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巴戟天多糖对骨质疏松大鼠骨密度及血清微量元素的影响



全 文 :改善微循环、抑制自由基产生、阻止脂质过氧化的作
用[ 11]。因而,推测复方丹参滴丸浸膏改善葡萄糖代
谢的作用机制可能是通过启动骨骼肌细胞 Glut-4
转录,上调 Glut-4 mRNA 表达,改善胰岛素受体后
信号转导途径, 进而调节葡萄糖代谢,丹参素可能是
复方的有效成分, 且在三七、冰片的协同效应下, 复
方的作用明显优于单体丹参 ,说明复方还有其他的
物质基础,其确切的物质基础及作用机制有待深入
研究。
参考文献:
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巴戟天多糖对骨质疏松大鼠骨密度及血清微量元素的影响
朱孟勇1 ,赫长胜2 ,王彩娇1*
( 11 浙江省台州市中心医院 骨科, 浙江 台州 318000; 21 青岛市胶州区中心医院, 山东 青岛 266300)
摘 要:目的 探讨巴戟天多糖对切除卵巢后骨质疏松大鼠骨密度及血清微量元素的影响。方法 切除大鼠双侧
卵巢,建立骨质疏松模型, 造模后分别给予巴戟天多糖 ( 100、300 mg/ kg ) 干预, 给药 30 d 后检测大鼠骨密度及骨
矿物质、血清 IL-6 和 T NF-A水平、血清微量元素水平。结果 巴戟天多糖组大鼠骨质密度及骨矿物质水平高于模
型组,血清 IL-6、TNF-A表达水平低于模型组, 骨矿物质及血清微量元素水平高于模型组, 并且高剂量作用显著。
结论 巴戟天多糖能够提高切除卵巢后骨质疏松大鼠骨密度, 其可能通过调节血清微量元素水平及 IL-6、TNF-A
表达水平发挥作用。
关键词:巴戟天多糖; 骨质疏松; 切除卵巢; 骨密度; 微量元素
中图分类号: R2861 1 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2010) 09-1513-03
骨质疏松是以骨质量下降为主要表现的退行性
骨病,临床发病率高,相对骨折发病率在 50 岁以上
男性与女性分别高达 1/ 3 与 1/ 5, 是影响老年人生
活质量的主要疾病之一。骨质疏松发病机制复杂,
与生活方式、激素分泌代谢和基因遗传等多因素相
关,中医药治疗骨质疏松取得了肯定的临床效果, 目
前含有治疗骨质疏松的有效成分的中药正逐渐成为
临床研究的热点。巴戟天是两种茜草科植物杂交品
种,具有补肾阳、健筋骨的作用,现代研究证实,巴戟
天含有多种有效成分, 如B-蒽醌、甲基-异茜草素、2,
4-二乙基胆固醇、维生素 C、多糖[ 1] 等, 具有抗氧化、
利尿及保护肾脏的作用[ 2] ,具有明显的抗炎止痛作
用,可以治疗关节炎症[ 3] 。在传统医药上,用来健骨
保肾,消肿止痛,治疗骨质疏松及股骨头坏死等骨科
疾病[ 4]。此外, 巴戟天尚有补中益气, 温精升阳作
用,能够治疗胃肠疾病和男科疾病[ 5-6]。动物实验表
明[ 7 ] ,巴戟天具有促进骨质合成, 减少骨溶解的作
用。研究显示,巴戟天用于治疗骨质疏松安全有效,
#1513#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 9 期 2010 年 9 月
* 收稿日期: 2009- 12-15 基金项目:浙江省台州市 A 级课题项目 ( 090114051)作者简介:朱孟勇( 1974 ) ) ,男,浙江台州人,研究生。E-mail: zhum engyong163@ 163. com
* 通讯作者 王彩娇 T el: 13586091878
动物试验未发现严重的不良反应[ 8] , 能够有效预防
骨质疏松后骨折发生 [ 9-10]。本实验通过切除大鼠卵
巢建立骨质疏松模型,检测骨密度、血清细胞因子水
平及血清矿物质水平变化, 探讨巴戟天多糖对骨质
疏松的保护作用。
1 材料与方法
11 1 巴戟天多糖的提取:干燥巴戟天根茎 (广东肇
东产) 研磨成粉末,加蒸馏水 (质量比 1 B25) 加热
至 75 e ,煎煮 4 h, 得到巴戟天浸膏, 冷却后加入
95% 乙醇 (质量比 1B 4) , 置于 2 e 冰箱内过夜,
沉淀,离心得巴戟天多糖, 低压冻干,制成红褐色巴
戟天多糖粗品, 经去蛋白及膜滤过,凝胶柱分离。提
纯得到白色粉末状巴戟天多糖 (多糖质量分数达到
90% ,硫酸-蒽酮法测定) , 结构分析由浙江大学附属
医院中心实验室完成。
11 2 实验动物与分组: 健康清洁级雄性 SD 大鼠
