全 文 ：化合物 13 : 黄色粉末 ,分子式为 C9 H8 N2 O3 。
ESI2MS m/ z : 19310 [ M + H ] + 。1 H2NMR ( 500
M Hz , CD3 OD)δ: 7188 ( 1 H , d , J = 915 Hz , H28) ,
7112 (1 H ,s , H25) ,6179 (1 H , s , H22) ,6123 (1 H ,d ,
J = 915 Hz , H27) ,3193 (3 H , s ,32OCH3 ) 。以上波
谱数据与文献对比基本一致[20 ] ,故化合物 13 鉴定
为 xylogranatinin。
参考文献 :
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刺柳珊瑚 Echinogor gia sp1 中的三个神经酰胺
廖 　柳 ,王 　楠 ,梁 　秋 ,廖小建 ,徐石海
①
(暨南大学 化学系 ,广东 广州 　510632)
摘 　要 :目的 　从刺柳珊瑚中寻找新化合物。方法 　采自南中国海域的刺柳珊瑚 Echinogorgia sp1 经色谱柱分离
得到 3 个同系列的神经酰胺。结果 　通过波谱分析及化学转化等方法确定了其化学结构分别为 (2 S ,3 S ,4 R)222N2
(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2正十六碳酰胺 (1) 、(2 S , 3 S , 4 R)222N2(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2正十七碳酰胺 (2)
和 (2 S ,3 S ,4 R)222N2(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2正十八碳酰胺 (3) 。结论 　3 个化合物均是首次从该物种中分离
得到 ,其中化合物 2 是新化合物 ,命名为刺柳珊瑚酰胺 (echinogoriamide) 。
关键词 :刺柳珊瑚 Echinogorgia sp1 ;神经酰胺
中图分类号 :R284102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 - 2670 (2010) 06 - 0851 - 04
·158·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
①收稿日期 :2010201221　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家“863”基金资助项目 (2006AA09Z408) ;国家自然科学基金资助项目 (20772048)3 通讯作者　徐石海　Tel : (020) 85228856 　E2mail :txush @jnu1 edu1cn
Three ceramides from gorgonian Echinogor gia sp1
L IAO Liu , WAN G Nan , L IAN G Qiu , L IAO Xiao2jian , XU Shi2hai
(Department of Chemist ry , J inan University , Guangzhou 510632 , China)
Abstract : Objective 　To find new compound f rom gorgonian1 Methods 　Three ceramides have been
isolated f rom t he Sout h China Sea gorgonian Echi nogorgi a sp1 by silica gel column chromatograp hy1
Results 　Their st ruct ures were established as (2 S , 3 S , 4 R)2N2[ 22(1 , 3 , 42t rihydroxyicosan222yl) ]2hexa2
decanamide (1) , (2 S , 3 S , 4 R)2N2[ 22(1 , 3 , 42t rihydroxyicosan222yl) ]2heptadecanamide (2) , and (2 S ,
3 S , 4 R)2N2[ 22(1 , 3 , 42t rihydroxyico san222yl ]2octadecanamide (3) by spect roscopic met hods and chemical
conversion1 Conclusion 　It is t he first time to report t he t hree chemical compounds f rom coral Echi nogor2
gi a sp1 and compound 2 is a new compound1
Key words : gorgonian ; Echi nogorgi a sp1 ; ceramide
