全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 4 期 2013 年 2 月 ·408·
• 药剂与工艺 •
盐酸青藤碱脂质体的制备工艺研究
郑杭生 1，黄绳武 1，李范珠 1*，徐莲英 2
1. 浙江中医药大学，浙江 杭州 310053
2. 上海中医药大学，上海 201203
摘 要：目的 提高盐酸青藤碱（sinomenine hydrochloride，SIN-HCl）脂质体的药物包封率，并阐明处方药量与脂质体粒径等
因素对包封率的影响规律。方法 以离心沉淀-离心超滤法测定 SIN-HCl 脂质体的包封率；以包封率与成型性为主要指标筛选
薄膜分散法（TFH）、逆相蒸发法（REV）与乙醚注入法（EI）3 种制备方法；考察水化液的种类、pH 值、离子浓度以及 pH
梯度载药、磷脂-胆固醇比例、药脂比对包封率的影响；以全面设计试验考察处方药量与粒径两因素对包封率的影响规律；考
察代表性脂质体样品在 4 ℃下的稳定性。结果 最适的制备工艺为薄膜分散法；最佳水化液为柠檬酸缓冲液（CBS）；随着水
化液 pH 值的升高，包封率增加；当水化液的 pH 值相同时，脂质体包封率随着水化液离子浓度的降低而增加；pH 梯度载药可
提高脂质体的包封率，pH 梯度载药脂质体的最适水化液为 pH 值 2.5 的 CBS，最适大豆磷脂-胆固醇比例为 6∶1，SIN-HCl 与
大豆磷脂的比例由 1∶6 增至 6∶6，未经探针式超声处理的脂质体包封率略有下降；建立了药物包封率与处方药量和粒径之间
的定量关系，一定粒径与处方药量的脂质体包封率大于 80%；成品脂质体的稳定性良好。结论 pH 梯度主动载药技术可以制
备高包封率的 SIN-HCl 脂质体。
关键词：盐酸青藤碱；脂质体；离心沉淀-离心超滤法；薄膜分散法；逆相蒸发法；乙醚注入法；全面设计试验；pH 梯度主
动载药技术
中图分类号：R283.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)04 - 0408 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.04.007
Preparation technology of sinomenine hydrochloride liposomes
ZHENG Hang-sheng1, HUANG Sheng-wu1, LI Fan-zhu1, XU Lian-ying2
1. Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China
2. Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 201203, China
Abstract: Objective To prepare sinomenine hydrochloride (SIN-HCl) liposomes with high entrapment efficiency (EE) and to
illustrate the effects of drug quantity and particle size on EE. Methods Centrifugation sedimentation-centrifugation ultrafiltration was
employed to determine EE of liposomes. Thin film hydration (TFH), reverse phase evaporation (REV), and ether injection (EI) were
screened based on EE and formability of liposomes. The effects of water type, pH value, ion concentration of hydration liquid, pH
gradient active drug loading, lecithin-cholesterol ratio, and drug-lipid ratio on EE of liposomes were investigated. The relationship
between EE and the factors affecting the drug quantity and particle size was probed with a comprehensive design experiment. The
stability of typical liposomes was evaluated at 4 ℃. Results The optimal preparation technology was TFH for SIN-HCl liposomes
and citrate buffer solution (CBS) was the best hydration liquid. The liposome EE increased with the increase of pH values of CBS.
When the pH value of CBS was fixed, the EE increased as a result of decrease in the ion concentration of CBS. pH gradient active drug
loading led to increase of EE. The preferable hydration liquid for liposomes was CBS with pH value of 2.5. The optimal ratio of
soybean lecithin to cholesterol was 6∶1. Increasing ratios of SIN-HCl to soybean lecithin from 1∶6 to 6∶6 led to a slight decrease in
EE of liposomes without probe signification. A quantitative relationship was established between the EE and drug quantity and
liposome size. The EE of SIN-HCl liposomes prepared by certain particle size and drug quantity could reach over 80%. The typical

收稿日期：2012-09-14
基金项目：教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目（20123322120002）；上海市教委重点学科资助项目（J50302）
作者简介：郑杭生，男，副教授，博士，研究方向为中药新剂型及其体内过程。Tel: (0571)86613524 18268066638 E-mail: HS-zheng@163.com
*通信作者 李范珠（1964—），男，博士，教授，博士生导师，研究方向为药物靶向给药系统。Tel: (0571)86633030 E-mail: lifanzhu@zjtcm.net
网络出版时间：2012-11-27 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20121127.0859.001.html
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liposomes showed a good stability. Conclusion The technology of pH gradient active drug loading is able to prepare SIN-HCl
liposomes with high EE.
