−6。但树脂具有更高的灭
杀尾蚴的能力,其 15 min 的 100%致死浓度为
2.5×10−6[40]。研究表明,豚草 Ambrosia artemisiifolia
L. 籽醇提取制成浓缩液,将浓缩液稀释至 0.1、0.5、
1 g/L,进行钉螺浸杀实验。结果显示,质量浓度大
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OH
H3C
CH3
CH3
H3C
CH3
CH3
HO
CH3
CH2H3C
CH3
CH3
CH3
46 47 48 49 50
OHH3C
CH2OH
O HO
H
CH3
CH3
H
OHH3C
OH
H
HO
H3C
CH2OH
OHO
CH3
CH3
H
H3C
HO
O
H3C
O
HO
H3C
CH2OH
OHO
CH3
CH3
H
OH3C
O
H3CO O
CH3
51 52 53 54
HO
H3C
CH2OH
O HO
CH3
CH3
H
OHH3C
OH
H
H3C
O
OH
H
OCOCH3
CH3
H
H3COCO
OCOCH3
CH3
CH3 CH3
C O
H3C
O
OH
H
H
CH3
H
H3COCO
OCCH2COCH3
OCOCH3
CH3 CH3
C O
H
OCOCH3
CH3CO2
55 56 57
CH3
OCOCH3
H3COCO
H3C
H3COCO
CH3
O2CHC(CH3)2H3COCO
H
H3CO2
CH3O
O
O
CH3
OCOCH3
H3COCO
H3C
H3COCO
CH3
O2CH2CCCH3H3COCO
H
H3CO2
CH3O
O
O
CH3
H3C
OHC
CH3
H
OH
CHO
58 59 60
H
O
O
O H
H
O
O
OAc
O
O
HO
O
O
O
OAc
O
O
HO
O
O
O
OAc
O
O
HO
O
61 62 63 64
O
O
OAc
O
OAc
OH
HO
O
O
OAc
O
O
OH
HO
O
O
O
OAc
H
O
O O
OAc
O
O
O
OAc
H
OAc
O O
OAc
65 66 67 68
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O H
O
O O
OAc
O
O
HO
O
O
O
O
O
O
HO
O
O
O
O
O
O
HO
O
O
O
O
O
O
O
69 70 71 72
O
O
O
O
O
O
H
HO
O
O
O
O
O
O
HO
O
O
O
O
O
O
HO
O
O
O
O
O
O
HO
O
O
O
O
O
O
HO
73 74 75 76 77
图 5 具有杀螺活性的萜类化合物
Fig. 5 Terpenes with molluscicidal activity
于 0.5 g/L 的豚草籽提取液具有抑制钉螺上爬和毒
杀效果,处理 72 h 钉螺死亡率达 100%[41]。桉树叶
和挥发油可入药,有消炎、杀菌、健胃、祛痰、驱
风之效。通过对 5 种桉树叶进行灭螺活性实验,发
现 5 种挥发油(10 mg/L)浸杀 48 h 后钉螺的死亡
率均≥60%,柠檬桉和尾叶桉挥发油的效果比其他
3 种好。但是现在并不知道是桉树叶里的哪种有效
成分具有杀螺作用 [42] 。富贵草 Pachysandra
terminalis Sieb. et Zucc. 粉及提取物(PT-I)具有较
好的杀灭钉螺和抑制钉螺上爬的作用,且对鱼的毒
性小。富贵草粉 2.19、4.38 mg/L 浸泡钉螺 42 h,其
抑制钉螺上爬率分别达到 63.3%和 100.0%;PT-I 1.4
mg/L 浸泡钉螺 72 h,钉螺死亡率达到 96.7%[43]。
从马尾藻 Sargassum natans J. Agargh. 中获得
的化合物 ricciocarpin A(78)和 ricciocarpin B(79)
具有很强的杀光滑双脐螺活性,LC50 分别是 1.1×
10−5 和 4.3×10−5[44]。大多数楝属植物的根中含有川
楝素(80)[45],它能通过抑制 K+通道的和促进 L
型 Ca2+通道进行杀螺。喜旱莲子草 Alternanthera
philoxeroides (Mart.) Griseb. 水提液表现出明显的
迅速麻醉钉螺的作用,抑制钉螺上爬效果与化学灭
螺剂相似,这点在目前所知植物灭螺水浸液中是非
常独特的。1%喜旱莲子草水浸液即表现出明显的抑
螺效果,钉螺一浸入到提取液中立即静止不动,一
直延续 24 h 均如此,但大多数并未死亡,其主要
是通过抑制胆碱酯酶活性和 ATP 酶活性来发挥作
用[46]。具有杀螺活性的其他类化合物见图 6。
O
H
H
O
O
O
H
H
O
O
O
78 79
O
O
O
OH
OH
O
O
H
H
O
OH
O
80
图 6 具有杀螺活性的其他类化合物
Fig. 6 Others components with molluscicidal activity
7 结语与讨论
早期人们对植物灭螺剂的研究多数是使用植物
粉末或者植物提取物直接灭螺,对具有灭螺活性的
具体化学成分的研究较少[47]。目前,人们对灭螺天
然产物的研究则更加注重于化合物的分离纯化、结
构鉴定和作用机制研究,力图明确成分分子中的哪
些官能团在起决定性的作用,通过检测化学处理后
钉螺超微结构以及生化指标的改变来阐明活性成分
的作用机制。对灭螺机制的研究主要是通过研究钉
螺生理学特征、生物化学参数、组织化学等方面的
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 14 期 2015 年 7 月
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变化,进而探讨植物灭螺剂的灭螺机制,找出植物
灭螺剂作用的靶器官[48]。然而,在研究过程中,钉
螺的某些生理学特征可能不仅受植物灭螺剂的影
响,还受到其他外界因素如温度、湿度和季节等的
干扰,而且某些生理学特征的改变往往是多种因素
共同作用的结果,因此单纯从钉螺的生理特征的变
化还不足以了解植物灭螺剂确切的灭螺机制,仍需
借助其他方法做进一步研究。
开发一种新的植物灭螺剂必须考虑到以下 3 个
方面问题:(1)具有较好的杀螺以及摇尾幼虫效果,
且对非靶生物的毒杀作用小,最好是无影响;(2)
植物资源必须丰富,并且对有效成分的提取分离、
纯化成本不高;(3)灭螺机制探究要透彻,掌握钉
螺超微结构以及生理生化上的改变。现阶段研究成
果表明,有些药物能够明显抑制钉螺上爬,有些药
物能够很好地杀灭摇尾幼虫,有些药物刺激性小能
够有效防止钉螺合靥,有些药物的杀螺活性和时间
呈正比与浓度关系不大,有些药物的杀螺活性与浓
度呈正相关但与时间的关系不大。还有一些研究发
现湖北钉螺中的血蓝蛋白很可能和钉螺有相同的碳
水化合物抗原,这样日本血吸虫可以逃避钉螺的免
疫攻击[49]。
为了有效地研发新型灭螺药物,主要可以从以
下 3 方面着手:(1)加强植物灭螺剂化学成分的分
析,找出关键灭螺化学成分及有效的功能基团和构
象,为研制仿生植物灭螺剂提供依据;(2)综合多
种有效的化学成分,找到最佳的杀螺混合比例;(3)
寻找免疫原刺激钉螺产生灭杀钉螺的抗体,打破钉
螺和血吸虫的系统。
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