全 文 ：( J= 7 7 Hz)和 6 26( J= 7 9 Hz)显示 2个糖端基
质子信号,推断化合物 1为 C19 位取代的 16hy
droxyentkauran19oic acid苷。
糖碳谱数据与葡萄糖数据对照一致[ 4] , 结合
HMBC数据分析(表 1) , 糖的端基氢 6 26 ( J =
7 9 Hz, H1)与碳信号 175 90、80 74、79 12 有
远程相关, 5 52 ( J= 7 7 Hz, H1) 与碳信号
80 74、76 26、78 18 有远程相关, 可以确定两个糖
的连接方式为 DGlu ( 2 1) DGlu。依据
1DT OCSY 和 HSQC 谱归属糖上各碳、氢信号,
1DT OCSY 谱中, 6 26、4 41、4 24~ 4 40、3 94为
一个葡萄糖上的一组氢信号, 结合 H SQC 谱可得此
糖各碳信号为: 93 5 ( C1) , 80 7( C2) , 78 5 ( C
3) , 70 9 ( C4) , 79 1 ( C5) , 62 2 ( C6) ;
1DT OCSY谱中, 5 52、4 54~ 4 56、4 21~ 4 26、
4 02为另一个葡萄糖上的氢信号, HSQC 谱糖碳信
号为: 105 5 ( C1) , 76 3( C2) , 78 5( C3) , 72 0
( C4) , 78 2( C5) , 63 0( C6)。综上所述,鉴定化
合物 1 的结构为 16, 17dihydroxyentkauran19
oic 19[ Dg lucopyranosy l( 12) Dg lucopyrano
syl] ester, 命名为贝壳杉烷酸苷 A ( kaurane acid
g lycoside A) ,为新化合物, 结构见图 1。
图 1 ! 化合物 1 的结构式和主要的 HMBC相关关系
Fig 1 ! Structure and key HMBC correlation of compound 1
参考文献:
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[ 4] ! 于德泉, 杨峻山 分析化学手册 [ M ] 第七分册 第 2版
北京: 化学工业出版社, 1999
海杧果叶中有机酸类成分研究
张小坡1, 3 ,裴月湖3 ,刘明生1, 2 * ∀ ,康胜利1, 2 ,张俊清1, 2
( 1 海南医学院 热带药用植物研究开发省重点实验室,海南 海口 ! 571101; 2 海南省南药黎药研究院, 海南 海口! 571101;
3 沈阳药科大学中药学院,辽宁 沈阳 ! 110016)
摘 ! 要:目的 ! 研究半红树植物海杧果 Cerbera manghas 叶中的有机酸类成分。方法 ! 通过多种柱色谱进行分离
纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果 ! 从海杧果叶中分离得到 7 个化合物, 分别鉴定为间羧基苯
乙酸( 1)、对羟基苯甲酸( 2)、原儿茶酸( 3)、对羟基桂皮酸( 4)、间羧基苯甲酸( 5)、香草酸( 6)、丁二酸( 7)。结论 ! 化
合物 1 为新天然产物,化合物 2~ 6 为首次从该属植物中分离得到。
关键词:海杧果; 有机酸;间羧基苯乙酸
中图分类号: R284 1 ! ! ! 文献标识码: A ! ! ! 文章编号: 02532670( 2010) 11176303
Organic acids from leaves of Cerbera manghas
ZHANG Xiaopo1, 3 , PEI Yuehu3 , L IU M ingsheng1, 2 , KANG Shengli1, 2 , ZHANG Junqing1, 2
( 1 Hainan Prov incial Key Labo rato ry of R & D of T ropical Herbs, Haikou 571101, China; 2 Hainan Prov incial
I nstit ute o f Sout h China Medicine and Li Nat ionality Medicine, H aikou 571101, China; 3 School
of Chinese Materia M edica, Shenyang Pharmaceut ical Univ ersity , Shenyang 110016, China)
Abstract: Objective ! T o study the org anic acids in the leaves of Cerber amang has Methods ! T he con
