全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

• 2104 •
色体
1. 7300
4.
为获得高产量药效成分的甘草品系奠定基础。
甘草总黄酮
和 轴及胚根分别在 NAA
2, 4-D 频
37.50 ，NAA 对愈伤组织中甘草酸、 酮具 NAA＋1.0 mg/L 2, 4-D 组
别
分别为 和 甘草总黄酮量与
28 对愈伤组织细胞染色体加倍及甘草酸、甘草总黄酮量提高具有显著的促
品系
黄
中图分类号：R282.21 A 02 2
Eff 4-dicholorophenoxyacetic acid on callus
ell ploidy and secondary metabolites of Glycyrrhiza uralensis
HUANG Hui-ying1, 4, MA Wen
1. Gansu Key Laboratory of Crop Genetic Improvement and Germplasm Enhancement, Lanzhou 730070, China
2. College of Life Science and Technolog
ou University ,
4. College of Agronomy, Gansu A
Abstract: Objective To establish
the strain of licorice with a high active ingredient content. Methods Exogenous hormone of naphthalencacetic acid (NAA) and
2, 4-dicholorophenoxyacetic acid (2,
and radicle, and the effect of NAA an
result showed that there were significant effects of NAA and 2, 4-D with different concentrations on cell ploidy of different explants
callus. The frequency of cell with ch
cotyledons and radicle. They were up to 42.38% and 25.19%, respectively. Meanwhile, the frequency of cell with 2n >14 and 2n = 28
in cotyledons, hypocotyls, and radicle callu
mg/L 2, 4-D, respectively. They were
callus cell increased by the extension of cultured time. Furthermore, there were significant effects of NAA and 2, 4-D on promoting the
contents of glycyrrhizic acid and lic e flavanone of cotyledons callus
reach to 52.13 mg/g and 8.36 mg/g, respectively.

NAA 和 2, 4-D 对甘草愈伤组织细胞染 倍性及次生代谢物的影响
黄惠英1, 4，马文芳2，陈晓燕3，王 清1, 2*
甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室，甘肃 兰州 70
2. 甘肃农业大学生命科学技术学院，甘肃 兰州 730070
3. 兰州大学生命科学学院，甘肃 兰州 730070
甘肃农业大学农学院，甘肃 兰州 730070
摘 要：目的 建立甘草愈伤组织细胞高频染色体加倍体系， 方法 采用组织
利用紫外分光光度法检测愈伤组织甘草酸、培养法对甘草子叶、下胚轴和胚根进行愈伤组织诱导和染色体加倍；
的量。结果 NAA、2, 4-D 不同质量浓度及配比对不同外植体愈伤组织染色体倍性变异具有显著的影响，其中下胚轴 2n＞
25.19%；且子叶、下胚 2.0 mg/L 、2.0 14 和 2n＝28 的细胞频率明显高于子叶和胚根，平均为 42.38%
mg/L 以及 1.0 mg/L 2, 4-D 下，2n＞14 和 2n＝28 的细胞
%。此外 、2, 4-D 甘草总黄
率最高，分别为 61.50%、39.20%，63.00%、36.23%，63.50%、
有明显的促进效应，在 1.0 mg/L
合下，子叶愈伤组织的甘草酸和甘草总黄酮量均达到最高，分
伤组织甘草酸及甘草总黄酮量最高， 49.01 mg/g 8.54 mg/g
为 52.13 mg/g 和 8.36 mg/g；在 2 mg/L NAA 下，下胚轴愈
。相关分析表明，愈伤组织中甘草酸、
2n＝ 的细胞频率呈正相关。结论 NAA、2, 4-D
进作用，通过染色体加倍有可能获得高产量药效成分的甘草
关键词：甘草；NAA；2, 4-D；染色体倍性；甘草酸；甘草总
文献标志码： 文章编号：
。
酮
53 - 670(2011)10 - 2104 - 06
ect of naphthalencacetic acid and 2,
c
-fang2, CHEN Xiao-Yan3, WANG Qing1, 2
y, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China
, Lanzhou 730070 China
gricultural University, Lanzhou 730070, China
the system of high frequency chromosome doubling and to lay the fundation for obtaining
4-D) were used to induce callus of Glycyrrhiza uralensis explants from cotyledons, hypocotyls,
d 2, 4-D were tested on callus cell ploidy and content of secondary metabolites. Results The
romosome 2n > 14 and 2n = 28 was significantly higher in hypocotyls callus than those in
s all reached the highest under the concentration of 2.0 mg/L NAA, 2.0 mg/L 2, 4-D, and 1.0
up to 61.50%, 39.20%, 63.00%, 36.23%, 63.50%, and 37.50%, respectively. The doubling rate of
orice flavanone. The contents of glycyrrhizic acid and licoric
3. College of Life Science, Lanzh
ed the highest on MS medium with 1.0 mg/L NAA and 1.0 mg/L 2, 4-D, they were up

