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Analysis on Peucedani Radix coumarin by UPLC/Q-TOF MS and study on its preliminary pharmacodynamics

前胡香豆素类提取物的UPLC/Q-TOF-MS分析及其初步药效学研究



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 24期 2015年 12月

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前胡香豆素类提取物的 UPLC/Q-TOF-MS分析及其初步药效学研究
徐 倩 1,胡云飞 3,汪电雷 1,徐国兵 1, 2, 3, 4*,汪 宁 1
1. 安徽中医药大学药学院,安徽 合肥 230031
2. 安徽省食品药品检验研究院,安徽 合肥 230051
3. 国家中药材产品质量监督检验中心,安徽 亳州 236800
4. 安徽医科大学药学院,安徽 合肥 230032
摘 要:目的 建立 UPLC/Q-TOF-MS 法分析前胡香豆素类提取物的化学成分,并对其初步药效学进行研究。方法 采用
Acquity UPLC BEH C18色谱柱;以 0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;检测波长 321 nm;采用电喷雾
正离子化模式(ESI+),扫描范围 m/z 100~1 000;利用链脲佐菌素(STZ)诱导的 2 型糖尿病大鼠模型,对前胡香豆素类提
取物的调脂降糖作用进行初步药效学研究。结果 前胡香豆素类提取物中的 qianhucoumarin D(1)、peucedanocoumarin II(2)、
白花前胡甲素(3)、peucedanocoumarin I(4)、白花前胡乙素(5)、praeuptorin E(6)得到良好的分离与鉴定。初步药效学
实验结果表明,前胡香豆素类提取物能显著降低 2 型糖尿病大鼠空腹血糖、胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白及肝脏指数(P<
0.05),升高高密度脂蛋白(P<0.05),提示前胡香豆素类提取物能改善 2 型糖尿病大鼠糖与脂质代谢,发挥治疗 2 型糖尿
病的作用。结论 建立了前胡香豆素类的 UPLC/Q-TOF-MS 的分离鉴定方法;初步药效学研究表明前胡香豆素类提取物具有
显著的调脂及降糖作用。
关键词:前胡;香豆素类提取物;UPLC/Q-TOF MS;降血糖作用;调血脂作用;白花前胡甲素;白花前胡乙素
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2015)24 - 3637 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.24.004
Analysis on Peucedani Radix coumarin by UPLC/Q-TOF MS and study on its
preliminary pharmacodynamics
XU Qian1, HU Yun-fei3, WANG Dian-lei1, XU Guo-bing1, 2, 3, 4, WANG Ning1
1. School of Pharmacy, Anhui University of Chinese Medicine, Hefei 230031, China
2. Anhui Institute for Food and Drug Control, Hefei 230051, China
3. National Quality Supervision and Inspection Center for Chinese Medicinal Materials Products, Bozhou 236800, China
4. School of Pharmacy, Anhui Medicine University, Hefei 230032, China
Abstract: Objective To establish a UPLC/Q-TOF MS method for analyszing the chemical constituents of total coumarins extract
from Peucedani Radix (the rhizome of Peucedanum praeruptorum) and to study its preliminary pharmacodynamics. Methods The
chromatographic column was Acquity UPLC BEH C18, the mobile phase was composed of 0.1% formic acid (A) and acetonitrile (B)
with gradient elution; The detection wavelength was set at 321 nm; The ionization mode was ESI+; And the mass scan range was m/z
100—1 000. Using the rat model of type 2 diabetes mellitus (T2DM) induced by streptozocin (STZ), the effect of total coumarins on
reducing blood-lipid and blood-sugar was investigated in the experiment. Results Qianhucoumarin D, peucedanocoumarin II,
praeruptorin A, peucedanocoumarin I, praeruptorin B, and praeuptorin E in Peucedani Radix coumarin could be well separated and
identified in one run. The preliminary pharmacodynamic results show that the total coumarins had an effect of reducing the level of
fasting blood glucose, cholesterol, triglycerides, LDL, and liver index (P < 0.05); On the other hand, it could improve the level of HDL
(P < 0.05). The above results prompt that coumarin extract of Peucedani Radix could improve the carbohydrate and lipid metabolism of
T2DM, then play a role in the treatment of T2DM. Conclusion A UPLC/Q-TOF MS method has been established to separate and

收稿日期:2015-07-24
基金项目:安徽省科技计划项目(08120303003);安徽省研究生“千人计划”支持项目
作者简介:徐 倩,女,硕士研究生,主要从事中药活性成分与质量控制研究。Tel: 18225886316 E-mail: xuqian45China@163.com
*通信作者 徐国兵,理学博士,硕士生导师,主任药师,从事中药活性成分与质量控制研究。Tel: (0551)63710027 E-mail: xgb119@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 24期 2015年 12月

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identify the total coumarin extract of Peucedani Radix, the preliminary pharmacodynamic study shows that the total coumarin extract
of Peucedani Radix had the function of reducing blood sugar and blood lipid significantly.