st ituents w ere isolated by repeated column chr omatography and their str uctures w ere elucidated on basis of
#1763#中草药! Chinese Traditional and Herbal Drugs! 第 41 卷第 11 期 2010 年 11月
∀收稿日期: 20100214! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! !基金项目:海南省重点学科项目作者简介:张小坡( 1982 ∃ ) ,河北人,博士研究生,主要从事热带药用植物开发与研究。
T el : ( 0898)31350773 ! Email: z_x p1412@ 163 com
* 通讯作者 ! 刘明生 ! T el: ( 0898) 66893826 ! Email: pharmacy1999@ hotmail com
physicochemical constants and spect ral data analyses Results ! Seven compounds w ere obtained and deter
mined to be mcarboxyphenylacetic acid ( 1) , phydroxybenzoic acid ( 2) , protocatechuic acid ( 3) , phydroxycin
namic acid ( 4) , isophthalic acid ( 5) , vanillic acid ( 6) , and succinic acid ( 7) Conclusion ! Compound 1 is a new
natural product, compounds 2- 6 are obtained from the plants of Cerber a L for the first t ime
Key words: Cer bera manghas L ; o rganic acids; mcarboxypheny lacet ic acid
! ! 海杧果 Cer bera manghas L 为夹竹桃科海杧
果属半红树林植物, 又名海檬果、牛心茄子等。海杧
果属约 9种,主要多分布于亚热带和热带地区,澳大
利亚、马达加斯加及太平洋沿岸,中国仅产海杧果一
种,分布于南海海岸 [ 1]。日本学者对冲绳岛产海杧
果进行了深入的化学成分研究,分离得到强心苷、木
脂素、黄酮、环烯醚萜类等成分 [ 2]。为进一步开发利
用海南半红树植物资源, 本实验对海杧果叶的有机
酸类成分进行研究, 通过硅胶柱色谱和 Sephadex
LH20等分离手段, 得到 7 个化合物, 分别鉴定为
间羧基苯乙酸( 1)、对羟基苯甲酸( 2)、原儿茶酸( 3)、
对羟基桂皮酸( 4)、间羧基苯甲酸( 5)、香草酸( 6)、丁
二酸( 7)。化合物 1为新天然产物,化合物 2~ 6 为
首次从该属植物中分得。
1 ! 仪器与材料
XT ∃ 5显微熔点测定仪, JASCOFTIR ∃ 4100
型红外分光光度仪, 核磁共振用 BrukerARX ∃
300/ 600型核磁共振仪测定, 薄层色谱和柱色谱用
硅胶由青岛海洋化工厂生产, ODS 由江苏汉邦科技
有限公司生产, Sephadex LH20由 Pharmacia bio
tech Sw eden生产,普通色谱用试剂均为分析纯, 均
为中国医药集团上海化学试剂公司生产。氘代试剂
由中国科学院武汉波谱公司生产,所用药材由中国
医学科学院药用植物研究所海南分所提供, 经陈伟
平研究员鉴定为夹竹桃科植物海杧果 Cerber a
manghas L。
2 ! 提取与分离
海杧果叶 10 0 kg 阴干,粉碎后用 70%乙醇回
流提取, 提取液经减压浓缩后得到浸膏 2 15 kg, 蒸
馏水混悬后分别用石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯、正
丁醇萃取,得到醋酸乙酯萃取部分浸膏( 50 g )及正
丁醇层部分浸膏( 120 g )。取醋酸乙酯部分 48 g, 进
行常压硅胶柱色谱, 氯仿丙酮梯度洗脱, 共得到 6
个流份( F r %~ & )。Fr ∋中析出无色针晶, 经过
反复重结晶后得到化合物 6( 10 mg ) ; Fr (加入氯
仿后出现白色不溶物,甲醇溶解后经 Sephadex LH
