全 文 :2016
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applicationindrugsafetyevaluation
LIDandan1,2,TANGXianglin2,TANHongling2,LIANGQiande2,WANGYuguang2,
MAZengchun2,XIAOChengrong2,GAOYue1,2
(1GuangxiMedicalUniversity,Nanning530021,China;
2InstituteofRadiationMedicine,AcademyofMilitaryMedicalSciences,Beijing100850,China)
[Abstract] 3Dinvitrotoxicitytestingmodelwasdevelopedbymagneticlevitationmethodforcultureofthehumanhepatomacelline
HepG2andappliedtoevaluatethedrughepatotoxicityAfterformationofstable3DstructureforHepG2cels,theirglycogenstorage
capacityunder2Dand3Dcultureconditionsweredetectedbyimmunohistochemistrytechnology,andthemRNAexpressionlevelsof
phaseⅠ andⅡ drugmetabolismenzymes,drugtransporters,nuclearreceptorsandliverspecificmarkeralbumin(ALB)werecom
paredbetween2Dand3DcultureconditionsbyusingRTPCRmethodImmunohistochemistryresultsshowedthatHepG2celshad
abundantglycogenstoragecapacityunder3Dcultureconditions,whichwassimilartohumanlivertissuesThemRNAexpressionlevels
ofmajordrugmetabolismenzymes,drugtransporters,nuclearreceptorsandALBinHepG2celsunder3Dcultureconditionswereup
regulatedascomparedwith2DcultureconditionsFordrughepatotoxicityevaluation,thetypicalhepatotoxicdrugacetaminophen
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Vol41,No.7 April,2016
(APAP),andmostreporteddrugsPolygonummultiflorumThunb(ChinesenameHeshouwu)andPsoraleaecorylifoliaL(Chinese
nameBuguzhi)wereselectedforsingledoseandrepeateddose(7d)exposureIntherepeateddoseexposuretest,3DHepG2cels
showedhighersensitivityThisestablished3DHepG2celsmodelwithmagneticlevitation3Dculturetechniqueswasmoreclosetothe
humanlivertissuesbothinmorphologyandfunctions,soitwasabeter3Dhepatotoxicityevaluationmodel
[Keywords] 3Dculture;hepatotoxicity;evaluationmodel
doi:10.4268/cjcmm20160725
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CYP2D6 AAGGGAACGACACTCATCACCAAC TCACCAGGAAAGCAAAGACACCAT
CYP2E1 GGACAGAGACCACCAGCACAACT TGATGGCAGGGATTCGGCTTGG
CYP3A4 CCAGCAAAGAGCAACACAGAGC ACAGCCAGGAGAAGCCAGGTT
MAOB GGCAGGACTTACACTCTTAGGAACC ATCAGACGCTCAACCTCATTCACTT
FMO3 CGGCTGTCTTTGATGCTGTAATGG TGGTTCTTTATAGTCCCTGCTGTGG
MRP1 CCGTGTTGGTCTCTGTGTTCCT AGTCGGCGGCGTAATTCTTAGC
MRP2 GACAACCTCATTCAGACGACCATCC GGCTGCCGCACTCTATAATCTTCC
MRP3 AGCAGACGGCACGACACAAG TGGATTGATGAAGGAGAGCAGG
MRP4 CTTGGATGATTTGCTGCCGCTGAC TGCTTGAGGAGGGAGGAGGATTG
BCRP CTTGGCTGAGGGTTTGGAACTGT GATGATTCTGACGCACACCTGGAT
MDR1 GTATTCAACTATCCCACCCGACCG GCCATCAAGCAGCACTTTCCCT
BSEP TTCAACTGCTGGACCGACAACC ACATCCACTGCTCCCAACAAACG
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