Key words: Peucedani Radix; coumarin extract of Peucedani Radix; UPLC/Q-TOF MS; reduce blood-lipid; reduce blood-sugar;
praeruptorin A; praeruptorin B

前胡 Peucedani Radix 为伞形科(Umbellifecrae)
前胡属 Peucedanum L. 植物白花前胡 Peucedanum
praeruptorum Dunn 的干燥根及根茎,始载于《名医
别录》,具有疏风散热、降气化痰等作用[1]。香豆素
为其主要成分,现代药理研究香豆素类具有保护心
血管、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用[2-3],同时也
具有疗效稳定、温和持久、副作用小、多靶点调节
等优势。近年来有文献报道[4],以香豆素为母环合
成的 3-溴-4,7-二甲基-6-磺酰脲香豆素能显著降低
小鼠血糖,然而进一步探讨香豆素类化合物是否对
2 型糖尿病具有治疗作用,却未见报道。本研究采
用 UPLC/Q-TOF-MS 技术,鉴定出前胡提取物中的
6 种香豆素类成分,并探讨了前胡香豆素类提取物
对 2 型糖尿病合并高血脂大鼠的治疗作用。
1 实验材料
1.1 仪器与设备
Waters AcquityTM 超高效液相色谱仪(美国
Waters 公司),包括二元高压泵、在线脱气机、柱
温箱、自动进器样装置;Xevo G2 QTOF 质谱仪(美
国 Waters 公司),MassLynx 4.1 数据处理工作站(美
国 Waters 公司随机附带);XP26 微量电子天平(瑞
士 Mettler Toledo 公司);S30H-D78224 超声波清洗
仪(德国 Elma Sonic 公司)。AU-2700 全自动生化
分析仪(日本 Olympus 公司);L0106RB00347 血糖
仪(美国 LifeScan 公司);HL-5 L/50 MPa-IICWQ
超临界流体萃取仪(华黎泵业有限公司)。
1.2 材料与试剂
前胡香豆素类提取物由本实验室自制(经峰面
积归一化法测得,总香豆素相对质量分数为
98.1%),前胡原药材采自安徽省宁国市云梯乡,经
安徽中医药大学刘守金教授鉴定为伞形科植物白花
前胡 Peucedanum praeruptorum Dunn 的干燥根及根
茎;对照品白花前胡甲素(批号 111711-200602)、
白花前胡乙素(批号 111904-201203)购自中国食
品药品检定研究院,质量分数均大于 98.8%;链脲
佐菌素(STZ,美国 Sigma 公司,批号 20131009490);
消渴丸(广州中一药业有限公司,批号 J00387)。
乙腈、甲醇、甲酸均为质谱纯(德国 Merck 公司),
水为蒸馏水(香港屈臣氏公司)。血糖试纸(美国
LifeScan 公司,批号 3060193009)。
1.3 动物
SPF 级 SD 雄性大鼠,体质量(200±20)g,
由南京安立默科技有限公司提供,合格证号 SCXK
(皖)2013-002 号。大鼠在恒温(24±2)℃、光照
周期 12 h/12 h 环境中分笼饲养,适应性饲养 1 周。
2 方法与结果
2.1 化学成分鉴定
2.1.1 混合对照品溶液的制备 分别精密称取对照
品白花前胡甲素和白花前胡乙素适量,加甲醇制成
质量浓度分别为 0.031、0.024 mg/mL 的混合对照品
溶液。经 0.22 μm 微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
2.1.2 前胡香豆素类提取物及供试品溶液的制备
称取适量前胡药材粗粉,在萃取压力 35 MPa、萃取
温度 60 ℃、萃取时间 60 min、夹带剂乙醇比例
15%、CO2体积流量 20 mg/min 的条件下进行萃取,
萃取物加入石油醚(60~90 ℃)适量混匀,5 ℃以
下冷藏 72 h,待结晶完全析出后,弃去上层石油醚,
再重复加入适量石油醚(60~90 ℃)反复重结晶 2
次,最后一次弃去上层石油醚后滤过,用少量石油
醚(30~60 ℃)洗至滤液无色,室温挥干,即得前
胡超临界 CO2流体提取物粉末。精密称定 0.102 mg
前胡香豆素类提取物粉末,置于 10 mL 量瓶,加甲
醇超声溶解,0.22 μm 微孔滤膜滤过,取续滤液,
即得。
2.1.3 色谱条件 色谱柱为Acquity UPLC BEH C18
色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为 0.1%
