全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 5 期 2011 年 5 月

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鹰嘴豆异黄酮提取物对 D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的影响
竺平晖
浙江省舟山市普陀区人民医院，浙江 舟山 316100
摘 要：目的 探讨鹰嘴豆异黄酮提取物（CIE）对 D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆能力的影响。方法 sc 10% D-半乳
糖 6 周建立衰老小鼠模型，同时 ig 给予 CIE（25、50、100 mg/kg），对照组和模型组给予等量的生理盐水。用 Morris 水迷
宫试验检测小鼠的学习记忆能力，同时检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活力以及丙二醛（MDA）水平。结果 与
对照组比较，模型组小鼠学习记忆能力降低，脑组织 SOD 活力下降，MDA 水平增加，差异均有统计学意义（P＜0.01）。ig
不同剂量的 CIE 后，小鼠各检测指标均明显改善，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05、0.01）结论 CIE 可改善 D-
半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆能力，其作用机制可能与 CIE 具有抗氧化能力有关。
关键词：鹰嘴豆；异黄酮；学习记忆；D-半乳糖；超氧化物歧化酶
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)05 - 0969 - 03
Effect of isoflavone extract from Cicer arietinum on learning and memory abilities
in senile mice induced by D-galactose
ZHU Ping-hui
People’s Hospital in Putuo District of Zhoushan City in Zhejiang Province, Zhoushan 316100, China
Key words: Cicer arietinum L.; isoflavone; learning and memory; D-galactose; superoxide dismutase (SOD)

鹰嘴豆 Cicer arietinum L. 又名鸡豆、桃豆等，
在新疆已有 2 500 年的栽培历史，为维吾尔族人民
喜爱的药食两用植物[1]。研究表明鹰嘴豆具有广泛
的药理活性，包括抗癌、调血脂、保护心血管功能
等，这些功效均与其活性成分异黄酮有关，鹰嘴豆
异黄酮主要为鸡豆黄素 A（biochanin A）、芒柄花
黄素（formononetin）[2]。实验研究表明鹰嘴豆异
黄酮具有抗氧化作用[3]。本实验通过 D-半乳糖致
小鼠衰老模型，观察鹰嘴豆异黄酮对该模型小鼠的
学习记忆能力的影响，从而为鹰嘴豆临床预防老年
痴呆提供实验依据，为进一步利用维药奠定一定的
理论基础。
1 材料
1.1 动物
雄性 ICR 小鼠 50 只，二级，体质量 23～25 g，
购自上海斯莱克实验动物有限公司。
1.2 药品、试剂与仪器
鹰 嘴 豆 异 黄 酮 提 取 物 （ Cicer arietinum
isoflavone extract，CIE）为自行制备[4]，紫外分光
光度法测得异黄酮量为 39%；D-半乳糖购自 Sigma
公司，用生理盐水配成质量分数为 10%的溶液；超
氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）试剂盒均
购自南京建成生物工程研究所。UV—3100 紫外可
见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）。
2 方法
2.1 动物分组、给药及模型制备
将雄性 ICR 小鼠随机分为 5 组：对照组，模型
组，CIE 低、中、高剂量（25、50、100 mg/kg）组，
每组 10 只。模型组与 CIE 各剂量组小鼠每天颈背
部 sc 10% D-半乳糖 0.25 mL/20 g，连续 6 周；对照
组 sc 等量的生理盐水。从第 1 天开始，各实验组均
ig给药进行干预，模型组及对照组 ig等量生理盐水。
2.2 学习记忆能力测试
采用改良的 Morris 水迷宫方法[5]，测试过程中
室温保持在 18～22 ℃。在槽壁上等距离标记 4 个
点，分别为 N、E、S、W，这 4 个点作为试验起始
点。在NW象限中间固定位置处放一透明玻璃平台，
高 9.5 cm，直径 6 cm，使其低于水面 1.5 cm。在水