收稿日期：
基
作者简介：黄惠英（1959—），女，河南鄢陵人，主要从事作物遗传育种的研究。E-mail: huanghy@gsau.edu.cn
*通
2010-12-26
金项目：甘肃省自然科学基金资助项目（0803RJZA032）
讯作者 王 清 Tel: (0931)7631875 E-mail: wangqing@gsau.edu.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

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And the conte on MS medium with 2 mg/L NAA, they were up to 49.01 mg/g and 8.54
mg/g, respectively. Besides the contents of glycyrrhizic acid and licorice flavanone showed positive correlation with chromosome
doubling frequency of callus cell. Conclusion There are significant effects of NAA and 2, 4-D with different concentrations
to promote chromosome doubling and the content increasing of glycyrrhizic acid and licorice flavanone in different explants callus. It
suggests that perhaps the new material in licorice with higher pharmacodynamic components will be obtained by chromosome
doubling.
Key words: licorice (Glycyrrhiza uralensis Fisch.); NAA; 2, 4-D; chromosome ploidy; glycyrrhizic acid; licorice flavanone

国内外学者在甘草生物学、化学、药理学、栽
培技术等方面已做了大量的研究[1-3]，取得了丰硕的
成果，为甘草资源的开发、利用和保护奠定了基础。
但目前甘草生产中仍然存在着许多急需解决的问
题，如人工种植甘草的品质普遍不能满足国内外市
场的要求[1]，甘草病害（根腐病、锈病、褐斑病、
猝倒病、白粉病等）未能很好地解决[4]，同种甘草
在不同生产地主要药效成分不稳定[5]，以及种子市
场的混乱，种子质量差、发芽率低等影响甘草产量
和质量的限制因素[6]。近年来，由于野生甘草资源
的匮乏和国家保护野生资源力度的加大，人工栽培
甘草成为获取商品甘草的重要手段，甘草的品质改
良逐渐受到重视[7-8]。然而，甘草的品质改良和育种
工作还很滞后，相关报道也很少。
细胞工程技术，尤其是细胞染色体加倍技术已
经成为目前药用植物育种的主要途径之一。与二倍
体相比，多倍体植株具有组织器官巨型性，药用活
性成分量高，抗逆性强等特点[9-10]。自 20 世纪 80
年代以来，我国已通过多倍体育种方法先后培育出
牛膝、丹参、菘蓝、当归、百合等药用多倍体新品
种，但甘草多倍体的研究尚未见报道。本实验针对
外源激素对甘草愈伤组织体细胞加倍及次生代谢物
产量的影响进行了研究，旨在为进一步获得高药效
成分、染色体加倍的甘草新材料奠定基础。
1 材料与仪器
1.1 材料
样品采自甘肃酒泉金塔县，经甘肃农业大学陈
垣教授鉴定为胀果甘草（2n＝2x＝14）Glycyrrhiza
uralensis Fisch. 的种子。甘草酸铵（110731）和柚皮
苷（110722）对照品购自中国药品生物制品检定所。
愈伤组织诱导培养基：以 MS＋1.0 mg/L 6-苄氨
基腺嘌呤（BAP）为基本培养基，在此基础上分别
添加质量浓度为 0.1、0.5、1.0、2.0 mg/L NAA 和
1.0、2.0 mg/L 2，4-D 以及 1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L
