全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 12 期 2012 年 12 月

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浙江西南野生金银花种质资源的特性研究
蓝云龙 1，王庆霞 2，朱云国 2，戴德雄 3，余 杨 4，程 舟 2, 4*
1. 丽水市林业科学研究院，浙江 丽水 323000
2. 同济大学生命科学与技术学院，上海 200092
3. 浙江维康药业有限公司，浙江 丽水 323000
4. 同济大学丽水中药研究院，浙江 丽水 323000
摘 要：目的 研究浙江西南地区野生金银花种质资源的形态性状、有效成分及遗传特性，为金银花种质资源的开发利用及
遗传育种提供依据。方法 采用形态性状调查、HPLC 检测及 ITS 序列分析揭示野生金银花种质的特性。结果 浙江西南地
区的 6 个野生金银花种质在形态性状上差异较小，通过 ITS 序列分析表明它们之间亲缘关系非常相近，能够与忍冬属其他植
物明显区分。6 个野生种质与栽培品种之间形态差异和有效成分量差异较大，其中有性状优良的野生种质，如产自浙江省景
宁县（ZJJN1）与浙江省青田县（ZJQT）的样品，其绿原酸量分别为 1.94%和 2.42%，达到《中国药典》2010 年版标准。结
论 研究野生金银花种质的优良特性，对浙江西南地区野生金银花资源的开发及优良栽培品种的选育具有重要的现实意义。
关键词：金银花；种质资源；形态性状；ITS 序列；忍冬属
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)12 - 2490 - 04
Characteristics of wild Lonicera Japonica Flos germplasm resources
in Southwest Zhejiang Province
LAN Yun-long1, WANG Qing-xia2, ZHU Yun-guo2, DAI De-xiong3, YU Yang4, CHENG Zhou2, 4
1. Forestry Research Institute of Lishui, Lishui 323000, China
2. School of Life Science and Technology, Tongji University, Shanghai 200092, China
3. Wecome Medicine Industry, Lishui 323000, China
4. Lishui Institute of Traditional Chinese Medicine, Tongji University, Lishui 323000, China
Abstract: Objective Morphological, chemical, and genetic characteristics of wild Lonicera Japonica Flos (LJF) germplasm
resources in Southwest Zhejiang Province were discussed for the utilization and breeding of LJF germplasm resources. Methods
Morphological investigation, HPLC detection, and ITS analysis were combined to reveal the feature of wild LJF germplasm. Results
Few differences in morphology were found among six wild LJF germplasm in Southwest Zhejiang Province and ITS analysis showed
the similar result, indicating a closed relationship which was easy to distinguish from the other species in Lonicera Linn. Diversities in
morphology and components were found between wild and cultivated LJF. Some wild germplasm, like ZJJN1 and ZJQT, presented
good properties, with the contents of chlorogenic acid reaching 1.94% and 2.42%, respectively, which met the requirements of Chinese
Pharmacopoeia 2010. Conclusion The investigation on the good characteristics of wild LJF germplasm could provide the practical
reference for the development of wild LJF in Southwest Zhejiang Province and breeding of superior cultivars.
Key words: Lonicera Japonica Flos (LJF ); germplasm resources; morphological characteristics; ITS sequence; Lonicera Linn.

