全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 14 期 2014 年 7 月

·2009·
HPLC 法同时测定人参及其制剂中 16 种人参皂苷
郭 冲，郜玉钢*，臧 埔，何忠梅，赵 岩，祝洪艳，杨 鹤，董 微，张连学*
吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130118
摘 要：目的 建立同时测定人参及其制剂中 16 种人参皂苷的 HPLC 方法。方法 采用 C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）色
谱柱；流动相为乙腈和水，梯度洗脱，体积流量 1.0 mL/min，检测波长 203 nm，柱温 35 ℃。结果 16 种人参皂苷 Rg1、
Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、Rh2及原人参三醇、compound K、原人参二醇均得到良好分离，线
性关系良好（r≥0.999 0）。加样回收率均在 95%～102%，RSD＜2%。结论 该方法快捷简便、稳定可靠，可应用于人参及
其制剂的质量控制。
关键词：人参；人参皂苷；HPLC；人参皂苷 Rg1；人参皂苷 Re；人参皂苷 Rf；人参皂苷 Rb1；人参皂苷 Rg2；人参皂苷 Rc；
人参皂苷 Rb2；人参皂苷 Rb3；人参皂苷 F1；人参皂苷 Rd；人参皂苷 F2；人参皂苷 Rg3；原人参三醇；compound K；人参
皂苷 Rh2；原人参二醇
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)14 - 2009 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.14.009
Simultaneous determination of sixteen ginsenosides in Panax ginseng and its
preparation by HPLC
GUO Chong, GAO Yu-gang, ZANG Pu, HE Zhong-mei, ZHAO Yan, ZHU Hong-yan, YANG He, DONG Wei,
ZHANG Lian-xue
College of Traditional Chinese Medicine, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
Abstract: Objective In order to evaluate the quality of Panax ginseng and its preparation, a simple and accurate HPLC method for
determining the contents of 16 ginsenosides from P. ginseng was established. Methods The chromatographic separation was
achieved on a C18 column (150 mm × 4.6 mm, 5 μm) using a mobile phase made up of acetonitrie and water at a flow rate of 1.0
mL/min. The detection wavelength and column temperature were set as 203 nm and 35 , respectively. ℃ Results Sixteen ginsenosides
(Rg1, Re, Rf, Rb1, Rg2, Rc, Rb2, Rb3, F1, Rd, F2, Rg3, protopanaxatriol, compound K, Rh2, and protopanaxadiol) were separated at
baseline with good linearity (r ≥ 0.999 0). The recovery rates were 95%—102% (RSD < 2%). Conclusion The method is simple, fast,
accurate, and could be applied to the quality control of P. ginseng and its preparation.
Key words: Panax ginseng C. A. Mey.; ginsenoside; HPLC; ginsenoside Rg1; ginsenoside Re; ginsenoside Rf; ginsenoside Rb1;
ginsenoside Rg2; ginsenoside Rc; ginsenoside Rb2; ginsenoside Rb3; ginsenoside F1; ginsenoside Rd; ginsenoside F2; ginsenoside Rg3;
protopanaxatriol; compound K; ginsenoside Rh2; protopanaxadiol

人参为五加科植物人参 Panax ginseng C. A.