2, 4-D，形成不同生长激素种类及不同质量浓度的
愈伤组织培养基。
1.2 仪器
XSP—2CB 普通光学显微镜（上海上光新光学
科技有限公司）；Motic B1 数码显微镜（深圳拓天
仪器设备有限公司）；WT700—格兰仕微波炉（格
兰仕微波炉电器有限公司）；U2800 型紫外-可见分
光光度计（Hitachi 公司）。
2 方法
2.1 愈伤组织诱导及细胞倍性检查
70%乙醇浸泡种子 1 min，0.1%升汞溶液浸泡种
子 10 min，无菌水冲洗 3 次后，接种于不含任何激
素的 MS 培养基中发芽。待子叶完全展开，将子叶
剪成小块，下胚轴和胚根剪成小段接入不同激素配
比的培养基中进行愈伤组织诱导。每一种外植体在
各种激素配比培养基中接种 100～120 块（段），并
置于光强 2 000 lx，温度（25±1）℃的光照培养箱
中，每隔 20 d 继代 1 次。于愈伤组织培养 40 d 时进
行细胞染色体数目检查，随机取每一激素组合下生
长的愈伤组织 10 块，于卡诺固定液中固定 4 h 以上，
蒸馏水冲洗后加入少量 HCl，置于（60±1）℃的恒
温水浴锅中酸解 8 min，改良品红染色后，分 3 次
压片；在光学显微镜下观察并计数 60 个以上具有中
期分裂相细胞的染色体数。计算愈伤组织频率和细
胞染色体数目变化频率。
愈伤组织频率＝形成愈伤组织的外植体小块数/接入外
植体小块总数
细胞染色体数目变化频率＝分裂中期相应染色体数目
的细胞数/检测的分裂中期细胞总数
2.2 甘草酸及甘草总黄酮的联合提取及检测
2.2.1 甘草酸及甘草总黄酮的联合提取 将继代培
养 40 d 的愈伤组织（子叶、下胚轴）于 60 ℃烘箱
中烘干，研成细粉。称取愈伤组织粉末 2 g，加无水
甲醇 20 mL，冷浸 30 min 后放入微波炉；中高火辐
射 3 min，离心并倒出上清液。下层残渣在同样条
件下重复提取 3 次，合并 3 次提取液备用。
2.2.2 甘草酸及甘草总黄酮最大吸收波长的确定
以甘草酸铵及柚皮苷为对照品，检测甘草酸及甘草
nts in hypocotyls callus reached the highest
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总黄酮的量[11]。精密称取甘草酸铵及柚皮苷对照品，
照品溶液，以甲醇为对照，于 200～600 nm的波长处
扫 长分
别
2.2
织 mL，
以 237 nm
处吸光度。 取愈伤组织液 0.5 mL，加入 2.5 mL
（
2.3 统计分析
分析及
相关系数计算。
3 结果与分析
A 与 2, 4-D 对愈伤组织细胞染色体倍性的影响
3.1.1 不同外植体愈伤组织细胞倍性的变化 将甘
草子叶、下胚轴、胚根外植体接入含有不同外源生
长素及配比的培养基中进行愈伤组织诱导（图 1-A、
1-B），40 d 后检查愈伤组织细胞染色体倍性，发现
用甲醇分别配成 0.424 mg/mL及 1.003 mg/mL的对 采用 SPSS 15.0 数据处理系统进行数据
描，获得甘草酸及甘草总黄酮的最大吸收波
为 237 nm和 431 nm。 3.1 NA
.3 甘草酸及甘草总黄酮的测定 吸取愈伤组
提取液 0.2 mL，用甲醇溶液定容至 50.00
甲醇为对照，紫外可见分光光度计检测
吸
甲醇和 1.25 mL 10% KOH 溶液，室温放置 5 min
后用甲醇定容至 25.0 mL，以甲醇为对照，紫外分
光光度计检测 431 nm 处的吸光度。以吸光度为横
坐标（X），甘草酸铵及柚皮苷质量浓度为纵坐标
Y），绘制甘草酸铵标准曲线，Y＝0.000 6＋0.173
5X（r＝0.998 3）及柚皮苷标准曲线 Y＝0.000 4＋
0.045 X（r＝0.995 9），计算出样品中甘草酸及甘
草总黄酮的量。
不同外植体愈伤组织细胞均存在明显的亚倍体现象
（图 1-D、1-E），且细胞的染色体倍性变异频率明显
不同，子叶及下胚轴染色体 2n＞14 的细胞频率明显
高于胚根，染色体2n＝28平均加倍率分别为24.79%
和 25.19%，而染色体 2n＞28 的加倍细胞在下胚轴
和胚根中较高，分别为 4.46%和 4.11%，见表 1。
3.1.2 NAA 与 2, 4-D 对愈伤组织染色体倍性的影响
不同质量浓度的 NAA、2, 4-D 显著影响愈伤组织细

