全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

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• 化学成分 •
大八角枝叶中 1个新的 seco-prezizaane型倍半萜化合物
方振峰，张 丽，刘 欣，张 涛
江汉大学医学院 药学系，湖北 武汉 430056
摘 要：目的 研究大八角 Illicius majus枝叶的化学成分。方法 采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱、快速制备色谱和制备
HPLC等技术进行分离和纯化，通过 HR-ESI-MS、1D-NMR、2D-NMR等波谱数据鉴定化合物的结构。通过MTT法评价了
化合物的细胞毒活性。结果 从大八角枝叶提取物中分离得到 1个 seco-prezizaane型倍半萜，命名为大八角酮（1）。化合物
1对人结肠癌细胞 HCT-8、人肝癌细胞 Bel-7402、人胃癌细胞 BGC-823以及人肺癌细胞 A549的 IC50值分别为 42.3、48.5、
51.1和 39.9 mol/L。结论 化合物 1为 1个新的倍半萜类化合物，未表现出明显的细胞毒活性。
关键词：八角属；大八角；倍半萜；seco-prezizaane型；大八角酮；细胞毒活性
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)16 - 2803 - 03
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.16.003
A new seco-prezizaane-type sesquiterpenoid from twigs and leaves of Illicium majus
FANG Zhen-feng, ZHANG Li, LIU Xin, ZHANG Tao
Department of Pharmacy, School of Medicine, Jianghan University, Wuhan 430056, China
Abstract: Objective To study the chemical constituents from the twigs and leaves of Illicius majus. Methods The compound was
isolated by column chromatography over silica gel, Sephadex HL-20, and flash chromatography coupled with preparative HPLC. The
structure was elucidated by spectroscopic analysis including HR-ESI-MS, 1D-NMR, and 2D-NMR. The cytotoxic activities were
assessed by MTT. Results A new seco-prezizaane-type sesquiterpenoid named majusatone (1) was isolated from the twigs and
leaves of I. majus. Compound 1 exhibited the cytotoxic activity against HCT-8, Bel-7402, BGC-823, and A549 with IC50 values of
42.3, 48.5, 51.1, and 39.9 mol/L, respectively. Conclusion Compound 1 is a new special seco-prezizaane-type sesquiterpenoid, and
shows no significant cytotoxic activities against HCT-8, Bel-7402, BGC-823, and A549.
Key words: Illicium Linn.; Illicium majus Hook. f. et Thoms.; sesquiterpenoid; seco-prezizaane-type; majusatone; cytotoxic activities

大八角 Illicium majus Hook. f. et Thoms. 为八
角科（Magnoliaceae）八角属 Illicium Linn. 植物，
果、树皮均有毒，主要分布在中国南方各省市[1]。
贵州民间用大八角根、叶治疗胃脘胀痛呕吐，皮用
于驱风除湿、活血止痛，治疗关节肿痛[2]。目前，从
大八角中分离得到的倍半萜类成分有 27个[3-10]，绝
大部分为 seco-prezizaane 型倍半萜，其中又以
anisatin和 majucin两种亚型最多。日本学者最先对
大八角中倍半萜的活性进行了研究，发现其中的毒
八角素（ anisatin） [5]、 2-O-6-去羟基新莽草素
（2-oxo-6-dehydroxyneoanisatin）[6]、2-O-新莽草素
（2-oxoneo-anisatin）[8]具有类似于苦毒素样的惊厥毒
性，且活性相当，而新大八角素（neomajucin）[4-5]
惊厥毒性较弱。近些年通过对大八角的深入研究，
也发现了一些新的活性，如牛长山等[11]发现莽草酸内
酯A（anislactone A）、莽草酸内酯 B（anislactone B）
对脂多糖（LPS）刺激小鼠小胶质细胞释放 NO 抑制
率分别为 75.31%、53.7%。随着八角属中倍半萜类化
合物一些新活性的发现，如抗乙肝病毒[12]、柯萨奇病
毒 B3感染选择性作用[13]等，科研工作者对八角属植
物的研究更加感兴趣。本实验对大八角枝叶 95%乙醇
提取物的醋酸乙酯萃取部位进行研究，分离得到 1个
新的 seco-prezizaane 型倍半萜，命名为大八角酮
（majusatone，1）。利用MTT法对化合物 1进行细胞
毒活性研究，结果表明其对人结肠癌细胞 HCT-8、
人肝癌细胞 Bel-7402、人胃癌细胞 BGC-823以及人