Key words: sinomenine hydrochloride; liposomes; centrifugation sedimentation-centrifugation ultrafiltration; thin film hydration;
reverse phase evaporation; ether injection; comprehensive design test; pH gradient active drug loading technology

青藤碱（sinomenine，SIN）是从防己科植物青
藤 Sinomenium acutum (Thunb.) Rehd. et Wils. 中提
取的单体生物碱，临床常以其盐酸盐（sinomenine
hydrochloride，SIN-HCl）的形式应用。青藤碱的药
理作用包括抗炎、免疫抑制、镇痛、降压、抗心律
失常等，临床常用于治疗风湿、类风湿性关节炎及
心律失常等[1]。但该药临床长期服用易引起白细胞
减少、血小板减少、皮疹以及胃痛等胃肠道不良反
应[2-4]，为减少其不良反应并发挥最佳的治疗作用，
研究人员已开展了多项关于该药物脂质体制剂的研
究[5-9]，其给药途径包括经皮给药与口服。药物被脂
质体包裹后可以实现靶向给药与缓释作用，从而增
强疗效、降低毒性，同时还可以提高药物的稳定性。
脂质体的药物包封率是脂质体能否发挥上述优势的
关键，故包封率是脂质体制剂质量评价中的最重要
指标[10]。《中国药典》2010 年版脂质体制剂指导原
则中也明确规定其包封率不得小于 80%[11]，而包封
率低也是脂质体工业化的最大障碍之一。根据文献
报道 [5-10]，SIN 脂质体制剂的药物包封率均低于
70%，张岩等[5]采用了 pH 梯度主动载药，但是制得
的柔性纳米脂质体包封率也只有 52.7%。本课题组
在前期研究中采用直接载药法，结果制得的脂质体
包封率均低于 35%[12]。为了提高药物包封率，本实
验重新研究了 SIN 脂质体的处方工艺，并采用 pH
梯度主动载药技术提高药物包封率，结果药物包封
率有了明显的提高，合适粒径与处方药量下可达到
《中国药典》2010 年版的要求。
1 仪器与材料
LC—2130 高效液相色谱仪（上海天美科学仪
器有限公司）；T—25 高剪切分散仪（德国 IKA 集
团）；XL2000 超声破碎仪（美国 Misonix 公司）；
Nicomp 380 CLS 激光散射粒度测定仪（美国 PSS
粒度分析仪公司）；R 系列旋转蒸发器（上海申生科
技有限公司）；2—16k 冷冻高速离心机（美国 Sigma
公司）；BX51 光学显微镜（日本 Olympus）；多头
磁力加热搅拌器、PHS—3C 型 pH 计（上海精科科
学仪器有限公司）；超滤单元（Microcon YM 100，
截留相对分子质量为 1×105，Millipore 公司）。
胆固醇（CH，分析纯，批号 F20090719，中国
医药集团上海化学试剂公司）；维生素 E（VE，批
号 082K1382，美国 Sigma 公司）；大豆磷脂[sbPC，
注射级，磷脂酰胆碱（PC）质量分数大于 70%，批
号 091208，上海太伟药业有限公司]；SIN-HCl（标
示规格为 98%，本室以外标法 HPLC 实测质量分数
为 92.67%，批号 Bsy090415，西安博胜生物科技有
限公司）；SIN 对照品（批号 0774-200206，中国药
品生物制品检定所）。柠檬酸缓冲液（CBS）：将 0.1
mol/L 柠檬酸溶液与 0.2 mol/L 磷酸氢二钠溶液按一
定比例混合配成，必要时稀释适当倍数（CBS 2.5、
3.0、5.0、7.0 分别为 pH 2.5、3.0、5.0、7.0 的 CBS
溶液）；pH 4.0 醋酸缓冲液（ABS 4.0）：将 0.1 mol/L
醋酸钠溶液与0.1 mol/L醋酸溶液按16.6∶83.4的比
例混合配成；pH 5.0 磷酸缓冲液（PBS 5.0）：将 1/15