A-甘草无菌种苗 B-甘草愈伤组织 C-愈伤组织细胞分裂中期染色体分布（箭头所示） D-四倍体（2n＝28）及亚倍体细胞染色体 E-二倍
体（2n＝14）及亚倍体细胞染色体
A-plantlets of licorice in vitro B-callus of licorice C-arrows show chromosome in medium term of callus cell division D-chromosome of tetraploid
with 2n＝28 and of hypoploid E -chromosome of diploid with 2n＝14 and of hypoploid
图 1 甘草愈伤组织及其细胞分裂中期的染色体
Fig. 1 Callus of licorice and chromosome in division metaphase
表 1 不同外植体愈伤组织的诱导频率和染色体倍性变化频率
Table 1 Frequency of callus induction and chromosome number change in different explants
愈伤组织细胞染色体数目变化频率/% 外植体类型 愈伤组织频率/%
2n＝14 14＜2n＜28 2n＝28 2n＞28 2n＞14
子叶 90.96 60.76 11.71 24.79 a 3.78 39.76 b
下胚轴 94.95 57.88 12.99 25.19 a 4.46 42.38 a
1 11.45 21.25 b 4.11 36.35 c胚根 88.22 64.1
不同小写字母代表显著水平 P＜0.05
Different small letters represent significant level P<0.05

A B C
D E
A
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61.50%、39.20%，56.25%、35.50%和 47.50%，
29.6

Fig. 3
A高 14.36%、10.79%、26.28%


1-2n＞14 2- 4＜2 ＜28 3-2n＝28 4-2n＞28
图 5 NAA 和 2, 4-D 及其组合下愈伤组织细胞倍性的
ean variation frequency of chromosome
AA+2, 4-D
黄
草酸
胞倍性。当 NAA 为 0.1 mg/L 时，子叶、胚根愈伤
组织细胞倍性未发生任何改变，仅下胚轴 3.75%
（下胚轴）和 27.54%、24.35%、61.98%（胚根）。另
外，除子叶、下胚轴 2n＞14 细胞频率及 3 种外植体
细胞倍性发生了改变。随着 NAA 质量浓度的升
高，2n＞14、2n＝28 和 2n＞28 的细胞频率逐渐升
高，且在 2.0 mg/L NAA 下达到最高，其中 2n＞14、
2n＞28 细胞频率明显高于 1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L
2, 4-D 组合外，其他类型的细胞频率在 2, 4-D 及 1.0
mg/L NAA＋1.0 mg/L 2, 4-D 间没有差异（图 5）。
2n＝28 的细胞频率在子叶、下胚轴和胚根中分别
为
0%。另外，下胚轴愈伤组织在两种质量浓度
2, 4-D下也有相同的趋势，并在 2.0 mg/L下 2n＞14、
2n＝28 的细胞频率最高，分别为 63.00%、36.23%。
但子叶、胚根却在 1.0 mg/L 2, 4-D 下 2n＞14、2n＝
28 的细胞频率最高，分别为 58.25%、36.47%和
63.5%、37.5%（图 2～4）。

