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Chemical constituents from fruits of Ligustrum lucidum

女贞子的化学成分研究



全 文 :女贞子的化学成分研究
黄晓君1,殷志琦1,叶文才1,2,沈文斌3
(1中国药科大学 天然药物化学教研室,江苏 南京 210009;
2暨南大学 中药及天然药物研究所,广东 广州 510632;
3中国药科大学 分析测试中心,江苏 南京 210009)
[摘要] 目的:研究女贞Ligustrumlucidum的干燥成熟果实的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱,SephadexLH20凝胶柱
色谱和ODS柱色谱等色谱方法进行分离纯化,并根据 NMR,MS等波谱方法和理化性质鉴定其化学结构。结果:从女贞子中
分离得到20个化合物,其中三萜类化合物15个,分别鉴定为齐墩果酸 (1),2α羟基齐墩果酸 (2),乙酰齐墩果酸 (3),羽扇
豆醇 (4),白桦脂醇(5),达玛烯二醇(6),3β乙酰氧基20,25环氧24α羟基达玛烷 (7),20,25环氧3β,24α二羟基达玛烷
(8),3β乙酰氧基达玛烯二醇 (9),3β,20S二羟基24R过氧羟基25烯达玛烷 (10),fouquierol(11),oliganthasA(12),达玛
烯二醇3O棕榈酸酯 (13),拟人参皂苷元 I3O棕榈酸酯 (14),3β,20S二羟基25过氧羟基23E烯达玛烷 (15);苯乙醇类
化合物5个,分别为毛蕊花苷 (16),北升麻宁 (17),2(3,4二羟基苯基)乙基OβD吡喃葡萄糖苷 (18),osmanthusideH
(19),3,4二羟基苯基乙醇 (20)。结论:化合物4,16,17,19为首次从本植物中分离得到,化合物12~15为首次从本属植物
中分离得到。
[关键词] 女贞子;化学成分;三萜;苯乙醇苷
[收稿日期] 20090602
[基金项目] 国家杰出青年科学基金(30625039)
[通信作者] 殷志琦,Tel:(025)85391099,Email:chyzq2005@
126.com;叶文才,Tel:(025)85322132,Email:chywc@ ya
hoocomcn
  女贞子是木犀科植物女贞 Ligustrumlucidum
Ait的干燥成熟果实,为我国传统中药,主要分布于
湖南、四川、江苏和浙江等地。女贞子自古常用做滋
补药材,具有滋补肝肾,明目乌发功效,用于眩晕耳
鸣、腰膝酸软、须发早白等。据国内外的文献报
道[19],目前从女贞子中分离得到的化合物主要为三
萜类、环烯醚萜苷类以及苯乙醇苷类。近年来的研
究发现女贞子具有多种生理活性,特别是增强免疫
活性作用[10]受到人们的广泛关注,因此对女贞子进
行较为系统的化学成分研究,探索其化学结构与生
理活性之间的关系,具有重要学术价值和应用前景。
本文对女贞子进行了系统的化学成分研究,从其石
油醚和正丁醇部分分离得到20个化合物。
1 仪器与试药
X4熔点测定仪(温度计未校正);NicoletImpact410
型红外光谱仪(KBr压片);BrukerAV500、AV400
和AV300型核磁共振仪;Agilent1100SeriesLC/
MSDTrap质谱仪。柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂)
和薄层色谱硅胶 GF254(烟台化工研究所);Sepha
dexLH20(Pharmacia公司),ODS(C18)(德国
Merck公司)。所用试剂均为分析纯。
女贞子于2006年5月在安徽亳州购得,经中国
药科大学秦民坚教授鉴定为 Llucidum,标本
(NO20060517)保存于中国药科大学中药学院天然
药化教研室。
2 提取与分离
干燥的女贞子果实 40kg,粉碎成粗粉,80% 乙
醇加热回流提取 3次,每次 2h,减压回收溶剂得浸
膏 4500g。加水混悬后依次用石油醚、醋酸乙酯、
水饱和正丁醇萃取,分别得到石油醚部位(194g)、
醋酸乙酯部位(2400g)、正丁醇部位(1200g)。石
油醚部位(194g)经硅胶柱色谱分离,石油醚醋酸
乙酯(100∶1~50∶50)梯度洗脱得 Fr1~Fr3;
Fr1经 硅 胶 柱 色 谱 分 离,石 油 醚醋 酸 乙 酯
(100∶1~100∶10)梯度洗脱,再经 SephadexLH20
柱色谱纯化,得化合物4(300mg),6(200mg),10
(10mg)。Fr2经反复硅胶色谱分离和 Sephadex
LH20柱色谱纯化,得化合物 3(200mg),7(50
mg),8(20mg),12(50mg),13(21mg),14(12
mg),15(22mg)。Fr3经反复硅胶色谱分离和
SephadexLH20柱色谱纯化,得化合物5(100mg),
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9(18mg),11(20mg)。正丁醇部位(1200g)经硅
