全 文 ：EFG<测定藏药麻花艽地上部位 种有效
成分的含量
聂颖杰! 林鹏程!
青海民族大学 化学与生命科学学院! 青海 西宁 (#
摘要#!目的$建立藏药麻花艽地上部位 种有效成分的含量测定方法) 方法#采用E6AMCUNSHX8柱!&d# 00i+$ 00$0$流动相以甲醇!45$d$+e磷酸水溶液!R梯度洗脱) $g$ 0N2$以 +$e4洗脱 $$g)$ 0N2$从 +$e4线性变化至 $e4) 流速 0G*0N2f$柱温 ) h$检测波长 +& 20) 结果# 种有效成分均达到基线分离$各成分相关系数及范围分别 是落干酸/j$d*** *$$ d)#& g+d(

D+獐牙菜苦苷/j$d*** *$$d+% gd# D+龙胆苦苷/j$d*** * $$d#& g)d#( D+獐牙菜 苷/j$d*** *$$ d$# # g$d)*&

D+异荭草素/j$d*** *$$d$(* * g$d)* D) 种有效成分中落干酸和龙胆苦苷远较其他 ) 种成分的含量高$达到总含量的 #$e以上) 结论#方法快速%灵敏%准确$可靠$重复性好$可用于藏药麻花艽地上部位药材的
质量控制)
关键词#!麻花艽+落干酸+獐芽菜苦苷+龙胆苦苷+獐芽菜苷+异荭草素+EFG<
稿件编号#!+ $$$+++$$
基金项目#!青海省重点科技攻关项目!+ $$#5;5& 通信作者#!!林鹏程$PMS#)(*%+&+#)$ QB7# !$*%(($&#&*$ I5 0BNS#b?SA.3+#d./0 作者简介#!聂颖杰$硕士研究生$PMS#)(*%&&&($&$ I50BNS#2NM65 N2D1NM3+#d./0 !!麻花秦艽L9),-7)7 ?,/7+-)97 9B7N0d为中国药 典(+$$ 年版收载的秦艽药材植物来源之一$以根 入药$祛风湿$清湿热$止痹痛$用于风湿痹痛$筋脉
拘挛$骨节酸痛等症./$是青海省大宗道地药材)
藏医以全草入药$用于治疗风湿性关节炎%肺病发 烧%黄疸%皮疹%水肿及二便不通等病症.+/ ) 笔者在 前期研究中从麻花艽地上部位分离得到落干酸%獐 牙菜苦苷%龙胆苦苷%獐牙菜苷等环烯醚萜苷类化合 物及黄酮类化合物异荭草素) 现代药理学研究表 明$落干酸具有一定的抗炎作用.)/ $獐牙菜苦苷具 有提高皮肤机能%促进毛发生长%抑制中枢神经%镇 痛抗炎等作用.&/$龙胆苦苷具有促进胃液分泌%抗
原虫和抗炎等作用.&/ $獐牙菜苷具有抗肝细胞损伤 作用./$异荭草苷具有明显的保肝活性.#/ ) 上述物
质与藏医所用功能相符$是麻花秦艽中主要有效成 分) 纪兰菊等采用药典中热回流提取法测定了藏药 麻花秦艽中苦苷类成分落干酸及龙胆苦苷的含量并 进行品质评价.%/$林鹏程等.(/及汪荣斌等.*/比较了
不同提取方法对麻花秦艽中 + 种苦苷类成分含量的
影响$超声法相对于索氏法及回流法具有提取快速% 完全%简便%次数少等特点) 为进一步深入研究麻花 艽地上部位$作者首次建立了超声提取%EFG<同时
测定麻花艽地上部位上述 种有效成分含量的分析