金银花 Lonicerae Japonicae Flos (LJF) 为忍冬
科植物忍冬 Lonicera japonica Thunb. 的干燥花蕾或
初开的花，为常用大宗中药材，具有清热解毒、凉
散风热之功效，其主要成分为绿原酸和木犀草苷[1]。
其原植物忍冬为多年生半常绿缠绕木质藤本植物。
现代药理实验研究表明，金银花及其同属植物具有
解热、抗炎、抑菌、抗病毒、利胆保肝、止血、抗
氧化、免疫调节、抗生育等作用[2-3]。近年来，随

收稿日期：2012-04-17
基金项目：丽水市科技合作项目（2011NZH0219）；丽水市重大专项（20090310）
作者简介：蓝云龙，高级工程师，从事药用植物研究。E-mail: 98lyl@163.com
*通讯作者 程 舟 Tel: (021)65985185 E-mail: chengzhou@tongji.edu.cn
网络出版时间：2012-11-26 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20121126.1752.004.html
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 12 期 2012 年 12 月

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着金银花在中成药、中药配方以及保健品开发等
应用的扩大，其需求量不断增加。目前金银花以
人工栽培为主要来源，在山东[4]、湖南[5]及河南、
河北等地均有较大规模种植。李林等[6]对浙江乐
清、永嘉以及文成的金银花进行调查发现，其原
植物分别为红腺忍冬、灰毡毛忍冬以及引种河南
的正品忍冬，野生种质在浙江也有分布，但资源
分散，未能形成商品。杨进等[7]对野生和栽培金
银花品种进行了核型分析，研究表明金银花在进
化和驯化过程中并未丢失染色体或获得额外的染
色体，两者亲缘关系较近。然而，随着环境问题
的加剧，金银花野生资源逐渐减少，且未得到充
足的开发利用。野生种质是抗病虫性、抗逆性、丰
产性等优良品质的重要来源，是优良栽培品种选
育的基础。浙江西南地区地处东经 118°41′～
120°26′和北纬 27°25′～28°57′，以中山、丘陵地貌
为主，生态环境优越，是优质金银花产地，其野
生金银花资源十分丰富。为更好地开发利用金银花
野生种质资源，本研究对浙江西南地区的 6 个野生
金银花种质形态、有效成分、遗传等方面进行了调
查探讨和评价，筛选优质野生金银花种质资源，为
该地区金银花资源的开发利用及高产优质品种选育
提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料
采集到浙江西南地区庆元县、丽水市、景宁县、
青田县及近邻福建寿宁县的 6 个金银花野生种质，
分别编号为 ZJQY、ZJLS、ZJJN1、ZJJN2、ZJQT
和 FJSN，均由丽水市林业科学研究院王军峰工程师
鉴定为忍冬属忍冬 Lonicera japonica Thunb. 的花。
以浙江景宁县栽培品种 ZJZP 作为对照（表 1）。所
有金银花种质均保存在丽水市林业科学研究院中药
材种质资源圃中。
1.2 形态性状调查
根据《中国植物志》[8]中忍冬的形态性状，主
要调查植物形态、幼枝颜色、被毛情况、老枝颜色、
叶片材质、叶下面被毛情况、叶片大小、花期、花
色、苞片形状等性状。
1.3 有效成分的测定
根据《中国药典》2010 年版一部[1]记载的金银
花中绿原酸及木犀草苷的测定方法，采用 HPLC 法
测定并对比分析 6 个野生种质和 1 个栽培品种的绿
原酸及木犀草苷量。
1.4 ITS 序列扩增及分析
采集金银花植物叶片于自封袋中，硅胶干燥，
用改良 CTAB 法提取总 DNA[9]。用 1.0%琼脂糖凝
胶检测DNA质量。以引物 ITS-1“AGAAGTCGTAA-
CAAGGTTTCCGTAGG”，ITS-4“TCCTCCGCTTA-
TTGATATGC”扩增金银花 rDNA ITS 序列[10]。反
应体系 50 μL 含 1×Buffer、1 mol/L dNTP、0.2
mmol/L MgCl2、1 μmol/L 各引物、Taq 聚合酶 0.03
U、10%二甲基亚砜、总 DNA 约 25 ng。扩增程序：
94 ℃预变性 4 min；94 1 min℃ ，50 ℃、2min，72 ℃、
1 min，30 个循环；72 ℃延伸 10 min。扩增得到
的 PCR 产物进行电泳检测，可观察到约 700 bp
片段即为 ITS 片段。扩增产物在英潍捷基贸易有
限公司进行测序，采用双向测序对 DNA 两条链都
进行测序，序列上传 GeneBank 数据库，见表 1。
运用 MEGA4 软件对 ITS 序列进行对齐，个别位
点进行必要的人工校正。对各样本进行序列比
对，统计变异位点数。运用 MEGA4 软件进行系
统发育分析，结合 GenBank 中下载的部分忍冬