mol/L 磷酸二氢钾溶液与 1/15 mol/L 磷酸氢二钠溶
液按 99.2∶0.8 的比例混合配成。甲醇为色谱纯；
HPLC 用水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 脂质体包封率的测定
按本课题组前期研究建立的离心沉淀-离心超
滤法[12]进行测定。测定过程简述如下：取待测脂质
体混悬液样品，摇匀，取少量进行光学显微镜观察，
确认其中不含药物结晶后精密称取适量置于精密称
定质量的离心管中，进行离心，使大部分脂质体沉
淀。取适量上清液进行离心超滤，弃去 50 μL 初滤
液，收集续滤液，分别测定续滤液与离心前脂质体
混悬液样品中药物浓度（前者即为脂质体外水相中
药物质量浓度）。提高离心机转速进一步离心脂质体
样品足够长时间使脂质体接近完全沉淀，除去上清
液，精密称定沉淀的脂质体与离心管的总质量，计
算得外水相质量，计算包封率。每个样品平行测定
3 次，取其平均值。
包封率＝1－EA×CEA / CS[12]
EA 为脂质体样品中外水相的质量百分比，CS、CEA分别为脂
质体样品与其外水相中的药物质量浓度
2.2 脂质体制备工艺的筛选
为了便于比较，统一处方为 SIN-HCl 0.05 g、
sbPC 0.30 g、CH 0.05 g、VE 0.005 g、CBS 5.0 15 mL，
考察以下 3 种工艺。
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2.2.1 薄膜分散法（TFH） 将 SIN-HCl、sbPC、
CH、VE 溶于 35 mL 二氯甲烷-甲醇（5∶2）混合溶
剂，转移至 500 mL 茄形瓶中，在 45 ℃、50 r/min
下减压旋转蒸去溶剂，得到干膜，室温下抽真空 2 h，
再以氮气吹干膜 15 min 后加入 15 mL CBS 5.0 水化
干膜，至水化完全后在冰水浴中用高剪切分散仪进
行处理（9 500 r/min），每次剪切持续 30 s，间隔 1
min，重复 6 次，即得脂质体混悬液。
2.2.2 逆向蒸发法（REV） 将 SIN-HCl、sbPC、
CH、VE 溶于 35 mL 二氯甲烷-甲醇（5∶2）混合溶
剂，转移至 500 mL 茄形瓶中，加入 5 mL CBS 5.0
振摇，水浴式超声，共 5 min，每次持续 1 min，两
次之间间歇 1 min，得乳状液，在 45 ℃、50 r/min
下减压旋转蒸去有机溶剂至凝胶态，再加入 10 mL
CBS 5.0，振摇并以高剪切分散仪进行分散，即得。
2.2.3 乙醚注入法（EI） 将 sbPC、CH、VE 溶于
30 mL 乙醚中，将 SIN-HCl 溶于 15 mL CBS 5.0 中，
转移至带水浴套的烧杯中，水浴温度控制在 53 ℃，
在磁力搅拌下将乙醚液匀速缓慢地注入 CBS 中，注
射完毕继续在 53 ℃下搅拌 1 h，再以高剪切分散仪
进行分散，即得。
光学显微镜下观察各样品发现，TFH 与 REV
法制得的样品中有大量近圆形的囊泡状结构，表明
脂质体已形成，而 EI 法制得的样品中只观察到大量
形态不规则的团块，不符合脂质体的典型形态特征，
并且样品中可以闻到乙醚味，故残留乙醚可能导致
所采用的 EI 工艺无法制得脂质体。
对 TFH 与 REV 法制得的脂质体分别进行包封
率测定，结果表明前者为（21.81±1.01）%（n＝3），
后者为（11.14±1.81）%（n＝3），故选用 TFH 法。
2.3 脂质体水化液筛选
2.3.1 脂质体水化液种类的筛选 按处方 SIN-HCl
0.05 g、sbPC 0.30 g、CH 0.05 g、VE 0.005 g、水化
液 15 mL，采用“2.2.1”项下 TFH 工艺条件制备脂
质体混悬液，水化液分别为 CBS 3.0、ABS 4.0 和
PBS 5.0。分别测定各脂质体的包封率，结果其包封
率分别为（13.66±1.66）%、（27.65±1.43）%、
（23.76±1.79）%（n＝3）。可以看出以 ABS 4.0 和
