全 文 :2016
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Vol41,No.5 March,2016
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,Tel:(0571)88208428,Email:quhb@zjueducn
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,Email:luoyu99_cpu@yeahnet
Simultaneousdeterminationofsixcomponentsinwaterextractandalcohol
precipitationliquidinAstragaliRadixbyHPLCUVELSD
LUOYu1,LIWenlong1,HUANGWenhua2,LIUXuehua2,SONGYangang2,QUHaibin1
(1PharmaceuticalInformaticsInstitute,ZhejiangUniversity,Hangzhou310058,China;
2LiminPharmaceuticalFactory,LivzonGroup,Shaoguan512028,China)
[Abstract] AHPLCUVELSDmethodwasestablishedforsimultaneousdeterminationofsixcomponentsintwointermediatesofShenqi
Fuzhenginjection(SFI)andthefeasibilityofestablishingquantitativeanalysisofmulticomponentsbysinglemarker(QAMS)methods
ondiferentdetectorswasfurtherexplored.Calycosin7OβDglucosideandastraglosideⅣwereselectedasinternalreferencesubstances
forrespectivelyflavonoidsandsaponins,andrelativecorelationfactors(RCF)offormononetin7OβDglucoside,9,10dime
thoxypterocarpan3OβDglucopyranoside,2′dihydroxy3′,4′dimethoxyisoflavan7OβDglucopyranosideandastraglosideⅡwerecal
culatedEventualy,quantitativeresultsofthe14sampleswerecomparedbetweenQAMSandexternalstandardmethodThesamplecon
centrationscalculatedbyQAMSweresimilarwithconcentrationscalculatedbyexternalstandardmethod,andtheabsolutevaluesofrela
tivedeviationsweregeneralylessthan5% accordingtotheUVdetectionofflavonoidsOnthebasisofELSDdetectionforsaponins,
however,theabsolutevaluesofrelativedeviationofthetwomethodsrangedfrom048%to2317%TheQAMSmethodbuiltonultravi
olet(UV)detectorswasstableandcanbeusedasasubstitutemethodtoreducetheconsumptionofstandardcompounds;meanwhile,the
accuracyofQAMSmethodbuiltonevaporativelightscateringdetector(ELSD)wasinferiortothatofexternalstandardmethod,andthe
workingprincipleofELSDandfeasibleconcentrationrangeremaintobefurtherstudied
[Keywords] AstragaliRadix;HPLCUVELSD;quantitativeanalysisofmulticomponentsbysinglemarker(QAMS);relativecor
relationfactors(RCF)
doi:10.4268/cjcmm20160515
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Agilent1260
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(46mm×250mm,5μm);¥Y¯02%ë»*
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B,40~50min,55%~95%B;
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Fig1 HPLCUVprofile(a)andHPLCELSDprofile(b)of
waterextractofAstragaliRadix
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Y=5.76X+9.42 10000 0300~181 625
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Y=5.43X+4.75 10000 0240~145 101
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/% RSD/%
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0172 0218 0380 9539 9862 26
0172 0218 0384 9718
0172 0218 0389 9934
0174 0187 0362 1007
0174 0187 0365 1020
0174 0187 0359 9924
0172 0145 0312 9633
0172 0145 0311 9575
0172 0145 0320 1016
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00379 00384 00756 9827 1010 35
00379 00384 00767 1010
00379 00384 00775 1031
00367 00356 00749 1075
00367 00356 00731 1022
00367 00356 00722 9964
00379 00256 00628 9729
00379 00256 00626 9656
00379 00256 00644 1036
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0121 0145 0269 1028 1032 31
0121 0145 0273 1053
0121 0145 0275 1066
0122 0134 0256 1000
0122 0134 0257 1010
0122 0134 0257 9757
0121 00964 0221 1041
0121 00964 0220 1035
0121 00964 0224 1076
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00520 00666 0119 1008 1014 33
00520 00666 0120 1028
00520 00666 0122 1049
00526 00617 0113 9745
00526 00616 0114 9950