属植物的 ITS 序列，用 UPGMA 法构建遗传关
系树状图。
表 1 金银花野生种质及栽培品种的形态性状特征
Table 1 Morphological characteristics of wild and cultivated germplasm of LJF
编号 产 地 枝 条 叶 片 苞 片 花 期 GenBank 号
ZJLS 浙江省丽水市 红褐色，细而软，匍匐状 3～6 cm，革质，光滑无被毛 小叶状，长＜1 cm 3 月～4 月 JQ780986
ZJQT 浙江省青田县 红褐色，细而软，匍匐状 3～6 cm，革质，光滑无被毛 小叶状，长＜1 cm 4 月～6 月 JQ780987
ZJQY 浙江省庆元县 红褐色，细而软，匍匐状 5～8 cm，革质，光滑无被毛 大叶状，长 2～3 cm 4 月～6 月 JQ780991
ZJJN1 浙江省景宁县 红褐色，细而软，匍匐状 3～6 cm，革质，光滑无被毛 大叶状，长 2～3 cm 4 月～6 月 JQ780990
ZJJN2 浙江省景宁县 红褐色，细而软，匍匐状 5～8 cm，革质，光滑无被毛 大叶状，长 2～3 cm 4 月～6 月 JQ780988
FJSN 福建省寿宁县 红褐色，细而软，匍匐状 3～6 cm，革质，光滑无被毛 小叶状，长＜1 cm 3 月～4 月 JQ780989
ZJZP 浙江省景宁县 黄色，粗壮，灌木状 4～6 cm，纸质，光滑无被毛 叶状，长 2～3 cm 4 月～6 月 JQ780993
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2 结果
2.1 野生金银花种质资源的形态特征
参照《中国植物志》[9]中对忍冬的性状描述，
调查了浙江西南 6 个金银花野生种质及 1 个栽培品
种的主要形态性状。结果表明金银花野生种质与栽
培品种的形态性状差别较大。栽培品种 ZJZP 枝条
较粗壮，呈小灌木状；幼枝与老枝均为黄绿色，被
毛；叶纸质，长度 3～6 cm；叶下面疏生糙毛或无
毛，叶脉与叶边缘被毛；花期 4 月～6 月，双花生
于叶腋处或者集生于枝顶，花色由白变黄，具大的
叶状苞片。金银花野生种质一般枝条细小，柔软，
匍匐于地面，常延伸至约 1 m 远处；幼枝、老枝均
为红褐色，被毛；叶革质，长度一般小于 10 cm，
不同种质之间有差异；叶脉与叶边缘被毛；具叶状
苞片。此外，各野生种质的花期也不尽相同，ZJLS、
ZJQT、FJSN 花期为 3 月～4 月，ZJJN1、ZJJN2、
ZJQY 和的花期为 4 月～6 月，花色均由白变黄。
2.2 金银花野生种质资源的有效成分分析
对浙江西南地区 6 个野生种质和 1 个栽培品种
的绿原酸及木犀草苷定量测定[1]表明，野生种质
ZJJN1、ZJJN2、ZJQT 的绿原酸及木犀草苷量均高
于栽培品种 ZJZP，结果见表 2。种质 ZJJN1 和 ZJQT
的绿原酸量分别为 1.94%和 2.42%，达到《中国药
典》2010 年版标准，而木犀草苷量分别为 0.049%
和 0.046%；栽培品种 ZJZP 无论是绿原酸及木犀
草苷量均未达标。
表 2 金银花野生种质及栽培品种中绿原酸与木犀草苷量
Table 2 Determination of chlorogenic acid and luteoloside
in wild and cultivated germplasm of LJF
编号 产 地 绿原酸 / % 木犀草苷 / %
ZJQY 浙江省庆元县 0.84 0.015
ZJLS 浙江省丽水市 0.57 0.013
ZJJN1 浙江省景宁县 1.98 0.049
ZJJN2 浙江省景宁县 1.04 0.032
ZJQT 浙江省青田县 2.42 0.046
FJSN 福建省寿宁县 0.40 0.022
ZJZP 浙江省景宁县 0.77 0.029

2.3 基于 ITS 序列的金银花野生种质资源遗传特征
对 6 个金银花野生种质及 1 个栽培品种的 ITS
序列分析表明 ITS 序列全长 722 bp，保守位点 719
个，共 3 个变异位点，其中信息位点 1 个，自近裔
位点 2 个，变异率极小，为 0.4%。结合 GenBank
中忍冬属囊管组、空枝组及忍冬组植物的 ITS 序列
进行综合分析，忍冬属植物 ITS 序列全长 725 bp，
共 45 个变异位点，其中信息位点 35 个，变异率增
加为 4.8%，序列间差异明显增大。
基于 ITS序列差异构建了GenBank登录的忍冬
属囊管组、空枝组、忍冬组植物及本研究测得的 7
个金银花种质的遗传关系树状图，见图 1。从图中
可以看出，在遗传距离为 0.010 处可聚为 3 大支，
刚好将忍冬组、空枝组和囊管组分开。实验测得 6
个野生种质以及 1 个栽培品种均聚在忍冬组内，6
个野生种质及栽培品种均与忍冬亲缘关系非常近，
聚为一支。

图 1 基于 ITS 序列构建的浙江西南野生金银花种质
及忍冬属植物的系统树