胶柱色谱分离,以氯仿甲醇(9∶1~1∶1)梯度洗脱的
Fr1~Fr3;Fr1经硅胶柱色谱分离,氯仿甲醇
(100∶0~9∶1)梯度洗脱,再经硅胶柱色谱分离,石
油醚醋酸乙酯丙酮(8∶1∶1)分离,得化合物 1(5
g),2(10mg),20(10mg);Fr2经 ODS柱色谱,甲
醇水(15%90%)梯度洗脱,再经 SephadexLH20
柱色谱,70%甲醇水纯化,得化合物16(10mg),17
(10mg),18(10mg),19(10mg)。
3结构鉴定
化合物 4 无色针晶(氯仿),mp202~204
℃。EIMSm/z427[M+H]+。1HNMR(CDCl3,
500MHz)δ:076,079,083,095,097,103,
168(each3H,s,Me23,24,25,26,27,28,30),
318(1H,dd,J=53,108Hz,H3),457(1H,
brs,H29β),468(1H,d,J=19Hz,H29α)。13C
NMR(CDCl3,125MHz)数据见表1。以上数据与
文献[4]报道基本一致,故鉴定化合物4为羽扇豆
醇(lupeol)。
化合物 12 无色油状物(氯仿),EIMSm/z
721[M+Na]+。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:
078×2,080,081,089,105,106,114(each
3H,s,Me18,19,21,26,27,28,29,30),082(3H,t,
J=69Hz,H16′),366(1H,t,J=74Hz,H24),
441(1H,dd,J=56,106Hz,H3)。13CNMR
(CDCl3,100MHz)数据见表 1。以上数据与文献
[11]报道基本一致,故鉴定该化合物12为 oligan
thasA。
化合物 13 无色油状物(氯仿),EIMSm/z
705[M+Na]+。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:
084×2,086×2,095,113,162,178(each3H,
s,Me18,19,21,26,27,28,29,30),086(3H,t,J=
69Hz,H16′),447(1H,dd,J=57,105Hz,H
3),511(1H,t,J=70Hz,H24)。13CNMR
(CDCl3,100MHz)数据见表 1。以上数据与文献
[1213]报道基本一致,故鉴定化合物13为达玛烯
二醇 3O棕榈酸酯 (dammarenediolI3Opalmi
tate)。
化合物 14 无色油状物(甲醇),EIMSm/z
721[M+Na]+。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:
082×2,085×2,095,109,112,118(each3H,
s,Me18,19,21,26,27,28,29,30),085(3H,t,J=
70Hz,H16′),361(1H,dd,J=55,90Hz,H
24),445(1H,dd,J=57,106Hz,H3)。13CNMR
(CDCl3,100MHz)数据见表 1。以上数据与文献
[13]报道基本一致,故鉴定化合物14为拟人参皂
苷元 I3O棕榈酸酯(ocotilolI3Opalmitate)。
化合物15 白色粉末(甲醇),mp78~80℃。
EIMSm/z509[M+Na]+。1HNMR(CDCl3,400
MHz)δ:077,084,086,095,097,113,133,
135(each3H,s,Me18,19,21,26,27,28,29,30),
319(1H,dd,J=50,112Hz,H3),560(1H,d,
J=119Hz,H24),576(1H,m),807(1H,brs,
OOH)。13CNMR(CDCl3,100MHz)数据见表1。以
上数据与文献[14]报道基本一致,故鉴定化合物15
为 3β,20S二羟基25过氧羟基23E烯达玛烷
[(E)25hydroperoxydammar23ene3β,20diol]。
化合物 16 无色针晶(甲醇),mp138~140
℃。EIMS m/z647 [M + Na]+。1 HNMR
(DMSOd6,500MHz)δ:745(1H,d,J=158Hz,
H7),702(1H,d,J=19Hz,H2),697(1H,dd,
J=19,83Hz,H6),676(1H,d,J=83Hz,H
5),663(1H,d,J=20Hz,H1′),662(1H,d,J=
80Hz,H6′),650(1H,dd,J=20,80Hz,H
5′),619(1H,d,J=158Hz,H8),504(1H,s,H
R1),472(1H,t,J=98Hz,HG4),435(1H,d,
J=78Hz,HG1),389(1H,q,J=80Hz,H
8a),371(1H,t,J=93Hz,HG3),368(1H,m,
HG6a),360(1H,q,J=80Hz,H8b),345
(2H,m,HG5,HG6b),336370(3H,m,HR