PBS 5.0 为水化液的脂质体包封率较高。但是在 4
℃、充氮条件下放置数天后两者均有颜色变黄的现
象，说明其稳定性欠佳，故后两者均不宜采用；而
CBS 3.0 水化的脂质体放置数月无变色现象，故水
化液选择 CBS。
2.3.2 脂质体水化液pH值的考察 按处方SIN-HCl
0.05 g、sbPC 0.30 g、CH 0.05 g、VE 0.005 g、水化
液 CBS 15 mL，采用“2.2.1”项下 TFH 工艺条件制
备脂质体混悬液，水化液 CBS 的 pH 值分别控制在
3.0、5.0、7.0。测得成品脂质体混悬液的 pH 值分别
为 3.0、5.0、7.0。分别测定各脂质体的包封率，结
果见表 1，可以看出，随着水化液 pH 值的升高，包
封率增加。
2.3.3 脂质体水化液离子浓度的考察 按处方 SIN-
HCl 0.05 g、sbPC 0.30 g、CH 0.05 g、VE 0.005 g、
CBS 3.0 水化液 15 mL，采用“2.2.1”项下 TFH 工
艺条件制备脂质体混悬液，CBS 3.0 水化液相对离
子浓度分别控制在 1、1/2、1/10，1 对应的水化液
为 0.1 mol/L 柠檬酸溶液-0.2 mol/L 磷酸氢二钠溶液
（80.3∶19.7）混合液（CBS 水化液的相对离子浓度
均为 1），1/2 与 1/10 离子浓度分别由 1 稀释 2、10
倍得到。分别测定 3 种不同离子浓度水化液水化的
脂质体的包封率，再分别以不同离子浓度的 CBS
5.0 与 CBS 7.0 作水化液制备脂质体并测定包封率，
结果见表 1。可以看出，当水化液的 pH 值相同时，
脂质体包封率随水化液离子浓度的降低而增加，当
水化液的 pH 值较低时，增幅较大。

表 1 CBS 水化液不同 pH 值与不同相对离子浓度对
SIN-HCl 脂质体包封率的影响 ( x ±s，n＝3)
Table 1 Effects of hydration liquid CBS at various pH
values and relative ion concentration on EE
of SIN-HCl liposomes ( x ±s, n＝3)
包封率 / % 相对离子
浓度 CBS 3.0 CBS 5.0 CBS 7.0
1/10 39.94±1.71 42.56±1.32 51.54±2.05
1/2 34.06±1.33 37.03±2.15 46.28±1.86
1 13.66±1.66 21.81±1.01 33.16±2.79

2.4 pH 梯度主动载药
2.4.1 条件预试 按处方 SIN-HCl 0.15 g、sbPC
0.90 g、CH 0.15 g、VE 0.015 g、CBS 3.0 水化液 45
mL，采用“2.2.1”项下 TFH 工艺条件制备脂质体
混悬液，CBS 3.0 水化液相对离子浓度分别控制在
1、1/10 两个水平，从各水化液相对离子浓度水平
的脂质体混悬液中分别取 4 份 7.5 mL 的样品，置于
不同烧杯中，于室温、磁力搅拌下，以 1 mol/L NaOH
溶液分别将 4 份样品的 pH 值调至 4.0、5.0、6.0、
7.0，分别测定 pH 值调节前后各样品的包封率，测
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定结果见表 2，可以看出，pH 梯度主动载药法可明
显提高脂质体药物包封率，水化液的缓冲盐离子浓
度较大时，相同 pH 梯度下包封率提高较大。

表 2 不同 pH 梯度下 SIN-HCl 脂质体的药物包封率
( x ±s，n＝3)
Table 2 EE of SIN-HCl liposomes under different
pH gradients ( x ±s, n＝3)
包封率 / %
样品状态 相对离子
浓度为 1
相对离子浓度
为 1/10
调节前（pH 3.0） 13.58±1.80 40.14±1.62
pH 调至 4.0 14.66±1.94 40.87±2.09