甲酸水溶液(A)-乙腈(B),洗脱梯度:0~8 min,
30%~60% B;8~15 min,60% B;15~20 min,
60%~85% B。柱温 30 ℃,进样量 2 μL,体积流量
0.25 mL/min。
2.1.4 质谱条件 采用电喷雾正离子电离模式
(ESI+),毛细管电压 3.0 kV,锥孔电压 30 V,离子
源温度 120 ℃,脱溶剂气温度 450 ℃,脱溶剂气流
量 800 L/h。采用 MSE模式进行数据采集,采集时
间 24 min,扫描间隔 0.5 s,碰撞低能量 6 V,碰撞
高能量 10~30 V,质量扫描范围 m/z 100~1 000,
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碰撞气为高纯氩气,雾化气为高纯氮气,LockMass
采用亮氨酸脑啡肽(Leueine Enkephalin)进行质量
数实时校准。
2.1.5 前胡香豆素类提取物分析 参照上述条件,
取前胡香豆素类提取物样品2 μL进样,样品的总离
子流图(TIC图)见图1。在正离子模式下,前胡香
豆素类提取物中的6个组分均有良好的响应。由一级
质谱图得到各成分的准分子离子,均为 [M+Na]+
峰,质量数分别为369.094 7、409.126 5、409.125 8、
411.142 0、449.157 2、451.173 2,质量偏差(×10−6)
分别为−0.8、0.5、−1.2、0、−0.8、0.2。

3-白花前胡甲素 5-白花前胡乙素
3-praeruptorin A 5-praeruptorin B
图 1 混合对照品 (A) 和供试品 (B) 的总离子流图
Fig. 1 TIC of mixed reference solution (A) and tested
solution (B)
本研究对白花前胡甲素及白花前胡乙素对照品
的裂解方式进行了探讨,见图 2、3。发现两者都存
在 m/z 227 的碎片峰,根据化学结构式可以确定其
为香豆素类化合物的母核。由前胡香豆素类提取物
中的一级质谱图可知,6 种成分均存在 m/z 227 的碎
片峰,且文献资料[5]显示白花前胡主要成分为角型
吡喃香豆素类(邪蒿内酯型香豆素),其 3′、4′位脱
取代基的母核质量数恰好为 m/z 227,因而推测前胡
香豆素类提取物的主要成分为角型吡喃香豆素。由
于这些化合物的母核结构相同,因而很难对其进行
准确地定性区分。在大量文献及对照品的基础上,
初步鉴定了 6 个化合物,分别是 qianhucoumarin D
(1)、peucedanocoumarin II(2)、白花前胡甲素(3)、
peucedanocoumarinI(4)、白花前胡乙素(5)、
praeuptorin E(6),化学结构式见图 4。
色谱峰 1:分子式为 C18H18O7,m/z: 369.094 7
[M+Na]+、309.073 6 [M-CH3COOH+Na]+、

图 2 白花前胡甲素的一级质谱图
Fig. 2 MS spectrum of praceruptorin A

图 3 白花前胡乙素的一级质谱图
Fig. 3 MS spectrum of praceruptorin B
OO
R2
R1
O
1 R1= O
O
R2=
2 R1= O
O
R2= O
O
3 R1= O
O
O
O
R2= O
O
4 R1= O
O
R2= O
O
5 R1= O
O
R2= O
O
6 R1= O
O
R2= O
O

图 4 前胡香豆素类的化学结构
Fig. 4 Chemical structures of total coumarins of Peucedani
Radix
287.091 7 [M+H-CH3COOH]+、245.080 9 [基峰,
M+H-CH3COO-CH3CO]+、227.070 5 [M+H-
CH3COO-CH3COO]+,以上数据与文献报道的
qianhucoumarin D 数据基本一致[6]。
A
B
3
5
3
5 6
2 4
1
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
t/min
245
227 327
327.123 0
227.070 3
245.079 9
409.125 8
425.100 9
599.188 2
795.263 5
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1 000
m/z
3′ 4′
327
227
3′ 4′