Mey. 的干燥根，具有大补元气、补脾益肺、生津、
安神益智等功效，在《神农本草经》中列为上品，
是常用的滋补强壮药[1]。人参化学成分复杂，现代
研究表明，人参皂苷是人参的主要药效成分[2-6]。因
此，人参皂苷的种类及其量是评价人参质量的重要
指标。大量研究[7-9]报道了人参皂苷的测定方法，但
未见同时测定 16 种人参皂苷的报道。本研究采用
HPLC 法同时测定人参及其制剂中 16 种人参皂苷，
为人参的质量控制提供理论依据。

收稿日期：2014-01-25
基金项目：国家科技支撑计划项目（2011BAI03B010602）；国家公益性行业科研专项（201303111）；国家科技重大专项子课题（2012ZX09304006）；
吉林省基础研究项目（20130102075JC）；吉林省科技厅重点项目（20110228）；吉林省科技条件与平台建设计划（20112101）；吉林
省现代农业产业技术体系建设项目（201218）
作者简介：郭 冲（1990—），女，硕士研究生，研究方向中药学。E-mail: guochong1990@163.com
*通信作者 郜玉钢，男，教授，博士，研究方向为生药学。E-mail: gaoyugang_2006@163.com
张连学，男，教授，博士，博士生导师，研究方向为中药学。E-mail: zlxbooksea@163.com
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·2010·
1 仪器与试药
日本岛津 LC—2010A 高效液相色谱仪，配有
LC—2010A 型液相色谱泵，LC—2010A 型自动进样
器，CLASS—vP 色谱工作站；AUY220 电子分析天
平，日本岛津公司，KQ—250DV 超声波清洗器，
昆山舒美超声仪器有限公司。
人参 Panax ginseng C. A. Mey. 药材 6 批，购自
于吉林省抚松县，经吉林农业大学中药材学院张连
学教授鉴定为 4 年生人参；人参茎叶 6 批，采自吉
林农业大学药植园；生脉散为实验室自制 6 批；生
脉饮（批准文号 Z22024479）6 批，吉林敖东延边
药业股份有限公司，批号分别为 1304001、1304002、
1307001、1307003、1309001、1311001。
对照品人参皂苷 Rg1（批号 201022）、Re（批
号 201035）、Rf（批号 201007）、Rb1（批号 201058）、
Rg2（批号 201023）、Rc（批号 201069）、Rb2（批
号 201078）、Rb3（批号 201029）、F1（批号 201225）、
Rd（批号 201018）、F2（批号 201255）、Rg3（批号
201237）、Rh2（批号 2012009）及原人参三醇（批
号 201206）、compound K（批号 201243）、原人参
二醇（批号 201235），均购自于吉林大学天然药物
化学实验室，质量分数均在 98%以上，乙腈、甲醇
为色谱纯；水为娃哈哈超纯水；其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；
流动相为乙腈-水，梯度洗脱程序：0～40 min，18%～
21%乙腈；40～42 min，21%～26%乙腈；42～46
min，26%～32%乙腈；46～66 min，32%～33.5%
乙腈；66～71 min，33.5%～38%乙腈；71～86 min，
38%～65%乙腈；86～91 min，65%乙腈；91～96
min，65%～85%乙腈；96～103 min，85%乙腈；103～
105 min，85%～18%乙腈；105～106 min，18%乙
腈；体积流量 1.0 mL/min；检测波长 203 nm；柱温
35 ℃；进样量 20 μL。对照品与样品 HPLC 色谱图
见图 1。








A-人参皂苷对照品 B-生晒参 C-人参茎叶 D-生脉散 E-生脉饮 1～16-人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、
F1、Rd、F2、Rg3、原人参三醇、compound K、人参皂苷 Rh2、原人参二醇
A-ginsenoside reference substances B-white ginseng C-stems and leaves of P. ginseng D-Shengmai San E-Shengmai Yin
1—16-ginsenoside Rg1, Re, Rf, Rb1, Rg2, Rc, Rb2, Rb3, F1, Rd, F2, Rg3, protopanaxatriol, compound K, ginsenoside Rh2, protopanaxadiol

图 1 混合对照品和样品色谱图
Fig. 1 Chromatograms of mixed reference solution and ginseng samples
A
C D
E
B
4
2 1
3
5
6 7 8
1
2
10
9
11
12
13
14
15
16
11
10
11
10 13 15 16
1
2 3
4
5
6
7
8
8
7
3
4
5
6
9
1
12
13
14
11
3
5
467
3 4 12
13
0 20 40 60 80 100