pH 调至 5.0 33.04±1.96 46.44±2.88
pH 调至 6.0 52.57±1.73 51.96±1.57
pH 调至 7.0 70.85±2.04 57.21±2.14

2.4.2 水化液筛选 按处方 SIN-HCl 0.05 g、sbPC
0.30 g、CH 0.05 g、VE 0.005 g、水化液 15 mL，采
用“2.2.1”项下 TFH 工艺制备脂质体混悬液，分别
以 CBS 2.5、CBS 3.0 及 0.1 mol/L 柠檬酸溶液为水
化液，并进行 pH 梯度主动载药，3 份样品的 pH 值
均调至 7.0，分别测定 pH梯度载药后样品的包封率，
结果其包封率分别为（99.37±0.46）%、（70.85±
2.04）%、（81.19±1.5）%（n＝3）。可以看出 CBS
2.5 水化的脂质体 pH 梯度载药后包封率最大，故
CBS 2.5 为最适水化液。
2.5 sbPC-CH 比例筛选
sbPC-CH比例是影响脂质体成型与包封率的重
要因素，故进一步考察其对 pH 梯度主动载药的
SIN-HCl 脂质体包封率的影响。
在处方SIN-HCl 0.05 g、sbPC 0.30 g、VE 0.005 g，
CBS 2.5 15 mL 的基础上，加入不同量 CH 使 sbPC-
CH 的比例分别为 24∶3、24∶4、24∶5、24∶6，按
“2.2.1”项下 TFH 工艺制备脂质体样品。将所制得
的样品分别进行 pH梯度主动载药，pH值均调至 7.0。
测定各样品包封率，结果其包封率分别为（99.22±
0.33）%、（99.37±0.29）%、（99.05±0.36）%、
（99.13±0.41）%（n＝3）。可以看出所有样品的包
封率均在 99%以上，sbPC-CH 比例对脂质体包封率
影响较小。但制备过程中发现，sbPC-CH 比例为
24∶5 和 24∶6 时，干膜水化困难，耗时长。此外，
显微镜观察样品发现，sbPC-CH 比例为 24∶4 时，
脂质体的形态与粒径均匀度明显优于比例为 24∶3
时，故确定最佳 sbPC-CH 比例为 24∶4。
2.6 药脂比对包封率影响的考察
在处方 sbPC 0.30 g、CH 0.05 g、VE 0.005 g，
CBS 2.5 15 mL 的基础上，加入不同量 SIN-HCl
（0.05、0.10、0.20、0.30 g）使药物与 sbPC 的比例
分别为 1∶6、2∶6、4∶6、6∶6，按“2.2.1”项下
TFH 工艺制备脂质体样品，分别进行 pH 梯度主动
载药，pH 值均调至 7.0。分别测定不同药脂比的脂
质体的包封率，结果其包封率分别为（99.37±
0.29）%、（99.32±0.24）%、（97.31±0.36）%、
（95.29±0.58）%（n＝3）。可以看出在考察范围内，
随着药脂比的增加，脂质体的包封率略有下降。
2.7 全面设计考察处方药量与粒径对包封率的影
响规律
在处方 sbPC 0.30 g、CH 0.05 g、VE 0.005 g、
CBS 2.5 15 mL 的基础上，按表 3 设定不同的处方
药量，将不同处方药量的脂质体分别平均分成 4 份，
取其中 3 份，分别在功率 5、18、22 W（均在 4 ℃）
下探针式超声处理（固定探针位置，每次 5 s，间隔
20 s，共 6 次），得不同粒径的脂质体，以激光散射
法测定粒径，结果见表 3。将所制得的样品分别进
行 pH 梯度主动载药，pH 值均调至 7.0。分别测定
各脂质体样品的包封率，结果见表 3。可以看出不
同药量下，包封率均随着脂质体粒径的减小而减小，
而药量较大时，这种减小幅度明显增大。以 UROS
软件（沈阳药科大学研制）对表 3 中的数据作逐步
回归分析，以 SIN-HCl 的处方量与脂质体粒径为自
变量 X1、X2，包封率为应变量 Y，以完全二次逐步
回归得到如下回归方程 Y＝63.629 3－0.164 6 X1＋
0.155 2 X2－0.000 1 X12－0.000 1 X22＋0.000 2 X1X2，