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1 000 1 100
327.121 9
227.071 9
449.157 2
455.130 2 875.310 5
m/z
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色谱峰 2:分子式为 C21H22O7,m/z: 432.200 3
[M+HCOOH]+、409.126 5 [M+Na]+、327.137 9 [M+
H-CH3COOH]+、287.091 2 [M+H-CH3CH=
C(CH3) COOH]+、245.081 2 [基峰,M+H-CH3COO-
CH3CH=C(CH3)CO]+、227.070 6 [M+H-CH3COOH-
CH3CH=C(CH3)COOH]+ , 以 上 数 据 与 文 献 中
peucedanocoumarin II 的数据基本一致[7]。
色谱峰 3:分子式为 C21H22O7,m/z: 425.100 9
[M+K]+、409.125 8 [M+Na]+、327.123 0 [基峰,
M+H-CH3COOH]+、245.1 [M+H-CH3COO-
CH3CH=C(CH3)CO]+、227.070 3 [M+H-CH3COOH-
CH3CH=C(CH3)COOH]+,由图 1 可见,此峰与白花
前胡甲素对照品的保留时间、质谱信息相一致,且
与文献中白花前胡甲素的数据基本一致[8],所以确
定此峰为白花前胡甲素,碎片图见图 2。
色谱峰 4:分子式为 C21H24O7,m/z: 411.142 0
[M+Na]+、329.139 1 [M+H-CH3COOH]+、245.081 3
[基峰,M+H-CH3COO-CH3CH2CH(CH3)CO]+、
227.070 4 [M+H-CH3COOH-CH3CH2CH(CH3)
COOH]+,以上数据与文献报道的 peucedanocoumarin I
数据基本一致[9]。
色谱峰 5:分子式为 C24H26O7,m/z: 472.256 4
[M+HCOOH]+、465.130 2 [M+K]+、449.157 2 [M+
Na]+、327.121 9 [基峰,M+H-CH3CH=C(CH3)
COOH]+ 、 227.071 9 [M + H - CH3CH=C(CH3)
COOH-CH3CH=C(CH3)COOH]+,由图 1 可见,此
峰与白花前胡乙素对照品的保留时间相同,质谱信
息一致,且与文献中白花前胡乙素的数据基本一致[8],
所以确定此峰为白花前胡乙素,碎片图见图 3。
色谱峰 6:分子式为 C24H28O7,m/z: 474.262 7
[M+HCOOH]+、467.148 3 [M+K]+、451.173 2 [M+
Na]+、 327.122 8 [基峰,M+H-CH3CH(CH3)
CH2COOH]+ 、 245.081 8 [M + H - CH3CH(CH3)
CH2COO-CH3CH=C(CH3)CO]+、227.069 4 [M+
H-CH3CH(CH3)CH2COOH-CH3CH=C(CH3) COOH]+,
以上数据与文献报道的praeuptorin E 数据基本一致[10]。
2.1.6 前胡香豆素类提取物质谱分析 从以上数据
中可以总结出前胡总香豆素以下裂解规律:(1)前
胡香豆素类提取物中各成分在正离子模式下均有较
好的响应。(2)前胡香豆素类提取物在正离子模式
下,均出现了 [M+K]+、[M+Na]+的特征峰(如白
花前胡甲素出现m/z 409.125 8、425.100 9 的峰)。(3)
前胡总香豆素类 3′、4′位取代基仅有 2 种断裂方式,
一是烷氧键断裂,二是酰氧键断裂。(4)角型吡喃
香豆素的 4′位取代基较 3′位容易断裂。(5)当 3′位
取代基上存在共轭体系时,先断裂 4′位,形成脱 4′
位取代基峰。
2.2 对 2型糖尿病大鼠的初步药效学研究
2.2.1 2 型糖尿病大鼠模型的建立 取 100 只健康
雄性大鼠,根据体质量随机抽取 15 只为对照组,用
普通饲料喂养,其余大鼠用高脂饲料(72%普通饲
料+20%猪油+8%蔗糖)连续喂养 4 周后,禁食不
禁水 16 h,对照组大鼠 ip pH 4.2 的柠檬酸-柠檬酸
钠缓冲液,对照组以外的大鼠按 30 mg/kg 的剂量 ip
STZ(临用前用 pH 4.2 的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液制成
1%的溶液),72 h 后,眼内眦静脉取血,测空腹血糖