00526 00616 0112 9692
00520 00444 00972 1017
00520 00444 00971 1015
00520 00444 00996 1072
Û)ëÄ
00559 00666 0125 1044 1035 15
00584 00666 0126 1009
00584 00666 0127 1035
00562 00616 0121 1049
00562 00616 0120 1038
00562 00616 0120 1028
00584 00444 0104 1033
00584 00444 0104 1021
00584 00444 0106 1062
Û)ÃÄⅡ 00444 00732 0122 1053 9918 45
00450 00732 0117 9878
00450 00732 0121 1034
00438 00687 0110 9563
00438 00687 0111 9789
00438 00687 0110 9608
00450 00488 00945 1014
00450 00488 00896 9134
00450 00488 00952 1028
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Table3 RecoverytestresultsofthesixcomponentsinalcoholprecipitationliquidofAstragaliRadix
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/mg
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/mg
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/mg
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/%
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/% RSD/%
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0135 0163 0302 1018 1030 21
0135 0163 0298 9975
0135 0163 0301 1015
0135 0135 0274 1032
0135 0135 0272 1020
0135 0135 0272 1019
0134 0101 0240 1065
0134 0101 0238 1041
0134 0101 0240 1058
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00168 00247 00418 1010 1019 15
00168 00247 00414 9944
00168 00247 00417 1010
00168 00204 00377 1022
00168 00204 00374 1010
00168 00204 00375 1013
00166 00153 00325 1040
00166 00153 00323 1029
00166 00153 00325 1039
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00850 00995 0187 1026 1033 21
00850 00995 0185 1005
00850 00995 0186 1018
00850 00822 0170 1030
00850 00822 0169 1018
00850 00822 0169 1026
00836 00616 0150 1070
00836 00616 0148 1043
00836 00616 0149 1064
ÿÛ=ûügÄ
00342 00403 00757 1032 1030 12
00342 00403 00747 1006
00342 00403 00754 1024
00342 00333 00690 1047
00342 00333 00680 1019
00342 00333 00683 1026
00344 00249 00603 1037
00344 00249 00602 1034
00344 00249 00605 1043
Û)ëÄ
00395 00512 00894 9756 1024 39
00395 00512 00911 1009
00395 00512 00923 1032
00395 00423 00846 1067
00395 00423 00850 1076
00395 00423 00818 1001
00384 00316 00716 1049
00384 00316 00716 1049
00384 00316 00688 9599
Û)ÃÄⅡ 00330 00397 00694 9174 9722 38
00330 00397 00720 9842
00330 00397 00712 9622
00330 00328 00638 9399
00330 00328 00640 9474
00330 00328 00655 9910
00313 00247 00564 1014
00313 00247 00550 9586
00313 00247 00569 1035
·458·
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、
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RCF3,RCF4。2¼ã$]G±5ûÍí
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R3=H。
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2
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Fig2 Molecular structures of astragloside IV and
astraglosideⅡ
26
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,
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(
TU
1),
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Agilent1100
>ç
F]j(u
Altech2000ES
½m+¢ËÅ(
u
(ELSD
Å(¹=
:
½ÀÇß±
105℃,
¶¥
16L·min-1),
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5。
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DionexUltimate3000DGLC
°W+Y>çF
Al
tech6000
½m+¢ËÅ(u
(ELSD
Å(¹=
:
½
ÀÇß±
105℃,
ö¥
26L·min-1),4
/Ø
<>ç
AgilentZorbaxSBC18>ç(46mm×
250mm,5μm),KromasilDimensionsC18>ç
(46mm×250mm,5μm),SupelcoDiscoveryC18>
ç
(46mm×250mm,5μm),WelchTopsilC18>
ç
(46mm×250mm,5μm)¼(× RCF。y
xó
5。
27
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2016
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Vol41,No.5 March,2016
ó4 Y±.®<Ïy
Table4 CalculationresultsofRCFs
No.