　　柳珊瑚的化学研究始于 20 世纪 60 年代 ,已从
柳珊瑚中发现了许多结构新颖且具生物活性的化合
物 ,尤其是具有重要生理活性的前列腺素的发现 ,使
得柳珊瑚化学成分的研究成为海洋天然产物研究的
一个热门领域。Echi nogorgi a sp1 属金网珊瑚科柳
珊瑚目柳珊瑚属动物 ,其化学成分的研究始于 20 世
纪 80 年代初 ,文献表明目前主要分离得到 xant hy2
letin和 xanthoxyletin 等化合物[1 ] 。本实验首次报
道从采自南海湛江硇洲岛刺柳珊瑚 Echi nogorgi a
sp1 样品中分离鉴定的 3 个同系列神经酰胺 : (2 S ,
3 S ,4 R)222N2(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2正十六
碳酰胺 (1) 、(2 S , 3 S , 4 R)222N2(1 ,3 ,42三羟基2正二
十烷基)2正十七碳酰胺 (2) 和 (2 S , 3 S , 4 R) 222N2(1 ,
3 ,42三羟基2正二十烷基)2正十八碳酰胺 (3) ,其中化
合物 2 为一新化合物 ,命名为刺柳珊瑚酰胺 (echi2
nogoriamide) 。
1 　材料
样品刺柳珊瑚 Echi nogorgi a sp12007 年 5 月
采集于中国湛江硇洲岛 ,标本现保存于暨南大学化
学系有机化学教研室 ,编号为 2007209 ,种属由荷兰
阿姆斯特丹大学 Rob van Soest 教授鉴定。5 - X 国
产显微熔点测定仪 (上海精密科学仪器有限公司) ,
温度计未校正 ;上海精密科学仪器有限公司 FA
2104 型电子天平 ; 美国 FINN I2GAN 公司 Trace
GC2MS 气质联用仪 ;V G公司产 ZAB 质谱仪 ;德国
BRU KER 公司 DRX - 400 超导核磁共振仪 ;色谱
用硅胶 :薄层色谱用硅胶 G(60 型) ,柱色谱用硅胶
(45～75μm ,青岛海洋化工厂) 。实验所用试剂均
为分析纯 (广州化学试剂厂) 。
2 　提取与分离
将湿质量 30 kg 的样品粉碎后 ,用乙醇浸提
30 d ×3 ,再用三氯甲烷2甲醇浸提 15 d ×2 ,合并酯
相部分后减压浓缩得到深褐色膏状固体 ,依次用醋
酸乙酯和正丁醇萃取 ,真空浓缩得到醋酸乙酯部分
152 g 和正丁醇部分 45 g。将醋酸乙酯部分用
100～200 目硅胶进行快速柱色谱 ,先用逐渐增加极
性的醋酸乙酯2石油醚 (0 %～100 %) 进行梯度洗脱 ,
再用逐渐增加极性的甲醇2醋酸乙酯 (0 %～100 %)
体系进行梯度洗脱 ,最后用水2甲醇 (0 %～50 %) 冲
洗柱子。从 10 %甲醇2醋酸乙酯洗脱下一晶状固体
A ,多次重结晶后得到针状晶体 A ( 56 mg ,产率
01037 %) ,该晶体经 TL C 多种体系跟踪为一个圆
点 ,经 ESI2MS 分析晶体 A 为 3 个同系列化合物的
混合物 (化合物 1～3) 。
3 　盐酸2甲醇水解反应
取固体 A 10 mg ,溶于 50 mL 甲醇 ,加入 160
mL 1 mol/ L 的盐酸 ,在磁力搅拌下于 85 ℃加热回
流 12 h。加入 100 mL 水 ,用正己烷萃取 (180 mL ×
2) 。甲醇2水相减压蒸干 ,重溶于甲醇 ,再浓缩至干 ,
共 3 次 ,以除尽残存的 HCl ,得长链碱盐 (L CB) 5
mg。正 己 烷 相 浓 缩 后 , 经 L H220 凝 胶 滤 过
(CH2 Cl22甲醇 ,1 ∶1) 得到 FAM 215 mg。用 GC2
MS 分析 FAM 的组成 :进样量 015 μL ;载气 (流
量) : He (110 mL/ min) ;分流比 :15 ∶1 ;MS 检测器 :
EI 电离源 ,电离电压 70 eV ,源温 200 ℃。
4 　结构鉴定
化合物 1～3 :固体 A 为无色针晶 , mp 129～
130 ℃。
411 　官能团的确定 : IR 谱中在1 621 ,1 548 ,1 467
cm
- 1的吸收峰表明分子中含有酰胺基团 ,1 H2NMR
谱中处于低场的一个质子信号δ8152 和13 C2NMR
谱中δ17314 的羰基碳信号表明分子中含有仲酰胺
结构 CON H , IR 谱中还显示存在羟基的吸收峰
3 340 ,1 066 cm - 1 。13 C2NMR谱显示含有 3 个连氧
·258· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
碳信号δ7617 (d) ,7311 (d)和 6212 (t) 。1 H2NMR谱
中δ4198 ,4148～4150 ,4138～4141 和 4127～4130
处显示出含有 4 个偕羟基质子信号 ,通过重水交换
实验 ,发现δ4129 ,4138 和 4147 处有 3 个可交换的
质子信号 ,说明分子中应含有 2 个 > CH —O H 和 1
个 CH2 —O H ; 1 H2NMR显示长链烷烃类化合物的