方法$具有快速%灵敏%准确$可靠$重复性好等特点) 利用该方法对青藏高原 个不同居群麻花艽地上 部分有效成分的含量进行了测定$为麻花艽地上部
位品质评价及开发利用提供了科学依据)
!仪器与试药
美国4DNSM2@ $$高效液相色谱仪!手动进样 器%在线脱气机%高压二元梯度泵%柱温箱%X4X检 测器$4DNSM2@$$ 色谱工作站+ c^ )+ $$\ 型超声 波清洗器!昆山市超声仪器有限公司+Q]$+ 微型 植物试样粉碎机!天津市泰斯特仪器有限公司+ 9I+)8电子天平!赛多利斯仪器有限公司) 落干酸%獐牙菜苦苷%龙胆苦苷%獐牙菜苷和 异荭草素对照品均自行分离得到$波谱数据与文 献 .$5&/报道一致$经归一化法检测$纯度均大于 *(e+甲醇为色谱醇!山东禹王实业有限公司禹 城化工厂 $其余试剂均为山东禹王分析纯试剂+ 水为哇哈哈纯净水+麻花艽于 +$$ ( 年 ( 月 !花
期采自青海%西藏等地$经青海民族大学化学与 生命科学学院林鹏程教授鉴定为龙胆科龙胆属 麻花秦艽 Ld?,/7+-)97$样品阴干$粉碎至 #$ 目$在青海民族大学实验中心标本室冷藏保存$样品
*#%+*
第 ) 卷第 $期 +$$年 月 !!!!!! ! ! ! ! ! !!!! ! ! ! ! [/Sd)$ :UULM!$9B6$ + $$按采集地点依次编号) (!方法与结果 (_!色谱条件!E6AMCUNSHX8 色谱柱!&d# 00i +$ 00$ 0+流动相甲醇!45$d$+e磷酸水溶 液!R$梯度洗脱) 在 $ g$ 0N2$以 +$e4等度洗 脱$$ g)$0N2$从 +$e4线性变化至$e4) 流速
0G*0N2
f
$检测波长 +& 20$柱温 ) h) 该色
谱条件下$待测成分均被洗脱且达到基线分离$各待
测组分与相邻组分分离度5

d$理论塔板数按龙 胆苦苷峰计算不低于 )$ $$$见图 ) d落干酸++d獐芽菜苦苷+)d龙胆苦苷+&d獐芽菜苷+d异荭草素) 图 !对照品及样品色谱图 (_(!对照品溶液的制备!精密称取对照品落干酸 %d+( 0D$獐牙菜苦苷 d 0D$龙胆苦苷 +d) 0D$ 獐牙菜苷 d) 0D$异荭草素 d($ 0D$加甲醇溶解 并分别定容至 $ 0G的量瓶中$配制成储备液) 使 用时按比例稀释$配制成质量浓度分别为落干酸为 )#d& 0D*G f $獐牙菜苦苷 +%d 0D*Gf$龙胆苦 苷 #d& 0D*Gf$獐牙菜苷 #d# 0D*Gf$异荭草 素 (d** 0D*Gf的混合对照品溶液) (_&!供试品溶液的制备!精密称取麻花艽地上部 位!过 #$ 目筛$d D$准确加入 $ 0G的甲醇$室温 下超声提取 )$ 0N2$过滤$以 0G的甲醇洗涤滤渣) 重复提取 次$合并滤液$定容至 + 0G$用 $d& 0 微孔滤膜过滤$备用) (_Q!线性关系试验!精密吸取混合对照品溶液$$ + $$)$$ &#$G依次进样$按上述色谱条件
测定峰面积$以峰面积积分值为纵坐标!3$对照品
进样量!