(FBG),FBG 值≥11.1 mmol/L 即造模成功[11-13]。
2.2.2 动物分组、给药与指标检测 选取 75 只造模
成功的大鼠,根据体质量与造模情况将大鼠随机分
成 5 组,每组 15 只。其中模型组,ig 同等体积的
0.5%羧甲基纤维素钠溶液;消渴丸组,给药剂量为
0.030 g/(kg·d);前胡香豆素提取物又分为低、中、高
剂量 [0.015、0.030、0.060 g/(kg·d)] 组。同时对照组
ig 同体积的 0.5%羧甲基纤维素钠溶液。上述药物均用
0.5%羧甲基纤维素钠溶液配制成一定浓度的混悬液,
给药量为 1 mL/100 g,每日 1 次,连续 4 周。
给药 4 周后,大鼠禁食 6 h,眼静脉取血后乌拉
坦(0.15 g/kg)左下 ip 麻醉,腹主动脉取全血置于
真空采血管中,静置 30 min,离心(3 500 r/min),
取上清液,比色法测大鼠血清糖化血红蛋白(GHB)
量,其他指标用全自动生化仪进行检测。另取出大
鼠肝、脾、肾脏称质量,并计算脏器指数(脏器指
数=脏器质量/体质量)。
2.2.3 前胡香豆素类提取物对大鼠 FBG 及 GHB 量
的影响 由表1结果可知,2型糖尿病大鼠血清FBG
和 GHB 量会显著升高,与对照组比较差异非常显
著(P<0.01),给药后,消渴丸及前胡香豆素类提
取物高、中、低剂量组血清 FBG 较给药前均有明显
降低(P<0.05、0.01),且与模型组相比也明显降
低(P<0.05、0.01);消渴丸及前胡香豆素类提取
物高、中剂量组血清 GHB 较模型组低(P<0.05、
0.01)。结果表明,前胡香豆素类提取物能降低 2 型
糖尿病大鼠血清 FBG 和 GHB 水平,且呈一定的量
效关系。
2.2.4 前胡香豆素类提取物对大鼠血清总胆固醇
(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 24期 2015年 12月

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及低密度脂蛋白(LDL-C)的影响 由表 2 的结果
可知,2 型糖尿病大鼠血清 TC、TG、LDL-C 显著
升高,而 HDL-C 水平显著降低,与对照组比较差
异显著(P<0.01)。消渴丸组和前胡香豆素类提取
物高、中剂量组大鼠血清 TC、TG、LDL-C 的水平
较模型组相比明显降低,HDL-C 水平则明显升高,
差异显著(P<0.05、0.01)。表明前胡香豆素类提
取物能降低糖尿病大鼠血清 TC、TG、LDL-C 及增
加血清 HDL-C 的量,且呈一定的量效关系。
2.2.5 对大鼠脏器指数的影响 由表 3 的结果可
知,2 型糖尿病大鼠的脏器指数均较对照组大鼠高,
差异非常显著(P<0.01)。消渴丸组大鼠的各脏器
指数均较模型组明显降低,差异显著(P<0.05)。
前胡香豆素提取物高剂量组大鼠仅肝脏指数较模型
组显著降低(P<0.05),脾脏、肾脏指数与模型组
无显著差异。前胡香豆素提取物中、低剂量组大鼠
的各脏器指数与模型组均无显著差异。表明高剂量
的前胡香豆素类提取物可能会降低 2 型糖尿病大鼠
的肝脏指数。
3 讨论
本实验对前胡超临界提取物进行了析出与重结
晶,得到了较为纯净的前胡香豆素类提取物,超临
界萃取法与传统提取分离技术相比,其对香豆素类
成分的提取效率较高,能较好地将香豆素类成分与
其他化合物进行分离[14]。基于前期对前胡中香豆素
提取工艺的研究,发现以白花前胡甲素的提取率作
为指标,超临界流体萃取法对白花前胡甲素的提取
率为 94.2%,纯化后白花前胡甲素的质量分数达
表 1 前胡香豆素提取物对 2型糖尿病大鼠 FBG及 GHB的影响 ( x±s, n = 15)
Table 1 Effect of total coumarins from Peucedani Radix on FBG and GHB in T2DM rats ( x±s, n = 15)
FBG/(mmol·L−1) 组别 剂量/(g·kg−1) 给药前 给药后 GHB/(mmol·L
−1)
对照 — 6.78±0.62△△ 7.17±0.40△△ 6.37±0.96△△
模型 — 17.02±1.61 19.19±3.36 24.35±3.34
消渴丸 0.030 17.21±2.04 9.65±0.55△△** 11.39±2.57△△
前胡香豆素提取物 0.015 17.16±1.84 15.70±1.96△* 23.56±3.93
0.030 17.30±1.20 17.30±0.83△* 20.46±5.21△