收稿日期：2016-02-24
基金项目：江汉大学科研启动经费资助项目（0600034）
作者简介：方振峰（1980—），湖北人，博士，讲师，从事天然产物活性成分研究。Tel: (027)84225149 E-mail: zhenfengfang@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

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肺癌细胞 A549的 IC50值分别为 42.3、48.5、51.1、
39.9 mol/L，均无明显细胞毒性。
1 仪器与材料
Inova 500 MHz核磁共振仪（美国Varian公司）；
Agilent Technologies 6250Accurate-Mass Q-TOF
LC/MS型色谱仪、Agilent 1100 Series高效液相色谱
仪（美国 Agilent公司）；Shimadzu LC-6AD制备型
高效液相色谱仪（日本岛津公司）；Biotage SP1/SP4z
快速制备色谱（瑞典 Biotage 公司）；YMC-Pack
ODS-A反相色谱柱（250 mm×20 mm，10 μm）、
YMC C18分析型反相色谱柱（250 mm×4.6 mm，5
μm）（YMC公司）；RP-C18反相硅胶（50 μm，默克
公司）；GF254 薄层色谱硅胶及柱色谱用 100～200
目、 200～ 300 目硅胶（青岛海洋化工厂）；
SephadexTM LH-20 葡聚糖凝胶（英国 Amersham
Pharmacia Biotech AB公司）；色谱纯溶剂（天津科
密欧公司）；分析纯试剂（国药集团）。
大八角枝叶购自亳州中药材市场，产地为广西。
样品经江汉大学张涛教授鉴定为八角属植物大八角
Illicium majus Hook. f. et Thoms. 的枝叶。
2 提取与分离
取干燥大八角枝叶约 6 kg，粉碎，用 95%乙醇
加热回流提取 3次（提取时间分别为 3、2、2 h；溶
剂每次 60 L，共 180 L），合并提取液，减压回收溶
剂浓缩得 650 g浸膏，加适量水使其混悬分散，分
别用石油醚（60～90 ℃，每次溶剂 2 L，共 7次）、
醋酸乙酯（每次溶剂 2 L，共 5次）、正丁醇（每次溶
剂 2 L，共 4次）等体积萃取，回收溶剂得到石油醚、
醋酸乙酯、正丁醇 3个萃取部位。取醋酸乙酯萃取
部位（180 g）经硅胶柱色谱分离，依次用二氯甲
烷-甲醇（100∶1、100∶2、100∶3、100∶5、100∶
7、100∶10、100∶20、100∶30、100∶50、0∶100）
梯度洗脱，合并洗脱液得到共 9个流分 Fr. A～I。
Fr. E（约 18 g）经 Sephadex LH-20柱色谱分离，
50%甲醇洗脱，得到样品约 12 g，再经反相快速制
备色谱，依次用甲醇-水（3∶97→100∶0）梯度洗
脱，共得 10个流分 Fr. 1～10。Fr. 4（约 2 g）经
Sephadex LH-20柱色谱，二氯甲烷-甲醇（1∶1）
洗脱，得共 5个流分 Fr. 4-1～4-5。其中 Fr. 4-3（240
mg）经反相制备 HPLC分离，乙腈-水（20∶80）
洗脱，得到化合物 1（6 mg）。
3 结构鉴定
化合物 1：白色粉末。[α]25D +13.5° (c 0.52,
MeOH)； MeOHmaxUV λ (nm): 206 (3.24)；HR-ESI-MS m/z:
305.136 0 [M＋Na]+（计算值 305.135 9），确定分子式
为 C15H22O5，不饱和度为 5。IR 光谱显示存在羟基
（3 465 cm−1）、羰基（1 732 cm−1）和双键（1 652 cm−1）。
1H-NMR 和 13C-NMR 谱数据（表 1）及 HSQC
实验中，可以观察到化合物 1 中有 15 个碳信号，包
括 2个孤立甲基信号 δH 1.24 (3H, s, H-12), 1.15 (3H, s,
H-13) 和 1 个连次甲基 (-CH-) 的甲基信号 δH 0.90
(3H, d, J = 7.5 Hz, H-15)；1个双键信号 δH 5.58 (1H,
brs, H-3)，δC 128.8 (C-3), 146.5 (C-4)；1个羰基信号 δC
210.0 (C-7)；1个半缩醛（或缩醛）叔碳 (-O-CH-O-) δH
5.70 (1H, brs, H-11)，δC 102.5 (C-11)；1个连氧叔碳
(-O-CH-) δH 4.71 (1H, brs, H-10)，δC 73.8 (C-10)；1个
连氧季碳 δC 79.3 (C-6) 以及 1个连氧亚甲基 δH 3.64
(1H, d, J = 11.0 Hz, H-14β), 3.55 (1H, d, J = 11.0 Hz,
H-14α)，δC 69.6 (C-14)。同时DEPT谱表明还有 2个
季碳 δC 50.6 (C-5), 49.8 (C-9)，2个仲碳 δC 40.3 (C-2),
47.9(C-8)和 1个叔碳 δC 46.1 (C-1)。根据 1H-1H COSY
谱，可知化合物 1具有 CH3-CH-CH2-CH=和-CH-CH-
片段（图 1）。以上所推断结构单元和片段，结合本属
植物中已得到倍半萜化合物的结构特点，可知化合物
1具有 seco-prezizaane型倍半萜的骨架。从HMBC谱
（图 2）中可知，H-11分别和 C-9、C-10、C-14相关，
H-12 分别和 C-5、C-7 相关，结合 C-11、C-14
表 1 化合物 1 的 1H-NMR 和 13C-NMR 数据 (500/125
MHz, CD3OD)
Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data of compound 1
(500/125 MHz, CD3OD)
碳位 δH δC
1 2.05 (1H, m) 46.1 (CH)
2 2.39 (1H, m, H-2β)
2.20 (1H, m, H-2α)
40.3 (CH2)
3 5.58 (1H, brs) 128.8 (CH)
4 146.5 (C)
5 50.6 (C)
6 79.3 (C)
7 210.0 (C)
8 2.61 (1H, d, J = 14.0 Hz, H-8β)
2.46 (1H, d, J = 14.0 Hz, H-8α)
47.9 (CH2)
9 49.8 (C)
10 4.71 (1H, brs) 73.8 (CH)
11 5.70 (1H, brs) 102.5 (CH)
12 1.24 (3H, s) 13.9 (CH3)
13 1.15 (3H, s) 15.2 (CH3)
14 3.64 (1H, d, J = 11.0 Hz, H-14β)
3.55 (1H, d, J = 11.0 Hz, H-14α)
69.6 (CH2)
15 0.90 (3H, d, J = 7.5 Hz) 13.3 (CH3)
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