t / min
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·2011·
2.2 对照品溶液的制备
分别精密称取 16 种人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、
Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、原人参三
醇、compound K、Rh2、原人参二醇对照品各 5 mg，
加甲醇制成上述 16 种人参皂苷的质量浓度分别为
1.00、0.94、1.12、1.00、0.98、0.94、0.96、0.96、
1.12、0.88、0.86、1.00、1.06、0.96、1.04、0.94 mg/mL
的对照品溶液，0.45 μm 滤膜滤过，备用。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取生晒参粉末 1 g，用滤纸包好，放置索
氏提取器中，加适量石油醚，80 ℃回流提取 4 h，
弃去石油醚液，加适量甲醇，80 ℃回流提取 10 h，
收集提取液，蒸干甲醇，加色谱甲醇定容至 10 mL，
用 0.45 μm 滤膜滤过，备用。
称取人参茎叶 0.5 g，加 5 mL 甲醇密封，超声
提取 45 min，离心，取上清液，用 0.45 μm 滤膜滤
过，备用。
精密称取生脉散 2.5 g，加乙醇超声处理 30
min，滤过，将滤液蒸干，向残渣中加水 20 mL 使
其溶解，用水饱和正丁醇提取 5 次，合并提取液，
蒸干，加甲醇定容至 10 mL，滤过，取滤液，用 0.45
μm 滤膜滤过，备用。
取生脉饮，用 0.45 μm 滤膜滤过，备用。
2.4 线性关系考察
分别精密称取 16 种人参皂苷对照品溶液 2、4、
6、10、16、20 μL 进样，以进样中人参皂苷质量（Y）
对峰面积积分值（X）作图，得到线性回归方程，
见表 1。
表 1 人参皂苷单体的回归方程
Table 1 Regression equations with correlation coefficients of ginsenoside monomers
人参皂苷 tR / min 回归方程 r 线性范围 / μg
Rg1 35.744 Y＝2.771 874×10−6 X－4.709 822×10−2 0.999 8 0.40～20.0
Re 37.706 Y＝3.029 359×10−6 X－3.870 053×10−2 0.999 7 0.38～18.8
Rf 51.174 Y＝2.460 955×10−6 X－2.056 733×10−1 0.999 5 0.45～22.4
Rb1 54.133 Y＝3.368 936×10−6 X－1.068 663×10−1 0.999 7 0.40～20.0
Rg2 55.108 Y＝2.620 051×10−6 X－1.166 935×10−1 0.999 6 0.39～19.6
Rc 56.263 Y＝4.221 176×10−6 X－9.289 365×10−2 0.999 7 0.38～18.8
Rb2 59.083 Y＝3.691 457×10−6 X－4.134 659×10−2 0.999 6 0.38～19.2
Rb3 60.089 Y＝4.738 287×10−6 X－8.241 088×10−2 0.999 8 0.38～19.2
F1 61.493 Y＝2.077 327×10−6 X－1.211 993×10−1 0.999 7 0.45～22.4
Rd 66.602 Y＝2.928 376×10−6 X－6.599 688×10−2 0.999 7 0.35～17.6
F2 78.779 Y＝2.377 302×10−6 X－2.065 956×10−1 0.999 4 0.34～17.2
Rg3 81.297 Y＝1.746 247×10−6 X－2.858 238×10−1 0.999 1 0.40～20.0
原人参三醇 83.391 Y＝2.942 008×10−6 X－2.534 155×10−1 0.999 5 0.42～21.2
compound K 87.040 Y＝2.094 061×10−6 X－2.301 267×10−1 0.999 3 0.38～19.2
Rh2 88.351 Y＝2.114 300×10−6 X－2.282 383×10−1 0.999 4 0.42～20.8
原人参二醇 101.596 Y＝1.079 770×10−6 X－2.852 037×10−1 0.999 0 0.38～18.8

2.5 检测限与定量限
在选定的色谱条件下，当信噪比为 3 时，测得
人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、
F1、Rd、F2、Rg3、原人参三醇、compound K、Rh2、
原人参二醇的检测限分别为 0.15、0.25、0.10、0.10、
0.20、0.25、0.28、0.32、0.25、0.30、0.24、0.31、
0.30、0.10、0.075、0.20 μg；当信噪比为 10 时，测
得人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、
Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、原人参三醇、compound K、
Rh2、原人参二醇的定量限分别为 0.40、0.70、0.25、
0.25、0.55、0.70、0.78、0.80、0.70、0.75、0.68、
0.76、0.70、0.25、0.145、0.55 μg。
2.6 精密度试验
按照“2.1”项下色谱条件，分别取对照品溶液
20 μL，重复进样 6 次，人参皂苷 Rg1、Re、Rf、
Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、原
人参三醇、compound K、Rh2、原人参二醇峰面积
的RSD分别为 1.12%、1.54%、0.65%、1.36%、1.43%、
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1.30%、0.78%、1.35%、0.98%、0.78%、0.56%、1.29%、
0.95%、1.06%、0.80%、0.75%，结果表明仪器精
密度良好。
2.7 稳定性试验
分别取生晒参和人参茎叶样品溶液，按“2.1”
项色谱条件，在 0、2、4、8、16、24 h 进样 20 μL，
生晒参中人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、
Rb2、Rb3、Rd、原人参三醇、Rh2、原人参二醇峰
面积的 RSD 分别为 1.63%、1.70%、1.93%、1.56%、
1.55%、1.96%、1.47%、1.78%、1.42%、1.42%、1.34%、
1.85%；人参茎叶中人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、
Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2 峰面积的 RSD 分
别为 1.67%、1.77%、1.89%、1.55%、1.59%、2.07%、
1.50%、1.86%、1.50%、1.36%、1.53%，说明生晒
参及人参茎叶溶液在 24 h 内稳定。
分别取生脉散及生脉饮样品溶液，按“2.1”项
色谱条件，在 0、2、4、8、16、24 h 进样 20 μL，
生脉散中人参皂苷 Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、F2、
Rg3、原人参三醇、compound K 峰面积的 RSD 分别
为 1.90%、1.54%、1.66%、2.12%、1.50%、1.44%、
1.36%、1.45%、2.18%；生脉饮中人参皂苷 Rg1、
Rf、Rb1、F2、Rg3、原人参三醇峰面积的 RSD 分别
为 1.65%、1.96%、1.47%、1.41%、1.40%、1.41%，
说明生脉散及生脉饮溶液在 24 h 内稳定。
2.8 重复性试验
分别取同一批生晒参和人参茎叶样品，按样品
制备方法制备 6 份，分别进样 20 μL，生晒参中人
参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、
Rd、原人参三醇、Rh2、原人参二醇质量分数的 RSD
分别为 0.13%、0.14%、1.19%、0.35%、1.09%、0.65%、
0.38%、1.67%，2.40%、1.43%、1.86%、0.97%；人
参茎叶中人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、
Rb2、Rb3、F1、Rd、F2 质量分数的 RSD 分别为 0.11%、
0.10%、1.24%、0.40%、1.17%、0.63%、0.35%、1.59%、
1.90%、2.44%、0.47%，均小于 2.5%，重复性较好。
分别取同一批生脉散和生脉饮样品，按样品制
备方法制备 6 份，分别进样 20 μL，生脉散中人参
皂苷 Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、F2、Rg3、原人参三
醇、compound K 质量分数的 RSD 分别为 1.20%、
0.36%、1.16%、0.72%、0.47%、0.39%、0.35%、1.38%、
1.66%；生脉饮中人参皂苷 Rg1、Rf、Rb1、F2、Rg3、
原人参三醇质量分数的 RSD 分别为 0.12%、1.25%、
0.37%、0.40%、0.47%、1.36%，重复性较好。
2.9 回收率试验
精密称取同一批生晒参和人参茎叶样品各 6
份，分别准确加入一定量的人参皂苷对照品，按供
试品溶液的制备方法处理后，按“2.1”项色谱条件
测定。生晒参中人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、
Rc、Rb2、Rb3、Rd、原人参三醇、Rh2、原人参二
醇的平均回收率（RSD）分别为 98.56%（1.25%）、
99.60%（0.83%）、99.97%（1.73%）、95.92%（1.23%）、
97.60%（1.73%）、98.50%（0.79%）、96.40%（1.10%）、
100.25%（1.30%）、96.29%（0.75%）、98.56%（1.62%）、
99.65%（0.73%）、101.21%（1.29%）；人参茎叶中