D为横坐标!4$绘制标准曲线$回归方
程$见表 ) 表 !回归方程和线性范围 测定成分 回归方程 线性范围= D 落干酸!! 3j%)d&4f++$d)#& g+d(
獐牙菜苦苷 3j*d#4f&dd+% gd#
龙胆苦苷! 3j $$+4k)&d& $d#& g)d#( 獐牙菜苷! 3j &%%4f* $d$# # g$d)*& 异荭草素! 3j %)$4f*) $d$(* * g$d)* !!注#/j$d*** *) (_$!精密度试验!精密吸取混合对照品溶液 $ G$连续进样 # 次$在上述色谱条件下测定各对照 品峰面积 # 次$峰面积积分值的>8X分别为落干酸 $d+e$獐芽菜苦苷 $d(*e$龙胆苦苷 $d)e$獐牙 菜苷 $d#(e$异荭草素 $de) (_Y!重复性试验!精密称取麻花艽地上部位 # 份$ 每份 $d D$按 (_& 项下操作制备供试液$进样 $ G$测定各色谱峰峰面积$峰面积 >8X分别为落干 酸 d+e$獐牙菜苦苷 d#e$龙胆苦苷 d#e$獐牙 菜苷 d*e$异荭草素 d&e$重复性良好) (_%!稳定性试验!精密吸取混合对照品溶液$分别 在$$ +$&$($+ ?进样$在上述色谱条件下测定$种 对照品在 + ? 内峰面积积分值的 >8X分别为落干 酸$d)(e$獐芽菜苦苷$d((e$龙胆苦苷$d&e$獐 牙菜苷$d(+e$异荭草素$d&%e$说明混合对照品 溶液在 + ?内稳定性良好) (_`!加样回收率试验!称取同一已知含量的样品 份$每份 $d$ D$精密称定后$每份加入混合对照
品溶液 + 0G$按 (_& 项下操作制备供试液$准确吸
取供试液 $G$进样$在上述色谱条件下测定$计
算回收率$种成分的回收率在 **d%e g$d#e$>8Xnde) (_#!样品测定!按 (_& 项下操作制备供试液$准确
吸取供试液 $G$进样$在上述色谱条件下测定$
用回归方程计算$结果见表 +) *%%+* 第 ) 卷第$ 期
+ $$年 月 !!!!!! ! ! ! ! ! !!!! ! ! ! ! [/Sd)$ :UULM!$ 9B6$ +$$
表 +!青藏高原不同采集点麻花艽中 种效成分质量分数!
#
Mp?$)j e 采集地 落干酸 獐芽菜苦苷 龙胆苦苷 獐芽菜苷 异荭草素 青海祁连 )-)# p$-$+-+& p$-$# %-) p$-& $-#* p$- $$& $-)## p$-$$ #
青海刚察 +-)% p$-$# +-&# p$-$% &-%* p$-$ $-$%% p$-$$+$-*+ p$-$$青海泽库 -*# p$-$-)+ p$-$) )-) p$-$($-+&& p$-$-&#+ p$-$$* 青海泽库 + +-# p$-$( -#* p$-$& &-( p$-# $-&& p$- $$) $-#$) p$-$$ (
青海河南 - p$-$& -$p$-$& -#$ p$-$% $-$ p$-$$&$-+%$p$- $$# 青海河南 + -#) p$-$& +-$ p$-$# -$ p$-$% $-+ p$-$$ % $-)&% p$- $$青海兴海 )-*$ p$-$) )-$+ p$-$ #-$% p$- $-$#+ p$-$$ + $-%## p$-$青海同德 -)( p$-$) - p$-$) &-$# p$-$ $-$&& p$-$-)(* p$-$$青海麦秀林场 +-)) p$-$# )-+ p$-$#-)$ p$-$-$() p$- $$+ $-*$) p$-$+ 西藏林芝 +-## p$-$% )-+ p$-$# #-* p$-& $-$% p$-$$ + $-$& p$-$$* 青海玉树 )-$ p$-$% +-%% p$-$( %-)# p$-*$-$% p$- $$+ $-*+ p$-$+$ 青海囊谦 +-%) p$-$( )-) p$-$% %-) p$-+ $-$* p$-$$ + $-($% p$-$(