收稿日期：2010-12-02
作者简介：竺平晖，男，副主任药师。Tel: (0580)3030646 E-mail: wz14516@163.com
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面覆盖一层大小相似，直径约为 1.5 mm 的泡沫颗
粒屑，使平台不可见。水槽周围有丰富的固定不变
的参照物（包括实验者本身），以供小鼠定位。参考
Williams 等[6]的方法，共训练 5 d，分为每天上午及
下午两个时段，每个时段训练 4 次，即将小鼠从槽
壁 4 个起始点分别放入水槽中，记录从小鼠放入到
找到平台的时间（逃避潜伏期）；小鼠找到平台后，
让小鼠在平台上休息 30 s，再进行下 1 次训练。如
小鼠 120 s 仍找不到平台，则由实验者将小鼠放置
于平台上，逃避潜伏期记为 120 s。
2.3 脑组织 SOD、MDA 检测
实验结束后取小鼠同一部位的脑组织 150 mg，
吸干水渍后置入液氮保存。测定前称质量，剪取适
量脑组织块，研磨成 100 g/L 匀浆，−4 ℃，3 500 r/min
低温离心 15 min，取上清液，测定上清液中 SOD
活性及 MDA 水平。SOD 测定采用羟胺法，MDA
测定采用 TBA 法，按试剂盒说明书进行操作。
2.4 统计学分析
数据用 sx ± 表示，采用 SPSS13.0 软件对数据
进行统计学处理。
3 结果
3.1 CIE 对衰老模型小鼠学习记忆能力的影响
与对照组相比，模型组小鼠逃避潜伏期明显延
长（P＜0.01）；ig CIE 后，逃避潜伏期缩短，与模
型组相比 CIE 中、高剂量组差异显著（P＜0.05、
0.01）。结果见表 1。
表 1 CIE 对 D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆能力的影响
( 10=± n , sx )
Table 1 Effects of CIE on learning and memory ability of
senile mice induced by D-galactose ( 10=± n , sx )
组 别 剂量/(mg·kg–1) 逃避潜伏期/s
对照 — 36.04±4.54
模型 — 44.63±5.13**
CIE 25 42.37±5.68
50 38.95±5.25#
100 36.65±3.38##
与对照组比较：**P＜0.01；与模型组比较：#P＜0.05 ##P＜0.01
**P<0.01 vs control group; #P<0.05 ##P<0.01 vs model group
3.2 CIE对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及MDA
水平的影响
模型组小鼠脑组织 SOD 活性降低，MDA 水平
升高，与对照组比较差异显著（P＜0.01），CIE 各
剂量组 SOD 活性均有所升高，MDA 水平下降，与
模型组比较，CIE 中、高剂量组差异显著（P＜0.05、
0.01）。结果见表 2。
4 讨论
D-半乳糖致衰老模型是基于衰老的代谢学说
而复制的一种衰老模型，是目前最常用的制备衰老
动物模型的方法，其衰老反应接近或相当于自然衰
老。研究表明[7]，D-半乳糖造成的衰老模型可使实
验动物出现认知功能障碍，本研究结果也表明，sc
D-半乳糖 6 周后，小鼠逃避潜伏期明显延长，学习
表 2 CIE 对 D-半乳糖致衰老模型小鼠脑组织 SOD 活性和 MDA 水平的影响 ( 10=± n , sx )
Table 2 Effects of CIE on SOD activity and MDA level in brain tissues of senile mice induced by D-galactose ( 10=± n , sx )
组 别 剂 量/(mg·kg–1） SOD/(U·mg–1) MDA/(nmol·mg–1)
对照 — 451.04±13.64 46.72±5.38
模型 — 379.37±18.75** 55.56±5.12**
CIE 25 388.50±22.44 53.12±3.02
50 402.69±14.71# 49.81±3.93#
100 435.66±21.90## 47.18±4.59##
与对照组比较：**P＜0.01；与模型组比较：#P＜0.05 ##P＜0.01
**P<0.01 vs control group; #P<0.05 ##P<0.01 vs model group

记忆能力下降。而在 D-半乳糖造模的同时 ig CIE，
可明显改善小鼠的学习记忆能力。
D-半乳糖致衰老模型具有与自然衰老相似的
自由基代谢紊乱特征[8]，主要表现为脂质过氧化
产物 MDA 生成增多、脂褐素沉积、清除自由基
酶类 SOD 的活性降低[9]，这在本实验中得到了进
一步证实。研究表明，CIE 具有显著的抗氧化作
用 [2]。本实验研究发现 CIE 通过提高脑组织中
SOD 活性，降低 MDA 水平，提高衰老小鼠脑组
织清除自由基的能力，减少过氧化产物对脑组织
的损伤，进而改善脑老化的程度，发挥其抗衰老
作用。
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参考文献
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