20纯化后得到化合物 2( 5 mg )、4( 10 mg )。Fr )
经硅胶柱色谱分为两个流份( FrA、B) , FrA 中析
出不溶物, 甲醇溶解后经 Sephadex LH20 纯化后
得到化合物 3( 20 mg ) ; FrB 经 ODS 柱色谱分离
(甲醇水) , 80%甲醇洗脱流份中出现白色粉末, 经
过 Sephadex LH20纯化后得到化合物 1( 10 mg)、5
( 20 mg)。正丁醇萃取物 100 g 经大孔树脂粗分,乙
醇水溶液梯度洗脱, 得到水、30%、50%、70%、95%
乙醇洗脱物,其中 30%乙醇洗脱物( 20 g )经 ODS柱
色谱分离得到化合物 7( 13 mg)。
3 ! 结构鉴定
化合物 1: 无色针晶, mp 183 2~ 185 4 ∗ , 溴
甲酚蓝反应呈阳性。UV !MeOHmax ( nm ) : 242。IR ∀KBrmax
( cm
- 1
) : 3 430, 1 690, 1 620, 1 590。ESIMS m/ z :
180。ESI 得准 分子 离子 峰 179 [ M - H ] - 。
1HNMR( 600 MHz, DMSOd 6 )中 12 70( 2H , br s)
的信号及 IR中1 690 cm - 1处的吸收峰说明结构中
存在 2个羧基, 1HNMR : 7 76( 1H , s) , 7 80( 1H ,
d, J= 7 8 Hz) , 7 41( 1H , t , J = 7 8 Hz) , 7 50( 1H ,
d, J= 7 8 Hz)提示结构中存在 1, 3二取代苯, 3 67
( 2H , s)处信号说明结构中存在一个孤立的亚甲基;
结合13CNMR ( 125 MHz, M eOD) : 175 1 ( C9) ,
167 4( C7) , 138 0( C3) , 130 3( C2) , 131 0( C1) ,
129 2( C6) , 129 5( C5) , 135 1( C4) , 41 6( C8) ,
提示化合物 1的结构为间羧基苯乙酸, 与苯乙酸数
据[ 3 ]对比后发现化合物 1在芳环间位上多一个羧基
取代,证明化合物 1为间羧基苯乙酸,该化合物首次
从自然界中分离得到, 为一新天然产物。
化合物 2: 无色针晶, 溴甲酚蓝反应阳性, mp
213~ 214 ∗ 。1HNMR ( 300 MHz, DM SOd6 ) :
7 79( 2H , d, J = 8 4 Hz, H2, 6) , 6 82( 2H , d, J=
8 4 Hz, H3, 5) ; 13 CNMR ( 75 MHz, DM SOd6 ) :
167 3 ( C7) , 161 7 ( C4) , 131 6 ( C2, 6 ) , 121 5
( C1) , 115 2( C3, 5)。以上数据与文献报道的对羟
基苯甲酸一致[ 4] ,故化合物 2鉴定为对羟基苯甲酸。
化合物 3: 无色针晶, 溴甲酚蓝反应阳性, 三氯
化铁反应阳性, mp 201~ 204 ∗ 。1HNMR ( 600
MHz, DM SOd6 ) : 7 34( 1H , d, J= 1 8 Hz, H2) ,
7 29( 1H , dd, J= 7 8, 1 8 H z, H6) , 6 77( 1H , d,
J= 7 8 Hz, H2) ; 13CNMR( 125 MHz, DM SOd6 )
#1764# 中草药! Chinese Traditional and Herbal Drugs! 第 41 卷第 11 期 2010 年 11月
: 167 6( C7) , 150 1( C4) , 145 0( C3) , 122 0( C
1, 6) , 116 7( C2) , 115 3( C5)。以上数据与文献报
道的原儿茶酸一致[ 5] ,故鉴定化合物 3为原儿茶酸。
化合物 4: 无色针晶, 溴甲酚蓝反应阳性, mp
210~ 211 ∗ 。1HNMR ( 300 MHz, DM SOd6 ) :
11 88( 1H , br s,COOH) , 7 50( 2H , d, J = 7 2 Hz,
H3, 5) , 6 88 ( 2H , d, J= 7 2 Hz, H3, 5) , 7 47
( 1H , d, J= 16 0 Hz, H7) , 6 28 ( 1H , d, J =
16 0 Hz, H8) ; 13CNMR ( 75 MHz, DMSOd6 ) :
168 0( C9) , 159 7( C1) , 144 2( C7) , 130 2( C3,