r＝0.976 7，Q＝445.692 6，F＝57.915 8，查 F 检验
的临界值表得 F0.01(5, 14)＝4.70，故 F＞F0.01(5, 14)，
F 检验通过，说明回归方程是可信的。软件优化结
果：当药量为 100.1 mg、粒径为 630.1 nm 时，包封
率达到最大，理论预测值为 102.5%，此条件下 3 次
验证试验结果表明脂质体处方的包封率分别为
99.89%、99.93%、99.94%。
2.8 成品脂质体的质量与稳定性评价
按处方SIN-HCl 0.10 g、sbPC 0.30 g、CH 0.05 g、
VE 0.005 g、CBS 2.5 15 mL，采用“2.2.1”项下 TFH
工艺制备脂质体样品，并进行 pH 梯度主动载药，
pH 值调至 7.0。质量评价结果如下：外观为白色均
匀的混悬液，流动性良好；在显微镜下观察，可以
观察到大量的囊泡结构，近似圆形，有大多层囊泡、
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大单层囊泡、小单层囊泡及多囊型囊泡，粒径大小
差异较大，囊泡之间有轻微的聚集，见图 1；药物
包封率平均值为 99.72%（n＝3）；以激光散射粒度
测定仪测得脂质体的平均粒径为（854±57）nm
（n＝3），多分散指数为 0.267±0.046，Zeta 电位为
（−25.36±3.58）mV（n＝3），粒径分布图与 Zeta 电
位图见图 2。
将脂质体混悬液置于 4 ℃冰箱保存，分别于 0、

表 3 全面设计试验安排与结果 (n＝3)
Table 3 Test arrangement and results of comprehensive
design (n＝3)
试验号 SIN-HCl 的量 / mg 粒径 / nm 包封率 / %
1 100.0 518.7 99.70
2 100.0 324.6 92.92
3 100.0 237.6 85.82
4 100.0 186.5 70.77
5 200.0 739.4 97.45
6 200.0 373.4 86.22
7 200.0 311.3 76.99
8 200.0 227.9 61.54
9 300.0 911.3 94.89
10 300.0 455.1 72.52
11 300.0 311.9 59.13
12 300.0 246.8 50.13
13 400.0 717.2 91.76
14 400.0 411.2 71.87
15 400.0 289.6 56.53
16 400.0 236.5 34.57
17 500.0 888.5 90.53
18 500.0 508.9 57.83
19 500.0 339.2 31.79
20 500.0 285.7 27.66
7、14 d 测定脂质体的各项质量指标，结果见表 4，
表明样品的外观性状、显微形态、载药量、包封率、
粒径与 Zeta 电位等均未发生明显变化，说明样品稳
定性良好。
3 讨论
根据成型情况与脂质体的包封率，本实验比较
了 TFH、REV、EI 3 种制备工艺，从而确定选用 TFH
工艺。与 REV、EI 工艺相比，TFH 在无水状态下


图 1 成品脂质体的显微镜照片
Fig. 1 Microscopic picture of liposomes products






图 2 成品脂质体的粒径分布图 (A) 和 Zeta 电位图 (B)
Fig. 2 Particle size distribution (A) and Zeta potential (B)
of liposomes products

表 4 成品脂质体稳定性测定结果 (n＝3)
Table 4 Stability of liposome products (n＝3)
时间 / d 外观性状 显微观察
载药量 /
(mg·mL−1)
包封率 /
%
粒径 /
nm
Zeta 电
位 / mV
0 白色混悬液，流动性良好 有大量囊泡状结构，近似圆形，
轻微聚集，以单层囊泡居多