人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、
F1、Rd、F2 的平均回收率（RSD）分别为 98.69%
（1.33%）、99.10%（0.95%）、100.35%（1.82%）、96.60%
（1.30%）、96.90%（1.87%）、100.02%（0.84%）、95.21%
（1.35%）、102.41%（1.46%）、99.69%（1.05%）、98.17%
（0.59%）、101.31%（1.35%）。
精密取同一批生脉散和生脉饮样品各 6 份，分
别准确加入一定量的人参皂苷对照品，按“2.3”项
方法处理后，按“2.1”项色谱条件测定。生脉散中
人参皂苷 Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、F2、Rg3、原人
参三醇、compound K 的平均回收率（RSD）分别为
99.86%（1.76%）、96.50%（1.16%）、97.40%（1.83%）、
99.26%（1.04%）、94.50%（1.33%）、98.29%（1.14%）、
97.46%（1.03%）、98.49%（1.35%）、97.78%（1.03%）；
生脉饮中人参皂苷 Rg1、Rf、Rb1、F2、Rg3、原人
参三醇的平均回收率（RSD）分别为 99.88%
（1.53%）、100.74%（1.81%）、96.82%（1.31%）、
100.73%（1.17%）、96.3%（1.11%）、98.06%（1.5%）。
2.10 样品测定
取生晒参、人参茎叶、生脉散、生脉饮按供试
品溶液制备方法制成样品溶液，按“2.1”项色谱条
件进样分析，根据线性回归方程计算 16 种人参皂苷
的质量分数，见表 2。
3 讨论
本实验建立的同时测定人参中 16 种人参皂苷
的方法，除了一些常见皂苷外，增加了人参皂苷 F1、
F2、Rg3 等一些稀有皂苷的测定，不仅可以检测人
参中人参皂苷的量，也可以检测人参茎叶及人参制
剂中人参皂苷的量。结果表明，人参中含有 12 种人
参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、
Rd、原人参三醇、Rh2、原人参二醇，未检测到人
参皂苷 F1、F2、Rg3、compound K，而人参茎叶中
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表 2 人参及其制剂中 16 种人参皂苷质量分数 ( x ±s, n＝6)
Table 2 Contents of 16 kinds of ginsenoside monomers in P. ginseng and its preparation ( x ±s, n＝6)
质量分数 / % 人参皂苷
生晒参 人参茎叶 生脉散 生脉饮
Rg1 0.222±0.022 0.694±0.004 0 6.30±0.009
Re 0.194±0.052 1.560±0.005 0 0
Rf 0.032±0.003 0.013±0.001 0.002±0.003 0.002±0.001
Rb1 0.266±0.052 0.212±0.002 0.006±0.003 0.017±0.006
Rg2 0.006±0.001 0.051±0.001 0.002±0.003 0
Rc 0.233±0.042 0.258±0.006 0.050±0.018 0
Rb2 0.156±0.026 0.291±0.009 0.021±0.002 0
Rb3 0.022±0.003 0.053±0.006 0 0
F1 0 0.255±0.003 0 0
Rd 0.046±0.013 0.830±0.003 0 0
F2 0 0.037±0.001 0.248±0.053 0.115±0.000
Rg3 0 0 0.021±0.005 0.001±0.001
原人参三醇 0.005±0.012 0 0.239±0.042 0.059±0.001
compound K 0 0 0.016±0.008 0
Rh2 0.019±0.002 0 0 0
原人参二醇 0.008±0.002 0 0 0
人参皂苷加和值 1.209 4.254 0.605 6.494

除常见人参皂苷 Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、
Rb3、Rd 外，检测到了人参茎叶特有皂苷 F1、F2，
在自制生脉散中检测到了 9 种人参皂苷 Rf、Rb1、
Rg2、Rc、Rb2、F2、Rg3、原人参三醇、compound K，
而在生脉饮中检测到了 6 种人参皂苷 Rg1、Rf、Rb1、
F2、Rg3、原人参三醇。
本实验建立的同时测定人参中 16 种人参皂苷
含量的方法，采用梯度洗脱，人参皂苷种类多达 16
种，提高了效率；流动相为乙腈和水，无需配制，
方便操作，并且解决了磷酸盐对色谱柱损耗大，系
统清洗麻烦等问题；所用 C18（150 mm×4.6 mm，5
μm）色谱柱为普通色谱柱，便于购买。16 种人参
皂苷分离完全，线性关系良好，方法准确，重复性
好，为人参的质量控制提供理论基础。
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