0.060 17.20±1.64 11.34±1.63△△** 12.79±4.36△△
与模型组比较,△P<0.05 △△P<0.01;与给药前比较,*P<0.05 **P<0.01,下同
△P < 0.05 △△P < 0.01vs model group; *P < 0.05 **P < 0.01 vs group befor administration, same as below
表 2 前胡香豆素类提取物对 2型糖尿病大鼠血清 TC、TG、HDL-C及 LDL-C的影响 ( x±s, n = 15)
Table 2 Effect of total coumarins from Peucedani Radix on TC, TG, HDL-C, and LDL-C in T2DM rats ( x±s, n = 15)
组别 剂量/(g·kg−1) TC/(mmol·L−1) TG/(mmol·L−1) HDL-C/(mmol·L−1) LDL-C/(mmol·L−1)
对照 — 1.96±0.31△△ 0.96±0.16△△ 3.36±0.37△△ 0.22±0.09△△
模型 — 3.65±0.16 1.61±0.21 1.89±0.22 0.64±0.19
消渴丸 0.030 2.28±0.32△△ 1.29±0.18△△ 2.62±0.37△△ 0.36±0.12△△
前胡香豆素提取物 0.015 3.59±0.37 1.59±0.23 1.90±0.28 0.64±0.15
0.030 3.05±0.27△ 1.42±0.20△ 2.25±0.34△ 0.52±0.12△
0.060 2.21±0.35△△ 1.21±0.13△△ 2.91±0.35△△ 0.40±0.11△△
表 3 前胡香豆素类提取物对 2型糖尿病大鼠脏器指数的影响 ( x±s, n = 15)
Table 3 Effect of total coumarins from Peucedani Radix on viscera indexes in T2DM rats ( x±s, n = 15)
组别 剂量/(g·kg−1) 肝脏指数 脾脏指数 肾脏指数
对照 — 3.61±0.13△△ 0.27±0.03△△ 0.57±0.04△△
模型 — 5.64±0.41 0.53±0.04 1.05±0.09
消渴丸 0.03 5.29±0.24△ 0.49±0.03△ 0.95±0.13△
前胡香豆素提取物 0.015 5.47±0.35 0.56±0.04 1.06±0.08
0.030 5.16±0.29 0.53±0.05 0.99±0.12
0.060 4.84±0.32△ 0.52±0.04 1.01±0.07
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 24期 2015年 12月

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40.8%[15]。运用 UPLC/Q-TOF-MS 法对前胡超临界
提取物的化学成分进行定性分析,能得到较 LC/MS
更为准确的碎片相对分子质量,实验依据质谱所得
的离子碎片信息,初步推断出了这 6 个色谱峰相应
的化学结构。另对前胡香豆素类的质谱规律进行了
简单的探讨,发现其断裂方式及离子碎片峰的相对
丰度与香豆素母核上的 3′取代基有很大关系,具体
的裂解规律有待进一步探讨。
2 型糖尿病模型的大鼠由于胰岛 β 细胞受损,
胰岛素分泌不足,机体对葡萄糖的利用率降低,肝
糖原输出增多,血清脂肪酸转运及移除的 TG 量减
少,脂肪合成被抑制,导致糖和脂质代谢紊乱,且
后期会出现体质量下降,各脏器不同程度的肿大,
导致脏器指数较正常值高[16]。本实验在 2 型糖尿病
大鼠模型的基础上评价了前胡总香豆素提取物的药
理作用,采用高脂饲料联合低剂量的 STZ 诱发大鼠
产生 2 型糖尿病,由于高脂可以引起机体的胰岛素
抵抗,所以以此方法造成的 2 型糖尿病模型较温和
更接近人类 2 型糖尿病的表征,而前胡总香豆素提
取物能显著改善 2 型糖尿病大鼠的症状,升高
HDL-C 的量,降低 LDL-C、TC 及 TG 的量,调节
血脂,降低机体由高脂导致的胰岛素抵抗,同时降
低 FBG 及 GHB 量,抑制葡萄糖与血红蛋白结合,
增加血糖的利用率。综上所述,前胡总香豆素对于
2 型糖尿病具有较好的降糖调脂作用。本实验为前
胡总香豆素的质量控制及新型药理作用的开发提供
理论依据。
参考文献
[1] 陶弘景 . 名医别录 [M]. 北京 : 中国中医药出版社 ,
1986.