Y±.®<
RCF1 RCF2 RCF3 RCF4
1 1168±0008 0180±0001 0168±0001 0995±0007
2 1172±0005 0180±0001 0169±0001 0995±0010
3 1174±0005 0181±0001 0169±0001 0997±0005
í¹
1171 0180 0168 0996
RSD/% 026 035 020 012
ó
5
]Fq
、
]^Ë]>çø(Y±.®<
(n=5)
Table5 RCFsofdiferentlabs,systems,andcolumns(n=5)
TU
>ç^Ë
ELSD
>ç
Y±.®<
RCF1 RCF2 RCF3 RCF4
1 Agilent1260Agilent1260ELSD Zorbax 1171 0180 0168 0996
Agilent1100Altech2000ESELSD Zorbax 1165 0185 0170 0998
2 DionexU3000Altech6000ELSD Zorbax 1129 0156 0151 0978
Kromasil 1130 0159 0150 0977
Discovery 1120 0159 0150 0985
Topsil 1128 0159 0150 0973
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、
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[5,12]。
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Table6 Relativeretentiontimeofdiferentlabs,systems,andcolumns
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ΔRT
ìÑ=ûügÄ
ΔRT
ÿÛ=ûügÄ
ΔRT
Û)ÃÄⅡ
1 Agilent1260Agilent1260ELSD Zorbax 1107 1359 1469 201
Agilent1100Altech2000ESELSD Zorbax 1100 1360 1478 196
2 DionexU3000Altech6000ELSD Zorbax 1093 1354 1471 193
Kromasil 1145 1417 1560 190
Discovery 1139 1368 1514 182
Topsil 1085 1355 1502 191
28
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Table7 ComparativeresultsofexternalstandardmethodandQAMSofflavonoids
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/g·L-1
Y±°K
¢±¹
/%
Ö¶
/g·L-1
QAMS
/g·L-1
Y±°K
¢±¹
/%
*Ñ+
1 0386 00663 00668 074 0257 0253 167 00951 00967 164
*Ñ+
2 0175 00350 00351 042 0104 0102 152 00439 00447 174
*Ñ+
3 0333 00555 00563 148 0205 0202 154 00737 00753 216
*Ñ+
4 0203 00355 00360 133 0120 0118 148 00552 00561 166
*Ñ+
5 0266 00494 00500 110 0162 0160 151 00662 00675 191
*ÑG½+
1 0967 0255 0254 028 0449 0444 108 0156 0161 343
*ÑG½+
2 0983 0261 0260 035 0448 0444 106 0146 0152 373
Ð2Ñ-.
1 231 0631 0628 052 100 0993 100 0386 0398 316
Ð2Ñ-.
2 214 0554 0553 013 108 107 120 0320 0332 388
Ð2Ñ-.
3 212 0553 0553 013 0952 0943 098 0326 0339 378
Ð2Ñ-.
4 203 0513 0514 012 0817 0811 071 0300 0313 413
Ð2Ñ-.
5 171 0425 0428 077 0762 0757 075 0261 0274 466
Ð2Ñ-.
6 181 0473 0475 034 0803 0796 080 0240 0252 524
Ð2Ñ-.
7 210 0546 0546 009 0875 0868 082 0316 0329 392
ó
8
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Table8 ComparativeresultsofexternalstandardmethodandQAMSofsaponins
(
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/%
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/g·L-1
( G±
/g·L-1
¥+
G±±=¹
/g·L-1
( G±
/g·L-1
*Ñ+
1 0168 182 0413 182 0411 012 048
*Ñ+
2 0072 178 0060 179 0061 033 135
*Ñ+
3 0137 173 0335 172 0330 036 143
*Ñ+
4 0115 189 0484 190 0496 054 236
*Ñ+
5 0129 178 0381 178 0377 021 087
*ÑG½+
1 0338 182 0408 188 0474 359 1618
*ÑG½+
2 0273 178 0374 187 0461 509 2317
,ÐÑ-.
1 0673 177 0370 185 0438 413 1837
,ÐÑ-.
2 0618 171 0320 177 0370 368 1557
,ÐÑ-.
3 0623 175 0348 182 0415 442 1943
,ÐÑ-.
4 0633 173 0334 179 0390 384 1651
,ÐÑ-.
5 0538 163 0269 169 0306 347 1396
,ÐÑ-.
6 0537 167 0292 174 0346 441 1848
,ÐÑ-.
7 0667 174 0345 180 0398 356 1536
3
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