特征 ,2 个末端甲基 (δ0185 ,6 H) ,一组高场亚甲基
(1123～1131 , brs) 信号和 13 C2NMR谱中δ2916～
3013 处的强信号提示分子的结构中含有 2 个长链
烷基 (未见 CH 的信号 ,所以 2 个甲基只能是两条长
链烷基的末端甲基) 。
412 　分子式的确定 :用薄层色谱不同溶剂体系鉴定
固体 A 均为一个点 ,而 ESI2MS 中的m/ z 584 ,598 ,
612 3 个强[ M + H ] + 峰 (图 1) ,彼此之间相差 14 ,则
说明固体 A 是一个同系列 3 个化合物的混合物 ,彼
此之间只相差一个 CH2 ,3 个化合物的相对分子质
量为 583 ,597 和 611 ,结合 D EP T ,确定分子式分别
为C36 H73 NO4 、C37 H75 NO4和C38 H77 NO4 。
m/ z
图 1 　固体 A的 ESI2MS色谱图
Fig11 　ESI2MS of solid A
413 　化学结构的确定 :上述官能团的分析表明 ,分
子中有一个 CON H ,2 条长碳链 ,2 个羟基 ,与神经
酰胺类化合物波谱数据极其相似[2 ] 。1 H2NMR谱中
δ5107～5112 处和13 C2NMR谱中δ5318 处的信号
表明存在一个与酰胺中 N 相连的 > CH ,因此 ,可推
测该化合物为神经酰胺类化合物 ,且分子中含有 3
个羟基。分子中 H —H 相互关系及 C —H 相互关
系 则 通 过 二 维 核 磁 共 振 谱 1 H21 H COSY、
1 H213 C2COSY和 HMBC 加以联系 ,见表 1 和图 2。
对混合物盐酸2甲醇解后得到的脂肪酸甲酯 ( FAM)
进行 GC2MS 分析。FAM 部分的 GC2MS 的总离子
流图只显示 3 组主峰为固体 A 水解得到的相应化
合物 ,其余均为杂质 ,见图 3。根据 3 个组分的质谱
裂解推导相应化合物的结构。它们的 EI2MS 分别
显示分子离子峰 m/ z : 256 [ M ] + , 270 [ M ] + , 284
[ M ] + ,表明了相对分子质量为 256 ,270 ,284。GC2
MS 给出的结构分别为正十六碳酸甲酯、正十七碳
酸甲酯和正十八碳酸甲酯。因此确定晶体 A 3 个同
系列化合物 1～3 的结构分别为 (2 S , 3 S , 4 R)222N2
(1 ,3 , 42三羟基2正二十烷基)2正十六碳酰胺 (1) 、
(2 S ,3 S , 4 R)222N2(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2正
十七碳酰胺 (2)和 (2 S ,3 S ,4 R) 222N2(1 ,3 ,42三羟基2
正二十烷基)2正十八碳酰胺 (3) 。结构见图 4。
　　晶体 A 中的 H21 , H22 , H23 和 H24 的化学位移
和偶合常数与已知化合物 (2 S , 3 S , 4 R) 222N2(十六
烷基 )2鞘氨醇[3 ] 相同 , 并且晶体 A 的旋光值
( [α]26D + 141 11) 也与其基本一致 ,结合NO ESY分
析最终确定其立体构型为 2 S , 3 S , 4 R ,所以 3 个化
合物的立体结构为 (2 S ,3 S ,4 R) 22 2N2(1 ,3 ,42三羟
表 1 　固体 A的13 C2NMR ( 100 MHz) 、1 H2NMR
( 400 MHz) 、COSY 和 HMBC NMR数据
Table 1 　13 C2NMR ( 100 MHz) , 1 H2NMR ( 400 MHz) , COSY ,
and HMBC NMR spectroscopic data of solid A
No1 δC δH COSY( H2H) HMBC( H2C)
1 621 2 4148～4150 2 2 ,3
2 531 8 5107～5112 1 3
3 761 7 4138～4141 2 ,4 4
4 731 1 4127～4130 3 ,5 5 ,6
5 341 0 1194～1196 4 ,6 6 ,n1
6 301 0 1165 ,2123
(CH2) 11 301 0 1124
1′ 321 1 1124
2′ 261 7 1124
3′ 141 3 0183～0187
(CH2) n 301 0 1124
1″ 1731 4
2″ 361 9 2144～2148 3″ 3″
3″ 261 4 1180～1185 2″,4″ 4″
4″ 301 0 1133～1137 3″
1Ê 321 1 1124
2Ê 231 0 1124
3Ê 141 3 0183～0187
N H 8152 2 1″
图 2 　化合物 1～3 部分远程碳氢相关关系
Fig12 　HMBC Correlations of compounds 1 - 3
·358·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
t/ min
图 3 　固体 A的 FAM 部分 GC2MS色谱图
Fig13 　GC2MS for FAM part of solid A