[2] Xu Z, Wang X B, Dai Y, et al. (±)-Praeruptorin A
enantiomers exert distinct relaxant effects on isolate rat
aorta rings dependent on endothelium and nitric oxide
sumthesis [J]. Chem-Biol Interact, 2010, 186(2): 239-246.
[3] 徐 倩, 徐国兵. 香豆素类化合物代谢研究进展 [J].
中国实验方剂学杂志, 2015, 21(3): 222-225.
[4] 韩 莹, 屠树滋, 周卫芬, 等. 香豆素磺酰脲类化合物
的合成及其降血糖活性研究 [J]. 中国药科大学学报,
2002, 33(2): 93-97.
[5] 张 村, 李 丽, 耿立冬, 等. 白花前胡质量标准研究
[J]. 中国中药杂志, 2005, 30(3): 177-179.
[6] Zhu G Y, Chen G Y, Li Q Y, et al. HPLC/MS/MS method
for chemical profiling of Radix Peucedani (Baihua
Quianhu) [J]. Chin J Nat Med, 2004, 2(5): 304-308.
[7] Song Y L, Jing W H, Yan R, et al. Metabolic
characterization of (±)-praeruptorin A in vitro and in vivo
by high performance liquid chromatography coupled with
hybrid triple quadrupole-linearion trap mass spectrometry
and time-of-flight mass spectrometry [J]. J Pharm
Biomed Anal, 2014, 90c(1): 98-110.
[8] Liang T G, Yue W Y, Li Q S, et al. Chemopreventive
effects of Peucedanum praeruptorum DUNN and its
major constituents on SGC7901 gastric cancer cells [J].
Molecules, 2010, 15(11): 8060-8071.
[9] Hou Z G, Xu D R, Shun Y, et al. An application of
high-speed counter-current chromatography coupled with
electrospray ionization mass spectrometry for separation
and online identification of coumarins from Peucedanum
praeruptorum Dunn [J]. J Chromatogr B, 2009, 877(24):
2571-2578.
[10] Lv H W, Luo J G, Wang X B, et al. Application of
UPLC-quadrupole-TOF-MS coupled with recycling
preparative HPLC in isolation and preparation of
coumarin isomer with similar polarity from Peucedanum
praeruptorum [J]. Chromatographia, 2013, 76(3): 141-148.
[11] Wang J J, Zhao R, Liang J C, et al. The antidiabetic and
hepatoprotective effects of magnolol on diabetic rats
induced by high-fat diet and streptozotocin [J]. Acta
Pharm Sin, 2014, 49(4): 476-481.
[12] Chen H Y, Wang J H, Geng M, et al. Protective effect of
extract of Apocynum venetum on kidneys of
streptozotocin-induced diabetic rats [J]. Acta Pharm Sin,
2010, 45(1): 26-30.
[13] Li Y M, Fan X M, Wang Y M, et al. Therapeutic effects
of Gegen Qinlian decoction and its mechanism of action
on type 2 diabetic rats [J]. Acta Pharm Sin, 2013, 48(9):
1415-1421.
[14] 徐国兵, 张亚中, 韩玲玲, 等. 前胡超临界提取物及挥
发油的 GC-MS 分析 [J]. 中成药, 2010, 32(6): 988-991.
[15] 张亚中, 徐国兵, 班永生, 等. 前胡中香豆素的提取工
艺研究 [J]. 时珍国医国药, 2010, 21(12): 3189-3190.
[16] 李敏州, 高彦彬, 马鸣飞, 等. 糖尿病肾病发病机制研
究进展 [J]. 中国实验方剂学杂志 , 2012, 18(22):
344-349.