图 4 NAA 和 2, 4-D 对胚根愈伤组织染色体倍性的影响
Fig. 4 Effects of NAA and 2, 4-D to chromosome ploidy
of radicle callus
n
图 2 NAA 和 2, 4-D 对子叶愈伤组织染色体倍性的影响
Fig. 2 Effects of NAA and 2, 4-D to chromosome ploidy
of hypocotyls callus
图 3 NAA 和 2, 4-D 对下胚轴愈伤组织染色体倍性的影响
Effects of NAA and 2, 4-D on chromosome ploidy
of cotyledons callus
比较 1.0、2.0 mg/L NAA 与 1.0、2.0 mg/L 2, 4-D
下愈伤组织细胞倍性的平均变异频率，发现 2, 4-D
的效应明显大于 NAA；尤其在下胚轴和胚根愈伤组
织细胞中更为明显，其 2n＞14、2n＝28 及 2n＞28
的细胞频率分别比NA
平均变异频率
Fig. 5 M
poildy from callus cells cultured in medium
with NAA, 2, 4-D, and N
3.2 NAA 与 2, 4-D 对愈伤组织甘草酸和甘草总
酮量的影响
统计结果表明，子叶、下胚轴愈伤组织甘草酸、
甘草总黄酮的平均量没有差异，分别为 41.30、5.93
mg/g 和 40.47、5.06 mg/g，见表 2。但在 7 种 NAA
和 2, 4-D 不同组合下，愈伤组织中甘草酸、甘草总
黄酮却有显著差异。其中，子叶愈伤组织中甘
和甘草总黄酮量有随 NAA 质量浓度的增加而提高
的趋势，并在 1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L 2, 4-D 激素
2n＞14 14＜2n＜28 2n＝28 2n＞28
70
60
50
40
30
20
10
0
细
胞
染
色
体
数
目
变
化
频
率
/%

0.1 mg·L−1 NAA
0.5 mg·L−1 NAA
1.0 mg·L−1 NAA
2.0 mg·L−1 NAA
1.0 mg·L−1 NAA＋1.0 mg·L−1 2, 4-D
1.0 mg·L−1 2, 4-D
2.0 mg·L−1 2, 4-D
0.1 mg·L−1 NAA
0.5 mg·L−1 NAA
1.0 mg·L−1 NAA
2.0 mg·L−1 NAA
1.0 mg·L−1 NAA＋1.0 mg·L−1 2,4-D
1.0 mg·L−1 2,4-D
2.0 mg·L−1 2,4-D
2n＞14 14＜2n＜28 2n＝28 2n＞28
70
60
50
40
30
20
10
0
细
胞
染
色
体
数
目
变
化
频
率
/%

2n＞14 14＜2n＜28 2n＝28 2n＞28
70
60
50
40
30
20
10
0
细
胞
染
色
体
数
目
变
化
频
率
/%

0
10
20
30
40
60
70
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
频
率
）
0.1 mg·L−1 NAA
−10.5 mg·L NAA
1.0 mg·L−1 NAA
2.0 mg·L−1 NAA
−1 −11.0 mg·L NAA＋1.0 mg·L 2, 4-D
1.0 mg·L−1 2, 4-D
2.0 mg·L−1 2, 4-D
50
（
%
子叶 下胚轴 胚根
2, 4-D NAA NAA＋2, 4-D
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
细
胞
染
色
体
数
目
变
化
频
率
/%

20
0
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草 的影响
ntents of
g·g− g·g−1) 染色体 2n＝28 的细胞频率/%
表 2 外源激素对愈伤组织甘
Table 2 Effects of different exogenous hormone on co
NAA/(mg·L
酸和甘草总黄酮量
glycyrrhizic acid and licorice flavanone of callus
1−1) 2, 4-D/(mg·L−1) 外植体类型 甘草酸/(m ) 甘草总黄酮/(m
0.1 － 子叶 16.04 cC 0 1.12 eE
下胚轴 24.31 eD
bB
cdB
abA
bAB
aA
aA
abA
B
bcB
bB
下胚轴 39.98 dC
平 均 子叶 41.30 a 5.93 a 27.17
下胚轴 40.47 a 5.06 a 27.79
1.60 eD 3.00
0.5 － 子叶 45.31
下胚轴 40.56
1.0 － 子叶 43.11 bB
下胚轴 45.19
2.0 － 子叶 46.06
下胚轴 49.01
1.0 1.0 子叶 52.13
下胚轴 45.48
－ 1.0 子叶 41.26 b
下胚轴 41.78
－ 2.0 子叶 45.19

