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Effect of isoflavone extract from Cicer arietinum on learning and memory abilities in senile mice induced by D-galactose

鹰嘴豆异黄酮提取物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的影响



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 5 期 2011 年 5 月

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鹰嘴豆异黄酮提取物对 D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的影响
竺平晖
浙江省舟山市普陀区人民医院,浙江 舟山 316100
摘 要:目的 探讨鹰嘴豆异黄酮提取物(CIE)对 D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆能力的影响。方法 sc 10% D-半乳
糖 6 周建立衰老小鼠模型,同时 ig 给予 CIE(25、50、100 mg/kg),对照组和模型组给予等量的生理盐水。用 Morris 水迷
宫试验检测小鼠的学习记忆能力,同时检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)水平。结果 与
对照组比较,模型组小鼠学习记忆能力降低,脑组织 SOD 活力下降,MDA 水平增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。ig
不同剂量的 CIE 后,小鼠各检测指标均明显改善,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05、0.01)结论 CIE 可改善 D-
半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与 CIE 具有抗氧化能力有关。
关键词:鹰嘴豆;异黄酮;学习记忆;D-半乳糖;超氧化物歧化酶
中图分类号:R285.5 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2011)05 - 0969 - 03
Effect of isoflavone extract from Cicer arietinum on learning and memory abilities
in senile mice induced by D-galactose
ZHU Ping-hui
People’s Hospital in Putuo District of Zhoushan City in Zhejiang Province, Zhoushan 316100, China
Key words: Cicer arietinum L.; isoflavone; learning and memory; D-galactose; superoxide dismutase (SOD)

鹰嘴豆 Cicer arietinum L. 又名鸡豆、桃豆等,
在新疆已有 2 500 年的栽培历史,为维吾尔族人民
喜爱的药食两用植物[1]。研究表明鹰嘴豆具有广泛
的药理活性,包括抗癌、调血脂、保护心血管功能
等,这些功效均与其活性成分异黄酮有关,鹰嘴豆
异黄酮主要为鸡豆黄素 A(biochanin A)、芒柄花
黄素(formononetin)[2]。实验研究表明鹰嘴豆异
黄酮具有抗氧化作用[3]。本实验通过 D-半乳糖致
小鼠衰老模型,观察鹰嘴豆异黄酮对该模型小鼠的
学习记忆能力的影响,从而为鹰嘴豆临床预防老年
痴呆提供实验依据,为进一步利用维药奠定一定的
理论基础。
1 材料
1.1 动物
雄性 ICR 小鼠 50 只,二级,体质量 23~25 g,
购自上海斯莱克实验动物有限公司。
1.2 药品、试剂与仪器
鹰 嘴 豆 异 黄 酮 提 取 物 ( Cicer arietinum
isoflavone extract,CIE)为自行制备[4],紫外分光
光度法测得异黄酮量为 39%;D-半乳糖购自 Sigma
公司,用生理盐水配成质量分数为 10%的溶液;超
氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒均
购自南京建成生物工程研究所。UV—3100 紫外可
见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司)。
2 方法
2.1 动物分组、给药及模型制备
将雄性 ICR 小鼠随机分为 5 组:对照组,模型
组,CIE 低、中、高剂量(25、50、100 mg/kg)组,
每组 10 只。模型组与 CIE 各剂量组小鼠每天颈背
部 sc 10% D-半乳糖 0.25 mL/20 g,连续 6 周;对照
组 sc 等量的生理盐水。从第 1 天开始,各实验组均
ig给药进行干预,模型组及对照组 ig等量生理盐水。
2.2 学习记忆能力测试
采用改良的 Morris 水迷宫方法[5],测试过程中
室温保持在 18~22 ℃。在槽壁上等距离标记 4 个
点,分别为 N、E、S、W,这 4 个点作为试验起始
点。在NW象限中间固定位置处放一透明玻璃平台,
高 9.5 cm,直径 6 cm,使其低于水面 1.5 cm。在水

收稿日期:2010-12-02
作者简介:竺平晖,男,副主任药师。Tel: (0580)3030646 E-mail: wz14516@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 5 期 2011 年 5 月