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图 1 化合物 1平面结构及主要 1H-1H COSY谱 ( )
Fig. 1 Structure and key 1H-1H COSY correlations ( )
of compound 1
O
OH
HO
H
O1
3
9
11
12
13
14
15
OH

图 2 化合物 1主要 HMBC和 NOESY谱
Fig. 2 Key HMBC and NOESY correlations of compound 1
和 C-7的化学位移值，可知 C-11和C-14通过氧原子
相连，C-7 为羰基。以上推断结合分子式及化学位移
值，可知 C-6、C-10、C-11上各连有 1个羟基，化合
物 1 的平面结构见图 1。化合物 1 结构和
cycloparvifloralone型倍半萜merrillianone的半乙酰化
合成物[14]相比较，化合物1少了 2个乙酰基片段信号。
另外，化合物 1的 7位与 11位是不相连的，这与常
见的 cycloparvifloralone型倍半萜母核不同，表明其是
一种特殊的 seco-prezizaane型倍半萜。在 NOESY谱
（图 2）中，H-10和H-15、H-8β 相关，H-11和H-14β
相关，H-14α 和H-12、H-13相关，H-13和H-4相关，
表明 12-CH3、15-CH3、10-OH 是处于 β 位，11-OH
是处于 α 位。由于Huang等[14]对化合物 1相同母核的
merrillianone的半乙酰化合成物的绝对构型是通过X-
单晶衍射技术进行确定，同时化合物1结构比较刚性，
因此，本实验未对化合物 1的绝对构型进行测定。综
上所述，确定了化合物 1的结构，为新化合物，命名
为大八角酮。
4 讨论
本研究利用多种色谱分离手段，从大八角枝叶
95%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分离得到 1 个
新 的 seco-prezizaane 型 倍 半 萜 大 八 角 酮
（majusatone，1）。采用 MTT 法对其进行细胞毒活
性评价，结果表明，化合物 1 对人结肠癌细胞
HCT-8、人肝癌细胞 Bel-7402、人胃癌细胞 BGC-823
以及人肺癌细胞 A549的 IC50值分别为 42.3、48.5、
51.1、39.9 mol/L，未表现出明显的细胞毒活性。
本研究结果为大八角的进一步研究开发提供了一定
的物质基础和科学依据。
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