6.05 cC 15.25
C 4.08 dC 18.18
4.86 dD 28.50
B 6.83 bB 28.45
8.40 aA 39.20
8.54 aA 35.50
8.36 aA 37.23
B 5.29 cC 37.65
5.77 Cc 37.82
C 4.74 cdC 36.50
6.96 bB 29.55
4.33 dC 36.23
大小写字母分别代表 1%（P＜0.01）和 5%（P＜0.01）的差异显著水平
The capital letter and small letter represent significant level of 1% (P < 0.01) and 5% (P < 0.05), respectively
配比下甘草酸量最高（52.13 mg/g）；此激素配比及 2
mg/L NAA 质量浓度下甘草总黄酮量最好，分别为
8.36 mg/g 和 8.40 mg/g。下胚轴中甘草酸及甘草总黄
酮量也随 NAA 质量浓度的增加而提高，但在 2
mg/L NAA 下表现最好，分别为 49.01 mg/g 和
8.54 mg/g，当 NAA 和 2, 4-D 分别为 1.0 mg/L，以
及随 2, 4-D 质量浓度增加时，甘草酸、甘草总黄酮
量反而有下降的趋势（表 2）。
对不同组合下四倍体 2n＝28 的细胞频率与甘
草
草
激
著的正相关，r 分别为 0.82、0.8
4 讨论
生长素和细
育中具有重要作用，
2, 4 诱导 愈伤组织细
胞倍性和甘草酸、甘草总黄酮量的变化，发现不同
植体在所 培养基中均易 伤组织[
利用组织培养进行染色 性育种的
主要途径之一。本实验在对培养 40 d的 3 种甘草外
植 基中NAA
或 2, 4-D质量浓度超过 1.0 mg/L时，14＜2n＜28、
2n＝28 和 2n＞28 的细胞频率急剧上升，且四倍体
细胞占到 23.40%～39.20%。外植体形成愈伤组织及
愈伤组织继代培养过程中，普遍存在细胞的染色体
数目变异[13-14]，有学者认为，染色体数目变异与愈
伤组织培养中细胞分裂期间纺锤体功能受阻有
关，由于纺锤丝受阻，使细胞的有丝分裂变成无丝
分裂，从而形成多核细胞；当多核细胞核同步分裂
时就会发生核融合而产生多倍体[14-16]。也有学者认
因此，实验中愈伤组织染色体数目的变化，
异外，更多是由于外源激素水
0.1 mg/L NAA的MS对
全部正常，
NAA 2, 4-D NAA后，愈
伤组织 率呈上升趋势，
中 不同。因 在成功诱导愈伤组织后，如
何使细胞经历多倍化途径，无疑是染色体加倍方法
的关键所在，也是通过倍性育种获得高药效成分甘
草品系的关键所在。
酸、甘草总黄酮量进行相关分析，发现子叶中甘 为，已存在植物体内的多倍体细胞在形成愈伤组织
酸、甘草总黄酮量及下胚轴甘草酸量与相应外源
素水平下诱导的愈伤组织 2n＝28 细胞频率呈显
的过程中，由于启动其分裂也可导致多倍体细胞的
增加
5、0.84。 除具有组织的自然变
胞分裂素在调节细胞生长和发
本实验采用不同质量浓度的
照培养基中，愈伤组织染色体数目几乎
而当 质量浓度增加以及 替代
-D、NAA组合 愈伤组织并调查
外
有供试 形成愈 12]。
体加倍是倍
体愈伤组织细胞倍性检查时，发现培养
[16]。
平所致。本研究中，在附加
细胞的染色体数目变化频
可见生长素的种类与质量浓度不同在染色体加倍
的效应 此，
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