3.31 99.72 854 −25.36
7 白色混悬液，流动性良好，有轻
微分层，但轻摇即可再分散
有大量囊泡状结构，近似圆形，
轻微聚集，以单层囊泡居多
3.29 99.64 864 −24.24
14 白色混悬液，流动性良好，有轻
微分层，但轻摇即可再分散
有大量囊泡状结构，近似圆形，
轻微聚集，以单层囊泡居多
3.32 99.56 871 −24.46
100 200 500 1 000 2 000 5 000
粒径 / nm
0 30 60 90 120
t / min
Ze
ta
电
位
/
m
V
0
−30
−60
A
B
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 4 期 2013 年 2 月 ·413·
去除有机溶剂，去除迅速且完全，一方面可以保证
制剂有机溶剂残留量符合限量要求，另一方面可以
避免残留有机溶剂对脂质体双分子层膜产生的去稳
定化作用，而且这种去稳定化作用随着有机溶剂残
留量的波动也可能呈现随机性，从而影响工艺的稳
定性，故从脂质体实际应用的安全性与工艺研究结
果的可靠性考虑，TFH 工艺具有较大优势。
本实验筛选了 CBS 3.0、ABS 4.0、PBS 5.0 3 种
水化液，后两者制得的脂质体均在数天内有颜色变
黄的现象，而前者制得的脂质体可以长时间稳定存
放，这可能与CBS中柠檬酸的协同抗氧化作用有关。
本实验考察了不同离子浓度的 CBS 3.0、5.0、7.0
3 种水化液对脂质体包封率的影响，结果表明，当
水化液的 pH 值相同时，包封率随水化液离子浓度
的降低而增加，这可能是由于水相中缓冲盐与药物
离子相互作用而增加药物在水相中的表观溶解度所
致，同一考察项目的结果同时表明，当水化液的 pH
值较低时，因水化液离子浓度降低包封率增加的幅
度增大，也说明了碱性药物与酸性缓冲盐具有更强
的相互作用。
pH 梯度载药是通过调节脂质体外水相 pH 值从
而在内外水相形成 pH 值梯度使原本外水相中的药
物进入内水相，从而提高脂质体药物包封率的方法。
由表 2 可以看出相对离子浓度为 1 的 CBS3.0 水化
液水化直接得到的脂质体的包封率为 13.58%，对其
进行 pH 梯度载药，将外水相 pH 值分别调至 5.0 与
7.0，则脂质体的包封率分别增至 33.04%与 70.85%。
由表 1 可以看出相对离子浓度为 1 的 CBS 3.0 水化
液、CBS 5.0 水化液、CBS 7.0 水化液分别水化直接
得到的脂质体的包封率分别为 13.66%、21.81%、
33.16%，随着水化液的 pH 值提高，药物的包封率
呈增大趋势，这是由于 SIN 为弱碱性药物，pH 值
增大时，分子型药物的比例增大，故更多的药物分
配到亲脂性的脂质双分子层，包封率增大，在 pH
梯度载药的过程中通过提高外水相的 pH 值同样存
在上述药物向脂质双分子层的分配作用，但是对比
上述相同外水相 pH 值的主动载药与直接载药脂质
体的包封率数据可以看出 pH 梯度主动载药脂质体
的包封率明显更大，此结果与本课题组在全缘千里
光碱脂质体研究中发现的规律一致[13]。由表 1、2
还可以看出，水化液的缓冲盐浓度较大时，相同 pH
梯度下包封率增幅更大。上述结果是对 pH 梯度主
动载药机制的证实。
pH 梯度主动载药的脂质体的最适水化液为
CBS 2.5，在此条件下控制合适的处方药量与粒径，
脂质体的包封率大于 80%，达到《中国药典》2010
年版的要求。
脂质体制剂的处方药量与粒径可影响制剂的包
封率，同时，前者对于保证药物临床用药剂量有很
大的现实意义，后者又可显著影响药物经皮吸收特
性，故本实验以包封率为指标，选取上述两个因素
进行全面设计试验建立了药物包封率与处方药量和
粒径之间的关系，从而可以为设计一定含药量下合
适粒径与高包封率的脂质体制剂或一定粒径下合适
含药量与高包封率的脂质体制剂提供参考。
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