全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 12 期 2011 年 12 月

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人参芦头多糖的初步研究
刘 斌 1，陈琴鸣 1 *，陈卫平 1，刘根才 2，戴德雄 2
1. 丽水市食品药品检验所，浙江 丽水 323000
2. 浙江维康药业有限公司，浙江 丽水 323000
摘 要：目的 探讨人参芦头多糖的组成与质量分数及其相对分子质量分布。方法 采用紫外光谱扫描法分析人参芦头多糖
的质量分数，采用 TLC 法分析其单糖组成，采用 HPLC-HPSEC 法测定多糖相对分子质量的分布，用硫酸-咔唑法测定多糖
的量。结果 紫外光谱扫描未发现在 260 和 280 nm 附近有特征吸收，经 TLC 分析，芦头多糖水解后的单糖成分为葡萄糖、
阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖及葡萄糖醛酸，多糖相对分子质量分布为 1×103～1×106，提取的人参芦头粗多糖含多糖按半乳
糖醛酸计为 12.2%（RSD＝0.6%，n＝6）。结论 经提取分离纯化得到的人参芦头多糖中蛋白质及核酸等杂质较少，不影响
后续的多糖相对分子质量分布的测定，采用硫酸-咔唑法定量测定较好。
关键词：人参；多糖；HPLC-HPSEC 法；相对分子质量分布；硫酸-咔唑法
中图分类号：R284.18 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)12 - 2422 - 02
Analysis on polysaccharide in Ginseng Radix et Rhizoma
LIU Bin1, CHEN Qin-ming1, CHEN Wei-ping1, LIU Gen-cai2, DAI De-xiong2
1. Lishui Institute for Food and Drug Control, Lishui 323000, China
2. Zhejiang Welcome Pharmaceutical Co., Ltd., Lishui 323000, China
Key words: Ginseng Radix et Rhizoma; polysaccharide; HPLC-HPSEC method; relative molecular weight distribution;sulfuric acid
carbazole method

人参多糖具有抗肿瘤、增强免疫、抗衰老等多
种功能；人参在临床上用于保健、抗肿瘤和治疗慢
性肝炎[1]。芦头是人参的入药部位，但是很长时间
内人们仅将芦头作为催吐药，目前关于人参多糖的
研究报道比较多[2]，而对人参芦头多糖的研究较少。
本实验开展了人参芦头多糖的提取、分离纯化和组
成与定量及相对分子质量分布的研究工作。
1 仪器与材料
Agilent 1100 型高效液相色谱仪（美国 Agilent
公司）；2000 ES 型蒸发光散射检测器（Alltech 公
司）；TU—1901 紫外可见分光光度计（北京普析通
用）；CP225D 型电子天平（赛多利斯天平公司），
RE—52AA 型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），
TDL—40C 型离心机（上海安亭科技有限公司），
Shodex Ohpak SB—802/803/804 色谱柱（日本昭和
电工），GPC 分析软件。
葡聚糖对照品及鼠李糖（Rha）、阿拉伯糖
（Ara）、木糖（Xyl）、甘露糖（Man）、半乳糖（Gal）、
葡萄糖（Glu）、葡萄糖醛酸（GluA）单糖对照品由
Sigma 公司提供，质量分数≥99.0%；水为双蒸水；其
他试剂均为分析纯；人参芦头由浙江维康药业公司
提供，经丽水市食品药品检验所李水福主任中药师
鉴定。
2 方法与结果
2.1 人参芦头多糖的制备
称取芦头 30 g，粉碎，加水 300 mL 于热水浴
上提取 3 次，每次 3 h，合并提取液，以 3 500 r/min
离心 10 min，取上清液加入 30% H2O2 溶液 60 mL，
于 50 ℃水浴中保温 3 h，至溶液变为淡黄色半透明
溶液，于水浴中边搅拌边缓缓加入等体积 10%三氯
醋酸，置冰箱内过夜，3 500 r/min 离心 6 min，取上
清液于旋转蒸发仪上浓缩至约 50 mL，缓缓加入 5
倍体积的无水乙醇，置冰箱过夜，经 4 号砂芯漏斗
滤过，沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤 3 次，真空

收稿日期：2011-04-12
基金项目：浙江省分析测试科技计划研究项目（2008F70063）
作者简介：刘 斌（1984—）, 男，药师，从事药品质量检验与研究。
*通讯作者 陈琴鸣 E-mail: cqm60224@ 126.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 12 期 2011 年 12 月