2,3,5),323(1H,t,J=83Hz,HG2),312(1H,
t,J=93Hz,HR4),270(2H,m,H7),097
(3H,d,J=62Hz,HR6)。13CNMR(DMSOd6,
125MHz)δ:1656(C9),1485(C4),1455(C
3),1455(C7),1449(C3′),1435(C4′),
1291(C1′),1254(C1),1214(C6),1195
(C6′),1163(C2′),1157(C5′),1154(C8),
1147(C2),1135(C5),1023(CG1),1012
(CR1),790(CG3),745(CG2),745(CG
5),717(CR4),705(CR2),704(CR3),
702(C8′),691(CG4),687(CR5),607
(CG6),350(C7′),181(CR6)。以上数据与
文献[15]报道基本一致,故鉴定化合物16为毛蕊
花苷 (verbascoside)。
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化合物17 白色粉末(甲醇),mp86~90℃。
EIMSm/z339[M+Na]+。1HNMR(D2O,400MHz)
δ:706(1H,d,J=15Hz,H2),775(2H,m,H
5,6),474(1H,d,J=78Hz,H1′),370(2H,t,
J=70Hz,H8),270(2H,t,J=70Hz,H7);
13CNMR(D2O,100MHz)δ:1468(C4),1466
(C3),1321(C1),1252(C6),1197(C2),
1171(C5),1044(C1′),783(C3′),777(C
5′),749(C2′),714(C4′),643(C8),625
(C6′),365(C7)。以上数据与文献[16]报道基
本一致,故鉴定化合物 17为北升麻宁(cimidahuri
nine)。
化合物19 黄色粉末(甲醇)。EIMSm/z431
[MH]。1HNMR(CD3OD,400MHz)δ:705(2H,
d,J=85Hz,H2,6),669(2H,d,J=85Hz,H3,
5),500(1H,d,J=24Hz,H1″),426(1H,d,J=
78Hz,H1′),399(1H,m,H8a),394(1H,d,
J=96Hz,H4″),388(1H,d,J=24Hz,H2″),
374(1H,d,J=96Hz,H4″),3,68(1H,m,H
8b),355(2H,s,H5″),282(2H,t,J=68Hz,H
7)。13CNMR(CD3OD,100MHz)δ:1567(C4),
1309(C26),1308(C1),1164(C3,5),
1110(C1″),104,4(C1′),805(C3″),780(C
3′),777(C2″),769(C5′),751(C2′),750
(C4″),722(C8),717(C4′),687(C6′),
656(C5″),364(C7)。以上数据与文献[17]报
道基本一致,故鉴定化合物19为osmanthusideH。
化合物1与标准品对照,在 HPTLC中的 Rf值
及显色行为一致,且混合熔点不下降,鉴定为齐墩果
酸;化合物2,3,5~11,18和20的波谱数据与文献
对照,结构分别确定为2α羟基齐墩果酸[2]、乙酰
齐墩果酸[3]、白桦脂醇[5]、达玛烯二醇[6]、3β乙
酰氧基20,25环氧24α羟基达玛烷[7]、20,25环
氧3β,24α二羟基达玛烷[8]、3β乙酰氧基达玛烯
二醇[13]、3β,20S二羟基24R过氧羟基24烯达
玛烷[18]、fouquierol[18]、2(3,4二羟基苯基)乙
基OβD吡喃葡萄糖苷[19]、3,4二羟基苯基乙
醇[20]。
表1 化合物4,12~15的13CNMR数据 (4inCD3OD,12~15inCDCl3)
No 4 12 13 14 15 No 4 12 13 14 15
1 38.9 38.7 38.7 38.7 38.9 20 150.9 86.3 75.3 86.4 75.1
2 27.8 23.7 23.7 23.7 27.5 21 30.0 23.5 25.4 27.1 25.6
3 79.1 80.5 80.5 80.5 79.0 22 40.1 35.7 40.5 34.8 43.3
4 39.0 37.9 37.9 37.9 39.0 23 28.1 26.1 22.5 27.0 127.1
5 55.5 55.9 55.9 55.9 55.8 24 15.4 83.3 124.7 86.2 137.4
6 18.4 18.1 18.1 18.1 18.2 25 16.1 71.3 131.5 70.1 82.0
7 34.5 35.2 35.1 35.2 35.2 26 15.9 24.2 25.7 24.0 24.1
8 41.0 40.4 40.4 40.3 40.4 27 14.6 27.3 17.7 27.7 24.5