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总黄酮量的改变，因
为染色体加倍意味着与次生代谢产物相关的基因
表达量也会增加。当然，这一推测有待在今后的实
验中进一步论证，但可以尝试通过染色体加倍创造
多倍体甘草植株来获得高药效成分的甘草新材料。
参考文献
[1] 郝心敏, 王德军, 杜建喜, 等. 栽培甘草的质量考察
[J]. 内蒙古中医药, 2002, 1: 40-41.
[2] 彭 励, 胡正海. 甘草生物学及化学成分的研究进展
[J]. 中草药, 2005, 36(11): 1744-1747.
[3] , 张 王一峰, 等. 乌拉尔甘草根挥发性
[4] 高立原 . 宁夏甘草病虫害记述 [J].
植物保护, 2002, 28(4): 30-32.
[5] 陆嘉惠, 李学禹, 马 淼. 国产甘草属植物的RAPD分
析及其分类学研究 [J]. 西北植物学报, 2006, 26(3):
527-531.
[9] 乔传卓, 吴美枢, 戴富宝. 的研究 [J].
植物学报, 1989, 31(9): 678-
[10] 乔传卓, 催 煦. 药用植物
科技, 1981, 4(4): 4-6.
[11] 李俊松, 徐德生, 冯 怡, 等 甘草中黄酮的纯化方法
和含量测定 [J]. 中成药, 2007, 29(7): 997-1000.
[12] 马文芳, 黄惠英, 王 清. 外源激素对甘草愈伤组织诱
导及染色体加倍的影响 (简报) [J]. 草业学报, 2008,
17(3): 142-145.
[13] Hao Y J, You C X, Deng X X. Effects of cryopreservation
developmental competence, cytological and molecular
stability of citrus callus [J]. Cryo Letters, 2002, 23(1):
[1 l
beha lture of Zea maysl [J]. Cytologia,
1986, 51: 37-41.
[15] Lee M, Geadelmann J L, Phillips R L. Agronomic
evaluation of inbred lines derived from tissue culture of
maize [J]. Theor Appl Genet, 1988, 75: 841-849.
6] 高效民. 植物离体培养中染色体的变异 [J]. 细胞生物
学杂志, 1984(1): 5-12.
[17] 杨 英, 何 峰, 季家兴, 等. 四种前体对胀果甘草细
胞悬浮培养生产甘草黄酮的调控效果评价 [J]. 武汉
植物学研究, 2007, 25(5): 484-489.
[18] 梁玉玲, 管延英, 阳 丽, 等. 胀果甘草愈伤组织培养
及甘草酸含量分析 [J]. 河北大学学报: 自然科学版,
2000, 20(4): 365

甘草酸、甘草总黄酮是甘草中的两种主要有效
成分[17-18]，关系到人工栽培甘草的质量与品质。故
提高甘草酸、甘草总黄酮量应作为甘草品质育种的
主要内容之一。本实验发现，随着外源生长素质量
浓度的提高，甘草愈伤组织亚倍体及加倍细胞频率
有逐渐升高的趋势，同时甘草酸、甘草总黄酮的量
也随之升高，这一结果与梁玉玲等[18]的实验相符。
以往，人们认为外源激素是导致愈伤组织次生代谢
产物或细胞合成化合物量发生改变的原因；本实验
结果表明，2n＝28 的细胞频率与甘草酸、甘草总黄
酮量呈正相关，这可能说明外源生长素能够改变愈
伤组织细胞染色体数目的变异，正是由于细胞染色
体加倍从而导致甘草酸、甘草
马君义 继, 化
学成分的分析研究 [J]. 草业学报 , 2006, 15(1)：
120-123.
, 杨彩霞, 刘 浩
[6] 孙 群, 佟汉文, 杨力刚. 市售甘草种子的质量分析
[J]. 中国农学通报, 2005, 21(3): 127-131.
[7] 王连喜, 李剑萍, 李 琪, 等. 乌拉尔甘草研究现状与
可持续利用对策 [J]. 中草药, 2009, 40(3): 496-499.
[8] 周应群, 陈士林, 赵润怀. 药用甘草植物资源生态学研
究探讨 [J]. 中草药, 2009, 40(10): 1668-1671.
菘蓝多倍体育种
682.
多倍体的应用 [J]. 中药材
27-35.
4] Mohanty B D, Paul N K, Ghosh P D. Chromosoma
viour in callus cu
[1
-368.