Fig. 1 Phylogenetic tree of wild germplasm of LJF
in Southwest Zhejiang Province and plants
in Lonicera Linn. based on ITS sequences
3 讨论
浙江西南地区的 6 个金银花野生种质在植物形
态上非常相近，与《中国植物志》[10]中忍冬的性状
描述较符合，为多年生藤本，枝条细小柔软，木质
化程度低，与栽培品种在形态上有明显差别。栽培
品种呈小灌木状，枝条粗壮繁密，木质化程度较野
生种质高，叶面积、叶片密度以及开花期花蕾密度
均较野生种质大。这可能与金银花栽培品种选育均
注重选择灌木化、花密度高等性状有密切关系。因
为在灌木形态下，通过修整株型、保证养分供应等
方法可有效提高金银花的产量[11]。
ITS 序列分析进一步验证了 6 个金银花野生种
质在遗传上也与忍冬亲缘关系非常近，能够与山银
花的植物来源灰毡毛忍冬、华南忍冬、黄褐毛忍冬
ZJJN2
FJSN
ZJQT
ZJLS
ZJQY
ZJZP
忍冬
ZJJN1
灰毡毛忍冬
大花忍冬
细毡毛忍冬
华南忍冬
黄褐毛忍冬
金银忍冬
长白忍冬
金花忍冬
紫枝忍冬
黑果忍冬
下江忍冬
忍冬组
空枝组
囊管组
0.020 0.015 0.010 0.005 0
遗传距离
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等明显区分。此外，尽管野生金银花种质与栽培品
种形态上存在较大变异，但它们在 ITS 序列上的差
异并不显著，这说明栽培品种在形态特征上的变异
可能主要来自于后天的人工选择。
本研究对浙江西南地区的 6 个金银花野生种质
和 1 个栽培品种进行了有效成分定量调查。研究发
现 6 个野生种质中绿原酸及木犀草苷量波动较大，
绿原酸量变化范围为 0.40%～2.42%，木犀草苷量为
0.013～0.049%。栽培品种中绿原酸和木犀草苷量分
别为 0.77%和 0.029%，尚未达到《中国药典》2010
年版规定的要求（绿原酸≥1.5%，木犀草苷≥
0.05%）。因此，金银花在栽培生产中除了注重提升
产量外，更需要保证其品质的要求。以本研究所测
的栽培品种 ZJZP 为例证，其 2 个指标成分量均远
低于一些野生种质，如 ZJJN1 与 ZJQT。这两个野
生种质与栽培品种相比，在有效成分上更具优势，
其绿原酸量已达标，木犀草苷量亦非常接近药典的
要求，是优秀的野生种质资源，可以作为进一步开
发利用的金银花材料。
综上所述，浙江西南地区野生金银花种质资源
在遗传关系上与栽培品种较近，在形态性状、有效
成分上与栽培品种有较大差异。其中不乏优良的野
生种质如 ZJJN1 与 ZJQT，因此，加大对野生金银
花种质的开发利用，对选育浙江西南地区宜栽的优
良金银花品种具有重要的现实意义。
参考文献
[1] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[2] Oku H, Ogawa Y, Iwaoka E, et al. Allergy-preventive
effects of chlorogenic acid and iridoid derivatives from
flower buds of Lonicera japonica [J]. Biol Pharm Bull,
2011, 34(8): 1330-1333.
[3] 盛卸晃, 刘文谦, 薛 霞, 等. 绿原酸体外抗单纯疱疹
病毒作用 [J]. 中国天然药物, 2008, 3(6): 232-234.
[4] 刘孝勇, 赵丽敏. 平邑县金银花产业发展现状及对策
分析 [J]. 黑龙江农业科学, 2011(7): 143-145.
[5] 王 昶, 王丁伟. 湖南省隆回县金银花产业现状及发
展对策[J]. 湖南环境生物职业技术学院学报 , 2007,
13(4): 15-17.
[6] 李 林, 陶正明, 雷海清, 等. 浙江产金银花的调查与
评估 [J]. 浙江农业学报, 2007, 19(6): 431-434.
[7] 杨 进, 李晓玲, 李 宁, 等. 栽培种金银花和野生种
金银花染色体核型的比较分析 [J]. 湖北农业科学 ,
2011, 50(2): 328-331.
[8] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志 (第
72 卷) [M]. 北京: 科学出版社, 1988.
[9] 王 婷, 周凤琴, 李 佳, 等. 忍冬干叶基因组DNA 提取
方法的研究 [J]. 中国中医药学刊, 2008, 26(3): 496-498.
[10] 朱 颖, 董玉芝, 昝少平, 等. 基于 ITS 序列探讨忍冬
属的系统发育关系 [J]. 西北植物学报, 2010, 30(2),
250-254.
[11] 王恒波, 袁月芳. 金银花繁育栽培技术 [J]. 河南林业
科学, 2003(3): 38-39.