9 50.6 50.7 50.5 50.7 50.6 28 18.1 16.2 28.0 16.2 28.0
10 37.3 37.1 37.0 37.0 37.1 29 109.3 27.9 16.5 27.9 15.3
11 21.1 21.5 21.5 21.8 21.5 30 19.4 16.4 16.2 16.3 15.5
12 25.4 27.3 27.5 26.9 24.9 1′ 173.6 173.6 173.5
13 38.3 42.9 42.2 42.8 42.5 2′ 34.8 34.8 34.8
14 43.0 50.0 50.3 50.0 50.3 3′ 25.1 25.1 25.1
15 27.4 31.4 31.2 31.8 31.1 4′13′ 29.129.729.129.729.029.7
16 35.7 25.7 24.8 25.8 27.4 14′ 31.9 31.9 31.9
17 43.1 49.5 49.8 49.8 50.3 15′ 22.6 22.7 22.6
18 48.5 15.4 15.5 15.4 16.4 16′ 14.1 14.1 14.1
19 48.1 16.5 16.4 16.5 16.2
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ChemicalconstituentsfromfruitsofLigustrumlucidum
HUANGXiaojun1,YINZhiqi1,YEWencai1,2,SHENWenbin3
(1.DepartmentofPhytochemistry,ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanjing210009,China;
2.InstituteofTraditionalChineseMedicineandNaturalProducts,JinanUniversity,Guangzhou510632,China;
3.CenterofInstrumentalAnalysis,ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanjing210009,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsfromthefruitsofLigustrumlucidum.Method:Thechemicalcon
stituentsfromtheethanolextractofL.lucidumwereisolatedandpurifiedbysilicagel,SephadexLH20,ODScolumnchromatographic
methods.Theirstructureswereidentifiedonthebasisofspectroscopicdataandphysicochemicalproperties.Result:Twentycom
poundswereisolatedandidentifiedasoleanolicacid(1),crategolicacid(2),acetyloleanolicacid(3),lupeol(4),betulin(5),
dammarenediolI(6),3βacetyl20,25epoxydammarane24αol(7),25epoxydammarane3β,24α# diol(8),(dammar24
ene3βacetyl20Sol)(9),20S,24Rdammarane25ene24hydroperoxy3β,20diol(10),fouquierol(11),oliganthasA(12),
dammarenediolI3Opalmitate(13),ocotilolI3Opalmitate(14),(E)25hydroperoxydammar23ene3β,20diol(15),ver
bascoside(16),cimidahurinine(17),2(3,4dihydroxyphenyl)ethylOβDglucopyranoside(18),osmanthusideH(19),2(3,4
dihydroxyphenyl)ethanol(20).Conclusion:Compounds4,1617,19wereisolatedfromthisplantforthefirsttime,andcompounds
1215wereisolatedfromthisgenusforthefirsttime.
[Keywords] Ligustrumlucidum;chemicalconstituents;triterpenoid;phenylethanoidglycosides
[责任编辑 王亚君]
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第34卷第24期
2009年12月
                           
Vol.34,Issue 24
 December,2009