32 只, 12月龄,体质量 ( 330 ? 10) g,购自中国科学
院上海实验动物中心,动物检验合格证号: 0002837,
室温 19~ 23 e 室内饲养,每日 12 h 光照, 定量给
食,自由饮水。动物适应环境后,随机数字表法分为
4组: 对照物、模型组, 巴戟天多糖 ( 100、300 mg/
kg ) 组。
11 3 模型建立:模型组及巴戟天多糖组大鼠经苯巴
比妥钠 ( 110 mg / kg) ip 麻醉后,经腰背部切口切除
双侧卵巢,对照组同样方法翻动双侧卵巢,手术后分
笼饲养。4周后给药组予巴戟天多糖干预, ig 给药,
对照组及模型组 ig 相同体积生理盐水, 连续给药
30 d。
11 4 标本采集及检测:处死动物, 经腹主动脉取血,
分离血清,贮存于 - 80 e 冰箱。应用 ELISA 试剂
盒双夹心抗体法 (南京建成生物工程研究所提供)
检测白细胞介素-6 ( IL-6)、肿瘤坏死因子-A( TNF-A)
及微量元素 (严格按照说明书操作)。取股骨, 除去
肌肉和软组织, 经 95% 乙醇固定后,应用双能 X线
机 ( A loka, DCS ) 600,日本) 检测骨密度及干骺端
单位面积内矿物质的量。
11 5 统计学分析: 数据处理采用 SPSS 111 5 软件
完成, 数据以 x ? s 表示, 采用单因素方差分析
( o ne-w ay analysis of variance、ANOVA) 进行组间
检验,组间相关性采用 Pearson 相关性检验。
2 结果
21 1 对股骨骨密度的影响:给药前各组股骨的骨密
度无显著差异 ( P> 01 05) ,给药后模型组骨密度低
于对照组 ( P< 01 01) , 巴戟天多糖干预组高于模型
组 ( P< 01 01) ,高剂量组优于低剂量组。见表 1。
表 1 巴戟天多糖对去卵巢大鼠股骨骨密度及血清中
IL-6 和 TNF-A水平的影响 ( x ? s, n= 8)
Table 1 Effect of polysaccharide from Morindae Of f icinalis
Radix on bone density, and IL-6 and TNF-A levels
in serum of ovariectomy rats (x ? s, n= 8)
组别
剂量 /
( mg# kg- 1 )
骨密度/ ( g# cm- 2)
给药前 给药后
IL-6/
(pg# mL- 1)
T NF-A/
( ng#mL- 1)
对照 - 01 182? 01 011 01183 ? 01013 691 23 ? 1157 61 04 ? 0124
模型 - 01 167? 01 013* * 01160 ? 01011* * 831 26 ? 2107* * 38141? 01 11* *
巴戟天多糖 100 01 169? 01 012* * 01198 ? 01017v v 771 35 ? 1153 v v71 58 ? 0117 v v
300 01 162? 01 011* * 01213 ? 01015v v 701 63 ? 1193 v v71 22 ? 0120 v v
与对照组比较: * * P< 01 01 与模型组比较: v v P< 01 01
* * P < 01 01 v s cont rol group; v v P< 01 01 v s model g rou p
21 2 对血清 IL-6、TNF-A水平的影响: 模型组血清
IL-6、TNF-A水平高于对照组 ( P< 01 01) , 巴戟天
多糖干预组血清 IL-6、T NF-A 水平低于模型组
( P< 01 01)。见表 1。
21 3 对股骨矿物质水平的影响:模型组血清微量元
素水平降低 ( P< 01 05) ,同模型组相比,巴戟天多糖
干预组微量元素水平增高 ( P< 01 05) , 且高剂量作
用强于低剂量。见表 2。
3 讨论
骨质疏松是一种骨骼骨密度降低、微结构断裂,
伴有非胶原蛋白质量和数量改变的骨病。常见于绝
经期后女性, 与雌激素分泌及代谢异常有关。骨质
表 2 巴戟天多糖对去卵巢大鼠血清矿物质和微量元素的影响 (x ? s, n= 8)
Table 2 Effect of polysaccharide fromMorindae Of f icinalis Radix on mineral matter and trace element
in serum of ovariectomy rats (x ? s, n= 8)
组别
剂量/
( mg # kg- 1)