青海天峻 )-)$p$-$* +-*# p$-$% %-)# p$- $-$)% p$-$-$p$-$& 青海玛多 )-+ p$-$+-+ p$-$% %-$$p$-% $-++ p$- $$) $-+% p$-$& 青海治多 )-)( p$- +-) p$-$ %-)* p$-* $-)# p$-$$ ) $-#% p$-$# &!讨论 &_!提取方法的确定!对回流%微波%超声等 ) 种 提取方法进行了比较$发现超声提取 )$0N2 较回流 提取 ?的提取效果明显提高$虽微波方法提取效
果也较好$但加热过程中溶剂损耗太大$所以采用超
声提取方法) 作者还对超声提取次数和提取时间进
行了比较$结果发现时间选择 )$ 0N2$提取 + 次$可
提取完全)
&_(!检测波长的确定!紫外光谱图!对照品溶液
分别进样后$利用X4X检测器在 +$$g&$$20扫描 其吸收光谱$各对照品均在 +& 20波长处有较高的
吸收$选择该波长为检测波长) &_&!青藏高原 个不同居群麻花艽地上部位 种 有效成分的含量有较大差异!其中$落干酸%獐芽菜
苦苷%龙胆苦苷的百分含量明显大于獐芽菜苷及异
荭草素的含量) 不同采集地点的麻花艽地上部分五
种成分含量亦有差别$青海玉树%囊谦%天峻%玛多% 祁连%治多所采麻花艽功效成分含量大于其它地区) 麻花艽地上部位龙胆苦苷含量均大于中国药典规定 的 +e的入药要求$是潜在的新药用部位+不同地区
以及在同一地区不同地点所采摘的麻花艽中的五种
有效成分的含量也有差异$分析可能是受到该地区 海拔%温度%湿度%日照时间长短及其他环境因素影 响$这些因素对麻花艽各成分含量的影响有待进一
步研究)
参考文献#
. /!中国药典d一部.8/d+ $$# *$d . + /!中国科学院西北高原生物研究所d藏药志.9/d西宁#青海 人民出版社$**#*d . ) /!>M.N/9<$ON2MC>9$9B2MY8$M@BSd8@CL.@LCBS./2UNJMCB@N/2U /2 @?MNCNJ/NJUBUB2@N5N2VSB00B@/C6BDM2@U.W/dFSB2@B9MJ$ **&$#$!)#+)+d . & /!孙文基$绳金房d天然活性成分简明手册.9/d北京#中国医 药科技社$**(#)*$+#$)#%d . /!E_>T$ >4HT d`P?MM0ANCN.BSU@LJ6/VAC/@M.@N/2 /VU,MC/5 UNJM@/XB0N2/DBSB.@/UM?MAB@N.N21LC6.W/d临床肝胆病杂志$ *(($ &!)# +%+d . # /!HC?B2 XX$4USB2 9$4K@B6O$M@BSdIlBSLB@N/2 /V?MAB@/AC/@M.5 @NlMMVM.@/VL9),-7)7 %&-J-9/-?MC\U/2 UL\B.L@MBJ0N2NU@CB@N/2 B2J NU/SB@N/2 /VB.@NlMACN2.NASM.W/dGNVM8.N$+$$ )$%+# ++%)d . % /!纪兰菊$马玉花$陈桂琛$等d藏药麻花秦艽中苦苷类成分的
含量测定及品质评价.W/d西北植物学报$+$$&$+&!+#+*+d
. ( /!林鹏程$冶兆辉$卢永昌$等d藏药秦艽%麻花艽中落干酸和 龙胆苦甙的 EFG<法含量测定.W/d中药材$+ $$&$+%!# (*d . * /!汪荣斌$张西玲$赵磊$等d不同提取方法对秦艽 + 种苦苷成 分含量的影响.W/d现代中药研究与实践$+$$ #$+$!##&$d .$/!李玉林$丁晨旭$刘健全$等d红直獐牙菜的苷类成分.W/d中 草药$ + $$+$)) !+ # $&d ./!陈德昌d中药化学对准品工作手册.9/d北京#中国医药科 技出版社$***d%$$ #$d .+/!陈千良$石张燕$涂光忠$等d陕西产秦艽的化学成分研究
.W/d中国中药杂志$+$ $$)$!*#*d .)/!国家医药管理局中草药情报中心 d植物药有效成分手册 .9/d北京#人民卫生出版社$*(##$$ (d
*(%+*