5) , 125 4( C1) , 115 8( C2, 6) , 115 5( C8)。以上
数据与文献报道的对羟基桂皮酸一致[ 6] ,故鉴定化
合物 4为对羟基桂皮酸。
化合物 5: 无色针晶, 溴甲酚蓝反应阳性。
1HNMR( 600 MHz, DM SOd6 ) : 8 50( 1H , s, H
2) , 8 16( 2H , d, J = 7 8 H z, H4, 6) , 7 63( 1H , t ,
J= 7 8 Hz, H5) ; 13 CNMR( 125 MHz, DMSOd6 )
: 166 8 (COOH ) , 131 0 ( C2) , 133 3 ( C1, 3 ) ,
129 0( C4, 6) , 130 4( C5)。以上数据与文献报道
的间羧基苯甲酸一致 [ 7] , 故鉴定化合物 5为间羧基
苯甲酸。
化合物 6: 无色针晶, 溴甲酚蓝反应阳性, mp
210 0~ 213 2 ∗ 。1HNMR( 300 MHz, DM SOd6 )
: 12 20( 1H , br s,COOH) , 9 85( 1H , br s,OH ) ,
7 43( 1H , dd, J = 8 7, 2 7 Hz, H6) , 7 42( 1H , d,
br s, H2) , 6 84 ( 1H , d, J= 8 7 Hz, H5) , 3 80
( 3H , s,OCH 3 ) ; 13CNMR( 75 MHz, DM SOd6 ) :
167 3(COOH ) , 151 1 ( C4) , 147 3 ( C3) , 123 5
( C6) , 121 7( C1) , 115 1( C2) , 112 8( C5) , 55 6
(OCH 3 )。以上数据与文献报道的香草酸一致[ 8] ,
故化合物 6鉴定为香草酸。
化合物 7: 无色柱晶, 溴甲酚绿反应阳性, mp
184~ 187 ∗ 。1HNMR ( 300 MHz, DM SOd6 ) :
12 12( 2H , br s,COOH ) , 2 39 ( 4H , m, H2, 3)。
以上数据与文献报道的丁二酸一致[ 9] ,故化合物 7
鉴定为丁二酸。
参考文献:
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8烷基13溴代盐酸小檗碱合成及对人肝癌细胞株增殖的影响
丁阳平1, 3 ,叶小利2 ,朱家颖1 ,朱小康1 ,李学刚1 * ∀
( 1 西南大学药学院,重庆 ! 400716; 2 西南大学生命科学院, 重庆 ! 400716; 3 西南大学食品学院, 重庆 ! 400716)
摘 ! 要:目的 ! 为了进一步提高小檗碱的抗肿瘤活性,对小檗碱进行了烷基化, 为开发新抗肿瘤药物奠定基础。方
法 ! 以盐酸小檗碱为起始原料,经格氏试剂烷基化及溴代反应, 合成一系列 8烷基13溴代盐酸小檗碱, 经 U V、
IR、1HNMR和元素分析进行结构鉴定。用四甲基偶氮唑盐( MT T )法观测产物对人肝癌细胞 HepG2 增殖能力的
影响。结果 ! 发现该细胞对目标产物的敏感性与碳链长度有很大关系,其中 8辛基13溴代盐酸小檗碱对该细胞
的敏感性最强,在浓度为 32 #g / mL 时抑制率为 96 82% , IC50为 3 33 #g/ mL。结论 ! 从 IC50可知在 8 个碳原子以
内,随着溴代小檗碱侧链的增长, 抗癌活性增强。
关键词:盐酸小檗碱; 烷基化;溴代; 细胞毒性
中图分类号: R284 1 ! ! ! 文献标识码: A ! ! ! 文章编号: 02532670( 2010) 11176506
#1765#中草药! Chinese Traditional and Herbal Drugs! 第 41 卷第 11 期 2010 年 11月
∀收稿日期: 20100530! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! !基金项目:重庆市重大科技专项资助项目( CST C, 2008AA5021) ;重庆市自然科学基金资助项目( CSTC, 2008BB5257) ;重庆市科委攻关项目
( CSTC, 2010AC5007)作者简介:丁阳平( 1978 ∃ ) ,男,土家族,湖南永顺人,西南大学食品学院讲师,博士生,主要从事天然产物研究与开发。
T el : 13883341918 ! Email: barry4784088@ 126 com
* 通讯作者 ! 李学刚 ! T el: 13808310978 ! Email: xuegangl i2000@ yah oo. com . cn