1 n = 9 　2 n = 10 　3 n = 11
图 4 　化合物 1～3 的结构
Fig14 　Structure of compunds 1 - 3
基2正二十烷基)2正十六碳酰胺 (1) 、(2 S , 3 S , 4 R)222
N2(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2正十七碳酰胺 (2)
和 (2 S , 3 S , 4 R) 222N2(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2
正十八碳酰胺 (3) ,其中化合物 2 未见文献报道 (通
过 CA 检索未见化合物 1 和 3 的核磁数据报道所以
只能是和类似的神经酰胺进行比较) 。另外通过二
维NMR分析 ,加之与文献数据[2 ] C22′和C22″的碳
谱数据 ,之所以有差异应该和链长有关。
5 　物理常数与波谱数据
化合物 1～3 : C36 H73 NO4 (1) , C37 H75 NO4 (2) ,
C38 H77 NO4 ( 3 ) , 无 色 针 晶 , mp 129～ 130 ℃
(C5 H5 N ) ; 1 H2NMR ( C5 D5 N/ TMS)δ: 8152 ( 1 H ,
brd) ,5107～5112 (1 H , m) ,4148～4150 (2 H , dd) ,
4138～4141 (1 H ,t) ,4127～4130 (1 H ,t) ,4149 (1 H ,
brs , H21) , 21 44～2148 (2 H , t ) , 1194～1196 (2 H ,
m) , 1124 ( 52 H) , 0183～ 0187 ( 6 H , t ) 。13 C2NMR
(C5 D5 N/ TMS)δ:17314 (s) ,7617 (d) ,7311 (d) ,6212
(t) ,5318 (d) ,3619 (t) ,3410 (t) ,3211 (t) ,3010 (nt) ,
2617 ( t ) , 2614 ( t ) , 2310 ( t ) , 1413 ( q ) 。IR νKBrmax
(cm - 1 ) : 3 340 , 3 219 , 2 850 , 1 621 , 1 548 , 1 467 ,
1 131 ,1 066 , 1 023 , 721 cm - 1 。ESI2MS m/ z : 584
[ M + H ] + (1) ; 598 [ M + H ] + (2) ; 612 [ M + H ] +
(3) 。
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四逆散冻干粉化学成分变化的研究
李越峰1 ,严兴科1 ,李廷利2
①
黄玉新2
(甘肃中医学院 ,甘肃 兰州 　730000 ; 21 黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 　150040)
摘 　要 :目的 　采用 RP2HPLC 法分析四逆散冻干粉的化学成分变化 ,为其工艺控制和配伍规律提供可靠依据。方
法 　采用高效液相色谱法 ,色谱条件 : Kromasil C18柱 (250 mm ×416 mm ,5μm) ,体积流量 110 mL/ min ,柱温 28
℃,流动相 A 为乙腈 ;B 为磷酸水 (p H = 3) ,在检测波长为 210 nm 和 240 nm 条件下 ,构建四逆散冻干粉、缺味四逆
散及单味药冻干粉的 HPLC 色谱图 ,分析其化学成分的变化。结果 　四逆散冻干粉 240 nm 波长下高效液相色谱
图 21 个成分峰中 ,确认了有 2 个组分来自柴胡 ,有 3 个组分来自白芍 ,有 10 个组分来自枳实 ,有 5 个组分来自甘
草 ,1 个组分为新物质。210 nm 波长下高效液相色谱图 24 个成分峰中 ,确认了有 1 个组分来自柴胡 ,有 4 个组分
来自白芍 ,有 14 个组分来自枳实 ,有 5 个组分来自甘草。结论 　本方法稳定可控 ,可用于四逆散冻干粉指纹图谱
测定 ,可全面地反映其化学成分变化。
关键词 :四逆散冻干粉 ;指纹图谱 ;化学成分变化
中图分类号 :R28411 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 - 2670 (2010) 06 - 0854 - 06
·458· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
①收稿日期 :2010201221　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (C03050205)
作者简介 :李越峰 (1975 —) ,女 ,博士 ,工程师 ,研究方向是中药及复方有效成分的研究。　Tel :136193493643 通讯作者　李廷利　Tel : (0451) 82196294 　E2mail :lyfyxk @1261com