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干燥 5 h，得人参芦头多糖。
2.2 人参芦头多糖的定性分析
2.2.1 紫外分析 紫外光谱扫描法，在 200～400
nm 波长处扫描，在 280 和 260 nm 波长处没有特征
吸收表明不含有蛋白质和核酸[4]。取人参芦头多糖
提取物适量，加水制成 1 mg/mL 的溶液，进行紫外
扫描，280 及 260 nm 附近未发现特征吸收峰。
2.2.2 人参芦头多糖中单糖组成的 TLC 鉴别
（1）对照品及供试品溶液的制备：精密称取
Rha、Ara、Xyl、Man、Gal、Glu、GluA 等对照品
各 25 mg 加水制成约 0.1 mg/mL 的对照品溶液。另
精密称取人参芦头多糖各 10 mg 分别置 2 支安瓿
中，各加入 2 mol/L 的 H2SO4 2 mL 溶解后封管，于
105 ℃条件下水解 8 h，切开封管，用 BaCO3 中和
水解液，4 000 r/min 离心，上清液吹氮浓缩一倍得
组分的完全酸水解溶液。
（2）显色剂的配制及显色结果：A 为：0.015
mol/L 高碘酸钠溶液（加热溶解），B 为：0.1 mol/L
联苯胺的 50%乙醇溶液 10 mL，加 0.2 mol/L 盐酸
1 mL，加丙酮 2 mL（避光放置）。将薄层板先以试
剂 A 喷雾至略显润湿后，置于 35 ℃烘箱中氧化 6～
8 min 后再用试剂 B 喷雾，此时背景呈蓝色，斑点
白色。经多次点样、显色后，检识到 Glu、Ara、Rha、
Gal 及 GluA。
2.2.3 人参芦头多糖中单糖组成的相对分子质量
分布[3]
（1）色谱条件 将 Shodex Ohpak SB-804/803
HQ 色谱柱串联使用，以纯水作为流动相，体积流
量 0.4 mL/min，采用蒸发光散射检测器（ELSD），
漂移管温度 50 ℃，气体体积流量（N2）2.8 L/min，
撞击器：开。
（2）标准曲线的制备 精密称取相对分子质量
分别为 180、2 500、7 100、21 400、84 400、133 800
的葡聚糖对照品，加水制成 5 mg/mL 的溶液，分别
用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，各取 30 μL 注入色谱仪，
记录色谱图，采用 GPC 软件，以洗脱体积（Y）和
相对分子质量（X）进行拟合得到标准曲线：Y＝
－0.293 4 X＋9.973 9，r＝0.991 1。
（3）供试品溶液的制备及其测定 取人参芦头
多糖，加水制成 1 mg/mL 的溶液，进样，测定保留
时间，将保留时间与体积流量的乘积，即保留体积
代入标准曲线计算待测多糖的相对分子质量，结
果表明其主要含有相对分子质量为 93 000（n＝6，
RSD＝3.2%）、35 000（n＝6，RSD＝3.9%）、3 500
（n＝6，RSD＝3.2%）、1 550（n＝6，RSD＝1.2%）
的单糖以及少量相对分子质量约为 170 的单糖。
2.3 芦头多糖的测定[4]
2.3.1 对照品溶液与供试品溶液的制备 精密称取
于 60 ℃减压干燥至恒定质量的半乳糖醛酸对照
品 100.3 mg，置 100 mL 量瓶中加水溶解并稀释至
刻度，摇匀。精密量取上述溶液 10 mL，置 100 mL
量瓶中，加水至刻度，摇匀制成 1 mg/mL 的溶液作
为对照品溶液。
精密称取人参芦头多糖 100.4 mg，置 100 mL
量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀制成 1 mg/mL
的溶液作为供试品溶液。
2.3.2 多糖测定 精密量取上述对照品溶液及供试
品溶液各 1 mL 置比色管中，分别精密加水 1 mL 与
0.25 mol/L 硼砂硫酸溶液 6 mL，置水浴加热 30 min，
放冷，再分别精密加入 0.125%咔唑无水乙醇溶液
0.4 mL，置水浴加热 10 min，放冷至室温，分光光
度法在 530 nm 处测定吸光度。结果表明，人参芦
头含芦头多糖按粗品以半乳糖醛酸计为 12.2%（n＝
6，RSD＝0.6%）。
3 结论
通过提取制备的人参芦头多糖，经 HPSEC 分
析，其中含有 3 种主要的多糖成分，相对分子质量
分别为 930 000、350 000 和 1 550。由硫酸-咔唑法
测得其多糖的量按半乳糖醛酸计为 12.2%，水解后
测得其主要由葡萄糖和葡萄糖醛酸组成，其单糖组
成摩尔比及分离纯化与初级结构确定等方面，还需
进一步研究。
参考文献
[1] 季宇彬. 中药多糖的化学与药理 [M]. 北京: 人民卫生
出版社, 2005.
[2] 张 彬, 林瑞超, 冯 芳. 人参多糖的研究概况 [J].
中国药事, .2004 ,18(9): 566-569.
[3] 中国药品生物制品检定所. 中国药品检验标准操作规
程 [M]. 北京: 中国医药科技出版社, 2005.
[4] 国家食品药品监督管理局试行标准. [S]. 2002.