第 ) 卷第 $期 +$$年 月 !!!!!! ! ! ! ! ! !!!! ! ! ! ! [/Sd)$ :UULM!$9B6$ + $$.&/!9BB@//b OP$IS58?BCKB./68 E$4VNVN98$M@BSd1!;5E6JC/765 \M2Y/6SDS6./VSBl/2MUVC/01-,/*&*?A%&%A),>-?.W/dF?6@/.?M0NU5 @C6$**%$&&!#(%d =>A>D+-@,A-?@?II-O>,TA-O>T?@HA-AF>@AH-@,>D-,.J,DA?I<-K>A,@ +>E-T-@>=2),-6)6 3,/6+-)26 KC 0L8/ ;:I N`2D1NM$ G:;FM2D.?M2D ! !1%&9(9%.1>9+-?,/7)< #-.9GA-9)A9?$ W-)(>7-I)-J9/?-,.%/67,-%)7&-,-9?$ 4-U)-)( ($$ $$$ 1>-)7 .3KHAD,TA/!42M,>F5EFG<0M@?/J ,BUJMlMS/AMJ V/C@?MUN0LS@B2M/LUJM@MC0N2B@N/2 /V B.@NlM./2U@N@LM2@U$N2.SLJN2DS/DB25 N.B.NJ$ U,MC@NB0BCN2$DM2@N/AN.C/UNJM$U,MC/UNJM$NU//CNM2@N2 N2 BMCNBSABC@/VL9),-7)7 ?,/7+-)97d42BS6UNU,BUB.?NMlMJ /2 BE6AMCUNS HX8 B2BS6@N.BS./SL02 !&d# 00i+$ 00$ 0 MSL@MJ ,N@? 0M@?B2/SB2J ,B@MC./2@BN2N2D$d$+e A?/UA?/CN.B.NJ N2 DCBJNM2@MSL5 @N/2dP?MVS/,CB@M,BU 0G*0N2 f $ @?M./SL02 @M0AMCB@LCM,BUUM@B@) h B2J JM@M.@N/2 ,BlMSM2D@? ,BUUM@B@+& 20dP?MCM5 ULS@UU?/,MJ @?B@ B.@NlM./0A/2M2@U,MCMUMABCB@MJ ,MSB2J U?/,MJ D//J SN2MBCN@6dP?M./CMSB@N/2 ./MVN.N2@UB2J ./2.M2@CB@N/2 CB25 DMU/V@?M.BSN\CB@N/2 .LClMU,MCMBUV/S/,# /j$d*** *$$ d)#&5+d(

DV/CS/DB2N.B.NJ-/j$d*** *$ $d+%5d# DV/CU,MC@NB0B5 CN2-/j$d*** *d#&5)d#(

DV/CDM2@N/AN.C/UNJM-/j$d*** *$ $d$# #5$d)*& DV/CU,MC/UNJM-/j$d*** * $$d$(* *5$d)* D V/CNU//CNM2@N2dP?M./2@M2@U/VS/DB2N.B.NJ B2J DM2@N/AN.C/UNJMVBCM7.MMJ @?B@/V@?M/@?MC) B.@NlM./0A/2M2@U$ B2J 0BJMLA #$e N2 @?M@/@BS./2@M2@UdP?MJMlMS/AMJ 0M@?/J ,BUAC/lMJ @/\MCBANJ$ UM2UN@NlM$ B..LCB@M$ .CMJN\SMB2J CMAMB@B\SMd:@.B2 \MBAASNMJ @/ bLBSN@6./2@C/S/VBMCNBSABC@/VPN\M@B2 0MJN.N2ML9),-7)7 ?,/7+-)97 d .a>C V?DEH/!L9),-7)7 ?,/7+-)97+ BMCNBSABC@S/DB2N.B.NJ + U,MC@NB0BCN2+ DM2@N/AN.C/UNJM+ U,MC/UNJM+ NU//CNM2@N2+ EFG< E?-# bQ(Y`NT\T++(( 责任编辑!王亚君# **%+* 第 ) 卷第 $ 期 +$$ 年 月
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