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面覆盖一层大小相似,直径约为 1.5 mm 的泡沫颗
粒屑,使平台不可见。水槽周围有丰富的固定不变
的参照物(包括实验者本身),以供小鼠定位。参考
Williams 等[6]的方法,共训练 5 d,分为每天上午及
下午两个时段,每个时段训练 4 次,即将小鼠从槽
壁 4 个起始点分别放入水槽中,记录从小鼠放入到
找到平台的时间(逃避潜伏期);小鼠找到平台后,
让小鼠在平台上休息 30 s,再进行下 1 次训练。如
小鼠 120 s 仍找不到平台,则由实验者将小鼠放置
于平台上,逃避潜伏期记为 120 s。
2.3 脑组织 SOD、MDA 检测
实验结束后取小鼠同一部位的脑组织 150 mg,
吸干水渍后置入液氮保存。测定前称质量,剪取适
量脑组织块,研磨成 100 g/L 匀浆,−4 ℃,3 500 r/min
低温离心 15 min,取上清液,测定上清液中 SOD
活性及 MDA 水平。SOD 测定采用羟胺法,MDA
测定采用 TBA 法,按试剂盒说明书进行操作。
2.4 统计学分析
数据用 sx ± 表示,采用 SPSS13.0 软件对数据
进行统计学处理。
3 结果
3.1 CIE 对衰老模型小鼠学习记忆能力的影响
与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期明显延
长(P<0.01);ig CIE 后,逃避潜伏期缩短,与模
型组相比 CIE 中、高剂量组差异显著(P<0.05、
0.01)。结果见表 1。
表 1 CIE 对 D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆能力的影响
( 10=± n , sx )
Table 1 Effects of CIE on learning and memory ability of
senile mice induced by D-galactose ( 10=± n , sx )
组 别 剂量/(mg·kg–1) 逃避潜伏期/s
对照 — 36.04±4.54
模型 — 44.63±5.13**
CIE 25 42.37±5.68
50 38.95±5.25#
100 36.65±3.38##
与对照组比较:**P<0.01;与模型组比较:#P<0.05 ##P<0.01
**P<0.01 vs control group; #P<0.05 ##P<0.01 vs model group
3.2 CIE对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及MDA
水平的影响
模型组小鼠脑组织 SOD 活性降低,MDA 水平
升高,与对照组比较差异显著(P<0.01),CIE 各
剂量组 SOD 活性均有所升高,MDA 水平下降,与
模型组比较,CIE 中、高剂量组差异显著(P<0.05、
0.01)。结果见表 2。
4 讨论
D-半乳糖致衰老模型是基于衰老的代谢学说
而复制的一种衰老模型,是目前最常用的制备衰老
动物模型的方法,其衰老反应接近或相当于自然衰
老。研究表明[7],D-半乳糖造成的衰老模型可使实
验动物出现认知功能障碍,本研究结果也表明,sc
D-半乳糖 6 周后,小鼠逃避潜伏期明显延长,学习
表 2 CIE 对 D-半乳糖致衰老模型小鼠脑组织 SOD 活性和 MDA 水平的影响 ( 10=± n , sx )
Table 2 Effects of CIE on SOD activity and MDA level in brain tissues of senile mice induced by D-galactose ( 10=± n , sx )
组 别 剂 量/(mg·kg–1) SOD/(U·mg–1) MDA/(nmol·mg–1)
对照 — 451.04±13.64 46.72±5.38
模型 — 379.37±18.75** 55.56±5.12**
CIE 25 388.50±22.44 53.12±3.02
50 402.69±14.71# 49.81±3.93#
100 435.66±21.90## 47.18±4.59##
与对照组比较:**P<0.01;与模型组比较:#P<0.05 ##P<0.01
**P<0.01 vs control group; #P<0.05 ##P<0.01 vs model group

记忆能力下降。而在 D-半乳糖造模的同时 ig CIE,
可明显改善小鼠的学习记忆能力。
D-半乳糖致衰老模型具有与自然衰老相似的
自由基代谢紊乱特征[8],主要表现为脂质过氧化
产物 MDA 生成增多、脂褐素沉积、清除自由基
酶类 SOD 的活性降低[9],这在本实验中得到了进
一步证实。研究表明,CIE 具有显著的抗氧化作
用 [2]。本实验研究发现 CIE 通过提高脑组织中
SOD 活性,降低 MDA 水平,提高衰老小鼠脑组
织清除自由基的能力,减少过氧化产物对脑组织
的损伤,进而改善脑老化的程度,发挥其抗衰老
作用。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 5 期 2011 年 5 月

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参考文献
[1] 李晓静, 阿吉艾克拜尔·艾萨, 程 珍, 等. 维药鹰嘴豆
的化学成分研究 [J]. 现代药物与临床, 2010, 25(3):
188-190.
[2] Saloniemi H, Wähälä K, Nykänen-Kurki P, et al.
Phytoestrogen content and estrogenic effect of legume
fodder [J]. Proc Soc Exp Biol Med, 1995, 208: 13-17.
[3] 李 燕, 巫冠中, 张巨松, 等. 鹰嘴豆异黄酮提取物对
糖尿病小鼠血糖和氧化-抗氧化态的效应 [J]. 中国组
织工程研究与临床康复, 2007, 38: 7625-7629.
[4] 周建军, 赵曙辉, 高 鹏, 等. 鹰嘴豆中总异黄酮的提
取工艺 [J]. 食品研究与开发, 2009, 30(12): 8-12.
[5] 聂荣庆, 张 进, 胡国柱, 等. 脑细胞活性因子对消化
素学习、记忆能力的影响 [J]. 中国行为医学科学 ,
2002, 11(5): 488-489.
[6] Williams M T, Morford L L, Wood S L, et al.
Developmental D-methamphetamine treatment selectively
induces spatial navigation impairments in reference
memory in the Morris water maze while sparing working
memory [J]. Synapse, 2003, 48(3): 138-148.
[7] 朱坤杰, 孙建宁. 六味地黄丸对 D-半乳糖所致衰老大
鼠学习记忆的改善作用及机理 [J]. 中国实验方剂学杂
志, 2006, 12(8): 44-46.
[8] 秦粉菊, 袁红霞, 邵爱华, 等. 纳米硒对衰老小鼠学习
记忆的保护作用 [J]. 中国老年学杂志, 2008, 38(5):
512-523.
[9] Song X, Bao M, Li D. Advanced glycation in D-galactose
induced mouse ageingmode l [J]. Mech Ageing Dev,
1999, 108(3): 239-251.

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