血清微量元素/ ( mg# cm- 3)
Ca P Mg Zn Mn Cu Fe
对照 - 2581 81 ? 131 09 1551 45 ? 81 54 51 47 ? 01 26 3001 58 ? 121 64 111 37 ? 01 98 411 47 ? 11 68 1311 56 ? 81 79
模型 - 2181 37 ? 51 83* * 1251 35 ? 21 53* * 41 71 ? 01 26* * 2511 14 ? 41 81* * 81 13 ? 01 33* * 311 33 ? 11 07* * 1111 95 ? 51 39* *
巴戟天多糖 100 2371 21 ? 61 12v v 1331 71 ? 51 01v v 51 17 ? 01 18v v 2711 42 ? 51 11v v 81 92 ? 01 41v v 381 41 ? 21 88v v 1251 06 ? 21 64v v
300 2451 27 ? 51 19v v 1491 32 ? 21 77v v 51 14 ? 01 32v v 2831 11 ? 31 47v v 101 28 ? 01 97v v 431 72 ? 11 92v v 1281 14 ? 41 03v v
与对照组比较: * * P < 01 01 与模型组比较: v v P < 01 01
* * P< 01 01 v s cont rol gr ou p; v v P < 0101 v s model group
#1514# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 9 期 2010 年 9 月
疏松的预防及治疗, 临床多采用激素替代疗法,但其
严重的不良反应影响了临床应用,传统的中医药治
疗及预防骨质疏松, 近年来取得了较好的临床效果。
中医认为,骨质疏松与肾虚诸症密切相关,属骨痹范
畴,含有补肾作用的中药对骨质疏松具有肯定的治
疗及预防作用。
IL-6是由 T 细胞和巨噬细胞、成纤维细胞、血
管中层的平滑肌细胞分泌的具有促炎和抗炎双重作
用的细胞因子, 在组织损伤时 IL-6 表达水平增高明
显。IL-6能通过抑制 T NF-A、IL-1 激活 IL-1ra 和
IL-10 发挥抗炎作用,能够抑制成骨细胞成熟, 增加
骨吸收,是能够导致骨量减少的细胞因子[ 11]。雌激
素治疗骨质疏松时, 抑制 IL-6 的表达, 是其发挥治
疗作用的途径之一[ 12] 。本实验结果显示,切除卵巢
后大鼠骨密度降低,血清 IL-6 及 T NF-A的水平升
高,血清微量元素水平下降, 给予巴戟天多糖干预
后,大鼠骨密度增加, 血清 IL-6 及 T NF-A水平下
降,血清微量元素水平增加,并且呈剂量依赖性, 高
剂量组的血清微量元素及 IL-6、TN F-A水平变化更
为明显,骨密度改善更为显著,说明巴戟天多糖对切
除卵巢后的大鼠骨密度具有改善作用, 能够拮抗雌
激素缺乏引起的骨质疏松 [ 13] , 其对骨密度的改善作
用,可能与降低血清的 IL-6、T NF-A表达水平,进而
刺激成骨细胞成熟, 促进骨质形成有关[ 11]。同时,
巴戟天对血清 Ca、Mg、P、Fe、Zn 等矿物及微量元素
的上调作用,所引起的骨质中矿物质的沉积作用, 也
是增加骨密度的原因之一[ 14]。结果显示,巴戟天多
糖能够有效改善去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度, 预
防或减缓骨质疏松的发生及病情进展, 发挥抗骨质
疏松作用。
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5现代药物与临床6杂志征稿、征订启事
5现代药物与临床6杂志( CN12-1407/ R, ISSN 1674-5515) 是国家级医药科技期刊,为中国药学会系列期刊。2009 年 1 月
由5国外医药# 植物药分册6更名为5现代药物与临床6 , 并被 CNKI 中国期刊全文数据库、中国核心期刊 (遴选)数据库等收
载。为了进一步提高期刊质量, 2010年出版的5现代药物与临床6全新改版,更加突出创新性与实用性, 紧跟国内外药学发展
趋势,适时追踪热点, 从栏目内容、文章质量, 到封面版式、装帧印刷都得到了全面的提升与改进。
办刊宗旨:报道国内外药物研究的新进展与新技术 ,以及药物在临床应用方面的最新动态, 为新药研发、生产人员以及临
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